حاويات صغيرة من راب GTP في الاتجار بالحويصلات داخل الخلايا: حالة Rab3A / Raphillin -3 مجمع في الكلى
Mar 30, 2022
اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791
الملخص:تنظم قواعد Rab GTP الصغيرة ، وهي أكبر مجموعة من GTPases الأحادية الصغيرة ، حركة مرور الحويصلات في الخلايا ، والتي تعد جزءًا لا يتجزأ من العديد من العمليات الخلوية. تمت دراسة دورها في الأمراض العصبية ، مثل السرطان والالتهاب على نطاق واسع ، ولكن لم يتم بحث تأثيرها في أمراض الكلى بشكل متعمق. تم إثبات وجود Rab3a ومستجيبه Rabphillin -3 A (Rph3A) في خلايا بودوسيتعاديالكلىمن الفئران والجرذان والبشر ، حول الحويصلات الموجودة في عمليات القدم ، ويتم التعبير عنها بشكل مفرط في الأمراض ذات البيلة البروتينية. بالإضافة إلى ذلك ، تسبب نموذج الفئران بالضربة القاضية Rab3A في حدوث تغييرات عميقة في الهيكل الخلوي في خلايا الأقدام للحيوانات التي تتغذى على نسبة عالية من الجلوكوز. وبالمثل ، تسبب تداخل RphA في نموذج ذبابة الفاكهة في حدوث أضرار هيكلية ووظيفية في الخلايا الكلوية مع انخفاض في قدرات التسلل وعدد الخلايا الكلوية. التغييرات في بنية ألياف القلب في نفس نموذج تداخل RphA ، افتح السؤال عما إذا كان الخلل الوظيفي Rab3A سيؤدي إلى تلف متزامن في القلب وخلايا الكلى,مجال جذاب سيتطلب الاهتمام في المستقبل.
الكلمات الدالة:بروتينات راب Rab3A ؛ رابفيلين -3 أ ، الكلى والكلى
مقدمةتشترك قواعد Rab GTP الصغيرة ، وهي أكبر مجموعة من GTPases الأحادية الصغيرة ، وبروتيناتها Rabinteracting في وظائف خلوية متعددة بما في ذلك حركة الحويصلات داخل الجسم وغشاء البلازما لإطلاق الشحنات إلى الفضاء خارج الخلية [1،2]. تم التحقيق على نطاق واسع في دور Rab GTPases في الأمراض والمتلازمات المحددة [3]. تم تقييمها إلى حد كبير وتورطها في حويصلات المشابك والترسبات في أمراض الجهاز العصبي ، وكانت الأدلة على ارتباطها بأنسجة أخرى وعمليات مرضية مثل السرطان والالتهاب والصفائح الدموية وإفرازات الغدد الصماء هي الدافع وراء البحث في السنوات الأخيرة. وظيفيًا ، تنسق Rab GTPases أحداث تهريب الأغشية على أساس التحويل البيني الدوري بين الدول المرتبطة بـ GTP النشطة والحالات غير النشطة المرتبطة بالناتج المحلي الإجمالي. يمكن أن يتفاعل النموذج المرتبط بـ GTP مع المؤثرات ، مما يعزز الخطوات المختلفة ويساهم في حركة الغشاء المتجه [2]. يحتوي كل بروتين من بروتين Rab على بروتينات فاعلة محددة تنظم خطوات النقل المتميزة داخل الخلايا ، وهي شبكة عبر جولجي ، أو المسار الداخلي - الليزوزوم للتخليص / التحلل ، أو الاندماج مع الغشاء الخلوي لإطلاق الحويصلة وهو الأكثر دراسة [4-6].
يرتبط مرض الكلب بالأمراض الوراثية والمكتسبة [7]. تأثيرها على السرطان ،مرض عصبي حصانة,وقد تم التعرف على العدوى [8]. على الرغم من زيادة المعرفة ، إلا أن مساهمتها في ضعف الكلى والقلب والأضرار نادرة. لذلك ، تقدم هذه المراجعة لمحة عامة عن أهمية Rab GTPases في الأمراض التي تصيب الإنسان ، مع التركيز بشكل خاص على مجمع Rab3a-Rph3A ودوره الحاسم في أمراض الكلى مع ذكر الآثار المستقبلية.
Rab GTPases والاتجار في Vesicleتعتبر بروتينات Rab [9] منظمات رئيسية لانتقال الحويصلة داخل الخلايا بين الأجزاء المختلفة من خلال توظيف المؤثرات والمنظمين المعينين [2] ، والمشاركة إما في تبرعم الحويصلة ، أو التنقل من خلال التفاعل مع الهيكل الخلوي ، أو الربط بالغشاء. تتكون عائلة Rab من أكثر من 70 GTPases ، كل منها يرتبط بشكل تفضيلي بحجرة واحدة داخل الخلايا من أجل التحكم في خصوصية واتجاه مسارات حركة الأغشية ، والتي تتعلق في الغالب بالنقل الحويصلي. وبذلك ، فإنهم يساهمون في منح هوية الغشاء [10] والتأكد من أن الشحنات المرتبطة بالغشاء يتم نقلها إلى وجهاتها الصحيحة داخل الخلية.
