SLC37A2، جزيء مرتبط بالفوسفور يزيد في خلايا العضلات الملساء في الشريان الأورطي المتكلس Ⅱ

نتائج

البحث عن الجزيئات المرشحة فيالمتكلس الناتج عن الفوسفاتAoSMC.للبحث عن الجزيئات التي يزيد تعبيرها في AoSMC المتكلّس، تم إجراء تحليل المصفوفة الدقيقة للحمض النووي لحوالي 26 جينًا 000 باستخدام AoSMC المتكلّس وAoSMC mRNA غير المكلس. يوضح الشكل 1 خريطة الحرارة للجينات المختلفة المعبر عنها بين AoSMC غير المستزرعة بـ 2.6 مم وتلك المستزرعة بـ 2.6 مم P لمدة 12 يومًا. زاد ما مجموعه 3066 جينًا أكثر من شقين في AoSMC المزروعة مقابل غير المزروعة. وكانت الجينات ذات التعبير المتزايد عبارة عن جزيئات مرتبطة بتكوين الأرومة العظمية مثل العظم، والعامل الخاص بالبيريوستين العظمي (POSTN)، وWnt3، والإنترلوكين -6 (ايل-6)، وعامل نمو الخلايا الليفية23 (FGF23) بالإضافة إلى العديد من الجزيئات في فصيلة SLC الفائقة (الجدول 1). من بين هذه الجزيئات، ركزنا على SLC37A2 الذي زاد فيه mRNA حوالي 3.1 مرة على AoSMC المستنبت بـ 2.6 ملي مولار P لمدة 12 يومًا مقارنةً بـ AoSMC غير المستنبت بـ 2.6 ملي مولار P. تم الإبلاغ عن أن SLC37A2 مرتبط بتنظيم P، لكن وظيفته التفصيلية غير معروفة التأثير. الالتهاب على التعبير SLC37A2.تكلس الأوعية الدمويةتم الإبلاغ عن أنه يتم تعزيزه عن طريق الالتهاب لذلك قمنا بفحص ما إذا كان SLC37A2 mRNA يتأثر بالاستجابة الالتهابية. بعد 24 ساعة من علاج LPS، زاد IL-6 بشكل ملحوظ مقارنةً بـ AoSMC غير المعالج بـ LPS (الشكل 2A). وشوهدت هذه النتائج أيضًا بعد 72 ساعة من علاج LPS. لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات في التعبير SLC37A2mRNA (الشكل 2B).

انقر هنا للحصول على مستخلص سيستانش عضوي طبيعي يحتوي على 25% من الإكيناكوسيد و9% أكتيوسايد لوظيفة الكلى.

الخدمة الداعمة لشركة Wecistanche - أكبر مصدر للسيستانش في الصين:

البريد الإلكتروني:wallence.suen@wecistanche.com

واتساب/هاتف:+86 15292862950

تسوق لمزيد من تفاصيل المواصفات:

https://www.xjcistanche.com٪2FCISTANCHE-shop

تعبير SLC37A2 في AoSMC المتكلس الناجم عن الفوسفات. لتحديد ما إذا كان SLC37A2 متورطًا في التكلس ، قمنا بفحص تعبير SLC37A2 mRNA على AoSMC غير المكلس والمكلس (الشكل 3). وقد لوحظ التكلس في AoSMC مثقف مع 2.6 ملي ف لمدة 6 أيام، ولوحظ تكلس أكثر تقدما في AoSMC مثقف مع 2.6 ملي ف لمدة 12 يوما (الشكل 3A). زاد Runx2 mRNA بشكل ملحوظ على AoSMC المكلس مقارنة بـ AoSMC غير المكلس (الشكل 3B). بدأ SLC37A2 mRNA في الزيادة بشكل ملحوظ في اليوم 3 في AoSMC المكلس، وفي اليوم 9، AoSMC المكلس زاد بشكل ملحوظ حوالي شقين مقارنة مع AoSMC غير المكلس (الشكل .3ج). زاد التعبير عن البروتين SLC37A2 بشكل ملحوظ حوالي شقين في اليوم السادس في AoSMC المكلس مقارنة مع AoSMC غير المكلس (الشكل ثلاثي الأبعاد).

التعبير عن SLC37A2 في الفئران النموذجية CKD.

