مشتقات ثيوريا

وفقًا للدراسات ذات الصلة ،cistancheهو عشب شائع يعرف باسم "عشب معجزة يطيل الحياة". مكونه الرئيسي هوالسيستانوسيدالتي لها تأثيرات مختلفة مثل مضادات الأكسدة ومضادات الالتهابات وتعزيز وظيفة المناعة. الآلية بين cistanche وجلدتبييضتقع فيمضادات الأكسدةتأثير cistancheجليكوسيدات. ينتج الميلانين في جلد الإنسان عن طريق أكسدة التيروزين المحفز بالتيروزيناز ، ويتطلب تفاعل الأكسدة مشاركة الأكسجين ، لذلك تصبح الجذور الخالية من الأكسجين في الجسم عاملاً مهمًا يؤثر على إنتاج الميلانين.سيستانشيحتوي على السيستانوزيد ، وهو مضاد للأكسدة ويمكن أن يقلل من إنتاج الجذور الحرة في الجسم ، وبالتالي يمنع إنتاج الميلانين.

انقر فوق Cistanche Tubulosa للتبييض

لمزيد من المعلومات:

david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501

Phenylthiourea (PTU) هو أحد أكثر مثبطات التيروزينيز شهرة والتي تمت دراستها في الأدبيات 89-91. ترتبط ذرة الكبريت في PTU بكل من أيونات النحاس في الموقع النشط للتيروزيناز وتمنع نشاط الإنزيم. البروفيسور جونغ وآخرون. اكتشفت مؤخرًا SAR لمشتقات PTU على فطر التيروزيناز 92،93. على الرغم من أن تأثيرات مشتقات PTU تم تقييمها بشكل أساسي لتثبيط تكون الميلانين في خلايا الورم الميلانيني B16 ، فقد تم التأكيد لاحقًا على أنها كانت بسبب تثبيط نشاط التيروزيناز. سلطت دراسات معدل الامتصاص النوعي الضوء على المتطلبات الهيكلية المهمة لكل من تكوين الميلانين وتثبيط التيروزيناز (الشكل 9 (أ)): (1) الاتصال المباشر للهيكل p-planar بالثيوريا (24a-24b) ، (2) البديل الكارهة للماء في الفقرة- أو تم قبول الوضع الفوقي لحلقة فينيل (24 ج - 24 د) ، لم يتم التسامح مع البديل في الموضع العمودي (24 هـ) ، واقترح أن C 2- الفينيل البديل قد يعيق التكوين المعقد للثيوريا مع أيونات النحاس عند الموقع النشط للتيروزيناز. علاوة على ذلك ، (3) الهيدروجين الأميني المجاني 3- كان مهمًا لتثبيط التيروزيناز ولكن ليس لتثبيط تكوين الميلانين في خلايا B16 ، أظهرت المشتقات غير المستبدلة فاعلية أكبر في تثبيط تكوين الميلانين (24f). تشير هذه النتائج إلى أن المشتقات غير المستبدلة 1 ، 3- تعمل من خلال مسار مختلف عن النشاط التحفيزي للتيروزيناز لمنع تكون الميلانين. كشف تحليل الالتحام الجزيئي لـ 1- phenylthiourea و 1،3، -diphenyl thiourea أن الاتصال المباشر للفينيل المستوي بوحدة ثيوريا و NH2 الحر 3- كان شرطًا أساسيًا لنشاط التيروزيناز (الشكل 10).

من ناحية أخرى ، أبلغ Crinton et al عن سلسلة من مشتقات اليوريا N-hydroxy-N 0 - فينيل اليوريا ، واستبدلت الكبريت بالأكسجين و 3- NH2 بـ N-hydroxylamine في PTU91. أظهرت النتائج أن المشتقات التي تم الإبلاغ عنها كانت أكثر فاعلية ، على وجه الخصوص ، أظهر N-hydroxy-N 0 - فينيل اليوريا (25 أ) 6 مرات أكثر فعالية من PTU. في المقابل ، لم تظهر مشتقات N-hydroxy-N 0 - phenylthiourea (25b) أي تثبيط ، مما يشير إلى أن قدرة مخلب N-hydroxyurea مهمة لتثبيط التيروزيناز (الشكل 9 (أ)).

