جليكوسيدات مونوتربين إيريدويد ولاحلقية، كانكانوسيدات L، M، N، O، وP من Cistanche Tubulosa

سيستانش توبولوسا(Sكرينك) R. Wخفيف(Orobanchaceae) هو نبات طفيلي معمر ينمو على جذورسلفادوراأوكالوتروبيسالأنواع، وتنتشر في شمال أفريقيا، والجزيرة العربية، ودول آسيا.1) تم استخدام سيقان هذا النبات (Kanka-nikujuyou باللغة اليابانية) تقليديًا في صناعةعلاج العجز الجنسي، والعقم، وألم الظهر، وضعف الجسمفضلا عن وكيل تعزيز الدورة الدموية.1,2) خلال دراساتنا على المكونات النشطة بيولوجيا من سيقانجيم توبولوسا, 3-6) لقد أبلغنا سابقًا عن أربعة وعشرين أمينوغليكوزيدات فينيليثانويد بما في ذلك كانكانوسيدات H1, H2, I, J1, J2, K1، و ك2واثنين من قليلات السكر المتحللة من سيقان طازجةجيم توبولوسا. 5,6) وعلاوة على ذلك، الرئيسيةجليكوسيدات فينيليثانويد، إكيناكوسيد، أكتيوسايد، وإيزواكتيوسايدتم العثور على أنه يمنع الزيادة في مستويات ناقلة أمين الأسبارتات (AST) والألانين أمينوترانسفيراز (الملح) في كبد الفئران المصاب الناجم عنD-جالاكتوزامين (D-GalN)/ عديد السكاريد الدهني بجرعات 25-100 ملغم/كغملكل نظام التشغيل(p.o.). كما تم توضيح المتطلبات الهيكلية لجليكوسيدات فينيلثانويد للنشاط الوقائي للكبد.5) في هذه الدراسة المستمرة على المكونات في السيقان الطازجة منجيم توبولوسا، قمنا أيضًا بعزل أحد عشر جليكوسيدات إيريدويد بما في ذلك كانكانوسيدات L (1), M (2) و ن (3) ، سبعة جليكوسيدات أحادية التربين الحلقية بما في ذلك كانكانوسيدات O (4) و ف (5) وثلاثة فينيل بروبانويد وأربعة قشور. يتناول هذا البحث عزل وتوضيح تركيب خمسة مركبات جديدة (1-5).

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتخفيف العجز الجنسي PHGS75% ECH 30% ACT 12%

تم استخلاص السيقان الطازجة من C. tubulosa (المزروعة في أورومتشي، مقاطعة شينجيانغ، الصين) باستخدام الميثانول تحت الارتجاع لإنتاج مستخلص ميثانولي (8.36٪ من السيقان الطازجة). من المستخلص الميثانولي، تم الحصول على الكسور المحذوفة H2O وMeOH (5.63% و2.73%، على التوالي) بواسطة كروماتوجرافيا عمود Diaion HP-20 (H2O → MeOH) كما هو موضح سابقًا. تعرض لكروماتوجرافيا عمود SiO2 و ODS وأخيرًا HPLC لتزويد كانكانوسيدات L (1، 0.0026%)، M (2، {{24}).{{27 }}001%), N (3, 0.00{{60}}7%), يا (4، {{71}).0{{90}}2{{105}}%))، وP (5، 0) .0002%), 6-ديوكسيكاتالبول3,7) (6, 0.197%), بارتسيوسيد3,7) (7, { {147}}.0583%)، جلوروسيد3,7) (8، 0.0443%)، كانكانواسيد A3) (9، 22.3 مجم، 0.0010%)، حمض موسسينوسيديك3،7) ( 10، 0.0056٪)، 8- حمض إبيلوجانيك 3،8) (11، 0.0023٪)، 8- حمض إبيديوكسيلوجانيك 3،7) (12، 0.0004٪)، حمض جينيبوديك 3،7) (13، 0.0040٪) ) ، كانكانوسايد E3) (14، 0.0026٪)، (2E،6Z) -8-bD-جلوكوبيرانوسيلوكسي -2، 6- ثنائي ميثيل -2، 6- حمض أوكتاديينويك3 ،9) (15، 31.0 مجم، 0.0014%)، (2E،6E)-3،7-ثنائي ميثيل-8-هيدروكسي أوكتاديان-1-yl-ObD-glucopyranoside10) (16، 0.0082%)، 8-هيدروكسيجيرانيول 8-O-bD-جلوكوبيرانوسايد11) (17، 0.0044%)، بيتولالبوسيد A12) (18، 0.0004%)، كونيفيرين13) (19، 0.0002%)، سيرينجين13) ( 20، 0.0015٪)، ألدهيد سينابيك 4- ObD-glucopyranoside14) (21، 0.0001٪)، ( ) - بينوريسينول ObD-glucopyranoside4،8،15) (22، 0.0010٪)، يوكومين A16) (23، 0.0002 %))، إيزوكومين A17) (24، 0.0010٪)، و ()-سيرينجاريسينول ObD-جلوكوبيرانوسيد 4،8،18) (25، 0.0044٪).