للكشف عما إذا كان SLC37A2 متورطًا في تكلس الأوعية الدموية في الجسم الحي، قمنا بفحص تعبير SLC37A2 mRNA على أوعية فئران CKD المستحثة بالأدينين. تم إنشاء فئران CKD المستحثة بالأدينين وفقًا للبروتوكول الموضح في الشكل 4A. ويبين الجدول 2 وزن الجسم والبيانات البيوكيميائية في يوم التضحية. وزن الجسممرض الكلى المزمن الناجم عن الأدينينوكانت الفئران أقل بكثير مقارنة مع الفئران غير CKD. بالمقارنة مع المجموعة التي لا تعاني من مرض الكلى المزمن، كان لدى مجموعات مرض الكلى المزمن مستويات P وCr أعلى في البلازما، ومستويات كالسيوم أقل في البلازما، وإفراز بولي لمدة 24- ساعة من P وCa وCr. علاوة على ذلك، كانت هذه النتائج أكثر وضوحا في مجموعة CKD-HP، كما رأينا في الدراسات السابقة.37،39) وهكذا، انخفضت وظائف الكلى في مجموعة CKD، وخاصة في مجموعة CKD-HP. قمنا بفحص تعبير mRNA في الأوعية الأبهري لفئران CKD (الشكل 4). على الرغم من عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية في التعبير عن Runx2 mRNA، وهو عامل النسخ الذي يتحرك مبكرًا في آلية تكلس الأوعية الدموية، بين المجموعات (الشكل 4B) زاد التعبير عن osteopontin mRNA بشكل ملحوظ في مجموعة CKD-HP مقارنة بالمجموعة غير. مجموعة CKD ومجموعة CKD-LP(الشكل 4C). تمت أيضًا زيادة تعبير SLC37A2 mRNA بشكل ملحوظ في مجموعة CK D-HP مقارنة بالمجموعة غير CKD ومجموعة CKD-LP (الشكل 4D). نظرًا لوجود اختلافات فردية كبيرة في هذه الفئران، قمنا بفحص العلاقة بين osteopontin وSLC37A2 mRNA ووجدنا علاقة ذات دلالة إحصائية بين هذه الجزيئات (الشكل 4E). كشف الفحص النسيجي للشريان الأورطي الصدري البطني عن تكلس وسطي فقط في الشريان الأورطي لمجموعة CKD-HP (الشكل 5A). لفحص موقع التعبير عن SLC37A2 على الشريان الأورطي، أجرينا المناعية للشريان الأورطي لـ CKD-HPrats. تم التعبير عن SLC37A2 بقوة في المنطقة التيتكلس الأوعية الدمويةحدث (الشكل 5 ب).

الشكل 1. خريطة HeatMap للجينات المعبر عنها بشكل مختلف بين AoSMCnon المزروعة بـ 2.6 مم P وAoSMC المزروعة بـ 2.6 مم P. يمثل اللون الأحمر جينات ذات مستوى إشارة مرتفع، ويمثل اللون الأخضر جينات ذات مستوى إشارة منخفض. AOSMC خلايا العضلات الملساء الأبهري. انظر الشكل في النسخة الإلكترونية.

مناقشة

قمنا بالتحقق من الجزيئات ذات الصلة بـ P المرشحة والمتورطة في تكلس الأوعية الدموية. أظهرت نتائجنا أن SLC37A2 هو أحد الجزيئات التي تزيد معتكلس الأوعية الدمويةفي المختبر وفي الجسم الحي.