تحتوي العمليات على طرق تهريب محددة جيدًا ، بما في ذلك مسارات الانبثاق والالتقام ، وتتكون الأخيرة من مكونات مبكرة ومتأخرة وإعادة التدوير [11]. عادة ما يتم تضمين كل من المسارات مع Rabs غير متداخلة ويحدث في مقصورات مختلفة (الشكل 1).
تم التعرف على العديد من بروتينات Rab المرتبطة بشبكة trans-Golgi والحويصلات الإفرازية. يُسهل Rab1 عملية تبرعم الحويصلات في موقع خروج الشبكة الإندوبلازمية وانتقال الحويصلات إلى حجرة ما قبل جولجي الوسيطة [12]. قد يتم أيضًا تنظيم عبور الحويصلات من الشبكة الإندوبلازمية إلى ما قبل جولجي بواسطة زميل عكسي بوساطة راب 2-. ينقل Rab8 تهريب الحويصلات في المسار الإفرازي المؤدي من شبكة عبر جولجي إلى غشاء البلازما. أعضاء فصيلة Rab3 الفرعية هم المنظمون المهمون لفرز الحويصلة الإفرازية في الخلايا حقيقية النواة ، ولكن تشير الدراسات الحديثة إلى أن هناك حاجة إلى أشكال إضافية من أشكال Rab ، فصيلة Rab27 الفرعية ، لهذه العملية [13]. تشير الأدبيات الحديثة إلى أن Rab3 و Rab27 يتعاونان لتحقيق خروج الخلايا الحويصلة من خلال تجنيد بروتينات فاعلة محددة ، مثل Rabphilin3a (Rph3a) التي تربط Rab27a ، وتجنيد إنزيم منشط Rab3IL1 ، وهو منظم Rab3 ، والذي يحفز تبادل الناتج المحلي الإجمالي لـ GTP في Rab3a [14 ]. يقود Rph3a التحام الحويصلة في الأغشية المستهدفة. ومع ذلك ، فإن بعض الحويصلات الإفرازية. يقود Rph3a التحام الحويصلة في الأغشية المستهدفة. ومع ذلك ، من المحتمل أيضًا أن تتشكل بعض الحويصلات الإفرازية من خلال التبرعم المباشر لغشاء البلازما ، ولا تُعرف متطلبات نشاط Rab GTPase في مثل هذا الإفراز.
الشكل 1. نقل حويصلي البروتين بوساطة راب داخل الخلايا. أبرز بروتينات عائلة Rab التي تلعب أدوارًا رئيسية في تنظيم تهريب الأغشية الخلوية بما في ذلك الالتقام الخلوي والإخراج الخلوي وإفراز الجسيمات الخارجية وتوصيل الحويصلات بين العضيات. تلعب قواعد Rab GTPases الصغيرة دورًا رئيسيًا في تنظيم الاتجار الحويصلي الخلوي بما في ذلك الالتقام الخلوي والإخراج الخلوي وإفراز الجسيمات الخارجية وتوصيل الحويصلات داخل الخلايا. يتوسط Rab5 ، المترجمة إلى الإندوسومات المبكرة ، عملية الالتقام الخلوي والاندماج الداخلي للحويصلات. يتوسط كل من Rab11 و Rab25 في إعادة التدوير البطيء للبطانة من خلال إعادة تدوير الإندوسومات ، بينما يتوسط Rab4 في إعادة التدوير الداخلي السريع مباشرة من الإندوسومات المبكرة. تتوسط حركة الإندوسوم-الليزوزوم المتأخرة المرتبطة بـ Rab7 في نضوج الجسيمات الداخلية المتأخرة واندماجها مع الجسيمات الحالة. تتوسط قاعدة GTPase الداخلية المتأخرة الأخرى ، Rab9 ، التهريب من الجسيمات الداخلية المتأخرة إلى شبكة عبر جولجي (TGN). يقع Rab1 في مواقع خروج الشبكة الإندوبلازمية (ER) والمقصورة الوسيطة لما قبل Golgi (IC) ، ويتوسط تهريب ER-Golgi. قد ينظم موقع Rab2 ، الموجود في IC ، تهريب Golgi-ER. يُعرف Rab6 بشكل أساسي بالاتجار داخل جولجي للحويصلات. يتوسط Rab8 في الاتجار التأسيسي من TGN إلى غشاء البلازما ، بينما يتوسط Rab3 و Rab27 أنواعًا مختلفة من الأحداث الخارجة المنظمة. يتوسط Rab22 في الاتجار بين TGN و endosomes المبكرة والعكس صحيح. أخيرًا ، بالنسبة للإفراز المعتمد على الجسم متعدد الخلايا (MVB) ، فقد ثبت أن Rab11 و Rab35 و Rab27 يعزز إفراز الجسيمات الخارجية وقد يعمل على MVBs المختلفة على طول مسار الالتحام. MVB: جسم متعدد الخلايا ؛ TGN: شبكة عبر جولجي.
