التأثير المضاد للأكسدة للكركمين الجزء 2

الرجاء التواصلoscar.xiao@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

لم يكن هناك فرق معنوي في التأثير المتوسط ​​لمتغيرات MDA و GSH و GSSG و GSH / GSSG و CAT في المجموعات المعالجة من الجرذان مع الكركمين والروتين ومزيج الكركمين والروتين. تم دعم هذه النتائج بقيم F منخفضة وتباين أقل بسبب التغيرات في العلاجات (الجدول 3).

كان هناك ارتباط بين الأنسجة الرخوة والدم فيما يتعلق بعلامات MDA و CAT (الشكل 4).

انخفضت مستويات MDA بشكل ملحوظ مقارنة بمجموعة الدواء الوهمي (DPP) بعد تناول الروتين والكركمين. كان للجمع بين الكركمين والروتين (DPCR) تأثير إيجابي أكثر على مستويات MDA مقارنةً بالروتين فقط (DPR) وتأثير مماثل مقارنةً بالكركمين وحده (DPC). أدى الجمع بين الكركمين والروتين (DPCR) إلى زيادة مستويات CAT مقارنةً بالكركمين (DPC) أو الروتين (DPR) وحده. كان لإعطاء الكركمين تأثير إيجابي أكثر من إعطاء روتين.

كان هناك فرق كبير بين مستويات MDA و CAT لجميع المجموعات الخمس من الفئران عندما تم إجراء التحليل على مستوى الأنسجة (الجدول 4).

على مستوى أنسجة اللثة ، كانت هناك اختلافات كبيرة بين قيم MDA التي تقارن المجموعة 1 وجميع الآخرين ، على غرار CAT (الجدول 5).

3. مناقشة

أشارت نتائج هذه الدراسة إلى ارتباط مستويات MDA في الدم وأنسجة اللثة وأنشطة CAT في جميع المجموعات.

يعد استخدام النماذج الحيوانية في أبحاث اللثة خطوة ضرورية قبل الشروع في التجارب السريرية باستخدام مواد حيوية وعلاجات جديدة. الجرذ هو القوارض الأكثر دراسة لأمراض اللثةطريقة تطور المرض، لأنها صغيرة وسهلة الصيانة وغير مكلفة ، وبنية اللثة السنية مشابهة تمامًا لتلك التي لوحظت عند البشر ، مع وجود ثلم لثة ضحل وربط ظهارة الوصلة بالملاط. تم التحقق من صحة نموذج جراحي لعيوب اللثة الحرجة في الجرذان ، مما يجعل من الممكن اختبار مواد حيوية جديدة بالاشتراك مع عوامل النمو أو الخلايا الجذعية الوسيطة [29،30]. السلالات الأكثر استخدامًا هي Wistar أو Sprague-Dawley ، لذلك تم استخدام 50 من الجرذان البيضاء من Wistar في بحثنا.

الرجاء الضغط هنا لمعرفة المزيد

مرض اللثة هو مرض متعدد العوامل تسببه النباتات الميكروبية المتنوعة الموجودة في اللويحة تحت اللثة. تركز الإدارة الحالية لأمراض اللثة على تقليل الحمل الجرثومي المرتبط بالأسنان واستعادة صحة اللثة من خلال الإجراءات الجراحية وغير الجراحية حول اللثة [31]. لقد ثبت أن الكركمين ، المكون الرئيسي للكركم ، له تأثير مضاد للالتهابات ومضاد للميكروبات ومضاد للأكسدة [32-34]. أظهرت الدراسات في المختبر [35،36] والدراسات على الحيوانات [27،37] والدراسات السريرية [38،39] أن هناك ارتباطًا إيجابيًا بين الكركمين وتطور التهاب دواعم السن.

أكدت الدراسات الوبائية أن مرض السكري هو عامل خطر كبير للإصابة بالتهاب دواعم السن ، وأن خطر الإصابة بالتهاب دواعم السن يكون أعلى إذانسبة السكر في الدمالسيطرة ضعيفة الأشخاص المصابون بمرض السكري الذي لا يتم التحكم فيه بشكل جيد (وهم أيضًا الأكثر عرضة للإصابة بمضاعفات الأوعية الدموية الكبيرة والأوعية الدموية الدقيقة) معرضون بشكل متزايد لخطر الإصابة بالتهاب دواعم السن وفقدان العظام السنخية [40،41].

