استنزاف البلاعم يقلل من أمراض المرض في التهاب كبيبات الكلى المعتمد على العامل H المعتمد على المركب المناعي Ⅱ

3. النتائج

لقد قمنا بتحفيز CSS في الفئران عن طريق التحصين المتكرر باستخدام أبوفيريتين في طحال الحصان. تولد الحيوانات مناعة خلطية نشطة مضادة للفيريتين IgGالاستجابة وإيداع IgG في الكبيبات. كشفت دراساتنا السابقة أن هناك زيادة في Mϕتسلل إلى الكلىفي هذا الإعداد.

3.1. يتم زيادة التعبير الجيني للبلاعم في الكلى ICGN المعتمدة على FH. لتقييم وجود Mϕs في كليتي ICGN المعتمدة على FH، تم إجراء qRT-PCR باستخدام علامات البلاعم M2، CD204 (مستقبل الزبال Mϕ 1) وCD206 (مستقبل Mϕ مانوز 1) [21-24]. تم تنظيم التعبير عن كلا الجينين في الكلى بشكل كبير بعد علاج أبوفيريتين في الفئران FHKO (الشكل 1) مما يشير إلى وجودزيادة وجود البلاعم في الكلى.

انقر هنا للحصول على مستخلص سيستانش عضوي طبيعي يحتوي على 25% من الإكيناكوسيد و9% أكتيوسايد لوظيفة الكلى.

الخدمة الداعمة لشركة Wecistanche - أكبر مصدر للسيستانش في الصين:

البريد الإلكتروني:wallence.suen@wecistanche.com

واتس اب/هاتف:+86 15292862950

تسوق لمزيد من تفاصيل المواصفات:

https٪3a٪2f٪2fwww.xjcistanche.com٪2fcistanche-shop

3.2. تغييرات الدورة الزمنية عن طريق علاج كلودرونيت في تسلل البلاعم الكلوي في فئران FHKO المعالجة بالأبوفيريتين. لتحديد الطريقة الفعالة لتقليل Mϕs في ICGN المعتمدة على FH، استنفدنا Mϕs في الفئران fh-/-

الشكل 3: البيانات التكميلية. فيما يلي ملفات تعريف التدفق الخلوي للخلايا الوحيدة F4 / 80+ من الفئران الخاضعة للتحكم والمعالجة بكلودرونيت. يتم تقليل خلايا F4/ 80+ بشكل كبير لتصل إلى أقل من 10% عن طريق العلاج بكلودرونيت. كل نقطة زمنية ن=6.

3.4. استنزاف البلاعم يقلل من الكبيبي

علم الأمراض في FH بوساطة ICGN. تم تقييم الرواسب المناعية المعقدة في الكلى والسمات النسيجية المرضية لـ ICGN في نهاية التجربة. كشف تلطيخ التألق المناعي لـ C3 وIgG أن استنزاف Mϕ لم يعدل المجمعات المناعية في هذا الإعداد. يظهر الشكل 5 تلطيخ التألق المناعي التمثيلي والتشريح المرضي. وكانت الميزة النسيجية الأولية هي فرط الخلايا المنتشر للخصلات الكبيبية في الفئران fh-/- مع CSS التي تم تقليلها بشكل كبير عند استنفاد Mϕs.

3.5. تقوم البلاعم بتعديل السيتوكينات في ICGN المعتمدة على FH.

مرة واحدةتسلل إلى الكلىوعندما تتعرض للمحفزات الالتهابية، فإنها تفرز السيتوكينات. قمنا، بواسطة ELISA، بتقييم مستويات TNF وIL-6 المنتشرة في البلازما وmCSF الكلوي في فئران FHKO المعالجة بالمحلول الملحي أو الأبوفيريتين أو الأبوفيريتين والكلودرونات. كانت مستويات الدورة الدموية لـ IL-6 منخفضة جدًا في الفئران من النوع البري وزادت في فئران FHKO وانخفضت في فئران FHKO التي عولجت بكلودرونيت (الشكل 6). تمت زيادة السيتوكينات الثلاثة، TNF و IL-6 وmCSF بشكل ملحوظ في الفئران المعالجة بالأبوفيريتين مقارنة بالضوابط المعالجة بالمحلول الملحي. أدى استنزاف Mϕ بواسطة الكلودرونات إلى الحد بشكل كبير من ارتفاع السيتوكينات في هذا الإعداد