بصرف النظر عن المصادر الاصطناعية أو الطبيعية ، فإن الفحص هو استراتيجية بديلة أخرى للعثور على مثبطات جديدة. أصبح فحص الأدوية التي تمت الموافقة عليها سريريًا بشكل أساسي في تزايد للعديد من الأهداف البيولوجية. ستعمل البيانات المرتبطة بالعقار الحالي على تقليل الوقت والتكلفة المرتبطين بالحقوق الفكرية لتطوير المستحضرات الصيدلانية الجديدة. هذا النهج لديه العديد من المزايا؛ بما في ذلك التوافر والتكلفة المنخفضة والسلامة / التحمل. عُرف فينيل ثيوريا منذ فترة طويلة بأنه مثبط للتيروزيناز 89-91.94. حدد تحليل التشابه الكيميائي الذي تم إجراؤه بواسطة الفحص الافتراضي القائم على الترابط أو HTS إيثيوناميد (26 أ) ونظائره (26 ج -26 هـ) ، بما في ذلك البروثيوناميد (26 ب) ، كمثبطات للتيروزيناز 95 (الشكل 9 (أ)). الإيثيوناميد هو دواء معتمد من الخط الثاني لمكافحة السل يستخدم لعلاج السل المقاوم للأدوية المتعددة. في المقابل ، كان أيزونيازيد ، وهو نظير هيكلي ، والخط الأول من الأدوية المضادة لمرض السل مثبطًا ضعيفًا للتيروزيناز. في خلايا B16 ، قلل مثبطات البيريدين -2- كاربوثيو أميد وثيوبينزاميد بشكل كبير محتوى الميلانين بنسبة 44 في المائة و 37 في المائة على التوالي. بعد تحليل هيكلي شامل ، تشير بيانات معدل الامتصاص النوعي إلى أن الكاربوثيو أميد كان جزءًا مركزيًا لتطوير مثبطات التيروزيناز الجديدة والقوية.

في دراسة حديثة ، استرجع الباحثون الأدوية المشتقة من الثيوريا في الاستخدام السريري ، وبحثوا في تأثيرها على أنشطة التيروزيناز باستخدام المقايسات القائمة على الإنزيم والخلية. لوحظ أن العوامل المضادة للغدة الدرقية methimazole 27a و 97 carbimazole 27b و 97 thiouracils 27c و 97 methylthiouracil 27d97 و propylthiouracil 27e97 تثبط تيروزيناز الفطر (الشكل 9 (ب)). بالإضافة إلى ذلك ، حددت الدراسات الحركية الأدوية المحتوية على الثيوريا كمثبطات غير تنافسية. أوضحت دراسات SAR أن الثيوريا نفسها تمنع نشاط إنزيم التيروزيناز بطريقة تعتمد على التركيز. هذا يدل على أن النشاط المثبط لنظائر ثيوريا يجب أن ينشأ من ذرات الكبريت والنيتروجين.

في دراسة أخرى ، تم تقييم فئة من مشتقات فينيل ثيوريا المستبدلة من N-aryl-N 0 - على نشاط ديفينولاز للفطر tyrosinase98. أظهرت النتائج بضعة 4،5،6 ، 7- tetrahydro - 2- [[(phenylamino) thioxomethyl] amino] -benzo [b] thiophene -3- مشتقات حمض الكربوكسيل (28a – 28d، ( الشكل 9 (ب))) أظهر فاعلية مثبطة معتدلة على نشاط ديفينولاز للتيروزيناز. عندما تم استبدال سقالة 4،5،6 ، 7- tetrahydrobenzo [b] thiophene -3- carboxylic acid بـ 2– (1،3 ، 4- thiadiazol -2- yl) thio acetic acid ، تم تحسين النشاط المثبط للمركبات (على سبيل المثال 29a-29d ، الشكل 9 (ب)) 98 ضد التيروزيناز. على وجه الخصوص ، أظهر 29d (IC 50=6. 13 lM) نشاطًا مثبطًا أقوى من حمض الكوجيك (IC 50=33. 3 lM).

منذ عام 1885 ، يعد السكرين ، 1 ، 2- بنزيسوثيازول -3- واحد -1 ، 1- مركبًا حلقيًا غير متجانس معروفًا ويستخدم كمُحلي على شكل ملح الصوديوم الخاص به . إلى جانب ذلك ، تم الإبلاغ عنه للعديد من الأهداف البيولوجية وبالتالي يمكن اعتباره سقالة مميزة. في الآونة الأخيرة ، تم تقييم سلسلة جديدة من مشتقات السكرين المقترنة 6- (فينيلورينيل / ثيونيل) للتأثيرات المثبطة على نشاط ديفينولاز لإنزيم التيروزيناز الموز 99. أظهرت النتائج أن جميع المركبات تثبط نشاط التيروزيناز. من بينها 6 - (3- chlorophenylurenyl) saccharin 30a (Ki = 5. 85 lM) و 6 - (3- iodophenylthiourenyl) saccharin 30b (Ki =3. 95 lM) أكثر المركبات نشاطا. أظهرت دراسات معدل الامتصاص النوعي (SAR) أن مشتقات 6- (phenylthiourenyl) saccharin أظهرت نشاطًا مثبطًا أعلى من مشتقات 6- (phenylurenyl) saccharin. زادت مجموعة سحب الإلكترون في 3- موضع فينيلورينيل / حلقة ثيورينيل في النشاط ، على وجه الخصوص ، أظهرت سلسلة الهالوجين أنشطة مثبطة أعلى.