روتين ، جليكوسيد الحمضيات الفلافونويد الموجود في الفواكه (البرتقال والجريب فروت والليمون والتفاح والتوت) ، هو أحد المكونات الرئيسية للعديد من مستحضرات الفيتامينات والعلاجات العشبية [42]. نظرًا لخصائصه المضادة للأكسدة والمضادة للالتهابات والإجراءات الوقائية للخلايا المرتبطة بخصائص مكافحة الشيخوخة والسرطان ، فإنه يحتوي على بعض التأثيرات الدوائية الموثقة [43 ، 44]. آثار روتين المفيدة على حالة نسبة السكر في الدم والأوعية الدموية الدقيقةومضاعفات الأوعية الدموية الكبيرة المرتبطة بمرض السكري ترجع إلى خصائص نقص شحميات الدم. يمكن تفسير الانخفاض في تركيز الجلوكوز من خلال تأثير مادة الروتين على أغشية الخلايا وتسهيل دخول الجلوكوز إلى الخلايا ، وبالتالي تقليل إطلاق الجلوكوز في الدم [45].

يمكن أن يحسن cistanche المناعة

في هذه الدراسة ، درسنا تأثير الإجهاد التأكسدي وتأثير الكركمين والروتين ، بشكل منفصل وفي خليط ، على مسببات التهاب دواعم السن المستحث تجريبياً في الفئران المصابة بداء السكري.

من أجل تحقيق حالة التهاب دواعم السن التجريبي أسرع من حدوث التهاب دواعم السن الطبيعي ، تم وضع رباط من الفولاذ المقاوم للصدأ بقطر 0. 1 مم حول أضراس الفئران الفك السفلي الثنائية الثنائية [46]. إن وضع رباط حول أضراس الجرذ يعزز التحدي الالتهابي مع وجودالعدلاتو T- والخلايا اللمفاوية بوالتقرح والهجرة القمية للالتصاق الظهاري [47].

هناك اهتمام متزايد بالعلاقة بين مضادات الأكسدة وأمراض اللثة. لذلك ، يستخدم هذا البحث الكركمين والروتين كمضاد أكسدة واحد ومزيج من الاثنين معًا. تم تقييم استخدام اللثة الكركمين في الدراسات السريرية [38،39] ، والدراسات على الحيوانات [37] ، والدراسات في المختبر [35].

قمنا بتقييم معلمات مثل MDA و GSH و GSSC و GSH / GSSC و CAT من خط الأساس إلى اليوم 70 لتحديد الإجهاد التأكسدي. وجدنا أن هناك فرقًا معنويًا بين المجموعة غير المعالجة ومجموعات العلاج الثلاث لهذه المتغيرات ، ولكن لم يكن هناك فرق كبير في متوسط ​​التأثير بين مجموعات DPC (المعالجة بالكركمين) و DPR (المعالجة بالروتين) ، DPC (المعالجة بالروتين). مع الكركمين) و DPCR (يعالج بالكركمين والروتين) و DPR (يعالج بالروتين) و DPCR (يعالج بالكركمين والروتين).

أشارت الزيادة في المصل MDA إلى أن الإجهاد التأكسدي الناتج بشكل كافٍ يمكن أن يتسبب في أكسدة بيروكسيد الجذور الحرة لمكون الدهون في غشاء الخلية ؛ وبالتالي ، يعد MDA مؤشرًا جيدًا لتقييم الإجهاد التأكسدي في الأمراض التنكسية مثل مرض السكري [48]. تم تخفيض متوسط ​​GSH و GHH / GSSC و CAT بشكل ملحوظ في مجموعات 2 و 3 و 4 و 5 مقارنة بمجموعة التحكم. Tomofuji وآخرون [49] ذكرت أن مستوى GSH انخفض وأن فقد العظم السنخي وزاد تسلل الكريات البيض النووية متعدد الأشكال في أنسجة اللثة ، و de AraujoJunior et al. [50] ذكرت أن مستويات MDA زادت وانخفضت مستويات GSH في أنسجة اللثة.

