مكونات مونوتربين من Cistanche Tubulosa - التركيبات الكيميائية للكانكانوسيدات A—E وKankanol-

سيستانش توبولوسا (Sكرينك) R. Wخفيف(Orobanchaceae) هو نبات طفيلي معمر ينمو على جذورسلفادوراأوكالوتروبيسالأنواع وتنتشر في شمال أفريقيا والجزيرة العربية ودول آسيا.1) تم استخدام سيقان هذا النبات (Kanka-nikujuyou باللغة اليابانية) تقليديًا لعلاج العجز الجنسي والعقم وألم الظهر وضعف الجسم.2) في السابق، كان هناك العديد من الإيريدويدات، والتربينات الأحادية،فينيليثانويدات، وتم عزل القشور من الصين وباكستانجيم توبولوسا. 1,3–7) في سياق دراساتنا المتسلسلة حول المكونات النشطة بيولوجيًا من الأدوية الطبيعية الصينية،8–18) أربعة جليكوسيدات إيريدويد جديدة، كانكانوسيدات A (1), B (2), C (3) و د (4) ، إيريدويد مكلور، كانكانول (5) ، وجليكوسيد أحادي التربين الحلقي، كانكانوسايد E (6) ، تم عزلها من المستخلص الميثانولي لهذا الدواء العشبي مع 16 مركبًا معروفًا بما في ذلك 12 تربينًا أحاديًا (7-18). يتناول هذا البحث عزل وتوضيح بنية مكونات المونوتربين الجديدة (1-6). 

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

تم إخضاع المستخلص الميثانولي من السيقان المجففة لنبات C. tubulosa (26.8% من هذا الدواء العشبي) إلى كروماتوجرافيا عمود هلام السيليكا ذات الطور العادي والطور العكسي وHPLC المتكرر لإعطاء كانكانوسيدات A (1، 0.{{7} }{{10}}54%), B (2, 0.030%), C (3, 0.{ {32}}027%)، وD (4، {{40}).0015%)، كانكانول (5، {{57 }}.0034%)، وكانكانوسايد E (6، 0.027%) مع حمض الموسينوسيديك 19) (7، 0 . %)، ajugol19) (12، 0.011%)، بارتسيوسيد19) (13، 0.21%)، 6-deoxycatalpol19) (14، 0.11%)، argyol21) (15، 0.0030%)، سيستانين22،23) (16) ، 0.0040%)، سيستاكلورين22) (17، 0.0035%)، (2E،6Z)-8-bD-جلوكوبيرانوسيلوكسي-2،6-ثنائي ميثيل-2،6- حمض الأوكتادينويك 24) (18، 0.0028٪)، Dmannitol25) (4.19٪)، يوريدين 25) (0.0069٪)، (3R) -3- هيدروكسي -2- بيروليدينون 26،27) (0.0020٪)، و (3R) )-3-هيدروكسي-1-ميثيل- 2-بيروليدينون27) (0.0059%).

هيكل كانكانوسايد أ (1)

تم الحصول على Kankanoside A (1) كمسحوق غير متبلور وأظهر دورانًا بصريًا سلبيًا ([a] D 25 - 107.4 درجة في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء 1 نطاق امتصاص عند 1647 سم - 1 يمكن تخصيصه لوظيفة الأوليفين بالإضافة إلى نطاقات امتصاص قوية عند 3410 و1076 سم - 1 مما يوحي بوجود شاردة جليكوسيد. في القصف الذري السريع الموجب والسالب (FAB) -MS من 1، لوحظت قمم الأيونات شبه الجزيئية عند m/z 369

