تكشف النسخ المنفردة للخلية الواحدة عن تفاعلات الخلايا الخلوية المرشحة للكلية بعد إصابة الخلايا بودوسيت المبكرة والانتقائية

نتائج

Single-Cell Profiling of >29,000 خلايا الكلى المخصبة بالكبيبات

بروتوكولات الخلية الواحدة الحالية لـتحديد الكلى بأكملها<2.5% glomerular cells,9 and although a إعداد الكبيبي المنقىباستخدام الخرز المغناطيسي يثري هذه الفئة من السكان، 22 فشل في التقاط الخلايا الأخرىأنواع الكلىقد يكون ذلك موضع اهتمام. تم استخدام طريقة النخل لإثراء الكبيبات والتقاط أنواع إضافية من خلايا الكلى في وقت واحد لتوسيع هذه النتائج وتطوير فهم تفصيلي لتفاعلات الخلايا الخلوية داخل الكبيبة في سياق المشهد الخلوي بأكمله للكلية، قبل وبعد إصابة البودوسيت.

لتحديد التأثيرات النسخية المبكرة لاستئصال الخلايا البودوسيتية بطريقة محددة لنوع الخلية، تم إجراء scRNAseq باستخدامأنسجة الكلىمن WT وiCTCFpod / الفئران التي تم جمعها عن طريق النخل التسلسلي بعد أسبوع واحد من العلاج الدوكسيسيكلين (الشكل 1A). أنتجت أنسجة الكلى من أربعة حيوانات WT (أربع مكررات بيولوجية) وأربعة iCTCFpod / حيوانات ما مجموعه 14,783 WT و14,727 iCTCFpod / خلية تم تحديدها بعد التصفية (الشكل التكميلي S1 وA وB؛ الجداول التكميلية S1 وS2). تم تطبيع البيانات لإزالة التأثيرات بسبب عدد UMIs والنسبة المئوية لقراءات الميتوكوندريا. بعد تكامل WT وiCTCFpod / العينات، تم استخدام دقة منخفضة للتجميع للكشف عن تسع مجموعات (الشكل 1B). تم توزيع النسخ المتماثلة البيولوجية لـ WT وiCTCFpod / العينات على جميع المجموعات (الشكل التكميلي S2، AC). تم تحديد جميع أنواع خلايا الكبيبة، بالإضافة إلى أنواع خلايا الكلى الإضافية، باستخدام علامات ثابتة ومشتقة من البيانات (الشكل 1C؛ الجدول التكميلي S3؛ الشكل التكميلي S3A).

تم عزل الخلايا الكبيبية، التي تمثل إجمالي 82.1% من جميع الخلايا المستردة [36.9% الخلايا الرجلية، 42.1% الخلايا البطانية الكبيبية (GECs)، 2.7% خلايا مسراق الكبيبة، و0.36% PECs] وتم إعادة تجميعها (الشكل 1D) . تم تحديد أربع مجموعات من الخلايا الرجلية، وخمس مجموعات من GECs، ومجموعة واحدة من خلايا مسراق الكبيبة وPECs، معبرة عن علامات نوع الخلية الأساسية، (الشكل 1E؛ الشكل التكميلي S3B). تم توزيع التكرارات البيولوجية لـ WT وiCTCFpod / العينات في جميع المجموعات (الشكل التكميلي S2، DF؛ الجدول الإضافي S4). كما هو متوقع، نظرًا لأن حذف CTCF الخاص بالبودوسيت يؤدي إلى فقدان البودوسيت القابل للاكتشاف تشريحيًا خلال أسبوعين، احتوت 13 عينة من iCTCFpod على نسبة مئوية أقل من الخلايا البودوسيت مقارنة بعينات WT (الشكل 1F؛ الجدول التكميلي S5). تحتوي عينات iCTCFpod / على عدد أقل من خلايا البودو بنسبة 13.1%، وخلايا GEC أكثر بنسبة 11.9%، وخلايا مسراق الكبيبة بنسبة 1.5% أكثر من عينات WT (الجدول الإضافي S5). ساهمت PECs<1% to either of the iCTCFpod / or WT samples. This finding suggests that disruption of transcriptional programs critical for podocyte survival precedes histologically detectable podocyte injury and loss and highlights the power of scRNAseq in discerning subtle changes that can be missed by histologic analysis.