مثبطات من نوع Thiosemicarbazone

تحتل Thiosemicarbazones واحدة من الفئات الرئيسية لمثبطات التيروزيناز بسبب وحدتها الهيكلية الكلاسيكية والقدرة على تخلب أيونات النحاس في الموقع النشط لإنزيم التيروزيناز. في الآونة الأخيرة ، تم الإبلاغ عن عدد كبير من thiosemicarbazones من قبل مجموعات بحثية مختلفة 99-101 كمثبطات التيروزيناز القوية.

كشفت دراسات SAR أن سقالة thiosemicarbazide كانت وحدة رئيسية لتحديد النشاط المثبط للتيروزيناز لأنها كانت قادرة على تعقيد أيوني النحاس بشكل فعال في الموقع النشط للتيروزيناز. لتحسين النشاط ، تم الإبلاغ عن سلسلة من 4 / 3- aminoacetophenones و thiosemicarbazones المشتقة بسبب نشاطها المثبط لتيروزيناز الفطر 1 0 2. أظهرت نتائج التقييم البيولوجي أن مركبات أكيلامينو (31 أ - 31 جم ، الشكل 11) أظهرت مثبطات إنزيم التيروزيناز أكثر فاعلية من حمض الكوجيك (IC 50=28. 5 lM) ، وعلى النقيض من ذلك ، أظهر أمينوفينول (31 ساعة و 31 ط) تفعيل نشاط التيروزيناز. تم العثور على المركب 31d ليكون أكثر المركبات نشاطا مع قيمة IC50 0.291 lM. كشفت الدراسات التي أجريت مع تحليل SAR أيضًا أن مجموعة thiosemicarbazide لعبت دورًا حيويًا للغاية في تثبيط التيروزيناز ، وشق acylamino الحاسمة لتعزيز النشاط المثبط للتيروزيناز واستبدال Acylamide في موضع 4- على حلقة فينيل مما زاد من فاعلية تثبيط التيروزيناز. علاوة على ذلك ، كشفت آلية التثبيط ودراسة الخواص الحركية أن المركب 31 أ كان قابلاً للعكس ومثبطًا غير تنافسي.

لمواصلة البحث عن مركبات قوية مثل مثبطات التيروزيناز عالية الكفاءة ، وفهم SARs لمركبات thiosemicarbazone ، سلسلة من نظائر {0} alkoxy- و 4- acyloxy-phenyl ethylene thiosemicarbazone (32a) –32i ، الشكل 11) تم تصنيعها وتقييمها للنشاط المثبط للتيروزيناز 103. أظهرت النتائج أن معظم المثبطات أظهرت فاعلية ملحوظة في تثبيط إنزيم التيروزيناز بقيمة IC50 أقل من 1.0 ملي مولار. على وجه الخصوص ، أظهر المركب 32 د فاعلية مثبطة لانزيم التيروزيناز بشكل ملحوظ مقارنة بالنظائر الأخرى من هذه السلسلة. كشفت دراسات SAR أن جزء thiosemicarbazone لعب دورًا رئيسيًا في تحديد النشاط المثبط للتيروزيناز. لم يؤثر طول رابط الميثيلين بين حلقة فينيل وشق ثيوسيميكاربزون (32 ف-جم) على الفاعلية المثبطة للتيروزيناز. كان إدخال جزء ثيوكربونوهيدرازيد (32 ساعة - 32 بوصة) غير ملائم للنشاط المثبط للتيروزيناز.

مثبطات نوع الببتيد

لاكتشاف مثبطات التيروزيناز الجديدة ، تم لفت الانتباه مؤخرًا إلى تطبيق تسلسل الببتيد لتثبيط التيروزيناز. تم فحص العديد من الببتيدات المثبطة للتيروزيناز مثل ثنائي الببتيدات 104 ، الببتيدات الحلقية 105 ، أوليغوبيبتيدات قصيرة التسلسل 106 ، ومركبات ثلاثي الببتيد حمض الكوجيك 107. على وجه الخصوص ، أثبتت oligopeptides أنها مثبطات فعالة للتيروزيناز. أظهر اثنان من oligopeptides P3 ، وهو octapeptide (Arg-Ala-Asp-ser-Arg-Ala-Asp-Cys) ، و decapeptide P4 (Tyr-Arg-ser-Arg-Lys-Tyr-Ser-Ser-Trp-Tyr) تأثيرات مثبطة كبيرة على الفطر والتيروزيناز البشري بقيمة IC50 تبلغ 123 و 40 lM ، مقارنة مع hydroquinone. لم تظهر هذه oligopeptides أي تأثير على السمية الخلوية الصباغية 108. بعد صياغة ناجحة في كريم موضعي ونتائج سريرية مواتية ، تم تسويق ديكاببتيد P4 المعروف أيضًا باسم ديكاببتيد -12 باعتباره المكون النشط الرئيسي في منتج تفتيح البشرة 109.