أظهرت الدراسات على الحيوانات والتجارب السريرية المحدودة نتائج إيجابية وواعدة ، ولكن لا تزال هناك قيود واحتياطات يجب معالجتها قبل الاستخدام السريري واسع النطاق للكركمين في مرضى التهاب دواعم السن. الكركمين ضعيف الذوبان في الماء ويجب أن يذوب في الإيثانول أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد ، وله توافر بيولوجي مجموعي منخفض بعد تناول جرعة فموية ، كما أنه يمتص بشكل سيئ ويتم استقلابه بسرعة في الجهاز الهضمي [51 ، 52].

مطلوب مزيد من البحث لتحسين تركيبات وأنظمة توصيل الكركمين والروتين. هناك نتائج واعدة للكركمين من أجل زيادة عملية الامتصاص ، وإبطاء عملية التمثيل الغذائي [25] ، وزيادة توافره البيولوجي من خلال استخدام الجسيمات النانوية [53] ، والجسيمات الشحمية [54] ، والمذيلات [55] ، ومركبات الفوسفوليبيد [56]. ].

4. المواد والطرق

4.1 المواد الكيميائية / الأدوية المستخدمة

تم شراء الستربتوزوتوسين (STZ) ، الجلوكوز ، الكركمين (C) ، الروتين (R) ، 2- حمض الثيوباربيتوريك ، o-phthalaldehyde ، بيروكسيد الهيدروجين ، ومحلول فوسفات الكالسيوم من Sigma Aldrich Chemicals GmbH (ميونيخ ، ألمانيا). ويذوب الجلوكوز في الماء المقطر. تم إذابة C و R في زيت معدني عند 10 ميكرولتر / لتر.

4.2 الحيوانات التجريبية

تم نقل خمسين جرذًا من ذكور الفئران البيضاء (8 أسابيع ووزنها ± 20 ± SD 220 جم) تم شراؤها من قسم الحيوان بجامعة "Iuliu Hatieganu" للطب والصيدلة ، كلوج نابوكا ، رومانيا إلى مركز أبحاث BIOCOM في قسم علم وظائف الأعضاء ، كلوج نابوكا ، رومانيا. تم إيواء الحيوانات في درجة حرارة 21 ± 2 درجة ، ورطوبة 70٪ ± 4٪ ، وفترة إضاءة أقل من 12- ساعة مظلمة / 12- ساعة في بيئة محكومة ، 5 لكل قفص. تم إطعامهم نظامًا غذائيًا قياسيًا في المختبر وتلقوا الماء بالشهرة. بدأت التجربة بعد فترة تأقلم مدتها 1- أسبوع ، وتمت الموافقة على البروتوكول من قبل اللجنة الأخلاقية لرعاية الحيوان التابعة لجامعة "لولو هاتيغانو" للطب والصيدلة رقم 172/13 يونيو 2019 ، وفقًا لـ إرشادات حول رعاية واستخدام الحيوانات للأغراض العلمية ، اللجنة الاستشارية الوطنية لأبحاث حيوانات المختبر ، 2004. 4.3 تحريض مرض السكري

في اليوم الأول بعد التخدير العضلي (في العضل) بحقنة كوكتيل كيتامين زيلازين (100 مجم / كجم من وزن الجسم (BW) والكيتامين 10- مجم / كجم -1 BW xylazine) ، تم تحريض مرض السكري في الفئران في مجموعات 2-5. تم إعطاؤهم عن طريق الحقن الوريدي في الوريد الذيلية STZ 30mgkg -1 وزن الجسم ، يليه بعد 6 ساعات الجلوكوز 30٪ ، 2 مل / حيوان. يحدث ارتفاع السكر في الدم عن طريق الستربتوزوتوسين (STZ) في الجرذان البالغة ؛ آلية العمل عن طريق تدمير الإجهاد التأكسدي الانتقائي لخلايا البنكرياس. وبالتالي ، يؤدي ذلك إلى خفض الأنسولين المنتشر ، ورفع مستوى الجلوكوز في الدم ، وظهور أعراض مهمة [57].