3.6. البلاعم تعدل البروفيبروتيك

الجزيئات واللامينين في ICGN المعتمدة على FH. مرة واحدة فيالكلى تصاب بالمرض، فإنها تميل إلى أن تصبح متليفة. تشارك Mϕs في العملية الليفية عن طريق الإفراط في إنتاج الجزيئات الليفية. كشف PCR في الوقت الحقيقي عن زيادة بنسبة 75٪ في تحويل تعبير mRNA لعامل النمو beta1 (TGFbeta1)، وزيادة بنسبة 100٪ في تعبير metalloproteinase -9 (MMP9)، وزيادة بنسبة 230٪ في laminin mRNA. تمشيا مع التعبير مرنا، يتم زيادة التعبير بروتين اللامينين بشكل ملحوظ في الفئران fh-/- مع CSS الذي تم تخفيضه في غياب Mϕs (الشكل 7).

4. مناقشة

وقد أظهرت دراساتنا الأخيرة أنه في غياب هرمون FH، تتطور الفئران بشكل منتشرالتهاب كبيبات الكلى التكاثري(GN) مع F4/80+ Mϕs حول مواقع المرحلية [10]. علاوة على ذلك، توضح دراساتنا أن الفئران Cd11b−/− fh−/− قد أدت إلى تفاقم مظاهر التهاب كبيبات الكلى [26]. بالنظر إلى أن وجود بلاعم M1 الالتهابية المتزايدة وتنشيطها المستدام يمكن أن يسبب أمراض الأنسجة، وإعادة استقطابها إلى النمط الظاهري المضاد للالتهابات من شأنه أن يساعد في حل أمراض المرض، فقد أجريت الدراسة الحالية لزيادة فهم دور Mϕs في fh -/- الفئران مع ICGN. يُظهر زيادة وجود Mϕs في الكلى وحل أمراض المرض عن طريق استنفاد البلاعم خلال ICGN بوساطة FH الدور الحاسم لـ Mϕs في هذا الإعداد، وبالتالي، يمكن أن تكون بمثابة أهداف علاجية مهمة في هذا الإعداد.

الشكل 5: استنزاف Mϕs يقلل من أمراض الكبيبات في ICGN المعتمدة على FH. توجد صور تمثيلية للكبيبات من الفئران المعالجة بالمحلول الملحي (أ) والمعالجة بالأبوفيريتين (ب) والفئران التي تعاني من نقص هرمون FH المعالجة بالأبوفيريتين + الكلودرونيت. في (A)، المقاطع ملطخة بـ C3 (الأخضر) وIgG (الأحمر)، بينما تظهر (B) المقاطع الملطخة بـ PAS. ظلت رواسب IgG التي زادت مع علاج الأبوفيريتين دون تغيير، في حين بدت الكبيبات أقرب إلى وضعها الطبيعي عند استنفاد البلاعم.

يؤدي غياب FH إلى زيادة إنتاج C5a. يرتبط C5a بـ C5aR1 الذي يشير إلى Mos إلى الكلية حيث يضيف إلى البيئة الالتهابية. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت دراساتنا أيضًا أنه في هذا الإعداد المفرط لجيل C5a، يبدو أن تعطيل نشاط C5a يحد من المرض [10]. يؤدي تنشيط Mos إلى استقطابها، لكنها تظل في حالة من الاستمرارية [27]. تظهر نتائجنا في هذه الدراسة أن المرض الكبيبي في CSS انخفض في الفئران fh -/− التي استنفدت فيها Mϕs مقارنة بفئران fh -/- دون استنفاد البلاعم. وبالتالي، فإن القضاء على Mϕs alle عبر ICGN في الفئران fh -/− يقلل من أمراض المرض. ومع ذلك، فإن Mϕs ضرورية أيضًا لعملية الإصلاح، وبما أن Mϕs تغير الحالات من الحالات المؤيدة للالتهابات إلى الحالات المضادة للالتهابات والعكس، فسيكون مسعانا المستقبلي هو فهم ما إذا كان تغيير مشهد Mϕs دون استنفادها يمكن أن يغير أمراض المرض.

تلعب Mϕs دورًا مهمًا في بدء التليف والحفاظ عليه وتشارك أيضًا في قمع التليف وحله وعكس اتجاهه [28]. تظهر نتائجنا تعبيرًا متزايدًا عن علامات CD204+ وCD206+ Mϕ مما يشير إلى زيادة وجودها في هذا الإعداد. نظرًا لأن هذه Mϕs هي مصدر رئيسي للجزيئات الليفية، فإن نتائجنا التي تظهر زيادة في TGF -1 بالإضافة إلى MMP9 تشير إلى أن هذه Mϕs يمكن أن تساهم بشكل مباشر وغير مباشر في العمليات الليفية في ICGN بوساطة FH من خلال آليات مختلفة ( 1،3،8،44). يمكن لـ TGF -1 أن يغير التليف عن طريق تنظيم السيتوكينات. بالإضافة إلى ذلك، يقوم TGF -1 بتعديل التخليق الحيوي لـ C3 والعامل B والتعبير في الخلايا الوحيدة [29]، كما أن تغيير المكمل في الخلايا المناعية وخلايا الكلى يمكن أن يسهل تليف الأنسجة [30]. ومع ذلك، فإن التفاعلات الدقيقة بين الخلايا البلعمية والمكملة، والآلية/الآليات المعنية، وأدوارها، وتقسيم الأنسجة تحتاج إلى فك رموزها [31]. أظهرت دراساتنا انخفاض التعبير عن اللامينين في الفئران المستنفدة لـ Mϕs مقارنة بالفئران الكافية لـ Mϕ. لفهم كيفية تنظيم FH للعملية الليفية بشكل أفضل، نحتاج إلى تحديد مجموعات Mϕ الفرعية المحددة الموجودة في ICGN بوساطة FH وتوضيح مساهمات كل مجموعة فرعية. هذه الدراسات مهمة لأن العلاجات التكميلية أصبحت حقيقة سريرية. لقد تم، ولا يزال، تطوير المثبطات ضد أهداف مختلفة في السلسلة التكميلية التي ستمنع الخطوات النهائية في مسار (مسارات) التنشيط. حاليًا، أحد المثبطات التكميلية المستخدمة سريريًا هو الجسم المضاد لـC5، إيكوليزوماب [32]. ولذلك، فإن تحديد المكونات التكميلية المسببة للأمراض في المرض واستكمال ذلك من خلال تنظيم سكان Mϕs ليس نقطة تافهة.

الشكل 7: ترسب اللامينين فيالكلى التي تعاني من نقص FHمع ICGN يتم تقليله عن طريق استنفاد Mϕs. ( أ ) qRT-PCR لـ TGFB و MMP9 و laminin منمرنا الكلىتم عزله من الفئران بعد 5 أسابيع من استخدام المحلول الملحي والأبوفيريتين و3 أسابيع من استخدام الكلودرونيت. تمت تسوية التعبير إلى GAPDH (n=6/group). ( ب ) صورة مجهرية تمثيلية IF لتلوين اللامينين في كليتي نفس مجموعات الفئران. ∗ف < 0:01.

باختصار، قمنا هنا بدراسة دور Mϕs في نموذج ICGN المعتمد على FH. يمكن أيضًا تطبيق النتائج في إعدادات التنشيط التكميلي غير المنظم مع المجمعات المناعية مثل تلك التي لوحظت في أمراض مختلفة بما في ذلك التهاب الكلية الذئبي، واعتلال الكلية بالجلوبيولين المناعي (IgA)، واعتلال الكلية الغشائي. نظهر أهمية كل من التنظيم المكمل بواسطة FH وحالة Mϕs في المرض. وبالتالي، فإن الاستهداف الدوائي للسلسلة التكميلية وحالة Mϕs في GN بوساطة IC له أهمية سريرية محتملة.

مراجع

[1] ت. ميوفيتش، أ. زيتوني، وإي. كولمينيا،"فقدان السمع الحسي العصبي المناعي الذاتي: واجهة طب الأذن والروماتيزم،" أمراض الروماتيزم، المجلد. 52، لا. 5، ص 780–789، 2013. [2] إم. أبونجوا، كي إي بابر، آر جيه مارتن، وأيه بي روبرتسون،"المورانتيل المُحاكي للكولين باعتباره مانعًا للقناة المفتوحة لـ Ascaris suum ACR-16 nAChR،" علم الأعصاب اللافقاريات، المجلد. 16، لا. 4, 2016.

[3] AS De Vriese، S. Sethi، J. Van Praet، KA Nath، وFC Fer venza،"مرض الكلى الناجم عن خلل تنظيم المسار البديل التكميلي: نهج مسبب للمرض،" مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى، المجلد. 26، لا. 12، ص 2917– 2929، 2015. [4] آر جي كويج،"أمراض الكبيبات التكميلية والمناعة الذاتية ،" الاتجاهات الحالية في المناعة الذاتية، المجلد. 7، ص 165– 180, 2003. 

[5] إم سي كارول،"النظام المكمل في تنظيم المناعة التكيفية" علم المناعة الطبيعة، المجلد. 5، لا. 10، ص 981– 986، 2004. [6] إم في كارول وآر بي سيم،"تكملة في الصحة والمرض،" مراجعات توصيل الأدوية المتقدمة، المجلد. 63، لا. 12، ص 965–975, 2011. 

[7] م. نوريس وج.ريموزي،"نظرة عامة على التنشيط والتنظيم التكميلي،" ندوات في أمراض الكلى، المجلد. 33، لا. 6، ص 479–492, 2013. 

[8] في بي فيريرا، أيه بي هربرت، سي. كورتيس وآخرون،"يرتبط ارتباط العامل H بمعقد من polyanions الفسيولوجية وC3b على الخلايا بالضعف في متلازمة انحلال الدم اليوريمي غير النمطية،" مجلة علم المناعة، المجلد. 182، لا. 11، ص 7009–7018, 2009.

[9] جي جي ألكساندر، إم سي بيكرينغ، إم. هاس، آي. أوساوي، و آر جي كويج،"العامل المكمل h يحد من ترسب المركبات المناعية ويمنع دخولهافلوريداتسمم وتندب في كبيبات الفئران المصابة بمرض المصل المزمن،" مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى، المجلد. 16، لا. 1، ص 52–57, 2005.

[10] جي جي ألكساندر، إل. تشافيز، أ. تشانغ، و آر جي كويج،"يلعب مستقبل C5a دورًا رئيسيًا في التهاب كبيبات الكلى المناعي المعقد في العامل المكمل H-deفايالفئران القديمة," الكلى الدولية، المجلد. 82، لا. 9، ص 961–968, 2012. 

[11] السيرة الذاتية ياكوبزيك، جي جي راندولف، بي إم هينسون،"الوحيدات ديوما يليهاوظائف erentiation وتقديم المستضد،" مراجعات الطبيعة. علم المناعة، المجلد. 17، لا. 6، ص 349–362, 2017. 

[12] س. كاو، واي. وانغ، ودي سي هاريس،"عدم تجانس البلاعم والأنماط الظاهرية والأدوار في الكلىفايبروس," الكلى الدولية. ملحق، المجلد. 4، لا. 1، ص 16–19, 2014.

[13] س. كاو، واي. وانج، إكس إم وانج وآخرون،"تعرض الخلايا البالعة وحيدة النواة الكلوية F4/80+ CD11c+ الخصائص المظهرية والوظيفية للبلاعم في الصحة وفي اعتلال الكلية الأدرياميسين،" مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى، المجلد. 26، لا. 2، ص 349–363, 2015.