(M Na) و345 (M-H)-، وكشف تحليل FAB-MS عالي الدقة أن الصيغة الجزيئية لـ 1 هي C16H26O8. التحلل المائي الحمضي لـ 1 مع 1.0 M حمض الهيدروكلوريك (HCl) يحرر الجلوكوز D، والذي تم تحديده بواسطة تحليل HPLC باستخدام كاشف الدوران البصري.8،10-12،15-18) 1 H- (CD3OD، الجدول 1) و13C-NMR (الجدول 2) أطياف 1، والتي تم تخصيصها من خلال تجارب الرنين المغناطيسي النووي المختلفة، 28) أظهرت إشارات قابلة للتخصيص لاثنين من الميثيل [d 1.31 (s، 10- H3) ، 1.51 (br s، 11-H3)]، اثنان من الميثيلين [d 1.49، 2.02 (كلاهما m، 6a- و6b-H)، 1.64، 1.67 (كلاهما m، 7b- و 7a-H)]، اثنين من الميثينات [d 2.21 (dd، J= 2.7، 9.5 هرتز، 9-H)، 2.71 (m، 5-H)]، ومجموعة أسيتال غير مشبعة a,b [d 5.33 (d، J= 2.7 هرتز، 1-H)، 5.95 (br s، 3-H)] مع شاردة b-glucopyranosyl [d 4.62 (d، J=7.9 هرتز، 1 '-H)]. كما هو مبين في الشكل 1، أشارت تجربة التحليل الطيفي للارتباط 1 H – 1 H (1 H – 1 H COSY) في 1 إلى وجود هياكل جزئية مكتوبة بخطوط عريضة. في تجربة الارتباطات المتعددة الروابط النووية غير المتجانسة (HMBC) على 1، لوحظت ارتباطات طويلة المدى بين البروتونات وذرات الكربون التالية (3-H, 1' -H و1-C; {{88}) }H3 و3-C؛ 3-H، 5-H، 6-H2، 9-H، 11-H3 و4- ج؛ 11-H3 و5-C؛ 10-H3 و7-C؛ 1-H، 7-H2، 9-H و 10-H3 و8-C; 10-H3 و9-C; 7-H2 و10-C) كما هو موضح في الشكل 1. أعطى التحلل المائي الأنزيمي لـ 1 مع b-glucosidase aglycon، kankagenin a (1a) كما هو موضح في الشكل 3. كشفت مقارنة طيف 13CNMR لـ 1 مع طيف 1a عن تحول الغليكوزيل حول الموضع 1- في 1 [ 1: د C 94.1 (1-C)، 134.6 (3-C)، 53.3 (9-C)؛ 1أ: د ج 92.9 (1-ج)، 135.3 (3-ج)، 54.7 (9-ج)]. وبالتالي، تم أيضًا توضيح اتصال شاردة bD-glucopyranosyl في 1 ليكون في الموضع 1-1a. بعد ذلك ، تميزت البنية المجسمة النسبية لـ 1 بتجربة التحليل الطيفي لتعزيز Overhauser النووي (NOESY) ، والتي أظهرت ارتباطات NOE بين المجموعات التالية.

خفض أزواج البروتونات ({{0}}H و10-H3؛ 3-H و11-H3؛ 5-H و6b-H، {{9 }}H; 6b-H و7b-H; و10-H3; 7b-H و9-H) كما هو موضح في الشكل 2. وأخيرًا، التكوين المطلق لـ {{ 22}}تم تحديد الموضع في 1 من خلال تطبيق قاعدة 13CNMR لإزاحة الغليكوزيل التي تبلغ 1,1' -ديساكاريد،29) والتي وجد أنها تنطبق على مركبات الهيمياسيتال.30،31) البنية المجسمة للموضع 1- في 1 تم التأكد من الحفاظ عليه في 1 أ بالمقارنة مع تحليل 1 H-NMR بما في ذلك تجربة NOESY. تم العثور على قيم تحول الغليكوزيل [Dd 1.2 جزء في المليون (1' -C) و0.9 جزء في المليون (1- C)، في البيريدين-d5] لتكون مميزة لمجموعة R، Rdihemiacetal، والتي تتوافق مع البنية المجسمة المطلقة لـ 1 كما هو مبين في الشكل 3. وبالتالي، تم تحديد التكوين المطلق عند الموضع 1 1- ليكون تكوين S وتم توضيح البنية المجسمة المطلقة لـ 1 كما هو موضح.

سيستانتشي توبولوسا الطبيعي الأدوية الصينية التقليدية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

هياكل Kankanosides B (2) و C (3)

