N-Succinyl-S-Farnesyl-L-Cysteine ​​(SFC): نظير جديد من Isoprenylcysteine ​​مع نشاط مضاد للالتهابات في المختبر وخصائص حماية الجلد السريرية

الرجاء التواصلoscar.xiao@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

الملخص:على مدار الخمسة عشر عامًا الماضية ، تم تحديد نظائر إيزوبرينيل سيستئين (IPC) الجزيئية الصغيرة على أنها فئة جديدة محتملة من مضادات الالتهاب الموضعية. أثبتت الدراسات السريرية أن IPCs آمنة وفعالة في تعزيز صحة الجلد عند وضعها موضعياً. يهدف هذا العمل إلى إظهار N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) كجزيء IPC جديد يوفر مجموعة واسعة من الفوائد للبشرة. تم تعريض خط الخلايا الملوية البشرية HL -60 ، والخلايا البطانية الوعائية الدقيقة للجلد البشري (HDMECs) ، والأرومات الليفية الجلدية البشرية (HDFs) ، والخلايا الكيراتينية البشرية الطبيعية (NHEKs) في الثقافة لمحفزات مختلفة لتحفيز أنواع الأكسجين التفاعلية ، السيتوكينات ، أو إنتاج الكولاجيناز. تم إجراء 49- تجربة عشوائية مزدوجة التعمية ، والتحكم في السيارة ، ومقسمة الوجه باستخدام هلام SFC بنسبة 1 في المائة ، أو 5 في المائة من نياسيناميد ، وتم استخدام مركبة لمدة 12 أسبوعًا لتقييم مقاومة التجاعيد ومقاومة الشيخوخة نقاط النهاية. لقد أظهرنا أن SFC تمنع GPCR وإطلاق السيتوكين المؤيد للالتهابات الناجم عن TLR في NHEKs و HDMECs من العديد من محرضات الالتهاب مثل UVB والمواد الكيميائية والكاثيليسيدين والبكتيريا. نجح SFC في تقليل الأكسدة التي يسببها GPCR في العدلات المتباينة. علاوة على ذلك ، أظهرت دراسات التشيخ الضوئي أن SFC قللت من إنتاج كولاجيناز المستحث بالأشعة فوق البنفسجية (pro-MMP -1) في HDFs. أظهر التقييم السريري لـ 1٪ من هلام SFC تحسنًا أعلى من المنتج لتقليل التجاعيد والترطيب والملمس والمظهر العام للبشرة. N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) هو جزيء صغير جديد مضاد للالتهابات وهو أول جزيء farnesyl-cysteine ​​IPC الذي يُظهر أنه يحسن المظهر وعلامات الشيخوخة سريريًا ، مع وجود القدرة أيضًا على تخفيف اضطرابات الجلد الالتهابية .

الرجاء الضغط هنا لمعرفة المزيد

الكلمات الدالة:إيزوبرينيل سيستئين. مكافحة الشيخوخة. مستحضرات التجميل؛ مستقبلات البروتين G ؛ مستقبلات تشبه الرسوم

1 المقدمة

تم تحديد نظائر إيزوبرينيل سيستئين (IPC) للجزيء الصغير كفئة جديدة محتملة من مضادات الالتهاب الموضعية. تحتوي نظائر IPC على 15- أو 20- سلسلة جانبية من الكربون مرتبطة بالحمض الأميني السيستين ، مما يحاكي الطرف C لبروتينات CAAX المعالجة ، وهو أمر ضروري لاستهداف الأغشية للبروتينات G الصغيرة وغير المتجانسة التي تتوسط مستقبلات الإشارات في الخلايا حقيقية النواة. تمنع نظائر IPC تنشيط الإشارات في حجرة الغشاء عن طريق التنافس مع مجموعات isoprenoid لمواقع ربط prenyl [1،2] وعن طريق تعطيل نقل الإشارة عن طريق منع تكوين بروتين G غير المتجانسة و / أو من المفترض عن طريق منع تفاعلات مستقبل البروتين G [ 3-5].