هياكل Kankanosides L (1)، M (2)، وN (3)

تم الحصول على Kankanoside L ( 1 ) كمسحوق أبيض مع دوران بصري سلبي ([a] D 26 - 45.7 في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء الخاص به نطاق امتصاص قوي عند 3433 و1{{20}}80 سم- 1 مما يوحي بوجود شاردة جليكوسيد. أظهر القصف الذري السريع (FAB) -MS من 1 تشغيل في أوضاع الأيونات الموجبة والسالبة قمم أيونية شبه جزيئية عند m/z 371 [M Na] و347 [M-H] -، على التوالي، وكانت الصيغة الجزيئية تم تحديده على أنه C15H24O9 بواسطة قياس FABMS عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 1 مع حمض الهيدروكلوريك 1.0 م (HCl) يحرر الجلوكوز D، والذي تم تحديده بواسطة تحليل HPLC باستخدام كاشف الدوران البصري. 3-6) أطياف 1 H- و13C-NMR لـ 1 (CD3OD، الجداول أظهرت (الشكل 1، 2)، والتي تم تخصيصها من خلال تجارب الرنين المغناطيسي النووي المختلفة، 19) إشارات يمكن تخصيصها لأربعة ميثيلين [d 1.43 (1H، br dd، J= ca. 5، 13 هرتز، 4a-H)، 1.73 ( 1H، br dd، J=ca. 12، 14 هرتز، 6a-H)، 1.85 (1H، m، 4b-H)، 1.93 (1H، br dd، J=ca. 8) ، 14 هرتز، 6b-H)، 3.50 (1H، ddd، J= 2.4، 12.5، 13.0 هرتز، 3a-H)، 3.83 (1H، br dd، J=)

كاليفورنيا. 5، 13 هرتز، 3b-H)، 3.78، 4.12 (1H لكل منهما، كلاهما d، J= 13.1 هرتز، 10-H2)]، اثنان من الميثينات [d 2.15 (1H، dd، J=7.2، 8.9 هرتز، 9-H) و2.23 (1H، m، 5-H)]، ومجموعة أسيتال [d 4.81 (1H، d، J{{28) }}.9 هرتز، 1-H)] مع شاردة b-غلوكوبيرانوسيل [d 4.70 (d، J= 7.9 هرتز، 1 -H)]. كما هو مبين في الشكل 1، أشارت تجربة التحليل الطيفي للارتباط 1 H – 1 H (1 H – 1 H COSY) في 1 إلى وجود هياكل جزئية مكتوبة بخطوط عريضة. في تجربة الارتباط متعدد الروابط النووية غير المتجانسة (HMBC) على 1، لوحظت ارتباطات طويلة المدى بين البروتونات وذرات الكربون التالية (1-H و3-C، 8-C؛ {{ 49}} H و 1- C؛ 7- H و 8- C، 10- C؛ 9- H و 8- C؛ }} H2 و 7- C، 8- C؛ 1 - H و 1- C) كما هو مبين في الشكل 1. بعد ذلك، تميزت البنية المجسمة النسبية لـ 1 بحساسية الطور تجربة التحليل الطيفي لتعزيز Overhauser النووي (NOESY الحساسة للطور)، والتي أظهرت ارتباطات NOE بين أزواج البروتونات التالية (1-H و3aH؛ 3a-H و4a-H؛ 3b-H و4b-H؛ 4b-H و 5-H، 9-H؛ 5- H و6b-H، 9-H؛ و7-H؛ و 10- H2)، كما هو مبين في الشكل 1. كان أطياف 1 H و13C-NMR لـ 1 قابلة للتركيب على أطياف المكون القزحي الرئيسي 6- deoxycatalpol (6)، باستثناء الإشارات المستحقة إلى شاردة d-lactol المشبعة. أخيرًا، أعطت هدرجة 6 1، لذلك تم توضيح البنية المجسمة للكانكانوسايد L لتكون 3،4- ثنائي هيدرو-6-ديوكسي كاتالبول (1).

