التأثير الوقائي ل Cistanche Total Glycosides على سمية عضلة القلب للفئران التي يسببها الأدرياميسين

لمزيد من information:ali.ma@wecistanche.com

يوليا ييمينغ

[مشروع تدعمه مؤسسة العلوم الطبيعية التابعة للجنة العلوم والتكنولوجيا لمنطقة شينجيانغ الويغورية ذاتية الحكم (96814)]

[نبذة عن المؤلفة، إيليا ييمينغ (1964-)، أنثى (الأويغور)، ماجستير. محاضر، اتجاه البحث: علم الأدوية القلبية الوعائية. ],

وانغ شياو وين، وانغ شيويفي، هيلمان ييلاهونغ 2، شيه ياويون 2، دو نيانشنغ 3

(جامعة شينجيانغ الطبية| قسم علم الأدوية ، كلية الصيدلة ، قسم المجهر الإلكتروني ، كلية العلوم الطبية الأساسية ، قسم كيمياء الأدوية الطبيعية ، كلية الصيدلة ، أورومتشي 830054 ، شينجيانغ)

تجريدي:لاستكشاف تأثير الحماية وآليةجليكوسيدات سيستانش(GCs) على تلف عضلة القلب الناجم عن دوكسوروبيسين (Dox) في الفئران. فانغ شي: تم استخدام نموذج لإصابة عضلة القلب الحادة الناجمة عن الحقن داخل الصفاق من Dox (17.5 ملغم / كغ) في فئران المعاهد الوطنية للصحة لتحديد نشاط ديسموتاز سوبر أكسيد عضلة القلب (SOD) ؛ نشاط السيلينيوم-الجلوتاثيون بيروكسيديز (Se-GSH- Px) ؛ يحتوي مالونديالدهيد (MDA) على نشاط فوسفوكيناز الكرياتين في المصل (CPK). يفحص المجهر الإلكتروني التغيرات الهيكلية فوق الهيكلية للخلايا العضلية القلبية. النتائج: بعد 48 ساعة من الحقن داخل الصفاق من دوكس يمكن أن يسبب ضررا كبيرا لعضلة القلب من الفئران. انخفض نشاط SOD و Se-GSH-Px في عضلة القلب ، وزاد محتوى MDA ، وزاد نشاط CPK في المصل ، وحدث تلف في البنية الفائقة لأنسجة عضلة القلب. جليكوسيدات سيستانش(62.5، 125.0، 250.0 مغ/كغ)يمكن أن تزيد من SOD عضلة القلب ، نشاط Se-GSH-Px. تقليل محتوى MDA وتقليل إصدار CPK. تقليل تلف البنية الفائقة لعضلة القلب.جي لينغ: سيستانش مجموع جليكوسيداتلها تأثير وقائي معين على تلف عضلة القلب الناجم عن دوكسوروبيسين. قد تكون آليته مرتبطة بحمايته من SOD عضلة القلب ونشاط Se-GSH-Px ، وإزالة الجذور الحرة ، ومنع بيروكسيد الدهون.

الكلمات المفتاحية: دوكسوروبيسين; مجموع جليكوسيد من سيستانش. سمية القلب. بيروكسيد الدهون. الكرياتين كيناز. البنية الفائقة

