عزل وتحديد جليكوسيدات فينيليثانول من Cistanche Deserticola

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

مقدمة

Cistanche Deserticolaالتي تم جمعها في الصيدلة الصينية هي جذع سمين جافCistanche Deserticola، نبات Orobanchaceae ، وهو دواء شائع الاستخدام لتنغيم الكلى في الطب الصيني التقليدي. هناك العديد من أنواع Cistanche deserticola ، وهناك العديد من التقارير البحثية حول Cistanche salsa وCistanche tubulosaفي الأدبيات ، ولكن هناك القليل من الدراسات حول الأصناف التي تم جمعها في دستور الأدوية. حصل Luo Shangfeng وآخرون على مانيتول و 8- حمض شرسوفي وحمض أميني من Cistanche deserticola. لمواصلة تطوير ودراسة Cistanche ، قسم الصيدلة ، استخرجت كلية طب شينجيانغ وفصل مكوناتها القابلة للذوبان في الماء - فينيل إيثانول جليكوسيدات. أظهرت النتائج أن أربعة مكونات تم فصلها وتحديدها وهيإشنكوسايد، كاستانوسيد أ ،أكتيوسيد، و 2-أسيتيل لاكتوزيد. المكونات المذكورة أعلاه لها تأثيرات دوائية مثل تعزيز وظائف الكلى ومكافحة الشيخوخة.

جزء تجريبي

تم شراء المواد الطبية التجريبية من شركة المواد الطبية Urumqi وتم إنتاجها في مقاطعة Jinghe. تم التعرف على الأصناف من قبل لي جياتشنغ ، الباحث المشارك في معهد شينجيانغ للطب العرقي. كان نموذج الراتنج الكبير المسام هو AB-B ، وهو منتج كيميائي لجامعة نانكاى. كان هلام السيليكا المستخدم في طبقة العمود أحد منتجات مصنع المواد الكيميائية البحرية في Qingdao ، وكان Stephan-dex LH -20 منتجًا لمصنع Shanghai Changzheng للأدوية. كان نموذج مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية هو Shimadzu UV -360. كان مقياس الطيف الضوئي بالأشعة تحت الحمراء هو Shimadzu IR -440. نماذج أجهزة H-NMR و C-NMR كانت Bruker MSL -300 (300 دورة ميجا)

1. الاستخراج والفصل

استخراج Cistanche deserticola10 كجم ثلاث مرات بواسطة ارتداد الإيثانول ، قم بخلط المستخلص وركزه للصق تحت ضغط منخفض ، أضف كمية صغيرة من الماء للتعليق ، قم بإزالته باستخدام أسيتات الإيثيل ، واستخرجه باستخدام n- بيوتانول ، امزج المستخلص ، وركزه حتى يجف تحت ضغط منخفض ، أضف كمية صغيرة من الماء للإذابة ، وقم بتجميع وتركيز جزء الميثانول على التوالي من خلال عمود راتينج كبير مسام وعمود بولي أميد (اغسل بالماء أولاً ثم الميثانول). يتم الحصول على إجمالي جليكوسيدات فينيل إيثانول بواسطة طبقة عمود هلام السيليكا. باستخدام CHCl 3- MeOH (10: 3 to 10: 5) شطف متدرج ، تم جمع ما مجموعه 78 تدفقات (حوالي 300 مل لكل تيار) ، 16-23 كانت مركبات خام IV (2.1 جم) ، 28-42 كانت مركبات خام III (5.4 جم) ، 48-61 كانت مركبات خام II (3.2 جم) ، 65-78 كانت مركبات خام I (5.1 جم). تمت تنقية المكونات المذكورة أعلاه بواسطة عمود كروماتوجراف على هلام السيليكا (كانت ظروف الشطف مماثلة لما ورد أعلاه) ثم تمت تنقيتها بواسطة عمود هلام ديكستران LH -20. أزل باستخدام CH3OH: H20 (l: 1) واجمع جزء الميثانول للحصول على مركبات مونومر IV (1.3 جم) و III (3.5 جم) و II (1.8 جم) و I (3.5 جم)

2. تحديد الهوية

المركب I: مسحوق غير متبلور أصفر فاتح ، تفاعل FeCl3 و - اختبار النفثول إيجابي ، كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة لهلام السيليكا بقيمة Rf 0. 3 (CHCl3: MeOH: H2O =6: 4: 1 تمدد ، 20 نسبة اكتشاف رذاذ H2SO4) ، الأشعة فوق البنفسجية λ (MeOH / نانومتر): 244 ، 292 ، 333. IR (KBr / MAX): سم -1: 3360 ، 1690 ، 1625 ، 1598 ، 1518. H-NMR (Methanol- d1) δ: 1.08 (3H ، D ، J =6 هرتز ، CH3) ، 2.79 (2H ، t ، J =7 هرتز ، Ar-CH 2- CH 2-) ، 4.29 ، 4.39 (1H ، D ، J =8 هرتز ، بروتونان طرفيان للجلوكوز) ، 5.18 (1H ، D ، J =1 هرتز ، بروتونات rhamnosyl الطرفية) ، 6.28 (1H ، J {{50) }} Hz، Ar-CH=CH-)، 6. 5-7. 1 (6H، aryl H)، 7.59 (1H، D، J =16 Hz، Ar-CH { {63}} CH-) C-NMR موضحة في الجدول 1. التفاعل الكيميائي والبيانات الطيفية المذكورة أعلاه متوافقة مع تقريرإشنكوسايدفي الأدب. لذلك ، تم تحديد المركب I على أنه إشنكوسايد.

