الإدارة في الجسم الحي لاتحادات بكتيريا الأمعاء تكرر أنماط الأيض لليوروليثين A وB في نموذج الفئران غير المنتج لليوروليثينⅡ

نتائج

تحليل خصوصية وحساسية البادئات المصممة ومسبار Ellagibacter وEnterocloster

تم تأكيد خصوصية البادئات والمسبار Ellagibacter وEnterocloster عن طريق تحميل تسلسلاتها على برنامج محاذاة التسلسل ProbeMatch.31 وتظهر النتائجفي الجدولين 1S و2S.† بعد ذلك، تم التحقق من خصوصية الاشعال والمسبار بواسطة qPCR باستخدام ظروف التفاعل المحسنة الموضحة في قسم المواد والطرق. تم اختبار الأنواع البكتيرية التمثيلية لعائلتي Eggerthellaceae وLachnospiraceae التي تتمتع بأكبر قدر من التشابه مع Ellagibacter وEnterocloster في تسلسل جينات الرنا الريباسي 16S بالإضافة إلى الأنواع الأخرى ذات الصلة الوثيقة التي يتم اكتشافها بشكل متكرر في الأمعاء البشرية (الجدولان 1S و2S†). يوضح الشكل 2 مخططات التضخيم المقابلة لمنحنيات القياس الكمي القياسية.

انقر لعلاج الإمساك

تم رسم قيم الأشعة المقطعية ضد التركيز البكتيري (Co ) كسجل 1 0 مكافئات/تفاعلات جينية (6.25 × 1 0−6 نانوغرام، للجينوم أحادي الصيغة الصبغية). كان ميل منحنى الانحدار الخطي، المحسوب باستخدام الحمض النووي الجينومي، −3.78، وكانت قيمة R2 أكبر من 0.99. فيما يتعلق بحساسية نظام qPCR، كانت هناك حاجة إلى 1.5 مكافئات الجينوم كحد أدنى للتفاعل الإيجابي باستخدام وضع TaqMan. تراوحت قيم الأشعة المقطعية التي تم الحصول عليها باستخدام منحنى معايرة E. isourolithinifaciens وE. Bolted من 15.5 ± 0.7 إلى 37.8 ± 0.7، بينما لم يتم الكشف عن تضخيم الحمض النووي للسلالات الأخرى التي تم اختبارها.

تم إجراء القياس الكمي لبكتيريا Ellagibacter وEnterocloster في عينات براز الفئران باستخدام هذه الطريقة (qPCR)، مع الأخذ في الاعتبار متوسط ​​ثلاث مكررات. تم التعبير عن النتائج كسجل 10 من البكتيريا لكل جرام من البراز ومقارنتها بقيم الوفرة النسبية التي تم الحصول عليها بواسطة تسلسل الرنا الريباسي 16S. لاحظنا وجود علاقة إيجابية بين النتائج التي تم الحصول عليها بكلا الطريقتين في Ellagibacter (r=0.660، p <0.001) وEnterocloster (r=0.459، p< 0.001) (data not shown).

تأثير الاتحادات البكتيرية التي يتم تناولها عن طريق الفم على إنتاج اليوروليثين في الجسم الحي

أظهر تحليل Uro في البراز أنه في البداية (T{{0}})، لم تنتج الفئران Uros بعد تناول مسحوق EA (الشكل 3A-C). ومع ذلك، بعد إدارة الاتحادات البكتيرية A (الشكل 3A) ) و B (الشكل 3B)، أصبحت الفئران قادرة على إنتاج Uros. خلال الأسابيع الثلاثة الأولى، عندما تناولت الفئران من المجموعتين A وB مسحوق EA فقط، كان تركيز Uro (النطاق: 0 –1.43 ميكروغرام g− 1) وكان سلائف EA الخاصة بهم (النطاق: 0.07–4.54 ميكروغرام لكل غرام) في البراز منخفضة. ومع ذلك، اعتبارًا من اليوم 21، عندما بدأ استهلاك الجوز كمصدر ثانٍ للـ EA، كانت هناك زيادة كبيرة جدًا في EA البرازية (الشكل 3A-C) وإنتاج البولي في المجموعتين A (الشكل 3A) وB (الشكل 3B). ).