في دراسة حديثة ، Hsiao et al. اكتشف أن المركب الشبيه بثنائي الببتيد (A5) وثلاثي الببتيدات RCY و CRY يثبطان نشاط التيروزيناز بشكل فعال. على وجه الخصوص ، أظهر ثلاثي الببتيد الجديد CRY الفاعلية المثبطة الأكثر لفتًا للانتباه ضد تيروزيناز الفطر (IC 50=6. 16 lM). هذا ثلاثي الببتيد أقوى من الببتيدات قليلة الببتيدات المعروفة ويمكن مقارنته بحمض الكوجيك ثلاثي الببتيدات. استخدمت CRY و RCY مجموعة ثيول من بقايا السيستين للتنسيق مع أيونات النحاس في الموقع النشط للتيروزيناز ، مما يُظهر نشاط إنزيم التيروزيناز المنخفض. في دراسة أخرى ، تم الإبلاغ عن أن الببتيدات المحتوية على السيستين تمنع نشاط التيروزيناز بطريقة فعالة 110. اقترح المؤلفون أن هذه الببتيدات المحتوية على السيستين يمكن أن تمنع مباشرة الموقع النشط للتيروزيناز وبالتالي تؤدي إلى تثبيط قوي. على وجه الخصوص ، تتفوق الببتيدات المحتوية على السيستين N-terminal بشكل ملحوظ على الطرف C و dipeptides المحتوية على السيستين ، CE ، CS ، CY ، CW تُظهر النشاطات الحيوية المقارنة و dipeptides المحتوية على التيروزين هي مثبطات تشبه الركيزة. بالإضافة إلى ذلك ، لا تظهر هذه الببتيدات ثنائية الببتيدات سمية خلوية كبيرة في الخلايا الصباغية ، وخففت CA و PD 5.6 و 16.5 في المائة من محتوى الميلانين ، على التوالي ، عند 100 لتر (الجدول 1).

لي وآخرون. أبلغت عن مجموعة من اتحادات هيدروكسي بيريدينون- L- فينيل ألانين (33 أ و 33 ب) بدءًا من حمض كوجيك (الشكل 12) 111 لأنشطتها المثبطة على التيروزيناز. كشف التقييم ضد نشاط التيروزيناز أن أحد المركبات ((S) - (5- (benzyloxy) -1- octyl -4- oxo {{1 {20}}}} ، {{11 }} dihydropyridine -2- yl) methyl 2- amino -3- phenylpropionate ، (33b) أظهر قيم IC50 12.6 و 4.0 lM لأنشطة mycophenolate و diphenolase على التوالي. علاوة على ذلك ، كانت هذه الاتحادات من النوع المختلط مثبطات ، مما يشير إلى أنها يمكن أن ترتبط بكل من الإنزيم الحر ومجمعات الركيزة الإنزيمية.

في دراسة أخرى ، تم تصميم مركبات هيدروكسي بيريدينون- L- الأحماض الأمينية وتقييمها لأنشطتها المثبطة على فطر التيروزيناز 112. من بين المركبات التي تم فحصها ، أظهر مركبان فقط كلا من mycophenolate (34، IC 50=1. 95 lM؛ 35، IC 50=2. 79 lM) ومثبط diphenolase (34، IC 50=8. 97 lM؛ 35، IC 50=26. 20 lM) نشاط التيروزيناز (الشكل 12). علاوة على ذلك ، تم تحديد المركبين 34 و 35 على أنهما مثبطات من النوع المختلط وعكوسة.

مثبطات تيروسيناز الفطر المتنوعة

في الآونة الأخيرة ، جذبت المستخلصات والمركبات المعزولة من المصادر الطبيعية اهتمامًا كبيرًا كمثبطات التيروزيناز وتم قبولها كعناصر شائعة لتبييض البشرة 113-123. للعثور على مادة تبييض آمنة وفعالة ، قام تشين وزملاؤه بفحص العديد من المنتجات الطبيعية من النباتات العشبية والمركبات المعزولة 36 و 37 من جذمور Gastrodia elata ، كمثبطات لتيروزينات الفطر 124. حددت دراسات SAR اللاحقة نظائرها 38-4 0 (الشكل 13). أظهر ثنائي (4- هيدروكسي بنزيل) كبريتيد 36 فاعلية مثبطة بارزة ضد التيروزيناز بقيمة IC50 تبلغ 0.5 ملي مولار وقيمة كي 58 نانومتر. يُظهر المركب 37 المتصل من خلال رابط إيثر 713- ضعفًا في القدرة التثبيطية (IC 50=378. 11 lM) مما يشير إلى أن ذرة الكبريت مهمة جدًا في مخلب أيونات النحاس وتساهم في زيادة تثبيط نشاط التيروزيناز. من ناحية أخرى ، يؤدي تقصير رابط الكربون ، الذي يربط الكبريت بحلقات البنزين ، إلى تثبيط معتدل للتيروزيناز بنسبة 38. يؤدي إزالة مجموعة الهيدروكسيل ، 39 إلى تثبيط ضعيف لإنزيم التيروزيناز ، مما يشير إلى أن مجموعتين من الهيدروكسيل مهمتان. مع استبدال الميثوكسي ، وهو نظير 36 ، يقلل الفاعلية إلى قيمة IC 50 البالغة 40.02 lM ، مما يشير إلى أن تفاعلات رابطة الهيدروجين كانت أكثر ملاءمة من التفاعلات الكارهة للماء التي توفرها مجموعات الميثوكسيد.