المركب II: مسحوق غير متبلور أصفر فاتح ، تفاعل FeCl3 ، و- اختبار النفثول كان موجبًا ، وكروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة بهلام السيليكا Rf 0 35 (كانت ظروف التطوير والكشف مماثلة لما سبق). كانت أطياف الأشعة فوق البنفسجية والأشعة تحت الحمراء مشابهة جدًا لتلك الموجودة فيإشنكوسايد، ولكن ظهر H-NMR δ 3.84 (3H ، s) إشارة ، يظهر C-NMR δ 56.5 إشارة ، مما يشير إلى أن الهيكل يحتوي على 1 methoxy. الأشعة فوق البنفسجية λ (MeOH / نانومتر): 246 ، 29 0 ، 333. IR (KBr / MAX) سم -1: 3350 ، 1655 ، 1620 ، 1596 ، 1508. H-NMR (methanol-d1) δ: 1.08 (3H، d، J =6 Hz، methyl group in rhamnose)، 2. 86 (2H، t، J=7 Hz، Ar-CH 2- CH 2-) ، 3.84 (3H ، s ، OCH3) ، 4.28 ، 4.39 (1H ، d ، J =8 هرتز ، بروتونات مجموعة نهاية الجلوكوز) ، 5.18 (1H ، s ، بروتونات المجموعة النهائية من rhamnose)، 6.27 (1H، d، J =16 Hz، Ar-CH=CH-)، 6. 65-7. 1 (6H، aryl H)، 7.60 (1H، d ، J =16 هرتز ، Ar-CH=CH-). انظر الجدول 1 لبيانات C-NMR ، تتوافق البيانات الطيفية المذكورة أعلاه مع القيمة الأدبية لـ castanoside A. لذلك ، تم تحديد المركب II على أنه castanoside ACompound III: مسحوق غير متبلور أصفر فاتح ، كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة لهلام السيليكا هي 0.40 (التطوير) وظروف الكشف هي نفسها المذكورة أعلاه). تتشابه أطياف الأشعة فوق البنفسجية والأشعة تحت الحمراء الخاصة بها مع أطياف إشيناكوسايد. يوجد بروتون طرفي أقل للجلوكوز في H-NMR وإشارة جلوكوز أقل في C-NMR ، مما يشير إلى أنه ثنائي السكاريد. الأشعة فوق البنفسجية λ (MeOH / نانومتر): 247 ، 292 ، 334. IR (KBr / MAX): 3350 ، 1690 ، 1625 ، 1600 ، 1515. H-NMR (methanol-d1) δ: 1.10 (3H، d، J {{ 83}} Hz، rhamnose methyl)، 2.79 (2H، t، J =7 Hz، Ar-CH 2- CH 2-)، 4.38 (1H، d، J {{94} } هرتز ، بروتون طرفي جلوكوز) ، 5.19 (1H ، d ، J =1 هرتز ، بروتون طرفي رامنوز) ، 6.28 (1H ، d ، J =16 هرتز ، Ar-CH=CH -) ، 6. 5-7. 1 (6H ، aryl H) ، 7.59 (1H ، d ، J =16 هرتز ، Ar-CH=CH-). يتم عرض بيانات C-NMR في الجدول 1. البيانات الطيفية المذكورة أعلاه متوافقة مع القيم الأدبية لـأكتيوسيد، لذلك تم تحديد LII المركب ليكونأكتيوسيد.

المركب الرابع: مسحوق غير متبلور أصفر فاتح. قيمة التردد الراديوي للطبقة الرقيقة لهلام السيليكا هي 0 .42 (شروط التطوير والكشف هي نفسها المذكورة أعلاه). بياناته الطيفية تشبه إلى حد بعيدأكتيوسيد. هناك ذروة امتصاص أخرى تبلغ 1735 سم -1 في طيف الأشعة تحت الحمراء ، وأظهرت H-NMR إشارات من مصفوفة الأسيتيل δ1.98 (3H.S) ، وأظهرت C-NMR إشارات من مجموعات الكربون والميثيل من δ171.5 و 20.9. وفقًا لقانون إزاحة الجلوكوزيل ، يقع الأسيتيل في مجموعة هيدروكسيل السكر 2. λ (MeOH / نانومتر): 247 ، 292 ، 333. IR (KBr / MAX): 3430 ، 1725 ، 1700 ، 1630 ، 1605. 1525. H-NMR (ميثانول- d1) δ: 1.08 (3 ساعات ، د ، J { {27}} هرتز ، رامنوس ميثيل) ، 1.98 (3H ، s. OAc) ، 2.70 (2H ، t ، J =7 هرتز ، Ar-CH 2- CH 2-) ، 4.50 (1H ، d =8 هرتز ، بروتون طرفي الجلوكوز) ، 5.19 (1H ، d ، بروتون طرفي رامنوز) ، 6.28 (1H ، d ، J =16 هرتز ، Ar-CH=CH -) ، 6. 5-7. 1 (6H ، aryl H) ، 7.60 (1H ، d ، J =16 هرتز ، Ar-CH=CH-). يتم عرض بيانات C-NMR في الجدول 1. تتوافق البيانات الطيفية المذكورة أعلاه مع القيمة الأدبية لـ 2 '- Acetylacteoside ، لذلك تم تأكيد المركب IV ليكون 2' - Acetylacteoside.