تلقت الحيوانات في المجموعة 1 نفس الحجم مثل سيارة التحكم فقط. بعد 72 ساعة ، باستخدام مقياس السكر ، تم قياس نسبة السكر في الدم في الدم المأخوذ من الوريد الذيلية. الفئران مع<300 mg/dl="" glycemia="" level="" were="" readministered="" stz="" and="" glucose="" as="" stated="">

4.4 تحريض التهاب اللثة

من أجل تسريع التهاب دواعم السن ، تم وضع أجهزة تراكم اللويحات ، مثل الأربطة التقويمية ، في قمي في المنطقة البينية ودفعها إلى التلم اللثوي حول الأضراس الثانية لتسهيل تكوين اللويحة ، وكذلك تعطيل ظهارة اللثة ، مما يعزز تكوين الخلايا العظمية والعظام الخسارة [58،59] يسمح وضع الرباط للبكتيريا بالتراكم حول الرباط ، مما يؤدي إلى التهاب دواعم السن السريع. تم إجراء الفحص عن طريق تحريك المسبار السني على جميع أسطح السن والسبر في 6 مواقع — 3 على الجانب الشدقي و 3 على الجانب الفموي. (الإنسي والوسط والبعيدة من السن). وصل عمق الجيب إلى ذروته بعد 15 يومًا ، وفقد الرباط الاتصال بأسفل الجيب اللثوي ، الذي ذهب في الاتجاه القمي ، مما قلل من فعاليته. وبالتالي ، أثناء التجربة ، يجب دفع الرباط بشكل قمي. أعمق جيب يبلغ متوسط ​​عمق الجيب 3.1 ملم. عندما تم تأكيد التهاب دواعم السن ، تمت إزالة الأربطة دون تعطيل اللويحة أو القلح.

اعتبرت هذه الطريقة أن تكون نموذجًا مناسبًا لمرض حاد [60]. إن وضع الأربطة فقط هو الطريقة الأكثر شيوعًا لتحريض التهاب دواعم السن (72.2 بالمائة) [60]. 4.5 تخصيص المجموعة والتصميم التجريبي

تم تقسيم فئران Wistar البيضاء بشكل عشوائي إلى 5 مجموعات: (1) (CONTROL) - مجموعة التحكم ، (2) (DPP) - السكري الناجم تجريبياً والتهاب اللثة ، (3) (DPC) - داء السكري والتهاب دواعم السن المحرض تجريبياً معالج بالكركمين (C) ، (4) (DPR) - داء السكري والتهاب دواعم السن الناجم تجريبياً المعالج بالروتين (R) و (5) (DPCR) - داء السكري والتهاب دواعم السن المستحث تجريبياً والمعالج بـ Cand R.

بعد تثبيت داء السكري والتهاب دواعم السن ، تلقت الجرذان من المجموعات 3-5 العلاج بـ C أو R أو معًا: في المجموعة 3 تم إعطاؤها C ، 75 مجم / كجم من وزن الجسم / الجرذ ، في المجموعة 4 تم إعطاؤها R75 مجم / كجم من وزن الجسم / فأر ، وفي المجموعة 5 ، بنسب متساوية ، توليفة من Cand R ، 75 مجم / كجم من وزن الجسم ، على التوالي. تلقت المجموعة 2 نفس حجم السيارة فقط. تم إعطاء العلاج عن طريق الفم كل يوم لمدة 10 أسابيع. استند اختيار الجرعة إلى البيانات المستخدمة في دراسات أخرى مماثلة حيث تأثيرات الكركمين (15-90 مجم / كجم) [61-64] وروتين (25-100 مجم / كجم) [65 ] على الحد من عوامل الإجهاد التأكسدي. 4.6 جمع عينات الدم والأنسجة وتحليلها

في نهاية التجربة ، بعد الحقن داخل الصفاق لكوكتيل الزيلازين كيتامين (100 ملجم / كجم من الكيتامين و 10 ملجم / كجم من الزيلازين من وزن الجسم) ، تم سحب 5 مل من الدم من الجيوب الوريدية الرجعية المدارية لجميع الحيوانات ، و تم قياس علامات التأكسد. تم جمع عينات الأنسجة من الغشاء المخاطي اللثوي للأسنان المربوطة والأسنان الضابطة المتماثلة. تم استخدام العينات لقياس علامات الأكسدة البيوكيميائية.