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتخفيف اضطراب الإثارة البريدية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

تم الحصول على Kankanoside M ( 2 ) كمسحوق أبيض مع دوران بصري سلبي ([a] D 26 - 18.7 في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء 2 نطاقات امتصاص عند 3433 و1736 و1655 و1076 سم- 1 تعزى إلى شقوق الهيدروكسيل واللاكتون والأوليفين والأثير. أظهر طيف الأيونات الموجبة FAB-MS 2 ذروة أيونية شبه جزيئية عند m/z 353 [M Na]، وتم تحديد الصيغة الجزيئية على أنها C15H22O8 عن طريق قياس FAB-MS للأيونات الموجبة عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 2 مع 1.0 M HCl المحرر من الجلوكوز D. أظهر أطياف 1 H و 13CNMR لـ 2 (CD3OD، الجداول 1، 2) إشارات يمكن تخصيصها لأربعة ميثيلين [d 1.66، 2.11 (1H لكل منهما، كلاهما m، 4- H2)، 2.15، 2.75 (1H لكل منهما، كلاهما m، 6-H2)، 4.29 (1H، ddd، J=2.8، 8.4، 14.3 هرتز، 3b-H)، 4.32، 4.51 (1H لكل منهما، كلاهما d، J{{61) }}.1 هرتز، 10-H2)، 4.35 (1H، ddd، J=3.1، 6.7، 14.3 هرتز، 3a-H)]، اثنان من الميثينات [d 2.97 (1H، m، 5-H)، 3.82 (1H، br s، 9-H)]، أوليفين [d 5.94 (1H، m، 7-H)]، ومجموعة لاكتون مشبعة (d C 174.9) مع شاردة bD-glucopyranosyl [d 4.32 (1H، d، J= 7.9 هرتز، 1 -H)]. كما هو مبين في الشكل 1، أشارت تجربة 1 H – 1 H COZY في 2 إلى وجود هياكل جزئية مكتوبة بخطوط عريضة، وفي تجربة HMBC، لوحظت ارتباطات طويلة المدى بين أزواج البروتون والكربون التالية ({{ 103}}H و1-C؛ 7-H و9-C؛ 9-H و1-C، 8-C؛ }}H2 و7-C، 8-C، 9-C؛ 1 -H و10-C). تميزت البنية المجسمة النسبية لـ 2 بتجربة NOESY حساسة للطور، والتي أظهرت ارتباطات NOE بين أزواج البروتونات التالية (3a-H و4a-H؛ 3b-H و4b-H؛ 4b-H و5- H؛ 5- H و6b-H، 9- H) كما هو موضح في الشكل 1. وهكذا، تم توضيح البنية المجسمة لـ 2 كما هو موضح.