قلل المركب 36 المعالج بـ 5 0 لتر من محتوى الميلانين بنسبة 20 في المائة في نظام الخلايا الصباغية البشرية دون سمية خلوية كبيرة. بالإضافة إلى ذلك ، يكشف اختبار الزرد في الجسم الحي أن 36 يقلل بشكل فعال من تكون الميلانين دون أي تأثير ضار. علاوة على ذلك ، أكدت دراسة السمية الفموية الحادة أن المركب 36 كان خاليًا من السمية الخلوية التي يمكن تمييزها في الفئران. وبالتالي فإن المركب 36 هو مرشح محتمل لتطوير عامل دوائي آمن وفعال لتبييض البشرة. في الآونة الأخيرة ، فحص Ai et al. مكتبة كيميائية باستخدام نهج الفحص الافتراضي وحدد مركب 41 كمثبط قوي لتيروزيناز الفطر 125 ، بقيمة IC 50 تبلغ 8 lM وأنتج انسدادًا بنسبة 29 بالمائة ± 17.64 بالمائة من تخليق الميلانين الحيوي في خلايا B16 بتركيز 0.002٪ يساوي 27.5 مخارط.

أظهرت دراسات معدل الامتصاص النوعي التي تم فحصها حول البنية 41 أن عطرية الحلقة B للمركب 41 تبدو ضرورية للنشاط ، حيث إن استبدال الحلقة B بحلقة سيكلوهكسيل (مركب 42 ب) يفقد النشاط المثبط لتخليق الميلانين في خلايا B16. من ناحية أخرى ، فإن الاستبدال في موضع 4- الحلقة A له تأثير ضئيل على النشاط المثبط (42a-42d). كانت هذه المركبات تعتمد على الجرعة وتثبط تخليق الميلانين في خلايا B16. ومع ذلك ، فإن مزيدًا من التطوير للمركب 41 ، يؤدي إلى مشكلة محتملة في التركيب ويتم التخلص منه كمرشح للأغراض التجميلية. حدد تحليل هيكلي إضافي أن المركب 43 أظهر تثبيطًا بنسبة 79٪ ± 5.34٪ على تخليق الميلانين الحيوي لخلايا B16 بتركيز قدره 0 .001 بالمائة (33.6 lM). يمتلك هذان المركبان 41 و 43 خصائص كيميائية حيوية جيدة ويلبيان "قاعدة الخمسة" ليبينسكي وأظهرت تأثيرًا مثبطًا كبيرًا على تخليق الميلانين في خلايا B16. تبين أن تثبيط تخليق الميلانين هذا لا يؤثر على الجدوى الخلوية ، مما يؤكد كذلك على الفائدة التجارية المحتملة لهذه المركبات.

تم الإبلاغ عن أن الفانيلين وحمض الفانيليك المعزولان من Origanum vulgare قد يعملان كعوامل لتكوين الخلايا المضادة. بناءً على هذه الخلفية ، تم الإبلاغ عن سلسلة من إسترات الفانيلين تتضمن حمض البنزويك وحمض سيناميك والبيبرازين للنشاط المثبط للتيروزيناز. أظهرت النتائج أن المركبات 44a-44d أظهرت تثبيطًا جيدًا وممتازًا لنشاط التيروزيناز في الفطر (شكل 14). على وجه الخصوص ، أظهر 44 ب النشاط المثبط الأكثر فاعلية مع قيمة IC50 16.13 lM. من وجهة النظر الهيكلية ، لعبت إسترات حمض سيناميك المستبدلة واستبدال الهيدروكسيل دورًا مهمًا في تثبيط إنزيم التيروزيناز. كشفت الدراسات الحركية أن المركب 44b كان من النوع المختلط من مثبطات التيروزيناز مع Ki 13 lM و Ki 0 53 lM وشكل مركبًا مثبطًا للإنزيم عكسيًا.