فيما يتعلق بالالتقام الخلوي وإعادة تدوير مسارات الجسيم الداخلي ، فإن Rab5 هو مقيم في الجسيمات الداخلية المبكرة ، والبالعات ، وأغشية البلازما ، ويتوسط في الالتقام الخلوي الذي يتضمن حويصلات مغلفة بالكاثرين. يشارك Rab11 و Rab25 في إعادة التدوير الداخلي البطيء ويسهل Rab4 إعادة التدوير السريع للإندوسومات من مجموعات الجسيم الداخلي المبكرة. بعد ذلك ، يتوسط Rab7 في نضوج الجسيم الداخلي المتأخر (LE) ثم يقوم بإدخال LE في الجسيم الحال للتحلل. أخيرًا ، يربط Rab9 LE بشبكة trans-Golgi. بالتركيز على إفراز الجسيمات الخارجية ، هناك لاعبون جزيئيون جدد في التسبب في العديد من الأمراض ، وكان Rab11 هو أول ما تم الإبلاغ عنه [15]. في وقت لاحق ، تم التأكيد على نوعين من أنواع Rabs الجديدة في إفراز exosome ، Rab27 و Rab35 ، وكلاهما يسمح بإرساء الأجسام متعددة الحبيبات (MVBs) إلى غشاء البلازما. أدت تجارب إسكات Rab2B و Rab5A و Rab9A و Rab11 والأكثر كفاءة Rab27A و Rab27B إلى تقليل إفراز exosomes [16-18]. ومع ذلك ، كانت هذه الملاحظات الفردية مختلفة وفقًا لأنواع الخلايا التي تم تحليلها وتأثرت بتنوع الجسيمات الخارجية المخصب بشحنات مختلفة. يرتبط Rab11 و Rab35 بشكل أساسي بإعادة التدوير والفرز المبكر للداخلية ، على التوالي ، و Rab27A / B إلى الأجزاء الداخلية المتأخرة والإفرازية ، والتي تسمى غالبًا العضيات المرتبطة بالجسيمات [9]. وهكذا ، يمكن أن تولد أنواع فرعية مختلفة من الإندوسومات المتأخرة exosomes مختلفة [19]. ربما يكون التنوع الخارجي في شحنات البروتين ناتجًا عن طرق حركة الإفراز المختلفة التي تنظمها بروتينات راب معينة وفقًا لمحفز الخلية.
علاوة على ذلك ، فإن تفاعلات راب مع المؤثرات تنظم استهداف الحويصلة واندماج الغشاء بثلاث طرق [20]. أولاً ، يساعد Rabs في نقل الحويصلات من موقعها الأصلي إلى مقصورات المستقبل من خلال عناصر الهيكل الخلوي والبروتينات الحركية. ثانيًا ، تعمل مؤثرات راب على تنظيم تهريب الأغشية في خطوة إرساء الحويصلة. ثالثًا ، في الاندماج الغشائي للحويصلات يتم الالتحام بواسطة SNAREs على الغشاء [20]. باختصار ، فإن التوطين المحدد لحاويات Rab GTPases المختلفة لمقصورات غشائية محددة وقدرتها على تنظيم مسارات تهريب محددة ، جعلتها جذابة كأهداف جزيئية جديدة. ومع ذلك ، هناك معرفة جزئية بالوظيفة الدقيقة وتأثير التعبير الزائد أو الناقص عن حاويات Rab GTP على حركة الحويصلات المستمدة من عدم تجانس الوظيفة في أنواع الخلايا المختلفة مع الصعوبات لتحديد حركتها. يساهم تطوير تقنيات جديدة ، مثل الفحص المجهري عالي الدقة [21] وتقنية CRISPR / Cas ، في الحصول على معلومات قوية وفهم أكبر لدور Rab GTPases في التكوين الحيوي للحويصلة وإفرازها ، مما يكشف عن الأدوار الفسيولوجية غير المعروفة سابقًا وبالتالي تأثيرها على الصحة والمرض.
cistanche للبيع
المرور الحويصلي بوساطة راب والأمراضيعتمد التنظيم الدقيق لعمليات تهريب الأغشية بواسطة Rab GTPases على التفاعلات مع المؤثرات ، والحفاظ على قطبية الخلايا لتحقيق أقصى قدر من الكفاءة للوظيفة والهيكل ، وتنظيم إشارات الخلية ، والانقسام ، والبقاء ، والهجرة [22 ، 23]. وبالتالي ، أدت أهميتها في تنظيم الاتجار بالحويصلات إلى التحقيق في علاقتها بتطور العديد من الأمراض (الجدول 1).