تنتمي عائلة SLC37 إلى فصيلة SLC الفائقة وتتضمن البروتينات: SLC37A 1-440) تحتوي عائلة SLC37 على بروتينات غشائية في غشاء الشبكة الإندوبلازمية ولها تسلسل متماثل لمضاد الفوسفات العضوي البكتيري. (41) يُعرف SLC37A4 باسمناقل الجلوكوز6-الفوسفات.(2-44 ومع ذلك، هناك القليل من التقارير حول SLC37A2، ولم يتم فهم التفاصيل حول وظيفته بشكل كامل. يتم التعبير عن SLC37A2، المعروف أيضًا باسم SPX2، بكثرة في بلاعم الفئران والطحال والغدة الصعترية والأنسجة الدهنية البيضاء (WAT) ) من نماذج الفئران السمينة وراثيا والخلايا الشبيهة ناقضة العظم المشتقة من خلايا Raw264.7. (45.6) ينقل البروتين SLC37A2 كلاً من الجلوكوز-6-الفوسفات/الفوسفات وتبادل الفوسفات/الفوسفات.(4) في الآونة الأخيرة، أظهرت التقارير وجود ارتباط بين SLC37A2 مع مرض حيواني. (47-49) يسبب خلل SLC37A2اعتلال العظام القحفي الفكي(CMO)، وهو مرض عظمي تكاثري محدود ذاتيًا، في سلالات الكلاب. (47) في أبقار الألبان، تكون طفرة متماثلة اللواقح SLC37A2 مسؤولة عن الموت الجنيني. (8.9) بالإضافة إلى ذلك. يعتبر SLC37A2 هدفًا للجينات المستهدفة لفيتامين د. (هكذا) تم أيضًا النظر في احتمالية الجين المستهدف لمستقبلات هرمون البروجسترون الفوسفور-Ser294 في تطور سرطان الثدي (1) وقد تم الإبلاغ عن أن الالتهاب قد يسبب تكلس الأوعية الدموية ويؤدي إلى تفاقمه. (٢س٢٦) علاوة على ذلك. يتم التعبير عن SLC37A2 بكثرة في البلاعم وWAT التي تتأثر بتسلل البلاعم. (ق) لذلك. لقد اعتبرنا أن SLC37A2 قد يكون جزيئًا يتم التعبير عنه أثناء الالتهاب. ومع ذلك، أظهرت النتائج التي توصلنا إليها عدم وجود زيادة في تعبير SLC37A2 في AoSMC المعرض للاستجابة الالتهابية، ولا يبدو أن هذا الجزيء يتأثر بشكل مباشر بالتحفيز الالتهابي. قد يكون SLC37A2 متورطًا في تكلس الأوعية الدموية من خلال آلية أخرى غير الالتهاب.

تم الإبلاغ عن أن SLC37A2 يعمل كمرتبط Pمكافحة بورتر. (41) بالإضافة إلى ذلك، تم الإبلاغ عن أن SLC37A2 هو الجين المستهدف لفيتامين د، ويحتوي جين SLC37A2 على موقع رئيسي لربط مستقبلات فيتامين د (ss2). التغيرات المرتبطة بشكل منهجي في التعبير عن جينات SLC37A2 والأشكال المنتشرة من فيتامين د. وقد شوهد في خلايا الدم وحيدة النواة المحيطية البشرية. (50) ترتبط مستقبلات فيتامين د بـ 1a، 25-ثنائي هيدروكسي فيتامين د، وهو مستقلب لفيتامين د، وينظم التعبير الجيني. يعمل لو، 25 ثنائي هيدروكسي فيتامين د، على امتصاص الكالسيوم والفسفور في الأمعاء، وتعبئة الكالسيوم في العظام، وإعادة امتصاص كين في الكلى. (3) هناك تقرير يفيد بأن في الفئران النموذجية لمرض الكلى المزمن الناجم عن الأدينين، كان المصل، 25- ثنائي هيدروكسي فيتامين د، أعلى بشكل ملحوظ في الفئران التي تتناول نظامًا غذائيًا عالي p، مع تكلس الأوعية الدموية المتقدم، مقارنة بالفئران ذات تناول طعام منخفض. -مدخول النظام الغذائي.39) قد يكون SLC37A2 مرتبطًا بتنظيم P عبر فيتامين د. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتوضيح أن فيتامين د يؤثر على تعبير SLC37A2 في المختبر وفي الجسم الحي.

لقد ثبت أن آلية تكلس الأوعية الدموية تشبه آلية تكوين العظام. إن نقص SLC37A2 الناجم عن CMO يمكن مقارنته سريريًا بفرط التعظم القشري الطفلي البشري، المعروف أيضًا باسم مرض كافي. بالإضافة إلى ذلك، هناك تقارير تفيد بأن SLC37A2 يتم التعبير عنه في نخاع العظم والخلايا العظمية. قد يتسبب SLC37A2 في خلل في وظيفة تكوين العظام العظمية والعظمية، ونتيجة لذلك، يؤدي إلى فرط التعظم.

Runx2 هو عامل نسخ أساسي لتكلس الأوعية الدموية. يُذكر أيضًا أن Runx2 هو عامل نسخ تمايز العظم المعبر عنه في تطوير الخلايا الظهارية للثدي. (s435) يبدو أن Runx2 ضروري لتنظيم جينات هرمون البروجسترون المستهدفة بالفوسفور-Ser294، والتي ترتبط بتطور سرطان الثدي. يعتبر SLC37A2 الجين المستهدف لمستقبلات هرمون البروجسترون الفوسفور-Ser294. (s1) لذلك، يعتبر أن Runx2 قد ينظم SLC37A2 في هذه الدراسة، ارتبط التعبير عن SLC37A2 mRNA في الشريان الأورطي لفئران CkD مع osteopontin mRNA، الذي يستهدف جين Runx2.