في دراسة أخرى ، وُجد أن {0} هيدروكسي إيروسول 45 (2- HT) 128 يثبط تيروسيناز الفطر بقيمة IC50 تبلغ 13.0 lmol / L والتي كانت فعالة مثل حمض الكوجيك (IC {{{{{0}}}} ". 7}}. 8 مول / لتر). علاوة على ذلك ، 2- يعمل HT على تثبيط نشاط التيروزيناز (IC 50=32. 5 lmol / L) في المستخلص الخالي من الخلايا من خلايا سرطان الجلد B16 وتكوين الميلانين المحفز بـ a-MSH في خلايا سرطان الجلد B16 السليمة . تم الإبلاغ عن مشتقات ميثيمازول (2- مركابتو -1- ميثيلميدازول) لتثبيط تيروزيناز عيش الغراب. 2- Mercaptoimidazole (46a) و mercapto -1- methylimidazole (46b) و tert-butyl 3- methyl -2- sulfanylidene -2 و 3- dihydro { {30}} H-imidazole - 1- carboxylate (46c) يثبط بشكل كبير نشاط التيروزيناز الذي يظهر قيمة IC50 تبلغ 4.11 ملي مولار و 1.43 ملي مولار و 1.45 ملي مولار على التوالي (الشكل 14). أشار التحليل الحركي إلى أن المركبين 46 أ و 46 ب كمثبطات التيروزيناز التنافسية ، بينما كان 46 ج مثبطًا غير تنافسي لإنزيم التيروزيناز. علاوة على ذلك ، في التحليل المختبري لخلايا B16 ، كان للمركبات من 46a- 46c تأثير مثبط قوي على إنتاج الميلانين داخل الخلايا دون التأثير على السمية الخلوية.

تم إثبات سلسلة من مشتقات قاعدة تريازول شيف لنشاطها التثبيطي ضد نشاط فطر التيروزيناز 13 0. أظهرت النتائج من التقييم البيولوجي أن ثلاثة مركبات فقط 47a- 47c تظهر تأثيرات مثبطة قوية مع قيم IC 50 من 12.5 ، 7.0 ، و 1.5 لتر (الشكل 14). أظهر التحليل الحركي أن المثبطات قابلة للعكس ومن النوع المختلط. أكدت دراسات التبريد الفلوري والتفاعل النحاسي تفاعل المثبطات مع التيروزيناز والقدرة على إزالة معدن ثقيل مع أيونات النحاس في الموقع النشط. من وجهة نظر هيكلية ، أظهر الاستبدال عند موضع 2- حلقة البنزين نشاطًا أعلى (47 ج) من الموضع 3- (47 ب). تم الإبلاغ عن سلسلة جديدة من نظائر الثيمول تتضمن أحماض البنزويك الهيدروكسيلية وأحماض سيناميك كمثبطات لتيروزيناز الفطر. بشكل عام ، أظهرت مشتقات الثيمول المشتقة من حمض سيناميك تثبيطًا أفضل للتيروزيناز من مشتقات حمض البنزويك ، على سبيل المثال مقارنة 48a (IC 50 15. 20 lM) مقابل 48b (IC 50 91. 5 lM) .

في الآونة الأخيرة ، تم فحص تأثير picrionoside A 49 المعزول من أوراق الجينسنغ الكوري (P. ginseng CA Mayer) وقد أدى إلى تثبيط نشاط تيروسيناز الفطر بقيمة IC50 بقيمة 9.8 lM ، أي حوالي 6.8 إلى 10- أضعاف أعلى من حمض كوجيك وأربوتين ، على التوالي (الشكل 14). في خلايا الميلان أب ، قلل 49 من محتوى الميلانين بنسبة 17.1 في المائة بطريقة تعتمد على الجرعة دون إحداث حيوية الخلية. بالإضافة إلى ذلك ، أظهر سمك الزرد المعالج ببيكريونوزيد A تأثيرًا مثبطًا ملحوظًا على تصبغ الجسم. تُظهر هذه النتائج مجتمعة أن Picrionoside A قد يكون عاملًا فعالًا لتبييض البشرة. في سياق الفحص ، مثبطات تكون الميلانين في Streptomyces bikiniensis ، وجد أن S - (-) -10 ، 11- حمض ثنائي هيدروكسي ميثيل إستر (dhFAME ، 50) ، وهو هرمون حشري يفرزه Beauveria bassiana يثبط CS 1029 134 نشاط التيروزيناز بشكل مباشر. بالإضافة إلى ذلك ، يقلل 50 بشكل كبير من محتوى الميلانين ، ويثبط نشاط التيروزيناز الخلوي وكذلك التراكم داخل الخلايا لمستويات cAMP في خلايا الميلان-أ دون إحداث حيوية الخلية.