منذ الاكتشاف الأولي لـ N-Acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) كأول تناظرية IPC لتقليل الاستجابات الالتهابية بشكل فعال في الصفائح الدموية والبلاعم والعدلات [6-8] ، تم إجراء العديد من نظائر IPC المختلفة اكتشفوا مجموعة متنوعة من الأنشطة المختلفة في الجلد ، بما في ذلك تثبيط مستقبلات البروتين G المقترنة (GPCR) التي يسببها إطلاق السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، والوذمة ، وتسلل العدلات عند تطبيقها موضعياً [9]. على سبيل المثال ، يوضح N-acetylglutaminoyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SIG -1191) الخصائص المضادة للالتهابات والترطيب في الخلايا الكيراتينية البشرية والبشرة ثلاثية الأبعاد للإنسان [10]. تُظهر الدراسات الحديثة أن نظائر IPC أيضًا صريحة ؛ التهاب غير بروتيني بوساطة الخلايا الكيراتينية للبشرة البشرية ، والأرومات الليفية الجلدية البشرية ، والخلايا البطانية الجلدية البشرية ، وخلايا الدم أحادية النواة عن طريق إبطال المستقبلات الشبيهة بالحصيلة 2،4 ، و 6 ( TLR2 ، TLR4 ، TLR6) وإشارات مستقبلات الخلايا التائية (TCR) [11،12]. علاوة على ذلك ، ثبت أيضًا أن نظائر فيتيل سيستين IPC فعالة سريريًا ضد حب الشباب [13] وشيخوخة الجلد [14] ، مما يبرز فعالية هذه الفئة من المركبات في منع الالتهاب الجلدي ، وتحسين حالات الجلد المختلفة عند تطبيقها موضعيًا.

يمكن للسيستانش مكافحة الشيخوخة

هنا ، تم الإبلاغ عن أن IPCanalogN-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) (الشكل S1) يمتلك مجموعة واسعة من الخصائص المضادة للالتهابات وحماية الجلد للمساعدة في إبطاء الالتهاب والشيخوخة من خلال آلية عمل غير معروفة سابقًا. تظهر الدراسات التي تستخدم الخلايا البطانية الجلدية أن SFC يثبط الالتهاب الناجم عن الكاثليسيدين (L -37) GPCR. علاوة على ذلك ، تُظهر الدراسات في المختبر في الخلايا الكيراتينية للبشرة أن SFC تمنع بنجاح إطلاق السيتوكين المؤيد للالتهابات من العديد من الضغوطات البيئية مثل الأشعة فوق البنفسجية ، والمواد الكيميائية ، والبكتيريا.cistanche tubulosa جرعة redditتظهر دراسات التصوير الفوتوغرافي أن SFC يمكن أن تقلل بنجاح إنتاج كولاجيناز المستحث بالأشعة فوق البنفسجية (pro-MMP -1) في الخلايا الليفية الجلدية. بالنظر إلى ملف النشاط متعدد الوظائف في الجلد ، قمنا بعد ذلك باختبار SFC سريريًا في دراسة وجه منقسم ، مزدوجة التعمية ، والتحكم في السيارة ، وأثبتنا أن هلام SFC بنسبة 1 في المائة جيد التحمل ويتفوق بشكل كبير على المركبات التي تظهر تحسنًا ملحوظًا في جميع نقاط النهاية السريرية ، بما في ذلك تقليل التجاعيد والترطيب والمظهر العام للبشرة.

2. المواد والأساليب

2.1 المواد الكيميائية والكواشف

All reagents were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis,MO, USA).Organic solvents were purchased from Fisher Scientific (Hampton, NH, USA). SFC was synthesized according to methods as described in US patent US10314802B2. All chemicals were ana-lyzed by LC/MS (Agilent 1100), H,and l3CNMR (500 MHz and 125 MHz, Bruker) for structural identity,and confirmed to be >نقي بنسبة 95 في المائة بواسطة HPLC التحليلي (Agilent 1200). 2.2 العلاجات الخلوية

تم الحصول على خلايا HL -60 (CCL -240 TM) من American Type Culture Collection (ATCC ؛ ماناساس ، فيرجينيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، والتي نمت في ثقافة التعليق ، وتم تحفيزها على التمايز إلى أشكال النخاع الناضجة (dHL { {2}}) عن طريق الزراعة في وجود 1.3 بالمائة (y / v) ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) [15]. تم إجراء اختبار الاندفاع كما هو موضح سابقًا [16]. لفترة وجيزة تم تحضين dHL -60 (2 × 10 درجة خلية / مل) باستخدام formyl-Met-Leu-Phe-OH ((MLP) للحث على إطلاق الأكسيد الفائق من العدلات. تم قياس اكتشاف أنيون فائق الأكسيد عن طريق تقليل ferricytochrome c إلى ferrocytochrome c عن طريق قراءة الامتصاصية عند 550 نانومتر.تم تحضير خليط تفاعل الفحص في محلول الملح المتوازن Hanks مع 160 ميكرومتر من السيتوكروم c ، و 100 U / mL superoxide disutase (SOD) ، و 16 uM TPA ({{ {18}} O-Tetradecanoylphorbol 13- acetate) تم قياس الامتصاصية في قارئ لوحي عند 550 نانومتر كنقطة نهاية (بعد 20 دقيقة من التعرض).