تم عزل Kankanoside N ( 3 ) كمسحوق أبيض مع دوران بصري سلبي ([a] D 25 - 24.6 في MeOH). في الأيون الموجب FAB-MS 3، لوحظت ذروة أيون شبه جزيئي عند m/z 371 [M Na] . تم تحديد الصيغة الجزيئية C16H28O8 بواسطة قياس FAB-MS عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 3 مع 1.0 M HCl يحرر D- الجلوكوز. أظهرت بيانات 1 H- و13C-NMR (CD3OD، الجداول 1، 2) إشارات يمكن تخصيصها لميثيل [d 1.07 (3H, d, J= 7.2 هرتز، {{ 28}}H3)]، أربعة ميثيلين {d 1.37، 1.87 (1H لكل منهما، كلاهما m، 7-H2)، 1.65، 1.81 (1H لكل منهما، كلاهما m، 6-H2)، [3.65 ( 1H، dd، J=9.1، 9.8 هرتز)، 3.90 (1H، dd، J=5.9، 9.8 هرتز)، 11- H2]، و [3.70 (1H، dd، J= 3.3، 12.0 هرتز)، 3.88 (1H، m)، 3-H2]}، أربعة ميثينات [d 1.69 (1H، m، 4-H)، 1.75 (1H، m، 9-H)، 2.06 (1H، m، 8-H)، 2.16 (1H، m، 5-H)]، ومجموعة نصف الأسيتال [d 4.67 ( 1H، d، J= 7.4 هرتز، 1-H)] معًا مع شاردة bD-glucopyranosyl [d 4.26 (1H، d، J= 7.9 هرتز، {{101) }}ح)]. تم توضيح البنية القزحية لـ 3 من خلال تجارب 1 H – 1 H COZY وHMBC وتميزت البنية المجسمة النسبية بتجربة NOESY حساسة للطور كما هو مبين في الشكل 1. وبالتالي، تم توضيح البنية المجسمة لـ 3 كما هو موضح.

سيستانش توبولوسا الطبيعي لحل المشكلة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

هياكل Kankanosides O (4) و P (5)

تم الحصول أيضًا على Kankanosides O (4) وP (5)، C16H26O8، كمساحيق بيضاء ذات دورات بصرية سلبية (4: [a]D 23 - 26.1؛ 5: [a]D 21 - 32. 7 سواء في MeOH). أظهر أطياف الأشعة تحت الحمراء 4 و5 نطاقات امتصاص عند 3433 و1696 و1647 و1076 سم- 1 لـ 4 و3434 و1701 و1647 و1{ {95}}76 سم- 1 لـ 5، والتي تعزى إلى وظائف الجليكوسيدية، والكربوكسيل، والأوليفين. أظهر أطياف الأشعة فوق البنفسجية الخاصة بهم الحد الأقصى للامتصاص المشترك عند 217 نانومتر مما يشير إلى وجود شاردة حمض الكربوكسيل غير المشبع a،b في كل منهما. التحلل المائي الحمضي لـ 4 و5 يحرر D- الجلوكوز، بينما من خلال التحلل المائي الأنزيمي مع الجلوكوزيداز، أعطى 4 و5 (2E,6E)-8-هيدروكسي-2،6-ثنائي ميثيل{{37} }، 6- حمض الأوكتادينويك2 0) (4a) و (2E،6E) -8- هيدروكسي -3، 7- ثنائي ميثيل -2، {{ 47}} حمض الأوكتاديينويك 21) (5 أ)، على التوالي. أظهرت بيانات 1 H- و13C-NMR لـ 4 (CD3OD، الجداول 2، 3) إشارات قابلة للتخصيص لميثيلين [d 1.71 (3H، br s، 10-H3)، 1.81 (3H، d، J{{ 66}}.0 هرتز، 9-H3)]، ثلاثة ميثيلين {d 2.19 (2H، br t، J= كاليفورنيا 7 هرتز، 5-H2)، 2.36 (2H، م، 4-H2)، [4.24 (1H، dd، J=7.6، 12.0 هرتز)، 4.33 (1H، dd، J=6.2، 12.0 هرتز)، { {96}}H2]}، واثنين من الأوليفينات ثلاثية الاستبدال [d 5.41 (1H، ddd، J= 1.2، 6.2، 7.6 هرتز، 7- H)، 6.75 (1H، tq، J{ {111}}.2، 1.0 هرتز، 3-H)] معًا مع جزء b-Dglucopyranosyl [d 4.34 (d، J= 7.8 هرتز، 1 -H)]. من خلال مقارنة إشارات الكربون في طيف 13C-NMR البالغ 4