تمت دراسة كيفية عمل بروتينات Rab ودورها في المرض على نطاق واسع في خلايا الجهاز العصبي ، وتقييم دورها في دورة حياة الخلايا العصبية ونشاطها وتراكم الترسبات داخل الخلايا العصبية [24-27]. في الاضطرابات التنكسية العصبية المختلفة ، تم التحقيق في التغيرات والأدوار التنظيمية لبروتينات Rab في الآليات المرضية في الخلايا العصبية ، على مستوى الميتوكوندريا ، واختلال الخلايا الدبقية. في مرض الزهايمر ، باركنسون ، هنتنغتون كوريا ، التصلب الجانبي الضموري ، وأمراض شاركو ماري توث [25] ، تم التعرف على التغيرات في بروتينات راب. على الرغم من أن تغيير بروتينات Rab ليس هو السبب الرئيسي للمرض في كل منهم ، حتى أنه نتيجة. تعد طفرات Rab7 و Rab28 و Rab11 السبب الرئيسي لمرض شاركو ماري توث و Rab39B في مرض باركنسون [28-31]. لوحظت الآثار الثانوية لـ RabGTPases على تهريب الأغشية في العديد من الأمراض الأخرى (انظر مراجعة واسعة في 16). من الأمثلة على تعقيد الآليات المشاركة في التغييرات المحتملة لبروتينات راب الدراسات التي أجريت على مرض باركنسون [32]. مرتبطًا بطفرة Rab39b ، تم التعرف على Rab29 و Rab5a و Rab7 في مرض باركنسون الوراثي المبكر مع جسم ليوي [31]. في المقابل ، ينقذ Rab11 العديد من الأنماط الظاهرية ، مثل تراكم بروتين ليوي [33]. يمكن أن يساعد البحث في تحليل آليات المرور الحويصلي والرباب على فهم ما يحافظ على الخلايا العصبية على قيد الحياة ودورها في الاضطرابات التنكسية العصبية.
في أمراض القلب والأوعية الدموية ، تم الحصول على المعلومات ذات الصلة أيضًا. يؤدي زيادة التعبير عن Rab1 في عضلة القلب إلى تشويه التوطين تحت الخلوي للبروتينات وهو كافٍ للتسبب في تضخم القلب وفشل القلب [34]. في الخلايا العضلية ، تتعرف البلعمة الذاتية المعتمدة على راب 9- على الميتوكوندريا التالفة وتبتلعها ، مما يؤدي إلى تغيرات نقص التروية - ضخه (IR) في الفسفرة التأكسدية ، مما يؤدي في النهاية إلى تقليل قابلية بقاء خلايا عضلة القلب [35-37]. في مرضى السكري المصابين ببول الزلالي ، حددت دراسة على مستوى الجينوم الموضع الجيني للرباب 38 المرتبط بالبيلة الزلالية ، وسلطت الضوء على مسارات جديدة تؤثر في البيلة الزلالية [38].
في الصفائح الدموية ، تمت دراسة تأثيرها على الإرقاء والتخثر وكذلك على تجديد الأنسجة والتهابها ونقائلها من خلال امتصاص وتعبئة وإطلاق الإكسوسومات من حويصلات التخزين نظرًا لآثارها العلاجية المحتملة [39]. تم تحديد دور البلعمة في ابتلاع ، وقتل ، ومعالجة الأجسام الغريبة والخلايا الأبوطوزية وتقديم المستضدات للخلايا المناعية على أنها تلعب دورًا مهمًا في عمليات المناعة [40]. في إصابة الأشعة تحت الحمراء ، تعد آلية الاستقطاب التي تنظم الفسفرة من خلال Rab21 عبر Rph3A مهمة لالتصاق العدلات بالخلايا البطانية أثناء الاستجابات الالتهابية [41]. في الكبد، عامل تنظيم مضاد للفيروسات 1 ينظم نسخ Rab27a وإفراز الحويصلة خارج الخلية ، مما يؤدي إلى تنشيط الفسفوليبيد المؤكسد للعدلات وإصابة الأشعة تحت الحمراء الكبدية اللاحقة [42].
نظرًا لأهمية Rab GTPases في تهريب الأغشية ، وأهمية هذه العملية لصحة الإنسان [22] ، ربما يكون من المدهش أن يرتبط عدد محدود فقط من الأمراض الوراثية بخلل وظيفي في راب. من المفترض أن وجود العديد من الأشكال الإسوية للرباب ومسارات التهريب تجعل البشر أقل عرضة للطفرات في جينات ترميز راب الفردية.