تم تجانس شظايا الأنسجة باستخدام مجانس بوليترون (Brinkman Kinematica ، لوسيرن ، سويسرا) لمدة 3 دقائق على الجليد في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات (PBS) (pH7.4) وإضافته بنسبة 1: 4 (وزن / حجم). تم طرد المعلق عند 300 × جم و 4 درجة لمدة 5 دقائق لتحضير جزء العصارة الخلوية. تم قياس محتوى البروتين في المتجانسات باستخدام طريقة برادفورد [66]. 4.7 تحديد المؤشرات الحيوية للإجهاد التأكسدي

تم تحديد MDA بواسطة طريقة قياس الفلور باستخدام 2- حمض الثيوباربيتوريك (TBA) الذي وصفه Conti et al. [67].

تم قياس الجلوتاثيون المخفض (GSH) والجلوتاثيون المؤكسد (GSSG) فلورو-متري باستخدام o-phthalaldehyde [68]. تم التعبير عن النتائج في الشامات / مل.

لتقييم MDA في عينات اللثة ، تم تحديد محتوى البروتين في المتجانسات بواسطة طريقة برادفورد [69] باستخدام ألبومين مصل الأبقار كمعيار. تم تسخين متجانسات أنسجة اللثة في حمام مائي مغلي لمدة ساعة واحدة في 75- mMK2HPO4 ، pH3 ، تحتوي على 10- ملي مولار TBA. بعد التبريد ، تم استخلاص المحلول باستخدام 3 مل من n- بيوتانول في 0. تم ​​تحديد 6 مل من TBA.MDA بطريقة قياس طيفي الفلورومتر في المرحلة العضوية باستخدام تقنية متزامنة مع 534 نانومتر من الإثارة و 548 نانومتر من الانبعاث. تم الإبلاغ عن MDA على أنه بروتين nmol / mg.

تم قياس نشاط الكاتلاز (CAT) في المتجانسات ومحللات الخلية في خليط تفاعل يحتوي على {0} ملي مولار بيروكسيد الهيدروجين في 50- ملي مولار من فوسفات الكالسيوم ، pH7.4. تم تعريف كمية الإنزيم التي أدت إلى تقليل الامتصاص بمقدار 0.43 عند 25 درجة في الدقيقة عند 240 نانومتر في هذا النظام على أنها وحدة واحدة من نشاط الكاتلاز. تم التعبير عن النشاط بوحدة / ملجم بروتين. [70] 4.8. التحليل الإحصائي

تم تحليل البيانات إحصائيًا باستخدام ANOVA مع اختبار Scheffe لمقارنة مستويات الأهمية بين المجموعة الضابطة والمجموعات التجريبية. تم إجراء جميع التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج SPSS24 ، أرمونك ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية. تعتبر قيم p أقل من أو تساوي 0. 05 تعتبر مهمة.

5. الاستنتاجات

يمكن الاستنتاج أن تناول الكركمين والروتين عن طريق الفم ، منفردًا أو مجتمعًا ، يمكن أن يقلل من الإجهاد التأكسدي في كل من أنسجة اللثة والدم ويعزز حالة مضادات الأكسدة في الفئران المصابة بارتفاع السكر في الدم. نمذجة الإجهاد التأكسدي ، قد يكون لهذين المضاد للأكسدة تأثير مثبط على الالتهاب. هناك حاجة لأبحاث مستقبلية لتقييم تأثيرات مضادات الأكسدة على الالتهابات الموضعية مقارنة بالالتهاب الجهازي.

تم استخراج هذه المقالة من جزيئات 2021 ، 26 ، 1332