الجزء 2 الآثار الوقائية من جليكوسيدات الفينيل إيثانول من Cistanche Tubulosa على التليف الكبدي الناجم عن ألبومين مصل البقر في الفئران
Mar 06, 2022
الاتصال: أودري هو واتساب / حصان: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 والكولاجين I التعبير بعد التدخل الدوائي في خلايا HSC-T6 من أجل توصيف إشارات التليف الكبدي ، تم تحديد اثنين من الجينات التنظيمية الرئيسية في الكبد عن طريق فحص RT-PCR. أظهرت البيانات أن خلايا tHSC-T6 من المجموعة الضابطة لديها مستويات أقل من NF- κB والكولاجين من النوع الأول mRNA. وعلى العكس من ذلك، حفز TGF-β1 خلايا HSC-T6 على تنظيم NF-κB بشكل ملحوظ (P< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش) ، أظهرت نتائج NF-κB p65 [P NF-κB = 0.001 ل 100 ug/ml ، P NF-κB = 0.002 ل 75 ug / ml ، P NF-κB = 0.007 ل 50 ug / ml ، و P NF-κB = 0.012 ل 25 ug / ml ، على التوالي] و Col-I [P Col-I = 0.006 ، P Col-I = 0.009 ، P Col-I = 0.014 ، P Col-I = 0.019 ، على التوالي] تعبيرات مخفضة لهذه mRNAs (الشكل 7).
تحليل اللطخة الغربية لمستوى الكولاجين I بعد التدخل الدوائي في خلايا HSC-T6 يوضح الشكل 8 مستويات التعبير عن بروتين الكولاجين I في خلايا HSC-T6 من المجموعات التجريبية المختلفة. انخفض مستوى التعبير عن بروتين الكولاجين I بشكل ملحوظ في مجموعات الجرعة المختلفة من CPhGs(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)(100 ميكروغرام/مل، 75 ميكروغرام/مل، 50 ميكروغرام/مل، و25 ميكروغرام/مل) مقارنة بمجموعة TGF-β1
مناقشة
جهغس(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)هو جليكوسيد فينيل يثانويد معزول ومنقى من جذمور Cistanche ، والذي يستخدم كدواء عشبي صيني تقليدي. في السنوات الأخيرة ، ثبت أن CPhGs تمتلك قدرة قوية على منع إصابات الكبد [20]. لذلك ، كنا نهدف إلى التحقيق فيما إذا كان CPhGs له آثار مثبطة على تليف التهاب الكبد عن طريق التليف الكبدي الناجم عن BSA في الفئران. يستخدم BJRG عادة كدواء علاجي للتليف الكبدي في الصين. وهي مصنوعة من قذيفة السلاحف. Radix Paeonia rubra و Cordyceps Sinensis و Radix isatidis وما إلى ذلك لها آثار تجديد Qi والدم ، وتخفيف التعب ، وتليين العقد. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر الدراسات السابقة أن لديها وظيفة واضحة تتمثل في منع تليف الكبد المبكر ، وتثبيط انتشار خلايا تخزين الدهون ، والحد من تخليق الكولاجين [21]. لذلك ، تم استخدام BJRG كدواء إيجابي في هذه الدراسة.
التغيرات المرضية للتليف الكبدي في الفئران الناجمة عن حقن BSA تشبه تلك الموجودة في تليف الكبد البابي البشري [22]. جهغس(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)خففت الجرعة من درجة تليف الكبد ومنعت تحول HSC إلى خلايا تشبه الخلايا الشبيهة بالخلايا الليفية العضلية ، وقللت من المستويات المرتفعة من المصل ALT و AST و HA و LN و CIV و TGF-β1 ومؤشر الكبد ، وقمعت بشكل ملحوظ التعبير عن الكولاجين I والكولاجين III و TGF-β1 في أنسجة الكبد. ترتبط مراحل التليف الكبدي بمستويات المصل من HA و LN و IV-C ، والتي قد تلعب دورا في الكشف عن درجة التليف الكبدي [23]. وقد أفيد أن HA هو المورد الرئيسي للمصفوفة خارج الخلية. سيتم تصنيع IV-C كعنصر أساسي في الغشاء السفلي بكثرة وترسبه بشكل كبير في المراحل المبكرة من تليف الكبد. مستويات المصل من LN و IV-C هي مؤشرات معدل دوران الغشاء السفلي وتظهر درجة التليف في منطقة البوابة والشعيرات الدموية الجيبية [24]. PC III هو علامة في تشخيص التليف الكبدي وتليف الكبد المبكر ، ولكن حساسيته وخصوصيته ليست عالية ، ولا يوجد فرق كبير بين المراحل المختلفة للتليف في العديد من المراجع [24 ، 25].
حصلت هذه الدراسة على نتيجة مماثلة. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر ملاحظات القسم الملطخ بالتريكروم في H & E و Masson أنسجة الكبد الطبيعية مع الفصيصات الكبدية المميزة والجيوب الأنفية الكبدية. كان هيكل أنسجة الكبد في المجموعة النموذجية مضطربا ، وتم استبدال أنسجة الكبد والجيوب الأنفية الكبدية بكمية كبيرة من النسيج الضام. ومع ذلك ، لوحظ تحسن كبير في مجموعات العلاج مقارنة بمجموعة النموذج. الأهم من ذلك ، أن تعبير الكولاجين من النوع الأول والكولاجين من النوع الثالث يلعبان أدوارا أساسية في تطور التليف الكبدي ، والذي يمكن أن يؤدي حظره إلى منع وعلاج التليف الكبدي. لذلك ، يمكن أن يكون توليد وترسب أنسجة الكبد من النوع الأول والكولاجين من النوع الثالث بمثابة محدد مهم لفعالية التليف المضاد للتليف. TGF-β1 هو أيضا سيتوكين بروفيبروجيني مهم في إصابة الكبد وهو نشط بيولوجيا مع العديد من الإجراءات الدوائية [26]. مطلوب توازن بين هذه الإجراءات للحفاظ على توازن الأنسجة. يشارك التعبير الشاذ ل TGF- β1 في التسبب في أمراض الكبد [27 ، 28]. من المعروف أن TGF-β1 هو سيتوكين حاسم يشارك في المراحل المبكرة من تليف الكبد.
يؤدي الإجهاد التأكسدي إلى تحفيز TGF-β1 ، مما يؤدي إلى تحفيز إنتاج ECM وترسبه [29]. لذلك ، فإن إحدى الاستراتيجيات الفعالة لإنتاج دواء مضاد للتليف الكبدي هي تحديد العوامل المضادة ل TGF-β1. أظهر التحليل الكيميائي النسيجي المناعي أن تعبيرات الكولاجين من النوع الأول والكولاجين من النوع الثالث و TGF-β1 يمكن أن تكشف عن العملية المرضية للتليف الكبدي. يتم تقليل تعبيرات الكولاجين من النوع الأول والكولاجين من النوع الثالث و TGF-β1 في مجموعات العلاج ، والتي كانت أقل بكثير في الجرعة العالية CPhGs(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)مجموعة العلاج على وجه الخصوص ، واقترح أن CPhGs هو نوع فعال من الكولاجين الأول والكولاجين من النوع الثالث ومثبط TGF-β1. من المفترض أن CPhGs يمكن أن يحسن نشاط الكولاجيناز ، والحفاظ على التوازن الديناميكي لتخليق ECM وتدهوره ، وبالتالي تأخير ومنع تكوين تليف الكبد. جهغس(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)ليس فقط يمكن أن يخفف من التليف الكبدي الناجم عن BSA في الفئران ولكن أيضا قد يكون مرتبطا بتثبيط تنشيط HSC في المختبر. يعتقد أن تنشيط HSC يمثل الخطوة الحاسمة لتكوين الليف. في هذه الدراسة ، أوضحت النتائج أن إعطاء CPhGs من 25 إلى 100 ميكروغرام / مل خفف بشكل ملحوظ من انخفاض NF-κB p65 ، وتعبير الكولاجين I mRNA ، وتعبير بروتين الكولاجين I في HSC. يلعب NF-κB دورا مهما في تعديل الاستجابة المناعية للعدوى أو المحفزات [30]. يمكن أن يؤدي تراكم NF-κB في خلايا الكبد إلى تجنيد السيتوكينات / الوسطاء الالتهابيين ، وبالتالي تحفيز تطور التليف [31 ، 32]. علاوة على ذلك ، الكولاجين هو أيضا مؤشر حساس يعكس مستوى التليف ويمثل حوالي 50 ٪ من إجمالي البروتين في الكبد الليفي [33].
نتيجة لذلك ، افترضنا أن الآلية الجزيئية ضد تليف الكبد مرتبطة ب CPhGs(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)- التعطيل الوسيط لتعبير NF-κB ، حيث تساهم الفائدة في الأدوار التآزرية للسمية المناعية المخففة وإجهاد الالتهاب في أنسجة الكبد المصابة ب BSA ، مما يزيد من تصحيح خلل التمثيل الغذائي لتحسين وظائف الكبد.
الاستنتاجات
في الختام ، تشير دراساتنا إلى أن CPhGs(فينيل إيثانويد جليكوسيد من سيستانش)يخفف بشكل كبير من مدى التليف الكبدي الناجم عن BSA في الفئران. قد تكون آليته جزئيا على الأقل بسبب التأثير المثبط ل CPhGs على تكوين ECM وتحفيز تدهور ECM ، و / أو عن طريق التثبيط المباشر لتخليق الكولاجين من النوع الأول والكولاجين من النوع الثالث والتعبير عن TGF-β1. لذلك ، توقعنا أنه يمكن استخدام CPhGs في منتجات الرعاية الصحية أو في الأدوية السريرية للوقاية من تليف الكبد البشري. هناك حاجة إلى دراسات مستقبلية لإثبات فعالية CPhGs كدواء قوي مضاد للتليف الكبدي.
الاختصارات
جهغس:جليكوسيدات فينيل إيثانول من سيستانش; BSA: ألبومين مصل البقر. HSC-T6: الخلايا النجمية الكبدية. Hyp: هيدروكسي برولين. BJRG: أقراص Biejiarangan المركبة. TGF-β1: تحويل عامل النمو β1 ؛ بديل: ألانين أمينوترانسفيراز. AST: الأسبارتات أمينوترانسفيراز. HA: حمض الهيالورونيك. LN: لامينين. PC III: بروكولاجين من النوع الثالث; IV-C: الكولاجين من النوع الرابع. NF-κB: العامل النووي كابا - سلسلة الضوء - محسن للخلايا البائية المنشطة ؛ RT-PCR: تفاعل سلسلة النسخ العكسي - البوليميراز ؛ SDS-PAGE: كبريتات دوديسيل الصوديوم بولي أكريلاميد هلام الكهربائي الرحلان الكهربائي.
المصالح المتنافسة يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح متنافسة. مساهمات المؤلفين TL و JZ و SPY و LM و MT و SLZ تصور التجارب وتصممها. قام SPY و TL و JZ بتحليل البيانات. كتب SPY و JZ المخطوطة. راجعت TL و LM و JZ المخطوطة. قرأ جميع المؤلفين المخطوطة النهائية ووافقوا عليها. شكر وتقدير تم دعم هذا البحث من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81260624). يود المؤلفون أن يعربوا عن خالص شكرهم للبروفيسور تاو ليو على التحسينات التي اقترحها لكتابة هذه الورقة. تفاصيل المؤلف 1 قسم علم السموم ، كلية الصحة العامة ، جامعة شينجيانغ الطبية ، رقم 393 طريق شينيي ، أورومتشي 830011شينجيانغ الأويغور المستقلة
المنطقة، الصين. 2 المختبر الرئيسي لطب الإيغور ، معهد المواد الطبية في شينجيانغ ، أورومتشي 830004 ، الصين. 3 رقم 140 طريق شينخوا الجنوبي، منطقة تيانشان، أورومتشي 830000شينجيانغ الويغورية ذاتية الحكم، الصين. تاريخ الاستلام: 6 آب/أغسطس 2015 تاريخ القبول: 24 تشرين الثاني/نوفمبر 2015
مراجع
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. الوضع الحالي للعلاجات المضادة للتليف الجديدة في المرضى الذين يعانون من أمراض الكبد المزمنة. ثير أدف جاستروينتيرول. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. الخلايا النجمية الكبدية وتليف الكبد. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. التسبب في تليف الكبد. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA ، محمد نجاد م ، مالك زاده ر. مراجعة المقالة: انعكاس تليف الكبد. الغذاء فارماكول ثير. 2012;36(9):824–32.
Raven PH ، Zhang LB ، Ventenat O. الأكاديمية الصينية للعلوم. الطبعة 23 الصين: لجنة تحرير النباتات الصينية. 2013. صفحات 1–16.
لجنة دستور الأدوية الصينية التابعة لوزارة الصحة في جمهورية الصين الشعبية. دستور الأدوية الصيني ، الجزء 1. الصين: دار نشر الصناعة الكيميائية؛ 2010. ص 126.
يان جي إتش، تيان جيه إتش، لونغ بي دبليو، لي ن. تقدم البحث في جليكوسيدات الفينيل إيثانويد من سيستانش توبولوزا. سنترال ساوث فارم. 2012;10:692–5.
لي J ، هوانغ D ، هو L. تأثير رو كونغ رونغ(هيربا سيستانشز ديزرتيكولا) على السمية التناسلية في الفئران الناجمة عن جليكوسيد ليغونغتنغ (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, ومثبطات تجميع الصفائح الدموية من Tamarix Hojnacki Bunge (النبات المضيف ل Herba Cistanches) الذي ينمو في شينجيانغ. Pharmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.
جيا Y، غوان Q، جيانغ Y، صالح B، قوه Y، تو P، وآخرون. تحسين التهاب القولون الناجم عن كبريتات الدكستران الصوديوم في الفئران عن طريق مستخلص إchinacoside المخصب من Cistanche tubulosa. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.