3.1. الإجراءات التي تتم بوساطة راب في الصحة والمرض في الكلى
الالكلىهي عضو مهم للحفاظ على توازن السوائل والكهارل من خلال نشاط الخلايا المتخصصة على مستويات مختلفة من الهيكل. ينتج عن خلل وظيفة أحدهما تأثير سلبي على الآخرين ، مما يؤدي إلى انخفاض تدريجي فيكلوي وظيفةالتحرك نحو المزمنمرض كلوي(كد) ، وهو منتشر بشكل كبير في عموم السكان ، حوالي 10 في المائة. معظم الخلايا في الأنسجة وخاصة فيالكلىهي مستقطبة وعادة ما يكون لها مجالان متميزان من غشاء البلازما - غشاء قمي وغشاء قاعدي - والذي ينتج عن الاتجار المستقطب للبروتينات والدهون. في الكلويالكبيبة، الخلايا البودوسية هي خلايا متشعبة شديدة التباين ولها دور رئيسي في الحفاظ على حاجز الترشيح [53] ، بالتعاون مع الخلايا البطانية الوعائية والخلايا ميسانجيل. في الأنابيب ، تمتلك الخلايا آليات متعددة متخصصة لوظائف مختلفة ، وتلعب تلك الموجودة في الترجمة البطانية اللحمية دورًا مهمًا في آليات الالتهاب. المعرفة حول Rab GTPase في المكونات الخلوية المختلفة لـالكلى، على الرغم من أن الأهمية في الصحة والمرض محدودة اليوم. التقدم في فهم دور Rab GTPase فيالكلىتم الحصول عليها من تقييم تعبير ونشاط مجمع exocyst في تطوير وإصلاح الضرر الأنبوبي ، والتغيرات المحددة في بروتينات Rab التي يسببها اعتلال الكلية الوراثي منخفض التردد أو ارتفاع ضغط الدم ، أو تقييم التعبير المرضي في نماذج بروتينية ، كل من الكبيبات والأنبوبي . وبالمثل ، تم أيضًا فحص الدور في إفراز الجسيمات الخارجية. ثقافةكلوي الخلاياونماذج في الجسم الحي للبحث عن الآليات التي تشارك فيها بروتينات راب. على سبيل المثال ، توفر الخلايا الكلوية في ذبابة الفاكهة ، ونظائر الخلايا البودوسية ، والخلايا الأنبوبية في نفس الوقت أداة لاختبار وظائف راب باستخدام التلاعب الجيني. في الجدول 2 ، ملخص للمعرفة حول مشاركة راب فيكلوييتم عرض علم وظائف الأعضاء والحالات المرضية. الكيس الخارجي عبارة عن مركب بروتيني مكون من ثماني وحدات فرعية محفوظ بدرجة عالية يشارك في استهداف ورسو الحويصلات الخارجية التي تنتقل من شبكة عبر جولجي إلى مواقع مختلفة فيكلويخلايا [54]. العديد من وظائف exocyst فيالكلىهي نتيجة العديد من GTPases التنظيمية الصغيرة ، والمشاركة في ciliognesis الأولي ، cystogenesis ، و tubulogenesis. دور الإصلاحكلويالخلايا الظهارية الأنبوبية بعدبَصِيرإصابة كلويةكما تم الاعتراف بها [55].
3.1.1. بودوسيتيس
حدد فو وزملاؤه 27 نوعًا مختلفًا من نباتات Rabs في الخلايا الكلوية ، 11 منها كانت وظيفية ومن بينها خمسة كانت مهمة للحفاظ على الوظيفة ، وثلاثة كانت ضرورية. حدد إسكات Rab5 دورها في تنظيم الالتقام الخلوي. أثناء القيام بالمثل في Rab7 و Rab 11 ، لوحظت تغييرات في تحلل البروتين وإعادة تدوير الأغشية. نتيجة لإسكات هذه الجينات ، لوحظ حدوث اضطراب في تنظيم الحويصلات ، وسلامة حاجز الترشيح ، والبنى تحت الخلوية المسؤولة عن إعادة امتصاص البروتين [56]. المتلازمة الكلوية المقاومة للستيرويد (SRNS) هي مرض منخفض التكرار يحدث فيه 30 في المائة من الحالات عند الأطفال بسبب طفرة جينية ، مع الآفات النسيجية لتصلب الكبيبات البؤري (FSGS) ، وهو متلازمة أقل شيوعًا عند البالغين. في الطفرات الخاطئة في جين TBC1D8B (عائلة TBC1domain) ، التي لوحظت في عائلتين مع SRNS في وقت مبكر مرتبط بـ X ، انخفاض في بروتين تنشيط Rab11b GTPase ، ومراقبة خلية بودوسية داخل التغييرات المعمارية وعيوب الهجرة نتيجة لنقص الاستيعاب و عمليات إعادة التدوير [46]. كامب وآخرون وصف خمس عائلات أخرى مع هذه الطفرة وفي نموذج ذبابة الفاكهة ، أكد تأثير Rab11 في العملية [57]. الطفرات الأخرى التي تم تحديدها على أنها سببية لـ SRNS ، كانت في جين GAPVD1 ، (المنظم الداخلي) ، وربما في جين ANKFY1 (Ankyrin Repeat و FYVE Domain الذي يحتوي على 1). تفاعل كلا الجينين مع Rab5 وزادت الطفرات على العكس من الارتباط بـ RAB5 المرتبط بـ GTP. يشير تفاعل GAPVD1 و nephrin ، وهو مفتاح بروتيني هيكلي في الحجاب الحاجز الشق ، إلى أن تهريب النيفرين بالبطانة قد يلعب دورًا في التسبب بوساطة RAB 5- لـ SRNS [45].