تم شراء الخلايا الأولية البشرية التي تم الحصول عليها من متبرعين حديثي الولادة من Ther-moFisher (NHEKs، HDFs؛ Carlsbad، CA، USA) و ScienCell (HDMECs؛ Carlsbad، CA، CA، USA). / مل) في ظروف طبيعية (5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون ، 37 درجة) ، ثم حضنت مسبقًا لمدة ساعتين مع مركبات (0.1 في المائة ت / ت إيثانول مركبة) في وسائط طازجة مستنفدة لعامل النمو في ثلاث نسخ. تم إحداث NHEKs بواسطة 5 نانوغرام / مل TPA ، 25 م // سم 2 نطاق عريض 305 ± 12 نانومتر UVB (Daavlin ؛ Bryan ، OH ، الولايات المتحدة الأمريكية) أو 10 ميكروغرام / مل ببتيدوغليكان. تم تحفيز HDMECs و HDFs بـ 10 ميكروغرام / مل من LL -37 (Tocris Bioscience ؛ Bristol ، المملكة المتحدة) و 12.5J / cm2 عريض النطاق 350 ± 12 نانومتر UVA (Daavlin ؛ Bryan ، OH ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، على التوالي. خضعت الخلايا لاختبارات الجدوى بواسطة مركب تترازوليوم [3- (4 ، 5- ثنائي ميثيلثيازول -2- يل) -5- (3- كاربوكسيميثوكسيفينيل) -2- ( 4- sulfophenyl) -2 H-tetrazolium ، ملح داخلي ؛ MTS] الفحص (بروميغا ، ماديسون ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم حصاد المواد الطافية للوسائط بعد 24 ساعة من تحريض السيتوكينات (TNF- و IL -6 و IL -8) وقياسات كولاجيناز (pro-MMP -1).

2.3 فحوصات الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)

تم قياس مستويات السيتوكينات البشرية والكولاجيناز من طاف وسائط زراعة الأنسجة بواسطة ELISA ساندويتش ، باستخدام المعايير المناسبة واتباع بروتوكولات الشركة المصنعة. تم شراء مجموعات IL {0}} و IL -8 من BD Biosciences (سان خوسيه ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء مجموعات Pro-MMP -1 و TNF من R&D Systems Inc. (مينيابوليس ، MN ، الولايات المتحدة الأمريكية).

2.4 دراسة سريرية

تم إجراء تجربة سريرية على متطوعين أصحاء في SGS Stephens (دراسة # C 20- J156 ؛ طوكيو ، اليابان) ، وتم الحصول على موافقة مستنيرة مكتوبة تتوافق مع القسم E6 (r2) الصادر عن المجلس الدولي للتنسيق (ICH). من كل موضوع. كانت هذه دراسة مركزية واحدة ، منقسمة الوجه ، مزدوجة التعمية يتم التحكم فيها بواسطة مركبة مع 49 امرأة يابانية أكملن دراسة الأسبوع 12-. تم تخصيص الموضوعات لواحدة من خليتين معالجتين ، وفقًا لعشوائية محددة مسبقًا. داخل كل خلية ، تم اختيار الأشخاص بشكل عشوائي لاستخدام SFC أو niacinamide على جانب واحد من الوجه ، والتحكم في السيارة على الجانب الآخر من الوجه (الخلية 1: 31 شخصًا يتلقون 1 بالمائة من هلام SFC والمركبة ، وموضوعات الخلية 2:18 تلقي 5 في المائة من هلام النياسيناميد والمركبة) (انظر الجدول S1 للحصول على قائمة المكونات الكاملة).كم cistanche لاتخاذأجريت هذه الدراسة على أساس "المبادئ التوجيهية لتقييم المنتجات المضادة للتجاعيد" من قبل جمعية علوم التجميل اليابانية. قام الأشخاص بتطبيق مادة الاختبار على الجانب المخصص من منطقة أقدام الغربان ونصف الوجه بالكامل 2x يوميًا. أجرى الأشخاص أول تطبيق لمواد الاختبار في العيادة بعد الانتهاء من التقييمات الأساسية. تم إجراء التقييمات السريرية في الزيارة الأولى (خط الأساس و 15 دقيقة بعد تقديم الطلب) ، والزيارة الثانية (الأسبوع 8) والزيارة الثالثة (الأسبوع 12).cistanche แอ ม เว ย์تم اختيار حالات تجاعيد قدم كرو في النطاق الخفيف إلى المتوسط ​​(الدرجة {0}} وفقًا لمقياس الجمعية اليابانية لكيميائيات التجميل (JSCC) حيث 0= لا شيء و 7= عميقًا ملحوظًا التجاعيد التي لوحظت). تم تقييم الدرجات السريرية لمعلمات الفعالية بشكل منفصل على الجانبين الأيمن والأيسر من الوجه العام باستخدام مقياس جريفيث المعدل 10- ، مع تعيين درجات نصف نقطة حسب الضرورة (0 - لا شيء (أفضل حالة ممكنة) ، 1 إلى 3= خفيف ، 4 إلى 6= متوسط ​​، 7 إلى 9= شديد (أسوأ حالة ممكنة)). تم تصنيف معلمات الفعالية وفقًا لمثبتات المقياس المدرجة في الجدول 1.