مع تلك الموجودة في 4a، لوحظ تحول الغليكوزيل في الموضع 8- (d C 4: 65.5؛ 4a: 59.4). تم تأكيد موضع ارتباط الجلوكوزيد أيضًا من خلال تجارب HMBC كما هو موضح في الشكل 2. وبالتالي، تم توضيح البنية المجسمة لـ 4 لتكون (2E،6E)-8-bD-glucopyranosyloxy-2،{{ 16}}ثنائي ميثيل-2،6-حمض الأوكتادينويك. من ناحية أخرى، أشارت بيانات 1 H- و13C-NMR لـ 5 (CD3OD، الجداول 2، 3) إلى وجود (2E,6E)-8-hydroxy{{30}} ،7- ثنائي ميثيل -2، 6- شاردة حمض الأوكتاديينويك [d 1.70 (3H، br s، 10-H3)، 2.14 (3H، br s، 9-) H3)، 2.24 (2H، م، 4- H2)، 2.27 (2H، م، 5- H2)، 4.05، 4.20 (1H لكل منهما، كلاهما بر د، J=كاليفورنيا. 12 هرتز، 8-H2)، 5.47 (1H، tq، J=7.1، 0.9 هرتز، 6-H)، 5.67 (1H، br s، 1-H) )] مع جزء bD-glucopyranosyl [d 4.23 (d، J= 7.7 هرتز، 1 -H)]. تم توضيح اتصال شحنة bD-glucopyranosyl في 5 بناءً على تجارب HMBC كما هو موضح في الشكل 2. علاوة على ذلك، لوحظ تحول نموذجي في الغليكوزيل للإشارات عند الموضع 8- (d C 5: 75.6؛ 5a: 68.8). استنادًا إلى الأدلة المذكورة أعلاه، تم تحديد البنية المجسمة لـ 5 لتكون (2E,6E)-8-bD-glucopyranosyloxy-3،7-ثنائي ميثيل-2،{{103 }}حمض الأوكتادينويك.

آثار المكونات على السمية الخلوية الناجمة عن عامل نخر الورم-أ (TNF-a) في خلايا L929

من المعروف أن TNF-a يتوسط في مجموعة متنوعة من إصابات الأعضاء من خلال تحريض موت الخلايا المبرمج. في حالة الكبد، فإن التأثيرات البيولوجية لـ TNF-a متورطة في إصابة الكبد الناجمة عن السموم الكبدية، ونقص التروية/إعادة التروية، والتهاب الكبد الفيروسي، والكحول. 22-24) لذلك، يعتبر TNF-a هدف مهم لاكتشاف العوامل المضادة للالتهابات ووقاية الكبد. استنادًا إلى المفهوم المذكور أعلاه، قمنا بدراسة المكونات الوقائية من المنتجات التي تحدث بشكل طبيعي في موت الخلايا الناجم عن TNF-a في خلايا L929، وهي خط خلايا حساس لـ TNF-a.

أن العديد من مكونات Piper chaba، 26-29) Boesenbergia rotunda، 30،31) Punica granatum، 32) Helichrysum arenarium، 33-35) و Sapindus rarak، 36-38) تم العثور عليها لإظهار تأثيرات مثبطة السمية الخلوية الناجمة عن TNF-a في خلايا L929. نظرًا لأن مكونات الفينيليثانويد لـ C. tubulosa (على سبيل المثالإشيناكوسيد، أكتيوسيدي، وإيزواكتيوسيدي، وما إلى ذلك) 5) قام أيضًا بتثبيط هذه السمية الخلوية، وقمنا بفحص مكونات الأيريدويد والفينيل بروبانويد والليغنان كما هو موضح في الجدول 4. ونتيجة لذلك، كانكانوسايد A (9، التثبيط: 16.3± 2.0% عند 1 00 مم)، حمض الموسينوسيديك (10، 44.7± 8.7%)، 8-حمض الإيبيغاميك (11، 10.7± 0.4%)، 8-هيدروكسي جيرانيول 8-ObD- تم العثور على جلوكوبيرانوسيد (17، 21.3 ± 2.4٪)، و () - بينوريسينول ObD- جلوكوبيرانوسيد (22، 22.3 ± 1.6٪)، لإظهار نشاط كبير. على الرغم من أن أنشطتها كانت أضعف من تلك الخاصة بالإكيناكوسيد (IC50= 31.1 مم)، والأكتيوسيد (17.8 مم)، والإيزوأسيتوزيد (22.7 مم)، وهي مكونات الفينيليثانويد الأساسية.5)

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%