3.1.2. الأنابيب الكلوية
تتأثر الوظائف الأنبوبية ، بشكل رئيسي تلك التي تشارك في إعادة امتصاص البروتين ، إلى حد كبير بالتغيير في حركة المرور الحويصلي. في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم المزيف ، نموذج لارتفاع ضغط الدم المرتبطامراض الكلى، Rab38 يؤثر على إفراز البروتين البولي في النبيبات القريبة. باستخدام خلايا النبيبات القريبة المستزرعة LLC-PK1 ، خفضت ضربة قاضية Rab38 mRNA من الالتقام الخلوي للألبومين الغرواني المقترن بالذهب [49]. إلى جانب دور Rab38 في الخلايا الأنبوبية الظهارية ، تم تحديد الدور المناسب لـ Rab7 أيضًا في حماية تطور انتقال اللحمة البطانية (EMT) وموت الخلايا المبرمج عند حدوث زيادة في الألبومين. يؤدي الحمل الزائد للألبومين في التنشيط الأنبوبي الناجم عن الخلايا الأنبوبية لـ MMP -2 ، وهو بروتين ميتالوبروتيناز المصفوفة -2 ، إلى تحطيم الكولاجين من النوع الرابع ويقلل من سماكة الغشاء القاعدي الأنبوبي. يقلل تعبير Rab7 الزائد من نشاط MMP -2 الذي يحافظ على بنية الغشاء القاعدي الأنبوبي. تفتح نتيجة هذه الدراسة إمكانية أن يؤدي تنشيط Rab7 إلى أن يكون مفيدًا في حماية تأثير الحمل الزائد للبروتينات في السائل داخل الأنبوب الذي يقلل من EMT ، كما يحدث في اعتلال الكلية السكري [50]. بالإضافة إلى ذلك ، ينظم Slp 2- ، مستجيب لـ Rab27A ، الاستهداف القمي للبودوكاليكسين وشريكه الملزم ، إزرين ، بالتنسيق مع Rab27A. أنشأ المؤلفون نموذجًا لتعبير claudin -2 من خلال نقل podocalyxin إلى السطح القمي بوظيفة مركب Slp 2- a-Rab27A [51] ، والذي يساهم في كمية بروتين الوصلة الضيقة .
أخيرًا ، تمت دراسة دور بروتينات Rab في أنبوب التجميع. Aquaporin هو بروتين قناة مائية منظم بواسطة الفازوبريسين مسؤول عن إعادة امتصاص الماء التناضحي عن طريق تجميع القنوات. في وجود الفازوبريسين ، يشارك Rab7 وفرز البروتين الفراغي 35 (Vps35) في فرز AQP2 في الإندوسومات المبكرة تحت ظروف السيارة وتهريب الغشاء القمي [58].
حيث لشراء cistanche
3.1.3. إصدار إكسوسوم
تم أيضًا تقييم تأثير بروتينات Rab في إطلاق الإكسوسوم مع لعب Rab27 دورًا ذا صلة. تحدد دراستان حديثتان أن تثبيط أو تنشيط تعبير Rab27 يؤدي إلى انخفاض أو زيادة في إطلاق exosome من الخلايا البودوسية. في خامس هذه الدراسات ، استقر التعبير المفرط لـ KIBRA عن Rab27 ، متجنبًا تدهوره عبر مسار اليوبيكويتين-البروتيازوم [59]. في النموذج الثاني ، في نموذج الاستجابة الالتهابية للخلايا الظهارية الأنبوبية القريبة ، أدى القضاء على Rab27a إلى تثبيط الاستجابة الالتهابية المفرطة من خلال مسار CHAC1 / NF-B. كان هذا بسبب التراكم داخل الخلايا لـ miR -26 ، مما أدى بالتالي إلى تأخير تطور مرض السكري.مرض كلوي [52].