2.5 التحليل الإحصائي

تم تحديد الدلالة الإحصائية بواسطة ANOVA متبوعًا باختبار مقارنات متعددة في Dunnett باستخدام قيم p أقل من 0. 05 كان فرقًا كبيرًا. لجميع القياسات المضادة للبكتيريا ومستويات السيتوكينات ، تم فحص العينات في ثلاث نسخ. تم إنشاء منحنيات استجابة جرعة السيتوكين من خلال ملاءمة البيانات مع هيل ، معادلة ثلاثية المعلمات باستخدام برنامج Sigma Plot (Systat Software Inc. ، شيكاغو ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، والذي تم من خلاله تحديد IC50 والحد الأقصى للتثبيط.

3. النتائج

3.1. يمنع SFC الإجهاد والتهاب التأكسد الناجم عن GPCR

مستقبل الببتيد الفورميل -1 (FPRL1) هو GPCR الموجود على سطح العدلات والخلايا البطانية التي تلعب دورًا مهمًا في الاستجابة لعدد كبير من المحفزات الالتهابية [17]. على سبيل المثال ، N-Formyl Methionyl-leucyl-phenylalanine (fMLP) عبارة عن ببتيد كيميائي يرتبط بالعدلات التي تجند FPRL1 ، وعند وصولها ، يؤدي إلى إطلاق سريع لأنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ومجموعة متنوعة من وظائف مضادات الميكروبات [18] . ومع ذلك ، إذا استمر تجنيد العدلات ، يحدث خلل تنظيمي كبير في الشلال الالتهابي ، مما أدى إلى ارتشاح العدلات في التسبب في العد الوردي والعديد من الأمراض الجلدية الأخرى [19]. الكاثليسيدين (LL -37) هو رابط آخر لـ FPRL1 له نشاط متعدد الاتجاهات ، بما في ذلك الخصائص المضادة للميكروبات ، والتجنيد ، والالتهاب المرتبط بالتهاب الجلد التأتبي ، والصدفية ، والوردية [20].ما هو الكفالةوبالتالي ، سعينا إلى التحقق مما إذا كان بإمكان SFC تعديل انفجار والتهاب التأكسد بوساطة FPRL 1-. باستخدام العدلات المتمايزة (DHL -60) [21] ، تمت إضافة fMLP لبدء ROS ، وأظهرت النتائج أن SFC يمنع بشكل فعال تكوين الأكسيد الفائق بطريقة تعتمد على الجرعة （IC 50=25 μM） （الشكل 1A） مع تأثيرات غير سامة （الشكل S2）. بالإضافة إلى ذلك ، الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة (HDMECs) المعالجة بـ 10 ميكروغرام / مل LL -37 تحفز الإنتاج الزائد للسيتوكين IL المؤيد للالتهابات -6. حالت العلاجات باستخدام SFC إلى إفراز IL -6 اعتمادًا على الجرعة بنسبة 100 في المائة (الشكل 1 ب) مع تأثيرات غير سامة (الشكل S2) وفعالية مماثلة (IC 50=2 uM) لعقار الإكزيما FK {{ 19}} (IC 50=1 uM) ، وأفضل بكثير من علاجات الوردية الميترونيدازول (IC 50=14 uM) وحمض الأزيلايك (IC 50 =100 uM). أظهر كلوبيتاسول الجلوكورتيكويد الموضعي أقوى نشاط مضاد للالتهابات كما هو متوقع （IC 50=0. 08 ميكرومتر ؛ البيانات غير ظاهرة).