تم عزل Kankanoside B (2) أيضًا كمسحوق غير متبلور مع دوران بصري سلبي ([a] D 26 - 118.7 درجة في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء 2 نطاقات امتصاص عند 3410 و1647 و1085 سم- 1 تعزى إلى وظائف الهيدروكسيل والأوليفين والأثير. تم تحديد الصيغة الجزيئية C15H24O10 من 2 بواسطة قمم الأيونات شبه الجزيئية في FABMS الأيونات الموجبة وبواسطة FAB-MS عالية الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 2 مع 1.0 M HCl يحرر الجلوكوز D، والذي تم تحديده بواسطة تحليل HPLC باستخدام كاشف الدوران البصري.8،10-12، 15-18) 1 H- ( أظهر CD3OD، الجدول 1) و13C-NMR (الجدول 2) spectra28) من 2 إشارات قابلة للتخصيص لاثنين من الميثيلين [d 1.40 (ddd، J= 5.2، 7.3، 13.5 هرتز، 6a-H)، 2.52 ( ddd، J= 7.0، 9.2، 13.5 هرتز، 6b-H)، 3.85، 3.99 (كلاهما d، J= 11.9 هرتز، 10-H2)]، أربعة ميثينات [ د 2.21 (يوم، J=6.4، 8.6 هرتز، 9- H)، 2.83 (م، 5- H)، 4.02 (يوم، J=5.2، 7.0 هرتز، 7- H)، 5.49 (د، J=6.4 هرتز، 1- H)]، وزوج رابطة الدول المستقلة أوليفين [d 4.95 (dd، J {{84) }}.0، 6.1 هرتز، 4-H)، 6.22 (dd، J= 1.8، 6.1 هرتز، 3-H)]، مع شاردة b-glucopyranosyl [d 4.72 (د، ي=7.9 هرتز، 1 '-ح)]. كانت إشارات البروتون والكربون في بيانات 1 H و13C-NMR لـ 2 مماثلة لتلك الخاصة بـ 6-deoxycatalpol (14)، باستثناء الإشارات الناتجة عن 7- و8- المواقف. كما هو مبين في الشكل 1، أشارت تجربة 1 H – 1 H COZY في 2 إلى وجود هياكل جزئية مكتوبة بخطوط عريضة، وفي تجربة HMBC، لوحظت ارتباطات طويلة المدى بين أزواج البروتون والكربون التالية ({{ {117}}H، 1' -H و 1-C؛ 3-C؛ 10-H2 و7- C؛ }H، 7-H، 9-H، 10-H2 و8-C؛ 7-H، 10-H2 و9- ج؛ 7-ح و10-ج). تميزت البنية المجسمة النسبية لـ 2 بتجربة NOESY، التي أظهرت ارتباطات NOE بين أزواج البروتونات التالية (1- H و10- H2؛ 3- H و4- H؛ 4- H؛ 4- H؛ {144}}H و6b-H، 9-H؛ 6b-H و7-H؛ 7-H و9-H) كما هو موضح في الشكل 2. أخيرًا ، أنتجت المعالجة القلوية لـ 14 مع 5٪ هيدروكسيد البوتاسيوم المائي (KOH) 2 و 19، 32) بحيث تم توضيح البنية المجسمة لـ 2.

كانكانوسايدتم عزل C (3) كمسحوق غير متبلور مع دوران بصري سلبي ([a] D 26 - 34.0 درجة في MeOH). في الأيون السالب FAB-MS من 3، تمت ملاحظة زوج من قمم الأيونات شبه الجزيئية النظائرية عند m/z 399 و401 (M-H)-. تم تحديد الصيغة الجزيئية لـ 3 لتكون C15H25ClO1 0 عن طريق قياس FAB-MS عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 3 مع 1.0 M HCl المحرر من الجلوكوز D، والذي تم تحديده بواسطة تحليل HPLC باستخدام كاشف الدوران البصري.8،10-12، 15-18) 1 H- (CD3OD، الجدول 1) و أظهرت 13C-NMR (الجدول 2) أطياف 28) من 3 إشارات قابلة للتخصيص لثلاثة ميثيلين [d 1.70 (br dd، J=ca. 3، 13 هرتز، 4a-H)، 2.70 (br dd، J {{ 41}} كاليفورنيا 6، 13 هرتز، 4b-H)، 1.68 (br d، J=كاليفورنيا 13 هرتز، 6aH)، 2.44 (m، 6b-H)، 4.01، 4.04 (كلاهما d، J= 11.3 هرتز، 10-H2)]، خمسة ميثاين [d 2.47 (dd، J= 2.5، 7.9 هرتز، 9-H)، 2.61 (م) ، 5- H)، 3.94 (br s، 7- H)، 5.10 (br d، J=كاليفورنيا. 3 هرتز، 3- H)، 5.48 (د، J=2.5 هرتز، 1-H)]، وشحنة b-glucopyranosyl [d 4.60 (d، J=8.0 هرتز، 1 '-H)]. كانت إشارات البروتون والكربون في أطياف 1 H و13C-NMR لـ 3 قابلة للتركيب على إشارات 2، باستثناء الإشارات الناتجة عن المواضع 3- و4-. تم توضيح مواقع bD-glucopyranosyl ووظيفة الكلور في 3 من تجارب H – H COZY وHMBC كما هو مبين في الشكل 1. وبالتالي، تم بناء الهيكل المستوي 3 ليكون كما هو موضح. تم تحديد البنية المجسمة النسبية لـ 3 من خلال تجربة NOESY، حيث تمت ملاحظة ارتباطات NOE بين أزواج البروتونات التالية (1-H و3-H، 10-H2؛ 3- H و4a-H؛ و5- H؛ و6b-H، و9-H؛ و7-H؛ }H و9-H) كما هو موضح في الشكل 2.