تم تحديد فئة جديدة من مثبطات التيروزيناز القوية من خلال تنبؤ الفحص الافتراضي القائم على الهيكل. تم استخدام هيكل فطر التيروزيناز (PDB ID: 2Y9X) كقالب لمحاكاة الديناميات الجزيئية (MD). في البداية ، تم إنشاء مجموعة من 10 000 الهياكل باستخدام محاكاة الديناميات الجزيئية. أسفرت الفحوصات اللاحقة عن أفضل 61 جزيئًا للتقييم ضد نشاط التيروزيناز في الفطر والمثبطات الانتقائية (51a – 51e) موضحة في الشكل 14. وأظهرت النتائج أن شقوق الترازول والتريازول كانت قادرة على التفاعل مع مركز تحفيز ثنائي النحاس في التيروزيناز. على وجه الخصوص ، يُظهر مركب التيرازول 51 ب أقوى نشاط. وجد المؤلفون أن العديد من المركبات أظهرت انخفاضًا جيدًا في إنتاج الميلانين في خلايا سرطان الجلد B16 مع عدم وجود سمية خلوية. على وجه التحديد ، يقلل المركب المحتوي على thiosemicarbazone 51e محتوى الميلانين بنسبة 55 بالمائة. توفر النتائج نظرة ثاقبة حول تعديل وظائف نوع -3 إنزيمات النحاس.

كابتوبريل ([2S] -N - [3- مركابتو -2- ميثيل بروبيونيل] -ل-برولين) هو أحد مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 136137 والذي يستخدم على نطاق واسع في علاج ارتفاع ضغط الدم وفشل القلب. لتحديد مثبطات التيروزيناز الجديدة والفعالة ، تم تجربة التأثير المثبط للكابتوبريل (52) للنشاط المثبط للتيروزيناز. أظهرت النتيجة أن 52 يثبط نشاط التيروزيناز مع قيمة IC50 590 lg / mL (الشكل 14) 138. علاوة على ذلك ، في الدراسات المختبرية في خلايا B16 ، وجد أن 52 يثبط نشاط التيروزيناز بطريقة تعتمد على الجرعة والتي تؤدي إلى لتثبيط تكوين الميلانين دون السمية الخلوية.

مثبطات التيروزيناز البشرية

على الرغم من توفر عدد كبير من مثبطات التيروزيناز والعديد منها مع أنشطة مثبطة قوية تمت مناقشتها في وقت سابق ، تم تقييم جميع المثبطات تقريبًا ضد التيروزيناز الفطر. للعثور على مثبطات جديدة ضد التيروزيناز البشري ، أظهر يوشيموري وآخرون ثوجابليسين (52-54 ؛ أيزومرات أ ، ب ، ج ، الشكل 15) لتأثيراتها المثبطة على كل من تيروزيناز الفطر والتيروزيناز البشري (صور) ، مع المقارنة 141. أظهرت النتائج أن العلامة التجارية c-thujaplicins (53 و 54) تثبط بشكل فعال نشاط التيروزيناز البشري بطريقة تعتمد على الجرعة بقيم IC50 تبلغ 8.98 و 1.15 لتر على التوالي. على وجه الخصوص ، كان c-thujaplicin 54 متفوقًا للغاية على حمض الكوجيك (IC 50=17 lM). كشفت دراسات معدل الامتصاص النوعي أن موضع الأيزوبروبيل على سقالة التروبولون كان العامل المحدد لقوة ثوجابليسين. فعالية thujaplicins بالترتيب التالي: c> b> a-thujaplicin.

To understand the inhibitory mechanism, the binding mode of c-thujaplicin was predicted using a homology model of hTYR. It showed the carbonyl and hydroxyl group of the c-thujaplicin chelate with two copper ions at the active site of hTYR. Tropolone scaffolds of thujaplicin form stacking interaction with the imidazole ring of His367 and hydrophobic interaction with isopropyl of Val377. The isopropyl group of thujaplicin forms hydrophobic interaction with Ile368. In addition, the results from comparative studies on the inhibitory effects of the other thujaplicins (a and b) indicated that van der Waals (VdW) clashes of the isopropyl group of a-thujaplicin with Val377 and S380 might reduce the inhibitory activity against hTYR. The main reason for the higher inhibitory activity of c–thujaplicin against hTYR among thujaplicins is considered to be the hydrophobic interaction of the isopropyl group with Ile368. In contrast, in many, the Val377, and Ser380 are replaced with proline (P257) and alanine (A260), respectively, therefore it can be considered that there are little VdW clashes of the isopropyl group of a-thujaplicin with A260 and P257 (Figure 16). This explains why the inhibitory effect of a-thujaplicin against mTYR (IC50=9.53 lM) is more than two orders of magnitude stronger than hTYR (IC50>1000 م). وفقًا لذلك ، تم اقتراح أن الفرق بين Ala260 في mTYR و Ser380 في hTYR يؤثر بشكل كبير على المظهر المثبط لـ a-thujaplicin.