3.2 يحمي SFC من أشعة UVA و UVB الناتجة عن الشيخوخة الضوئية

الأشعة فوق البنفسجية (UV) هي ضغوط بيئية شائعة تهاجم بشرتنا يوميًا. يخترق الطول الموجي الطويل UVA (320-400 نانومتر) عمق الأدمة ، بينما يؤثر الطول الموجي الأقصر والطاقة الأعلى والأشعة فوق البنفسجية (290-320 نانومتر) بشكل أساسي على البشرة.

على وجه التحديد ، تحفز الأشعة فوق البنفسجية الطويلة على إفراز البروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs) ، والتي تلعب دورًا رئيسيًا في شيخوخة الجلد [22]. MMP -1 ، المعروف أيضًا باسم الكولاجين الخلالي ، يعمل على تكسير الكولاجين (النوع الأول والثاني والثالث) ، مما يساهم في ظهور الخطوط الدقيقة والتجاعيد. لتحديد إمكانات SFC المضادة للتجاعيد ، قمنا بفحص قدرتها على تقليل تحرر pro-MMP -1 الناجم عن UVA من الخلايا الليفية الجلدية البشرية (HDFs). يثبط SFC - اعتمادًا على جرعة SFC - إنتاج pro-MMP -1 مما يدل على فعالية استثنائية مع ICso =10 pM (الجدول 2) مع تأثيرات غير سامة (الشكل S2) ، في حين أن العناصر التجميلية المضادة للشيخوخة مثل حمض الأسكوربيك و a-tocopherol لم يقلل من إطلاق pro-MMP -1 عند أعلى مستوى تركيز تم اختباره (الجدول 2). على غرار UVA ، يؤدي التعرض الطويل للأشعة فوق البنفسجية إلى سلسلة من الالتهابات وإنتاج السيتوكينات المؤيدة للالتهابات التي تلعب دورًا رئيسيًا في شيخوخة الجلد التي تسببها الشمس [23]. على وجه التحديد ، تؤدي الخلايا الكيراتينية الموجودة في البشرة الطبيعية التي تتعرض للأشعة فوق البنفسجية B إلى إطلاق الإنترلوكين -6 (IL -6) وعامل نخر الورم أ (TNF-a) ، والتي تم ربطها أيضًا بجفاف الجلد [24] . توضح نتائجنا أن SFC تمنع إطلاق كل من IL -6 و TNF-x بطريقة تعتمد على الجرعة باستخدام ICso =10 pM و 100 pM ، على التوالي ، مع تأثيرات غير سامة (الشكل S2).بيوفلافونويدسعلاوة على ذلك ، كانت هذه الفاعلية القوية 4-5 أوامر من حيث الحجم أكبر من تلك التي لوحظت بالنسبة لحمض الأسكوربيك و-توكوفيرول والتي أظهرت أيضًا خصائص مضادة للالتهابات (الجدول 2).

3.3.SFC يحمي من الالتهابات التي تسببها المواد الكيميائية والبكتيريا

بالإضافة إلى الأشعة فوق البنفسجية من أشعة الشمس ، فإن العديد من العوامل البيئية الخارجية الأخرى تؤدي إلى التهاب الجلد ، ويمكن أن تسرع عملية شيخوخة الجلد الطبيعية إذا تركت دون حماية. اثنان من المذنبين هم المواد الكيميائية والبكتيريا. 12- O-tetradecanoyl -- phorbol -13- أسيتات (TPA) هو مادة كيميائية مخرشة شائعة تستخدم لاختبار النشاط الموضعي المضاد للالتهابات في الجسم الحي [9]. علاوة على ذلك ، تُظهر الدراسات السابقة أن الخلايا الكيراتينية للبشرة البشرية الطبيعية (NHEKs) المعالجة بـ TPA تؤدي إلى زيادة إنتاج العديد من الوسطاء المؤيدين للالتهابات [25 ، 26]. يُظهر اختبار NHEK المستند إلى الخلية تحريض TPA مهمًا ثابتًا لـ TNF-a ، وأن SFC يثبط إطلاقه بطريقة تعتمد على الجرعة باستخدام IC 50=0. 75 uM (أقصى تثبيط 70 بالمائة) (الشكل 2 أ) مع تأثيرات غير سامة (الشكل S2). وفي الوقت نفسه ، يُظهر كلوبيتاسول الجلوكوكورتيكويد المضاد للالتهابات الذي تم اختباره عند 3 أمتار الحد الأقصى للتثبيط بنسبة 58 في المائة فقط ، مما يشير إلى أن SFC أكثر فعالية في هذا الاختبار المحدد.