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

هياكل كانكانوسيد د (4) وكانكانول (5)

تم عزل Kankanoside D ( 4 ) كمسحوق غير متبلور مع دوران بصري سلبي ([a] D 25 - 30.6 درجة في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء 4 نطاق امتصاص عند 1655 سم - 1 يعزى إلى وظيفة الأوليفين ونطاقات امتصاص قوية عند 341 0 و1 0 78 سم - 1 مما يشير إلى وجود جليكوسيدية فيه. بناء. في الأيون الموجب FAB-MS البالغ 4، لوحظت ذروة أيون شبه جزيئي عند m/z 341 (M Na). تم تحديد الصيغة الجزيئية C15H26O7 البالغة 4 بواسطة قياس FAB-MS عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 4 مع 1.0 M HCl المحرر D- الجلوكوز، 8، 10-12، 15-18) بينما (R) -روتونديول (4a) 33،34) تم الحصول عليه عن طريق التحلل المائي الأنزيمي لـ 4 مع b- الجلوكوزيداز. أظهر 1 H-NMR (الجدول 3، CD3OD) و13C-NMR (الجدول 4) أطياف 28) من 4 إشارات قابلة للتخصيص لميثيل [d 1.69 (s، 10- H3)]، وثلاثة ميثيلين [d 1.41، 2.06 (كلاهما m، 4-H2)، 1.51، 2.01 (كلاهما m، 6a- و6b-H)، 2.23 (br dd، J= ca. 8، 15 هرتز، 7a-H) ، 2.37 (br dd، J= ca. 8، 15 هرتز، 7b-H)]، وميثين [d 2.90 (m، 5-H)]، واثنين من الميثيلين يحملان وظيفة الأكسجين { د [3.56 (DD، J=2.8، 7.4، 13.2 هرتز)، 3.97 (DD، J=4.9، 8.0، 13.2 هرتز)، 3- H2]، 4.04، 4.18 (كلاهما d، J= 12.2 هرتز، 1-H2)} مع جزء b-glucopyranosyl [d 4.25 (d، J= 7.7 هرتز، 1' -H )]. تم توضيح موضع جزء bD-glucopyranosyl في 4 بواسطة تجربة HMBC ليكون موضع 3- (الشكل 1). وبناء على هذا الدليل، تم تحديد البنية المجسمة المطلقة للرقم 4 كما هو موضح.