3.2 Rab -3 A / Rabphilin -3 مجمع فيمرض كلوي
في دراسات الارتباط الجيني ، حددت مجموعتنا تعدد الأشكال المتعلقة بخطر الإصابة بيلة الألبومين الدقيقة باستخدام البيانات الوراثية والأيضية المجمعة من عامة السكان ، وإيجاد ارتباط بين تعدد الأشكال لجين RPH3A والإمارات العربية المتحدة [60]. في الآونة الأخيرة ، في بيانات من دراسة القلب القوي ، تم شرح ما مجموعه 277 متغيرًا في الجينات RPH3A و RPH3AL (Rabphilin 3A like) و RAB3IL1 (RAB3A المتفاعل مثل البروتين 1) و RAB27A كانت متاحة لتحليل الارتباط مع تقدم الإمارات العربية المتحدة و GFR متأخر , بعد فوات الوقت. باستخدام نماذج التأثيرات المختلطة لمراعاة العلاقة الأسرية والتكيف مع الإرباكات المحتملة ، أظهر تعدد الأشكال في RAB3IL1 و RPH3A ارتباطًا ذا دلالة إيحائية بتقدم مستويات الإمارات العربية المتحدة و GFR (بيانات غير منشورة). علاوة على ذلك ، أظهرت دراسة سابقة من مجموعة Framingham أيضًا ارتباطًا بين الإمارات العربية المتحدة و RPH3A [61].
في عام 2003 ، Rastaldi et al. حقق في Rph3A و Rab3A كلاعبين محتملين في بيولوجيا الخلية. استنادًا إلى أن Rph3A يرتبط بـ Rab3A ، فهو مركب مطلوب لرسو الحويصلات المشبكية في غشاءها المستهدف والذي يرتبط ببروتينات الهيكل الخلوي في الخلايا العصبية والحويصلية والهيكل الخلوي مهمان أيضًا لاستتباب الخلايا البودوسية [47]. تم إثبات مركب Rab3A-Rph3A المركب في الخلايا العصبية وهياكل الغدد الصم العصبية وكذلك في الوضع الطبيعيالكلىمن الفئران والجرذان والبشر في الخلايا القرنية حول الحويصلات الموجودة في عمليات القدم [62،63]. بالإضافة إلى ذلك ، في الخزعات البشرية للمرضى الذين يعانون من بروتينية مع تصلب الكبيبات البؤري والقطعي ، تم تحديد زيادة في تعبير Rab3A-Rph3A [47]. الدور المحتمل لهذه الجزيئات فيكلويتمت دراسة الضرر بشكل أكبر من قبل نفس المجموعة في نموذج من الفئران الخاسرة Rab3A مع نظام غذائي عالي الجلوكوز. طورت الفئران الضربة القاضية اللدونة الأكتينية podocyte المتغيرة مع تلف خلية البودوسيت والبيلة البروتينية. علاوة على ذلك ، في النموذج الذي يتبع نظامًا غذائيًا عالي الجلوكوز ،كلويتم تطوير آفات مشابهة لتلك الموجودة في اعتلال الكلية السكري البشري [64].
حددت مجموعتنا في العمل الأخير أن Rph3A يتم التعبير عنها وتجميعها باستخدام علامات جزيئية لمسارات بطانية وخلوية في الخلايا الكلوية التأمور في Drosophila melanogaster. Nephrocyte هي خلية تجمع بين podocyte وكلويوظائف الأنابيب القريبة وتشارك في إزالة منتجات النفايات من الأنابيب الدملمفية والمالبيجية ، وهي بنية تعتبر مماثلة لـكلوينظام أنبوبي [48]. هناك نوعان من مجموعات الخلايا الكلوية المتميزة: الخلايا الكلية لخلايا الطوق حول المريء (ثنائي النواة) وخلايا الكلى التامور (أحادية النواة) الموجودة جنبًا إلى جنب مع القلب ، سواء وظيفيًا أو هيكليًا أو جزيئيًا مشابهًا لخلايا القدم البشرية [65].
تظهر العديد من الدراسات أن مسار الالتقام يلعب دورًا مهمًا في تطوير الخلية البودوسية وصيانتها وتلفها وقد يؤدي إلى حدوث تغييرات في شكل الخلية [66-68]. يقلل تداخل Rph3A من التعبير عن Rab3a وتقويم ذبابة الفاكهة لعامل النسخ عامل يشبه Krüppel 15 (KLF15) هو عامل نسخ زنك فيفينجر يتم التعبير عنه بشكل كبير في الكبيبات والخلايا الخلالية. له دور وقائي في النماذج البروتينية ، عن طريق الحد من الإصابة الأنبوبية و podocyte ،كلويالتليف ، والآفة المسراق. تعزز مستويات الإصابة المنخفضة هذه التغيير في مسارات الخلايا الداخلية التي تفقد مصير الخلية في النهاية [69]. لوحظ تأثير مورفولوجي على الخلايا الكلوية على عدة مستويات: (أ) تمزق الغشاء القاعدي ، و (ب) تعديلات الهيكل الخلوي التي تؤدي إلى غياب القنوات المتاهة وفقدان الخلايا الكلوية (الشكل 2).