تلعب المستقبلات TLRs دورًا مهمًا في تنظيم الجلد للاستجابة المناعية الفطرية لمسببات الأمراض ، وقد ثبت أن إشارات TLR2 على وجه التحديد تلعب دورًا رئيسيًا في التسبب في العديد من الأمراض الجلدية [27]. Peptidoglycan (PGN) هو منتج لجدار الخلية البكتيري ولجند يشبه مستقبلات الرسوم -2 (TLR2). تظهر النتائج التي توصلنا إليها أن SFC يقلل اعتمادًا على جرعة SFC من إطلاق إنترلوكين الناجم عن PGN -8 (IL -8) ​​في NHEKs مع ICso =0. 8 uM ، يمكن مقارنته بـ clobetasol مع IC {{11 }} ميكرومتر （الشكل 2 ب）.

3.4. يقلل SFC من التجاعيد ويحسن العديد من معلمات الجلد الأخرى في البشر. يعتبر التصوير الفوتوغرافي لجلد الوجه أحد العوامل العديدة التي تساهم في ظهور العلامات المرئية للشيخوخة ، ويتميز بوجود الخطوط الدقيقة والتجاعيد والتغيرات في التصبغ. تشير البيانات الواردة هنا إلى أن أنشطة الحماية ضد الالتهاب المضادة للشيخوخة والتأكسد الموجودة في SFC في المختبر يمكن أن تكون فعالة في إبطاء الشيخوخة المبكرة للجلد والالتهابات عند تطبيقها موضعياً على البشر. وبالتالي ، سعينا إلى تقييم SFC سريريًا لتقييم نشاطها عند التطبيق الموضعي. تمت صياغة SFC بنسبة 1 في المائة في هلام ، وتم تقييمه في دراسة مزدوجة الوجه ، مزدوجة التعمية ، تسيطر عليها السيارة ، حيث تم تطبيقه مرتين يوميًا لمدة 12 أسبوعًا. قبل هذه الدراسة ، تم اختبار هلام SFC في 100 موضوع اختبار رقعة الإهانة المتكررة للإنسان ووجد أنه آمن للبشرة (البيانات غير معروضة).

أكمل ما مجموعه 49 امرأة الدراسة مع جميع الأشخاص الذين استخدموا السيارة على جانب واحد من وجههم ، وبالنسبة للجانب الآخر ، استخدم 31 من الأشخاص 1 في المائة من هلام SFC ؛ الأشخاص الثمانية عشر المتبقون استخدموا 5 في المائة من النياسيناميد كمقارنة ، حيث ثبت سابقًا أنه يحسن مظهر بشرة الوجه [28]. تُظهر نتائج التصنيف السريري للتجاعيد في منطقة أقدام الغراب تحسنًا ملحوظًا من الناحية الإحصائية من خط الأساس والمركبة في الأسبوعين 8 و 12 مقابل 1 بالمائة من هلام SFC ، بينما يُظهر 5 بالمائة من النياسيناميد تحسنًا ملحوظًا فقط في الأسبوع 12 (الشكل 3). في الأسبوع 8،1 بالمائة ، يوضح هلام SFC تحسنًا ~ 32 بالمائة ، بينما أظهر 5 بالمائة من النياسيناميد والمركبة تحسنًا بنسبة 11 بالمائة و ~ 6 بالمائة على التوالي (الشكل 3). بالإضافة إلى تقليل التجاعيد ، يتفوق هلام SFC بنسبة 1 في المائة بشكل كبير على السيارة في العديد من نقاط النهاية الأخرى ، بما في ذلك الملمس (اللمس) والترطيب (المرئي) في الأسابيع 8 و 12 الإشراق / اللمعان / السطوع ، والملمس (المرئي) في الأسبوع 12 ، وبشكل عام ظهور حالة الجلد (صحية) على الوجه بعد التطبيق (الجدول 3). علاوة على ذلك ، في العديد من نقاط النهاية ، لا يتفوق هلام SFC بنسبة 1 في المائة على السيارة فحسب ، بل يتفوق أيضًا على النياسيناميد. على سبيل المثال ، يكشف تحليل معلمة الإشراق / اللمعان / السطوع في الأسبوع 12 أن الأشخاص الذين يستخدمون هلام SFC بنسبة 1 في المائة يظهرون تحسنًا مهمًا من الناحية الإحصائية بنسبة 52 في المائة تقريبًا مقارنة بنسبة 22 في المائة فقط لأولئك الذين يطبقون 5 في المائة من النياسيناميد (الجدول 3). يتفوق جل SFC بنسبة 1 في المائة أيضًا بشكل كبير على 5 في المائة من النياسيناميد في الأسبوع 8 للترطيب (~ 42 في المائة مقابل ~ 3 في المائة) (الجدول 3). تحسن ملحوظ إحصائيًا بنسبة 19 بالمائة من خط الأساس (القيمة الاحتمالية {{4 0}}. 0 31) ، بينما تحسن الجلد المعالج بالمركبة فقط بنسبة 10 بالمائة تقريبًا (القيمة الاحتمالية 0.063) ، و أظهرت المجموعة المعالجة بالنياسيناميد بنسبة 5 بالمائة تحسنًا بنسبة 0 بالمائة. إجمالاً ، تشير هذه النتائج إلى أن SFC عندما يتم تطبيقه موضعيًا إكلينيكيًا يحسن علامات الشيخوخة ويعزز صحة الجلد.