تم الحصول على Kankanol (5) كمسحوق غير متبلور مع دوران بصري إيجابي ([a]D 25 11.1 درجة). أظهر التأين الكيميائي (CI) -MS لـ 5 زوجًا من قمم أيونات النظائر عند m/z 221 و223 بسبب الأيون شبه الجزيئي (MH). كشف قياس CI-MS عالي الدقة بقيمة 5 أن الصيغة الجزيئية هي C9H13ClO4. أظهر 1 H-NMR (الجدول 1، CD3OD) و13C-NMR (الجدول 2) spectra28) من 5 وجود الوظائف التالية: ثلاثة ميثيلين [d 1.6 0 (ddd، J=2) .5، 5.5، 13.1 هرتز، 4a-H)، 1.80 (br dd، J=كاليفورنيا. 3، 13 هرتز، 4bH)، 1.83 (br d، J=كاليفورنيا. 12 هرتز، 6a-H)، 2.57 (م، 6b-H)، 3.75، 3.88 (كلاهما d، J= 9.2 هرتز، 10-H2)]، خمسة ميثينات [d 2.76 (dd، J{ {58}}.3، 8.0 هرتز، 9-H)، 2.50 (م، 5-H)، 3.80 (br s، 7-H)، 5.17 (br d، J{ {71}} كاليفورنيا 3 هرتز، 3- ح)، 5.26 (د، ي=4.3 هرتز، 1- ح)]. تم تأكيد البنية المستوية لـ 5 من خلال تجارب 1 H – 1 H COZY وHMBC. أي أن تجربة 1 H – 1 H COZY في 5 أشارت إلى وجود الهياكل الجزئية المكتوبة بخطوط غامقة، وفي تجربة HMBC، لوحظت الارتباطات طويلة المدى كما هو موضح في الشكل 1. وكانت البنية المجسمة النسبية لـ 5 تم تحديده بواسطة تجربة NOESY، حيث لوحظت ارتباطات NOE بين أزواج البروتونات التالية (1- H و9- H؛ 3- H و4a-H؛ 4b-H و{{95) }} H؛ 5-H و6b-H، 9-H؛ و7-H؛ و9-H) كما هو موضح في الشكل 2. من خلال مقارنة بيانات 1 H و13C-NMR لـ 5 مع تلك الخاصة بـ 14a، والتي تم الحصول عليها عن طريق معالجة 14 باستخدام حمض الهيدروكلوريك المائي بنسبة 5٪ كما هو موضح في الرسم البياني 1،35) موضع مجموعة الكلور في 5 تم دعمه ليكون الموضع 3-. علاوة على ذلك، أنتج أستلة 5 مع أنهيدريد الأسيتيك (Ac2O) والبيريدين أكسيد 37- (5a)، بينما أعطى 14a ثنائي الأسيتات (14b) تحت نفس حالة الأستلة. قادنا هذا الدليل أيضًا إلى تأكيد موضع وظيفة الكلور ليكون الموضع 3b (الرسم البياني 3). ونتيجة لذلك، تم تحديد البنية المجسمة لـ 5 كما هو موضح.

تم عزل هيكل Kankanoside E (6) Kankanoside E (6) كمسحوق غير متبلور مع دوران بصري سلبي ([a] D 25 - 20.0 درجة في MeOH). أظهر طيف الأشعة تحت الحمراء 6 نطاقات امتصاص عند 3410 و1647 و1085 سم - 1 تعزى إلى وظائف الجليكوسيديك والكربونيل، بينما أظهر طيف الأشعة فوق البنفسجية الحد الأقصى للامتصاص عند 211 نانومتر (سجل e 4.63)، مما يشير إلى وجود حمض كربوكسيلي غير مشبع أ،ب. تميزت الصيغة الجزيئية C16H28O8 البالغة 6 بالأيونات الموجبة والسالبة FAB-MS وبقياس MS عالي الدقة. التحلل المائي الحمضي لـ 6 D- الجلوكوز المحرر، 8، 10-12، 15-18) بينما (2E،6R) -8-هيدروكسي -2، 6- ثنائي ميثيل {{31 }} تم الحصول على حمض الأوكتانويك (6 أ) 36) عن طريق التحلل المائي الأنزيمي لـ 6 باستخدام ب-جلوكوزيداز. أشار 1 H-NMR (الجدول 3، CD3OD) و13C-NMR (الجدول 4) spectra28) من 6 إلى وجود (2E,6R)-8-hydroxy-2،6- ثنائي ميثيل -2- شاردة حمض الأوكتينويك [d 0.95 (d، J=6.4 هرتز، 10- H3)، 1.30، 1.48 (كلاهما m، 5- H2)، 1.45، 1.70 (كلاهما م، 7-H2)، 1.65 (م، 6-H)، 1.81 (ق، 9-H3)، 2.22 (2H، م، 4-H2) ، 3.61، 3.94 (كلاهما m، 8- H2)، 6.78 (dd، J=1.2، 7.3 هرتز، 3- H)] مع جزء bD-glucopyranosyl [d 4.26 (د، J=7.6 هرتز، 1 '-H)]. من خلال مقارنة إشارات الكربون في طيف 13C-NMR البالغ 6 مع إشارات 6a، لوحظ تحول الغليكوزيل حول الموضع 8-6. كما تم تأكيد موضع ارتباط الجلوكوزيد من خلال تجارب HMBC كما هو موضح في الشكل 1. وبالتالي، تم توضيح البنية المجسمة المطلقة لـ 6 لتكون (2E,6R)-8-bD-glucopyranosyloxy-2،6-ثنائي ميثيل-2-حمض الأوكتينويك.

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%