أعشاب جديدة لصحة الكلى

يؤدي حذف CTCF المحفز الخاص ببودوسيت إلى تغييرات في التعبير الجيني في جميع أنواع الخلايا الكبيبية

تم إجراء تحليل التعبير التفاضلي في كل مجموعة من 11 مجموعة تقارن خلايا iCTCFpod / وWT (الجدول الإضافي S6). تم اعتبار الجينات معبرًا عنها تفاضليًا إذا وجدت في ما لا يقل عن 10% من الخلايا في مجموعة معينة، مع الحد الأدنى المطلق لتغير أضعاف السجل 0.1 وP < 0 المعدل. 05. تم التعبير عن Ctcf بشكل تفاضلي في كل مجموعة من مجموعات الخلايا البودوسيتية الأربع، مع تغيرات متوسطة في سجل الطية تبلغ 0.390 و0.189 و0.331 و0.303 على التوالي. تم أخذ عينات من أعداد الخلايا في كل مجموعة وتكرر تحليل التعبير التفاضلي لمقارنة عدد الجينات المعبر عنها تفاضليًا بين المجموعات الـ 11. كان لدى مجموعات البودوسيت الجينات الأكثر تعبيرًا تفاضليًا، تليها GEC -1 وGEC -2 (الشكل 1G). كانت المجموعات الثلاث المتبقية من GECs، جنبًا إلى جنب مع خلايا مسراق الكبيبات وPECs، تحتوي على عدد أقل بكثير من الجينات المعبر عنها تفاضليًا (الشكل 1G)، مما يشير إلى أن GEC-1 وGEC-2، من بين جميع المجموعات الكبيبية، كانت الأكثر تأثرًا من خلال عواقب حذف CTCF وإصابة الخلايا البويضية.

برامج الجينات المرتبطة بالأمراض التي تم تحديدها في مجموعات معينة من الخلايا بودوسيت والخلايا البطانية

سعت هذه الدراسة أولاً إلى فحص كيفية استجابة مجموعات الخلايا الرجلية الفردية للإصابة. كشف مخطط فين للجينات المعبر عنها تفاضليًا في كل مجموعة من مجموعات الخلايا بودوسيت الأربع أن الخلية بودوسيت 1 لديها الجينات الأكثر تعبيرًا تفاضليًا بشكل فريد في مجموعات بودوسيت الأربع (الشكل 2 أ؛ الجدول التكميلي S7). إن ملاحظة أن إحدى مجموعات الخلايا الرجلية الأربع تأثرت بشكل أكثر وضوحًا تتفق مع البيانات النسيجية السابقة التي تشير إلى أنه لا تتأثر جميع الخلايا الرجلية بنفس الشدة في مواجهة الإصابة وتسلط الضوء على قوة scRNAseq في التوصيف الجزيئي لعدم تجانس حالات الخلية داخل نفس نوع الخلية.23

تم إجراء تحليل التمثيل الزائد لتحديد برامج الجينات المخصبة نتيجة لفقد CTCF في مجموعة البودوسيت 1 (الجدول الإضافي S8). تم تصور المصطلحات الأعلى التخصيب مع خريطة التخصيب لتجميع مجموعات الجينات المتداخلة (الشكل 2ب). وكانت مجموعة بارزة من المصطلحات المخصب وظائف الميتوكوندريا، بما في ذلك تخليق ATP، وتنظيم الميتوكوندريا، وسلسلة نقل الإلكترون، ونشوء الفوسفور التأكسدي (الشكل 2B). تمتد هذه البيانات إلى العمل الأخير الذي يشير إلى خلل الميتوكوندريا كعلامة على إصابة الخلايا الرجلية. بالإضافة إلى ذلك، أشار علم الوراثة البشرية إلى أهمية وظائف الميتوكوندريا في الخلايا الرجلية، بما في ذلك العديد من الطفرات في مسار التخليق الحيوي CoQ (PDSS1، PDSS2، COQ2، COQ6، و ADCK4) التي تسبب المتلازمة الكلوية، خاصة عند الأطفال. 25،26 لذلك تم افتراض أن خلل الميتوكوندريا في خلية بودوسيت قد يمثل حالة خلية بارزة مرتبطة بجميع الأمراض التي تنبع من فقدان بودوسيت.24 توفر البيانات الدعم لهذه الفكرة في مرحلة واحدة تحليل الخلايا، مما يشير إلى أن خلل ميتو الغضروفي قد يمثل حالة الإصابة المبكرة في مجموعة معينة من الخلايا الرجلية، مما يؤدي إلى فقدان الخلية الرجلية.

تم إجراء تحليل التمثيل الزائد لتحديد برامج الجينات المخصبة نتيجة لفقد CTCF في مجموعة البودوسيت 1 (الجدول الإضافي S8). تم تصور المصطلحات الأعلى التخصيب مع خريطة التخصيب لتجميع مجموعات الجينات المتداخلة (الشكل 2ب). وكانت مجموعة بارزة من المصطلحات المخصب وظائف الميتوكوندريا، بما في ذلك تخليق ATP، وتنظيم الميتوكوندريا، وسلسلة نقل الإلكترون، ونشوء الفوسفور التأكسدي (الشكل 2B). تمتد هذه البيانات إلى العمل الأخير الذي يشير إلى خلل الميتوكوندريا كعلامة على إصابة الخلايا الرجلية. بالإضافة إلى ذلك، أشار علم الوراثة البشرية إلى أهمية وظائف الميتوكوندريا في الخلايا الرجلية، بما في ذلك العديد من الطفرات في مسار التخليق الحيوي CoQ (PDSS1، PDSS2، COQ2، COQ6، و ADCK4) التي تسبب المتلازمة الكلوية، خاصة عند الأطفال. 25،26 لذلك تم افتراض أن خلل الميتوكوندريا في خلية بودوسيت قد يمثل حالة خلية بارزة مرتبطة بجميع الأمراض التي تنبع من فقدان بودوسيت.24 توفر البيانات الدعم لهذه الفكرة في مرحلة واحدة تحليل الخلايا، مما يشير إلى أن خلل ميتو الغضروفي قد يمثل حالة الإصابة المبكرة في مجموعة معينة من الخلايا الرجلية، مما يؤدي إلى فقدان الخلية الرجلية.

كانت إحدى المجموعات الرئيسية للمصطلحات المخصبة من تحليل التمثيل الزائد (الشكل 2B) هي تنظيم الهيكل الخلوي بالإضافة إلى مصطلح مخصب واحد ذي صلة لالتصاق مصفوفة الخلية. يلعب الهيكل الخلوي للأكتين دورًا أساسيًا في الحفاظ على البنية الفريدة والمعقدة للخلايا الرجلية، ويعتبر الالتصاق بـ GBM ضروريًا لوظيفة الخلية الرجلية.27 تحتوي الالتصاقات البؤرية الناضجة على مئات البروتينات التي تربط الهيكل الخلوي للأكتين، وربط مصفوفة المستقبل، ونقل الإشارة داخل الخلايا. ، وبلمرة الأكتين. كان Rhpn1 (الشكل التكميلي S4A) واحدًا من أكثر الجينات الخاضعة للتنظيم في بودوسيت 1، وهو مكون أساسي لتأسيس ديناميكيات الهيكل الخلوي بودوسيت والحفاظ على بنية عملية قدم بودوسيت.28 مركب Arp2/3 المعقد Arpc3، محرك بلمرة الأكتين، تم تنظيمه في مجموعة بودوسيت 1 (الشكل 2C؛ الشكل التكميلي S4B). تم أيضًا تنظيم الجين الخاص بمكون إضافي من المركب، Actr2، في كل من الخلية الأرجل 1 والبودوسيت 4. بالإضافة إلى ذلك، يقوم وصل، الذي ينتج منتجه البروتيني N-WASP، بتنشيط مجمع Arp2/3 وهو ضروري للصيانة. تم أيضًا تنظيم عمليات تكسير القدم في الجسم الحي 29 في الخلية بودوسيت 1، وبودوسيت 3، وبودوسيت 4. وكان منظم الهيكل الخلوي Arhgdia، الذي يرتبط حذفه بالتزامن الكلوي في الفئران، 30 خاضعًا للتنظيم في بودوسيت 1 (الشكل 2ج). مستويات التعبير لاثنين من Rho GTPases

الشكل 3: مجموعة Podosis تنظم Col4a5. ج: تم تنظيم Col4a5 بشكل كبير في حذف CTCF الخاص بخلايا بودوسيت (iCTCFpod / ) خلايا بودوسيت 1 مقارنة بخلايا بودوسيت 1 من النوع البري (WT). تم التعبير بقوة عن مستقبلات الكولاجين من النوع IV ɑ5 (COL4A5) في خلايا مسراق الكبيبة والمجموعات الفرعية للخلايا البطانية الكبيبية (GEC) من 1 إلى 4. يمثل حجم رأس السهم التعبير النسبي للمستقبل. ب: القياس الكمي للتفاعل المتسلسل التهجين (HCR). تم تنظيم Col4a5 بشكل ملحوظ في خلايا التعبير iCTCFpod / Nphs2- مقارنة بخلايا التعبير WT Nphs{{20}}. تم تقييم أربعة WT وأربعة iCTCFpod / الفئران. تم قياس كمية جميع الكبيبات من ثلاث صور. C: تعبير Col4a5 في الكبيبات من WT وiCTCFpod / الحيوانات حسب تقييم HCR. * P <0.0001 (اختبار t ثنائي الذيل مع تصحيح ولش). التكبير الأصلي، 40؛ 63 (توسيع المناطق المعبأة) (ج). أشرطة النطاق Z 50 مم (C). يعنيIFI التصوير المناعي.

GEC-1 and GEC-2 had nearly as many differentially expressed genes as podocyte clusters 2 to 4, whereas the remaining GEC clusters, mesangial cells, and PECs had fewer differentially expressed genes. Therefore, these two endothelial clusters were most affected by podocyte injury. GEC-1 expressed >600 جينة معبر عنها تفاضليًا بشكل فريد (الشكل التكميلي S6A؛ الجدول التكميلي S9). أشار تحليل التمثيل إلى أن الجينات المعبر عنها تفاضليًا فريدًا في GEC -1 تم إثرائها في برامج الجينات لهجرة الخلايا والتصاقها (الشكل التكميلي S6 وB وC؛ الجدول التكميلي S10). كشفت هذه التحليلات عن التغييرات النسخية الأولى التي تحدث في GECs كرد فعل لإصابة الخلايا البودوسيتية.

تكشف نمذجة الاتصالات بين الخلايا عن التفاعلات الرئيسية بين أنواع الخلايا استجابة لإصابة الخلايا بودوسيت المبكرة

بعد تحديد برامج الجينات المعطلة في العديد من مجموعات الخلايا المتميزة، سعت الدراسة بعد ذلك إلى فهم كيفية تأثر الحديث المتبادل بين الخلايا الكبيبية بإصابة الخلايا الرجلية. بحثت الدراسة أولاً في قائمة الجينات المعبر عنها تفاضليًا في مجموعات خلايا الرجل، وGEC، وخلايا مسراق الكبيبة. تم تعطيل التعبير عن اثنين من الروابط الرئيسية المؤيدة للاستبداد الاستبدادي، Vegfa وPdgfb، بالإضافة إلى التعبير عن مستقبل PDGFB، Pdgfrb، (الجدول الإضافي S6). انخفض تعبير Vegfa في جميع مجموعات الخلايا البودوسيتية (يعني تغير أضعاف السجل بين 0.034 و 0.149). في المقابل، تمت زيادة تعبير Pdgfb في جميع مجموعات GEC (متوسط ​​تغير طية السجل بين 0.031 و0.140)، وتم تنظيم المستقبل Pdgfrb في خلايا مسراق الكبيبة (متوسط ​​تغير طية السجل لـ 0.155). يشير هذا التحليل إلى أن إصابة الخلايا البودوسيتية تؤدي إلى انخفاض التعبير عن يجند Vegfa prosurvival، مما يؤثر سلبًا على GECs. للتعويض، قد تقوم GECs بتنظيم ligand Pdgfb، مما يؤدي إلى تحفيز خلايا مسراق الكبيبة لتنظيم المستقبل Pdgfrb.

تم استخدام NicheNet، وهي خوارزمية جديدة تستنتج كيف يمكن أن تؤثر تفاعلات مستقبلات الليجند المستمدة من بيانات التعبير على أهداف محددة من خلال دمج المعرفة الموجودة مسبقًا بشبكات الإشارة والشبكات التنظيمية، للتحقيق بشكل أعمق في تفاعلات مستقبلات الليجند وجيناتها المستهدفة المفترضة.20 تم تطبيق NicheNet على نموذج في التفاعلات بين الخلايا البودوسيتية وGECs وكذلك الخلايا الجيالية المتوسطة وGECs التي يمكن أن تحفز الجينات المعبر عنها تفاضليًا (الجينات المستهدفة) في GECs في تحديد إصابة البودوسيت (الشكل 4A). لهذا التحليل، تم دمج كافة المجموعات من كل نوع من الخلايا في مجموعة واحدة. كانت أهم الروابط المتوقعة التي تم التعبير عنها بواسطة خلايا مسراق الكبيبة و/أو الخلايا الرجلية هي البليوتروفين (Ptn)، والأنجيوبويتين 2 (Angpt2)، وCol4a1، وجزيء التصاق الخلايا الوعائية 1، والبروتين التشكلي العظمي 4 (Bmp4)، وإفرين B1، وعامل نمو النسيج الضام، والإشارات. 3E (Sema3e) (الشكل 4B). تم تعيين نمط التعبير لمستقبلات GEC التي من المعروف أن هذه الروابط تعمل من خلالها بجوار تحليل نشاط الروابط. بالإضافة إلى ذلك، تم أيضًا تعيين الجينات المستهدفة المتوقعة والتي تم التعبير عنها بشكل تفاضلي في iCTCFpod / GECs مقارنة بعناصر تحكم WT. يتم تلخيص النتائج في الشكل 4B كمؤامرات دائرية في الشكل 4 وC وD.

كانت العديد من الروابط والمستقبلات والجينات المستهدفة ملحوظة من هذا التحليل. البليوتروفين، وهو يجند يتم التعبير عنه بشكل كبير في خلايا مسراق الكبيبة (الشكل 4ب)، هو عامل نمو مُفرز يمكنه ربط وتثبيط مستقبل بروتين التيروزين الفوسفاتيز من النوع B، مما يحفز هجرة الخلايا البطانية عبر زيادة Tek (Tie2)/Angpt137 وKdr (Vegfr2)/Vegfa38. الإشارات. وفقا لذلك، تم تنظيم Tek بشكل كبير في GECs (الشكل 4B). Angpt2، الذي يتم التعبير عنه بشكل كبير في خلايا مسراق الكبيبة، هو رابطة معادية لـ Tek، تمنع ارتباط Angpt1.39 نظرًا لأن إشارات Angpt1 معروفة بتعزيز بقاء الخلايا البودوسيتية ويساهم تعطيل نسبة Angpt1/Angpt2 في تطوير DKD،40 هذه الرابطة يبدو أن تحليل المستقبلات يشير إلى إشارات Tek غير القادرة على التكيف في GECs باعتبارها واحدة من أولى النتائج المترتبة على إصابة الخلايا البودوسيتية

وجدت هذه الدراسة أيضًا تغييرات بارزة في تعبير الكولاجين من النوع الرابع في العديد من الخلايا الكبيبية (الشكل 4 ب). يتم إنتاج الكولاجين IV het erotrimers عادةً بواسطة الخلايا السليمة ، وينتقل من ɑ1ɑ1ɑ2 إلى ɑ3ɑ4ɑ5 أثناء التطور الكبيبي ، وهو أمر ضروري لتشكيل GBM ووظيفته بشكل صحيح. 33،34 يتم ملاحظة التنظيم الأعلى لـ Col4a1 ، جنبًا إلى جنب مع توسيع مصفوفة مسراق الكبيبة ، في كثير من الأحيان في DKD.41,42 في التحليل الحالي، تم التعبير عن Col4a1 بواسطة كل من خلايا مسراق الكبيبة وGECs (يعني التعبير عن خريطة حرارة يجند) (الشكل 4B) وتم تنظيمه بشكل محدد في iCTCFpod / GECs مقارنة بعناصر تحكم WT. تشير هذه البيانات إلى أن GECs تقوم بتنظيم Col4a1 في حالة إصابة الخلايا الرجلية، مما قد يؤدي إلى GBM أكثر صلابة وتليفية تساهم في تطور التصلب القطعي.33

كان Bmp4 عبارة عن يجند مسراقي تم التعبير عنه بشكل كبير بواسطة تحليل NicheNet (الشكل 4، BD). تلعب BMPs أدوارًا رئيسية في تطور الكلى والمرض.43 يتم تنظيم Bmp4 في تحديد اعتلال الكلية السكري لدى الجرذان،42 وعلاج الفئران المصابة بداء السكري بجسم مضاد لـ BMP4 يمنع التنظيم الأعلى لـ Col4a1 وتوسيع مصفوفة مسراق الكبيبة. 44. من الأمور ذات الأهمية الخاصة، تم العثور على مسراق Bmp4 لتحفيز تعبير GEC Smad6 (الشكل 4B). يتم تحفيز التعبير عن Smad6 بواسطة BMPs وفي حلقة ردود فعل سلبية، يمنع Smad6 على وجه التحديد BMPs، بما في ذلك BMP4.45 تم تنظيم Smad6 في iCTCFpod / GECs مقارنة بعناصر تحكم WT، مما يشير إلى زيادة إشارات BMP في الخلايا البطانية في تحديد إصابة الخلايا الرجلية .

واحدة من الروابط ذات الأولوية المحددة في الخلايا الرجلية كانت Sema3e (الشكل 4، BD). السيمافورينات من الفئة 3 هي بروتينات مُفرزة تعمل في مجموعة متنوعة من العمليات البيولوجية، بما في ذلك تكوين الأوعية الدموية وتولد الأوعية اللمفاوية والمرض.46 يتم تنظيم Sema3a في DKD البشري،47 وتم التعرف على Sema3g مؤخرًا على أنه جين خاص بالخلايا الرجلية يحمي الخلايا الرجلية من الالتهاب في الجسم الحي. 48 لا يزال دور Sema3e في خلية الرجل غير واضح. كشف التحليل الحالي عن زوج من مستقبلات يجند لم يتم التعرف عليه سابقًا حيث تتفاعل خلية بودوسيت Sema3e مع plexinD1 على GECs لتحفيز العديد من أهداف الجينات النهائية في تحديد إصابة خلية بودوسيت (الشكل 4 وC وD).

من بين العديد من الجينات المستهدفة التي تم تحديدها حديثًا في GEC، تم العثور على Hes1 وCx3cl1 أيضًا في برامج جينات الالتصاق المخصبة في GEC-1 (الشكل 4، BD؛ الشكل التكميلي S6). يعد Hes1 هدفًا لإشارة Notch، التي تلعب دورًا مهمًا في تطوير الكلى، ولكن إعادة التنشيط يمكن أن تؤدي إلى التليف.49 Cx3cl1 هو كيموكين يتم إنتاجه بشكل رئيسي بواسطة البطانة الكبيبية التي تعمل كجاذب كيميائي وجزيء التصاق لمستقبله، Cx3cr1، والذي يتم التعبير عنه في كل مكان على كريات الدم البيضاء الليمفاوية أحادية النواة والدورة الدموية.50 وقد تورط Cx3cl1 فيمجموعة متنوعة من أمراض الكلى، مشتملد.ك.دواعتلال الكلية بالجلوبيولين المناعي (IgA) والتهاب كبيبات الكلى. تم تنظيم كل من Hes1 وCx3cl1 في iCTCFpod / GECs مقارنةً بعناصر التحكم WT، مما يشير إلى أن GECs تستجيب لإصابة الخلايا البودوسيتية من خلال برامج تنظيم الالتهابات والتليف.

أخيرًا، نظرًا لأن العديد من الروابط والأهداف المحددة في تحليل NicheNet متورطة في DKD، في كل من نماذج القوارض وكذلك البشر، تمت مقارنة مجموعة البيانات مع مجموعة بيانات نسخية واحدة من نواة DKD البشرية المبكرة. تم إجراء مقارنة بين الجينات المعبر عنها تفاضليًا بين مجموعات الخلايا البشرية والفأرية. من بين 138 جينًا معبرًا عنها تفاضليًا في DKD GECs البشرية، تم تحديد 25 جينًا أيضًا في iCTCFpod / الخلايا البطانية للماوس، بما في ذلك Col4a1 (الشكل التكميلي S7؛ الجدول التكميلي S11). تشير هذه النتائج معًا إلى أن برامج الخلايا البطانية التي تتعطل بشكل متكرر في DKD البشري يمكن تلخيصها جزئيًا في نموذج الفأر للإصابة الكبيبية المبكرة عن طريق الاستئصال الانتقائي لخلايا البودوسيت. بالإضافة إلى ذلك، تشير هذه النتائج إلى أنه، بالإضافة إلى الخلايا الرجلية، قد تكون هناك أهداف واستراتيجيات علاجية محددة خاصة بالبطانة الوعائية لوقف أو إبطاء تطور الأورام المعقدة والمعقدة للغاية.أمراض الكلى السائدة، مثلد.ك.د.