4. مناقشة

تم اكتشاف أول جزيء IPC ، N-acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) منذ أكثر من 30 عامًا [6،29] ، وثبت لاحقًا أنه يقلل بشكل فعال من ارتشاح الوذمة والغذاء العصبي عند استخدامه موضعياً في الجسم الحي نماذج حيوانية للالتهاب وحساسية التلامس [9]. تم الإبلاغ عن العديد من مشتقات farlnesyl-cysteine ​​الأخرى بنجاح في تثبيط الالتهاب وإطلاق الإجهاد التأكسدي [21]. علاوة على ذلك ، تم إثبات أن جزيء IPC آخر بعيد المنال ، SIG -1191 ، يمتلك نشاطًا مضادًا للالتهابات في NHEKs ، ونشاط ترطيب محتمل عند وضعه موضعياً على بشرة الإنسان ثلاثية الأبعاد [10] إجمالاً ، تسلط هذه النتائج الضوء على إمكانات تستخدم هذه الفئة من المركبات لتحسين الأمراض الجلدية و / أو علاج الأمراض الجلدية. على الرغم من الملف الشخصي الواعد للنشاط في المختبر وفي الجسم الحي ، لم يتم اختبار أي مركب IPC فارنيسيلاتيد سريريًا للنشاط. وهكذا ، سعينا إلى تحديد نشاط IPC N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) الفارنيسيل (SFC) لأول مرة في دراسة سريرية ، والبدء في توضيح آلية عملها لشرح هذه الفوائد.

تم الإبلاغ عن جزيئات IPC لتعديل GPCRs ، والمستقبلات الشبيهة بالرسوم (TLRs) ، وإشارات غاما (PAR-y) المُنشّطة بالبيروكسيسوم [30] ؛ ومع ذلك ، فإن آلية هذه التأثيرات المضادة للالتهابات ليست مفهومة جيدًا. من خلال الاستفادة من الخلايا البطانية للأوعية الدموية الدقيقة عن طريق الجلد ، كان AFC قد أظهر سابقًا أنه يمنع الإشارات الالتهابية البيورينجية GPCR (إطلاق السيتوكين الناجم عن مستقبلات ATP-P2Y) [31]. علاوة على ذلك ، تبين أن SIG -1191 يتحكم في التعبير عن علامة ترطيب الجلد aquaporin 3 (AQP3) عبر مسار بروتين كيناز / كيناز خارج الخلية الذي ينظم الإشارة (MEK) [10]. علاوة على ذلك ، فإن مركبات IPC SIG -1273 و SIG -1459 تنظم إشارات مستقبلات TLR ومستقبلات الخلايا التائية (TCR) ، والتي تلعب دورًا مهمًا في التسبب في الإصابة بحب الشباب والتهاب الجلد التأتبي [11،12]. هنا ، نوضح أن SFC يعدل إشارات GPCR-FPRL1 عن طريق منع إطلاق cathelicidin (LL -37) الناجم عن FPRL1 في HDMECs بنجاح. من خلال استهداف الوسطاء الالتهابيين المنطلقين من HDMECs على وجه التحديد ، قد يكون SFC مثبطًا قويًا للالتهاب المزمن ، حيث يلعب IL -6 دورًا مهمًا في العديد من الآليات والاضطرابات الجلدية ، بما في ذلك التئام الجروح [32]. علاوة على ذلك ، تم اقتراح وسائط التهابية مشتقة من الخلايا الظهارية للعب دور في الوردية والصدفية بواسطة LL -37 [33،34] ، وهو جزيء مؤثر مهم في هذه الأمراض الجلدية ، بالإضافة إلى التهاب الجلد التأتبي [20] ]. كما ورد هنا ، كل من الأدوية المضادة للالتهابات الوردية الميترونيدازول (IC=o =14 uM) وحمض azelaic (IC 50 =100 uM) ، بالإضافة إلى علاج التهاب الجلد التأتبي FK {{37} } (IC 50 =1 uM) ، قلل إطلاق السيتوكين الناجم عن LL -37- FPRL 1- بفاعلية مختلفة. يعرض SFC فاعلية مماثلة لـ FK -506 ، ويتفوق في الأداء على كل من مركبات دواء الوردية ، ويمنع إطلاق ROS المستحث بـ FPRL -1- (الشكل 1 أ) من العدلات. إجمالاً ، تُظهر هذه البيانات قدرة جزيئات IPC على التفاعل في العديد من مسارات الإشارات المختلفة وأنواع الخلايا الحاسمة في التهاب الجلد. تحقيقًا لهذه الغاية ، على مدار العشرين عامًا الماضية تقريبًا ، برز TLR2 كمستقبل حاسم في اضطرابات الجلد الالتهابية مثل حب الشباب والوردية والتهاب الجلد التأتبي وغيرها [27 ، 35-37]. يُعبر TLR2 في جلدنا ، وهو جزء من خط الدفاع المناعي الأول للمضيف استجابة لمسببات الأمراض الغازية. تعمل إشارات TLR2 قبل المنبع من GPCRs و TCR و PPAR الذي تم عرضه مسبقًا بواسطة نظائر IPC. توضح النتائج المقدمة هنا أن SFC تمنع بشكل فعال إطلاق PGN-TLR 2- الذي يسببه IL -8 من NHEKs (الشكل 2B) ، ويقلل بنجاح TNF الناجم عن TPA في الخلايا الكيراتينية (الشكل 2A). TPA هو منشط معروف لبروتين كيناز سي (PKC) ، والذي يلعب أيضًا دورًا مهمًا في إشارات GPCR. وبالتالي ، قد يمنع SFC أيضًا استجابة الإشارات الالتهابية في اتجاه مجرى إطلاق السيتوكين الناجم عن PKC في NHEKs.