علاوة على ذلك، تمت ملاحظة الاختلافات في صورة Uro بين المجموعتين A وB. في المجموعة A، كانت Uro-C البرازية، وUro-M6، وUro-M7، والمستقلب النهائي Uro-A هي السائدة. في المقابل، في المجموعة B، كانت Uros الثلاثة النهائية (Uro-A، UroB، وIsoUro-A) موجودة، في حين كانت العناصر الوسيطة نادرة. ومع ذلك، تم اكتشاف تركيز أعلى من Uro-G الموصوف مؤخرًا في المجموعة B مقارنةً بالمجموعة A. بالإضافة إلى ذلك، كان تركيز Uro-B أقل من تركيز Uro-A وIsoUro-A في المجموعة B. علاوة على ذلك، Uro-A و تم إنتاج IsoUro-A، ولكن ليس Uro-B، في جميع فئران المجموعة B (الشكل 3B). وعندما تمت إضافة الجوز إلى النظام الغذائي لفئران المراقبة (المجموعة C) في اليوم 21، لوحظ أيضًا تركيز أعلى من EA في البراز. مما كان عليه قبل استهلاك الجوز، حيث كان تركيز البراز منخفضًا جدًا (الشكل 3C). ومع ذلك، لم يشجع أي من تناول المسحوق أو استهلاك الجوز على إنتاج اليورو في أمعاء فئران التحكم (أي التي لا تحتوي على اتحادات بكتيرية).

الاستعمار المعوي للبكتيريا التي يتم تناولها عن طريق الفم في البداية، قبل أن تبدأ فئران المجموعتين A وB في استهلاك الاتحادات البكتيرية، كانت Gordonibacter أو Ellagibacter تحت حد الاكتشاف في عينات البراز عندما تم إجراء تحليل تسلسل الميتاجينوم باستخدام منصة MiSeq-Illumina (الشكل 3D – F). ). عندما تم استخدام qPCR،كانت مستويات Gordonibacter في الفئران منخفضة (<5.8 log bacteria per g faeces), and Ellagibacter levels were under the limit of detection (data not shown). In contrast, Enterocloster was detected using the MiSeq-Illumina and qPCR in the faeces of rats from all groups (A, B, and C) at the baseline (Fig. 3D–F). 

الوفرة النسبية (يعني ± SD) لـ Enterocloster في المجموعات A و B و Cwas {{0}}.03 ± 0.02, {{10 }}.04 ± 0.06، و0.13 ± 0.17%، على التوالي، ولكن بدون فروق ذات دلالة إحصائية (ع=0.570). أدت إدارة الاتحادات البكتيرية A وB إلى ظهور بكتيريا Gordonibacter وEllagibacter وزيادة تدريجية في براز المجموعة A وB المقابلة، على التوالي (الشكل 3D وE). علاوة على ذلك، زادت مستويات الأمعاء البرازية طوال فترة الدراسة في المجموعتين A وB (الشكل ثلاثي الأبعاد وE).

ومع ذلك، أظهر تحليل LEfSe اختلافات نادرة في مجموعات بكتيريا الأمعاء الأخرى عند مقارنة بيانات التسلسل الميتاجينومي للمجموعتين A وBwere مع تلك الخاصة بالمجموعة الضابطة (الشكل 4A وB). ومن المثير للاهتمام، أنه لوحظ انخفاض في جنس Streptococcus وعائلة Streptococcaceae في المجموعتين A. و B مقارنة بالمجموعة الضابطة (الشكل 4A و B). بعد خمسة أيام من إيقاف تناول الاتحادات البكتيرية عن طريق الفم (تاريخ انتهاء الدراسة)، تم اكتشاف انخفاض في وفرة Ellagibacter وEnterocloster في المجموعة B، مما أدى أيضًا إلى انخفاض كبير في إنتاج اليورو (الشكل 3B وE). في المجموعة A، لوحظ أيضًا انخفاض في وفرة Gordonibacter ولكن ليس Enterocloster (الشكل 3A)، مما أدى إلى انخفاض في تركيز Uro ولكنه كان أقل وضوحًا من المجموعة B (الشكل 3D وE). في المجموعة الضابطة، كانت بكتيريا Ellagibacter تحت حد الاكتشاف طوال فترة الدراسة، وظلت بكتيريا Enterocloster وGordonibacter عند مستويات منخفضة جدًا (الشكل 3F).

دراسة سمية بكتيريا الأمعاء التي يتم تناولها عن طريق الفم

تم التحقيق في الآثار الجانبية المحتملة من ابتلاع الاتحادات البكتيرية. لم يلاحظ أي آثار ضارة على النمو وزيادة الوزن وتناول الطعام والأعضاء الحيوية بعد 4 أسابيع من تناوله عن طريق الفم عن طريق تزقيمية الاتحادات البكتيرية في الجرذان من المجموعتين A و B مقارنة بالمجموعة الضابطة. ومع ذلك، اكتسبت ذكور الفئران 107.4 ± 2.4 جرام، بينما اكتسبت إناث الفئران أقلالوزن (25.7 ± 5 جم) في نهاية الدراسة دون فروق مقارنة بمجموعة السيطرة. كان استهلاك الغذاء بواسطة القفص 63.1 ± 1.4 جم لذكور الجرذان و 33.8 ± 1.8 جم لإناث الجرذان. ومع ذلك، كان استهلاك الماء 136.1 ± 37.2 جم و76.0 ± 12.6 جم حسب الذكور والإناث في القفص على التوالي. .

وقد لوحظت فروق دموية بين الذكور والإناث في بعض المتغيرات، مثل توزيع كريات الدم الحمراء (RDW، p {{0}}.005)، كريات الدم البيضاء (p=0.005)، عرض توزيع الصفائح الدموية (PDW، p =0.005)، ومحتوى الهيموجلوبين الشبكي (CHr، p=0.013)(الجدول 2). ومع ذلك، لم تلاحظ أي فروق لأية متغيرات بين المجموعات التي استهلكت الاتحادات البكتيرية (المجموعتان A و B) والمجموعة الضابطة (المجموعة C). كما تم تحليل القيم الكيموحيوية وتم الكشف عن وجود فروق فقط بين الذكور والإناث في بعض المتغيرات مثل مؤشر الكرياتينين (p <0.001)، الفوسفور (p=0.007)، الفوسفاتيز القلوي (ALP) (p {{13 }}.003)، والثيروكسين (T4) (ع=0.002)(الجدول 3). ومع ذلك، لم تلاحظ أي فروق لأي من المتغيرات بين المجموعات التي استهلكت الاتحادات البكتيرية (المجموعتان A و B) والمجموعة الضابطة (المجموعة C).

الطب العشبي الطبيعي لتخفيف الإمساك-Cistanche

السيستانش (الاسم العلمي: Cistanche) هو جنس من النباتات الطفيلية التي تنتمي إلى فصيلة Orobanchaceae. تشتهر هذه النباتات بخصائصها الطبية وقد تم استخدامها في الطب الصيني التقليدي لعدة قرون. توجد أنواع Cistanche في الغالب في المناطق القاحلة والصحراوية في الصين ومنغوليا وأجزاء أخرى من آسيا الوسطى. تتميز نباتات Cistanche بسيقانها اللحمية الصفراء وتحظى بتقدير كبير لفوائدها الصحية المحتملة. في الطب الصيني التقليدي، يعتقد أن Cistanche له خصائص منشطة ويستخدم عادة لتغذية الكلى وتعزيز الحيوية ودعم الوظيفة الجنسية. كما أنه يستخدم لمعالجة مشاكل الشيخوخة والتعب والصحة العامة. في حين أن Cistanche له تاريخ طويل من الاستخدام في الطب التقليدي، فإن البحث العلمي حول فعاليته وسلامته مستمر ومحدود. ومع ذلك، فهو يحتوي على العديد من المركبات النشطة بيولوجيًا مثل جليكوسيدات فينيلثانويد، والإيريدويدات، والقشور، والسكريات، والتي قد تساهم في آثاره الطبية.

ويسيستانشمسحوق سيستانش، أقراص سيستانش، كبسولات سيستانش، ويتم تطوير المنتجات الأخرى باستخدامصحراءcistancheكمواد أولية، ولكل منها تأثير جيد في تخفيف الإمساك. الآلية المحددة هي كما يلي: يُعتقد أن سيستانش له فوائد محتملة لتخفيف الإمساك بناءً على استخدامه التقليدي ومركبات معينة يحتوي عليها. في حين أن البحث العلمي على وجه التحديد حول تأثير Cistanche على الإمساك محدود، يُعتقد أن لديه آليات متعددة قد تساهم في قدرته على تخفيف الإمساك. تأثير ملين:سيستانشمنذ فترة طويلة يستخدم في الطب الصيني التقليدي كعلاج للإمساك. ويعتقد أن له تأثير ملين خفيف، والذي يمكن أن يساعد في تعزيز حركات الأمعاء والتسبب في الإمساك. يمكن أن يعزى هذا التأثير إلى المركبات المختلفة الموجودة في سيستانش، مثل جليكوسيدات الفينيليثانويد والسكريات. ترطيب الأمعاء: بناءً على الاستخدام التقليدي، يعتبر سيستانش ذو خصائص مرطبة، ويستهدف الأمعاء على وجه التحديد. قد يساعد تعزيز ترطيب وتليين الأمعاء على تليين الأدوات وتسهيل مرورها، وبالتالي تخفيف الإمساك. تأثير مضاد للالتهابات: قد يرتبط الإمساك أحيانًا بالتهاب في الجهاز الهضمي. يحتوي Cistanche على مركبات معينة، بما في ذلك جليكوسيدات الفينيليثانويد والقشور، والتي يعتقد أن لها خصائص مضادة للالتهابات. من خلال تقليل الالتهاب في الأمعاء، قد يساعد في تحسين انتظام حركة الأمعاء وتخفيف الإمساك.