يؤثر تداخل Rph3A أيضًا على التعبير عن الجينات التي تشارك بشكل مباشر في بنية الخلية الكلوية ووظيفتها. يتم تقليل (إسكات) البروتينات Sns و Kirra و nephrin البشري و neph1 ، والتي تتفاعل من خلال المجالات خارج الخلية لتشكيل الحجاب الحاجز الكلوي [70]. يؤدي غياب تعبير Sns إلى انخفاض كبير في عدد الخلايا الكلوية ، بما يتوافق مع الدراسات الحديثة التي وثقت أهمية Sns السيتوبلازمية في تنظيم تنظيم أكتين داخل الكلية [71]. بالإضافة إلى ذلك ، يتأثر نظام Cubilin-Amnionless ، المسؤول عن الالتقام الخلوي للبروتينات صغيرة الحجم عبر قنوات المتاهة [72] ، أيضًا بتداخل Rph3A. ينتج الانخفاض في تناول البروتين بواسطة الخلايا الكلوية عن انخفاض في تعبير الكوبيلين والتهريب الحويصلي المتأثر بمستويات منخفضة من KLF15 [48] (الشكل 2). يمكن تغيير كلا النظامين ، وبروتينات Sns ، وبروتينات Cubillin ، عن طريق تقليل التعبير الجيني أو سوء تحديد أي من مكوناتها. تسلط دراستنا الضوء على دور التنظيم المتبادل بين مكونات الهيكل الخلوي وبروتينات الحجاب الحاجز في الخلايا الكلوية باعتبارها ضرورية للحجم والترشيح المعتمد على الشحن ، وتوفر بيانات لدعم النتائج السابقة في نموذج الفئران بالضربة القاضية Rab3A ، والذي تسبب في بيلة بروتينية وكلويقصور [64].
في الوقت نفسه ، قامت مجموعتنا بتحليل تأثير ارتفاع الجلوكوز والأنجيوتنسين 2 على نظام Rab3A-Rph3A في الخلايا البشرية المخلدة وفي كريات خلايا البول من مرضى ارتفاع ضغط الدم والسكري [73]. تشير نتائجنا إلى أن نظام Rab3A Rph3A يمكن أن يشارك في التعديلات التي لوحظت في الخلايا القرنية المصابة وأنه يمكن تنشيط آلية لتقليل الضرر من خلال تعزيز النقل الحويصلي الموجه بواسطة هذا النظام. أخيرًا ، وجدت البيانات الأولية من مجموعتنا أن Rph3A يتم التعبير عنه أيضًا في خلايا عضلة القلب ذبابة الفاكهة ، وكان لإسكات Rph3A تأثير قوي على تنظيم الألياف والمعلمات القلبية الوظيفية [74]. باختصار ، يلعب نظام Rab3A-Rph3A دورًا فيالكلىآليات الضرر. ما إذا كان يمكن أن يلعب دورًا في حدوث خلل وظيفي مصاحب في الجهاز أم لا ، يصبح مجالًا جذابًا للبحث الذي يتطلب الانتباه في المستقبل.
4 - نتائج
إن قواعد Rab-GTPases عبارة عن بروتينات تتوسط في النقل بين الأقسام للحويصلات التي تحمل البضائع داخل وخارج الخلايا والعضيات. يلعب Rabs دورًا سائدًا في تنظيم تهريب الحويصلات في الخلايا ، والتي تعد جزءًا لا يتجزأ من العديد من العمليات الخلوية ، مثل تكاثر الخلايا ، وتغذية الخلايا ، والاستجابة المناعية الفطرية ، والانقسام ، والاستماتة. وبالتالي ، يعتبر داء الكلب أهدافًا جزيئية محتملة في العديد من الأمراض مثل السرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية والاضطرابات المناعية والأمراض التنكسية العصبية. ومع ذلك ، فإن تأثير تعبير Rabs المتغير لا يُفهم كثيرًا في أعضاء معينة حيث يكون للاتجار الحويصلي صلة كبيرة بهيكلها ووظيفتها ، كما هو الحال فيالكلى.كشفت الدراسات الحديثة عن أهمية مركب Rab3A-Rph3A في التشكل وفقدان الخلايا ووظيفة التصفية فيالكلى. أيضًا ، مؤخرًا في قلب ذبابة الفاكهة ، مما جعله لاعبًا جزيئيًا جديدًا في التسبب فيكلويووجود خلل في وظائف القلب وكونه من أهم مجالات الاهتمام بالتطبيقات العلاجية المحتملة. في هذا الوقت ، تظل العديد من الأسئلة حول الآلية الدقيقة للعمل بدون إجابة وستتطلب بحثًا في المستقبل.
cistanche للبيع