الالتهاب المزمن هو العامل الرئيسي في الإصابة بأمراض الجلد والشيخوخة. كما ورد هنا ، بالإضافة إلى تثبيط الإشارات الالتهابية التي يسببها GPCR و TLR ، يمنع SFC أيضًا الالتهاب الناجم عن UVB و UVA ، بالإضافة إلى إنتاج MMP -1 في الخلايا الليفية ، مما يؤدي إلى تدهور الكولاجين وتسريع شيخوخة الجلد [22]. يتم تنظيم إنتاج MP -1 من خلال زيادة نشاط MAP kinase / AP -1 [38]. نظرًا لقدرة SFC على توفير نشاط مضاد للالتهابات في الخلايا الكيراتينية والخلايا البطانية ، وبطء الإجهاد التأكسدي والشيخوخة الضوئية في العدلات والخلايا الليفية الجلدية ، افترضنا أن طيف نشاط SFC الواسع سيكون مفيدًا لبشرة الإنسان عند تطبيقه موضعيًا. توضح البيانات السريرية المقدمة هنا أن جل SFC بنسبة 1 في المائة يقلل بشكل كبير من التجاعيد ويحسن الترطيب وملمس البشرة وتفتيح البشرة ومظهر البشرة الصحي بشكل عام أفضل من السيارة. هذه النتائج مثيرة بشكل خاص ، بالنظر إلى أن معظم الدراسات السريرية التجميلية يتم إجراؤها دون التحكم في السيارة. علاوة على ذلك ، تُظهر الخصائص المعززة لصحة الجلد في SFC في حالات معينة تحسنًا ملحوظًا بنسبة تزيد عن 5 في المائة من النياسيناميد ، وهو مكون مرجعي تجميلي مضاد للشيخوخة ومضاد للالتهابات (الجدول 3). بينما لا يزال يتعين إجراء دراسات إضافية لتوضيح آلية عمل SFC بشكل أكبر من حيث صلتها بالتهاب الجلد والشيخوخة ، فإننا نقترح هنا فرضية عمل لكيفية منح SFC أنشطة تعزيز صحة الجلد التي تنظم العديد من الأهداف ، بما في ذلك إشارات TLR و GPCR ( الشكل 4). إجمالاً ، تُظهر هذه النتائج أن SFC يحسن سريريًا علامات الشيخوخة ، وقد يكون فعالًا في تحسين صحة الجلد ومكافحة العديد من الاضطرابات الجلدية الالتهابية.

تم استخراج هذه المقالة من مستحضرات التجميل 2021 ، 8 ، 110. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040110 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics