تحديد HPLC من Echinacoside في Cistanche Cistanche

تحديد HPLC من إشنكوسايد في Cistanche Cistanche

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

هدف:حدد HPLC كميةإشنكوسايدفيسيستانشالأرض في حالة النيتروجين السائل وكذلك في حالة الهواء المجفف بشكل طبيعي ، ومقارنتها فيcistanche البريةوCistanche المزروعة صناعيا.

طُرق:تم استخدام نظام HPLC {0}} (شيمادزو ، اليابان). كان العمود YMC inertsil ods-sp (4.6 مم × 150 مم ، 5 ميكرومتر ؛ YMC Co Ltd ، اليابان) ؛ الطور المتحرك: أسيتونيتريل - ميثانول -1 في المائة حمض الفورميك (10:15:75) ؛ الطول الموجي للكشف 334 نانومتر ؛ معدل التدفق 0.7 مجم · مل -1. درجة حرارة العمود 30 درجة مئوية.

نتائج:كان لظروف المعالجة المختلفة تأثير واضح جدًا على محتوى إشنكوسايد ، مع وجود مستويات أعلى من إشنكوسايد بشكل عام في أرض سيستانش تحت النيتروجين السائل عنها في تلك الأرض في ظل ظروف طبيعية مجففة بالهواء ؛ محتوى العنصر النشط البريةسيستانشكانت أعلى بكثير من الثقافة الاصطناعية.

انقر فوق منتجات مسحوق استخراج Cistanche

Cistanche هو نوع من الأنواع المهددة بالانقراض ، وهو نبات طفيلي يسكن جذور Clostridium ، Salix rubrum. في الصين ، يتم توزيع Cistanche بشكل رئيسي في منغوليا الداخلية ، ونينغشيا ، وقانسو ، وشينجيانغ ، مع سمعة ممتازة لـ "الجينسنغ الصحراوي" ، وهو ذو قيمة طبية كبيرة. المكونات الطبية الرئيسية لها هي جليكوسيدات فينيل إيثانول ، والتي يمكن تقسيمها إلى إشنكوسايد ، كوهوسيد الأوراق ، سيستانش ، وغيرها اعتمادًا على بدائلها. من بينها ، قام إشنكوسايد بتحسين الوظيفة الجنسية ، ومضادات الأكسدة ، وتأثيرات إزالة الجذور الحرة ، ولكن له أيضًا بعض التأثيرات المضادة للاستماتة. منذ الثمانينيات ، تم استخدام تقنية HPLC ، التي توفر طريقة بسيطة وسريعة لفصل جليكوسيدات فينيل إيثانول ، على نطاق واسع في فصل المنتجات الطبيعية. تم اختيار طريقة HPLC لتحليل محتويات Cistanche ، المكون النشط الرئيسي لـ Cistanche البرية والمزروعة صناعياً ، في فترات نمو مختلفة ، مما يوفر أساسًا علميًا للتطوير الرشيد واستخدام Cistanche وللتقييم الفعال لجودته.

الأدوات والكواشف

Shimadzu، Japan lc -20 جهاز HPLC ، lc -20 بمضخة مزدوجة بمكبس ترادفي ، cto -20 فرن عمودي ، spda -20 كاشف الطول الموجي المزدوج للأشعة المرئية وفوق البنفسجية ؛ كونشان kq -100 منظف فوق صوتي؛ أسيتونتريل (نقي كروماتوجرافيًا ، معهد تيانجين جوانجفو للبحوث الكيميائية) ؛ الميثانول (نقي كروماتوجرافيًا ، معهد تيانجين جوانجفو للبحوث الكيميائية) ؛ حمض الفورميك (نقي كروماتوجرافيًا ، معهد تيانجين جوانجفو للبحوث الكيميائية) ؛ ماء مقطرة

التحكم: إيكينوسيد ، محتوى أكبر من أو يساوي 98.43 في المائة (Shanghai Yuanye Bio Technology Co.، Ltd.).

خمس عينات من Cistanche: مزروعة بشكل مصطنع لمدة عام مع Cistanche التالية ، مزروعة صناعياً لـ Cistanche ، Cistanche المجففة صناعياً ، Cistanche البرية ، وزُرعت صناعياً لأكثر من ثلاث سنوات مع Cistanche.

2 طرق ونتائج

2.1 تحديد الشروط الكروماتوغرافية

من أجل فصل ذروة إيكينوسيد المقاس في كروماتوجرام LC عن المواد الأخرى ، وكذلك للتحكم في ضغط المضخة والجدول الزمني ليكون ضمن النطاق المناسب ، تم إجراء التعديل التجريبي للظروف الكروماتوجرافية ، وبعد ذلك تجارب التحسين مع الطور المتحرك ، استنتج أنه كلما ارتفعت درجة الحرارة ، كلما كان وقت الاستبقاء أقصر وقل التركيز ، كان ضغط المضخة أقصر ووقت الاستبقاء أقل ، ولكن ارتفاع الذروة أصبح أقل ، وهو أمر غير مواتٍ لـ قياس. تم تحديد الطور المتحرك أخيرًا ليكون أسيتونيتريل - ميثانول -1 بالمائة حمض الفورميك (1 0: 15:75) ، وطول موجة الكشف 334 نانومتر ، ومعدل التدفق 0.7 مل / دقيقة ، ودرجة حرارة العمود 30 درجة مئوية ، وفقًا للظروف الموضوعية لدرجة حرارة الغرفة وضغط التحمل الأقصى للمضخة ، مما أدى إلى وفرة المعلومات بأشكال ذروة حادة وفصل جيد للمكونات.

2.2 تحديد الأعمدة

YMC-Inertsil ODS-SP (4.6 مم × 150 مم ، 5 ميكرون ؛ YMC Co Ltd ، اليابان).

2.3 تحضير المحلول التجريبي

2.3.1 إعداد الحلول القياسية

تم وزن كمية مناسبة من معيار echineoside بدقة ورفعها باستخدام الطور المتحرك acetonitrile-methanol -1٪ حمض الفورميك (1 0: 15:75) لصنع 0. 0 6 مجم · ML - 1 ، 0. 0 5 مجم · ML {{1 {2 0}}} ، 0.04 مجم · ML - 1 ، 0.03 مجم · ML - 1 ، 0.02 مجم · ML - 1 ، 0.01 مجم · ML - 1 ، 0.005 مجم · ML - 1 محاليل معيار إشيناكوسيد.

2.3.2 تحضير محلول الاختبار

تم طحن كميات مناسبة من Cistanche الطازج المزروع صناعياً (أقل من عام واحد) ، و Cistanche الطازج صناعياً ، و Cistanche الطازج البري إلى مسحوق باستخدام ملاط ​​تحت النيتروجين السائل ؛ أيضًا ، تم تقطيع كمية مناسبة من 3 Cistanche المذكورة أعلاه إلى كتل ، وتجفيف الهواء بشكل طبيعي في تهوية الظل ، وبعد التجفيف ، تم سحقها وطحنها إلى مسحوق. تم طحن cistanche الجاف الاصطناعي والبرية على مدى ثلاث سنوات من Cistanche مباشرة في المسحوق. 0. تم ​​أخذ 5 جم من مسحوق Cistanche المحضر أعلاه ووضعها في أنبوب طرد مركزي ، تمت إضافة 25 مل من الطور المتحرك ، ووزنها ونقعها لمدة 3 0 دقائق ، وصوتها لمدة 40 دقيقة ، وتبريدها ثم تم وزنه مرة أخرى لتعويض الوزن المفقود بالطور المتحرك ، ثم اهتز وطرده مركزيًا ، وتم أخذ المادة الطافية لترشيح غشاء مرشح مسامي 0.45 ميكرومتر.

2.4 قطع منحنيات الانحدار للعينة القياسية من إشنكوسايد

تم حقن العينات المعيارية المحضرة من echineoside في جهاز LC بشكل منفصل ، وتم استخدام تركيز عنصر التحكم (mg · L {0}) على شكل الإحداثي ، وتم تنسيق مناطق الذروة المقابلة لرسم منحنى قياسي ، ينتج عنه معادلة الانحدار: y=66 867 100 x -46 360. 83، R 2=0. 98637 ، والتي أظهرت أن echineoside عند 0.1 ~ 1.2 ميكروغرام ضمن علاقة خطية جيدة.

3 مناقشات

Echinacoside هو أحد المكونات النشطة الرئيسية لـ Cistanche ، والذي يمكن أن يمثل بشكل جيد الأساس الكيميائي للتأثير الدوائي لـ Cistanche ، مما يجعل تقييم جودة المواد الطبية ومراسلات تأثيرها الدوائي ، وتحسين ملاءمة تقييم جودة Cistanche.

كان لظروف المعالجة المختلفة تأثير واضح على محتوى إشنكوسايد ، مع وجود مستويات أعلى من إشنكوسايد بشكل عام في أرض سيستانش تحت النيتروجين السائل مقارنة بتلك الأرض تحت الظروف الطبيعية المجففة بالهواء. يقلل تجفيف الهواء الشائع من كمية إيكينوسيد ، والتي ربما تم استهلاكها أثناء تجفيف الهواء أو تحويلها. من أجل منع انخفاض محتوى العنصر النشط وضمان فعالية Cistanche ، يجب اختيار العلاج المناسب.

على الدوام ، اعتقد معظمهم أن بيئة الزراعة الاصطناعية في Cistanche وكذلك عادات النمو لا يمكن تمييزها عن البرية مع عدم وجود اختلاف في الجودة ، وتميل إلى التركيز فقط على المحصول ، ولم تحلل الجودة. أظهرت الدراسة الحالية أن كمية Cistanche echinacoside المزروعة صناعياً كانت أقل من تلك الموجودة في Cistanche echinacoside البري. أعلى نسبة كانت {0}. 3360٪ من الحضيض البري وأقلها صفر. 007 0٪ من Cistanche الاصطناعي. لذلك ، لا يزال يتعين دراستها في تكنولوجيا الزراعة لتحسين محتوى المكونات النشطة.

تعتمد جودة Cistanche على كمية المكون النشط ، إشنكوسايد ، والذي بدوره له علاقة قوية بالموسم والوقت وطريقة الحصاد ، لذلك يجب أن يأخذ حصاد Cistanche في الاعتبار حالة تراكم المكون النشط و مرحلة النمو والتطور. ضع في اعتبارك الجودة والعائد.

الطريقة المذكورة في هذه الورقة بسيطة ودقيقة وقابلة للتكرار ودقيقة لتحديد إيكينوسيد. مفيد لتحديد cistanche.