اكتشف وانج وزملاؤه مؤخرًا أن المنتجات الطبيعية linderanolide B (55) و suboxide A (56) المعزولة من سيقان Cinnamomum أثبتت أنها تتمتع بقدرات جيدة في التثبيط المختبري لتيروزيناز الفطر بجرعات منخفضة (الشكل 15) 142. قابلية بقاء الخلايا الكيراتينية البشرية والخلايا الصباغية والخلايا الليفية المعالجة بتركيزات مختلفة من مركبين. لم يُظهر العلاج بجرعة منخفضة (0. 0 1–1.0 لتر) سمية خلوية كبيرة لخلايا جلد الإنسان. كشفت الدراسة أن كلا المركبين يمكن أن يقللان بنسبة 50 في المائة من أنشطة التيروزيناز البشرية بجرعة 1 مل بعد 48- ساعة من العلاج وتثبيط (تقليل بنسبة 40 بالمائة) تكوين الميلانين في خلايا HEMn-MP. أظهر كل من 55 و 56 قدرة تثبيط ملحوظة على الزرد في تصبغ الجسم الحي حتى عند الجرعات المنخفضة دون سمية ملحوظة. لذلك فإن هذين المركبين يعتبران من مثبطات التيروزيناز الجديدة الفعالة التي تعتبر من عوامل تبييض البشرة. في دراسة أخرى ، Kolbe et al. فحص التأثيرات المثبطة لحمض الكوجيك ، والهيدروكينون ، والأربوتين مع فئة أخرى معروفة من المركب 4- بيوتيل ريزورسينول (57) على التيروزيناز البشري بالإضافة إلى تثبيط إنتاج ثقافة نموذج الجلد MelanoDermTM. في عام 1995 ، قدم 4- butyl resorcinol أحد مشتقات resorcinol التي لها تأثير مثبط على كل من tyrosinase144 و TRP -1145 ، 146. أظهرت النتائج أن 4- بيوتيل ريزورسينول أثبت أنه مثبط عالي الفعالية للتيروزيناز البشري بقيمة IC50 تبلغ 21 lmol / L وتثبيط كامل بتركيزات أعلى من 100 lmol / L. 4- أظهر Butyl resorcinol نشاطًا مثبطًا أقوى 20 مرة من حمض الكوجيك ، والذي أظهر تركيز IC50 بمقدار 500 lmol / L ، وتم تحقيق أقصى تثبيط (89 بالمائة) عند تركيز 5.6 مليمول / لتر. Arbutin و hydroquinone من مثبطات ضعيفة للتيروزيناز البشري بقيم IC50 في النطاق الملي ، أي 6500 lmol / L للأربوتين و 4400 lmol / L للهيدروكينون. ومع ذلك ، لم يثبط أي منهما تمامًا التيروزيناز البشري.

في نموذج الجلد melanoDerm ، أظهر أربوتين فعالية هامشية فقط في إنتاج الميلانين بقيمة IC5 {{3 0}} تبلغ 500 lmol / L ، بينما تم تثبيط حمض الكوجيك بـ IC5 بمقدار 400 مول / لتر. ومن المثير للاهتمام ، أن الهيدروكينون يثبط إنتاج الميلانين بقيمة IC أقل من 40 lmol / L ، والذي ربما يرجع إلى آليات مختلفة لتثبيط التيروزيناز. 4- كان بوتيل ريزورسينول هو أكثر الموانع فاعلية حيث يحتوي على IC50 يبلغ 13.5 مول / لتر. تم تأكيد فعالية 4- بوتيل ريزورسينول في الدراسات السريرية. تم علاج المرضى الذين يعانون من بقع الشيخوخة على الساعد مرتين يوميًا بتركيبة تحتوي على 4- n-butyl resorcinol (57) و 4- hexylresorcinol (58) و 4- phenylethylresorcinol (59) ). في غضون 8 أسابيع ، قلل 4- butyl resorcinol (57) ظهور البقع العمرية بشكل ملحوظ بينما أظهر 4- hexylresorcinol و 4- phenylethylresorcinol تأثيرات ملحوظة بعد 12 أسبوعًا. أظهرت دراسة ثانية أن 4- butylresorcinol كان أكثر فعالية من 4- hexylresorcinol و 4- phenylmethylsorcinol. يكشف الناتج السريري الناتج عن فرط التصبغ أن 4- butyl resorcinol يمكن أن يكون مركبًا فعالًا ذا قيمة لإدارة اضطرابات التصبغ. تم استخدام 4- بيوتيل ريزورسينول لعلاج الكلف. في جميع المنشورات المنشورة ، أظهر كريم 4- بوتيل ريسورسينول 0.1 بالمائة فعالية وأمان وتحمل سريع عند استخدامه لعلاج الكلف 147،148. أفادت دراسة حديثة أن كريم 4- butyl resorcinol 0.3 بالمائة آمن وفعال وجيد التحمل لدى المرضى الهنود المصابين بالميلسما 149.

لمزيد من المعلومات: david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501