Doxorubicin (Dox) هو نوع من مضادات البصل الحيوية ، والتي لها تأثير جيد على مجموعة متنوعة من الأورام الخبيثة ، ولكن بسبب سميتها عضلة القلب الحادة والمزمنة ، فإنه يحد من التطبيق الواسع ل Dox في الممارسة السريرية. من المعروف أن التأثير المضاد للورم ل Dox هو التأثير على تكرار الحمض النووي وتخليق الحمض النووي الريبي ، وترتبط سمية القلب بتلف بيروكسيد الدهون الناجم عن شبه الأدرياميسين. لذلك ، من المهم العثور على زبالين الجذور الحرة ومضادات الأكسدة لاستعداء السمية القلبية ل Dox مع الحفاظ على نشاطها المضاد للورم. المجموعمقتطفات من سيستانشهي المكونات النشطة المستخرجة منسيستانش. وقد وجدت الدراسات ذات الصلة أن جليكوسيدات سيستانش لها تأثيرات مضادة للأكسدة على أنسجة الفئران, جليكوسيدات سيستانشيمكن أن تقلل بشكل كبير من محتوى ليبوفوسكين(3), جليكوسيدات سيستانشلها آثار وقائية على نقص تروية عضلة القلب الفئران(3)، و جليكوسيدات سيستانشلها بيروكسيد مضاد للدهون وتأثيرات مضادة للإشعاع. لاستكشاف تأثير الحماية وآلية جليكوسيدات سيستانشعلى إصابة عضلة القلب الناجمة عن Dox في الفئران.

انقر إلى Cistanche tubulosa فوائد وآثار جانبية المنتجات

1 المواد والأساليب

1.1 المخدرات والكواشف

جليكوسيدات سيستانشيتم استخراجها منعشب سيستانشفي شمال شينجيانغ ، والمكونات الرئيسية هي إشنسا ، إيثوكسيلات الإرغوت ، وما إلى ذلك (مقدمة من قسم كيمياء الطب الطبيعي ، كلية الصيدلة ، جامعة شينجيانغ الطبية) ؛ رباعي ميثوكسي البروبان (شركة TMP Sigma) ؛ Adriamycin (Dox ، تشجيانغ Hisun الدوائية المحدودة )؛ فيتامين E (Vit E ، مصنع شنغهاي يانان للأدوية) ؛ يتم إنتاج الكواشف الأخرى محليا.

1.2 المعدات التجريبية

مقياس الطيف الضوئي من النوع 721 (مصنع شنغهاي رقم 3 للأدوات التحليلية) ؛ مجهر OLYMPUS (صنع في اليابان) ؛ JEM-100CXII المجهر الإلكتروني الناقل (صنع في اليابان)؟ PHS-250 نوع الحموضة متر (شنغهاي لي مصنع الأدوات المغناطيسية).

1.3 تجميع الحيوانات وإدارتها

يتم توفير الفئران NIH من قبل مركز التجارب الحيوانية التابع لمعهد شينجيانغ للأمراض المتوطنة. رقم شهادة المختبر الطبي هو رقم 16-068. تم اختيار 138 فأرا من المعاهد الوطنية للصحة ، تزن (24±2) جم ، نصفها ذكر ونصف أنثى. مقسمة عشوائيا إلى 6 مجموعات (23 في كل مجموعة): (1) المجموعة الضابطة: محلول ملحي طبيعي (NS) 20 مل / كجم. (2) مجموعة إصابة دوكس: NS 20 مل / كجم ؛ (3) مجموعة Vit E: Vit E 100 مغ / كغ؛ (4) المجموعة الأولى من GCs: GCs 62.5 مغ/كغ؛ (5) المجموعة الأولى من GCs: GCs 125.0 مغ/كغ؛ (6) مجموعة GCS1: GCs 25.0 ملغم / كغم ، كل مجموعة من المجموعات المذكورة أعلاه أعطيت جميعها عن طريق الإدارة داخل المعدة ، مرة واحدة في اليوم. مجموعة إصابات Dox ، مجموعة Vit E ، GCs | المجموعة ، GCs I المجموعة ، GCs المجموعة الأولى تم حقنها داخل الصفاق مع Dox 17. 5 مغ / كغ في اليوم الرابع بعد حقن NS و GCs لمدة 48 ساعة ، تم أخذ مقل العيون وأخذ الدم ، وتم إعداد المصل ، وعلى الفور تم التضحية بالحيوانات لإخراج القلب ، وشطفها ب NS ، ولطخت جافة مع ورقة مرشح ، ووزنها. ظروف الحمام تحت الماء ، تم تحضير تجانس عضلة القلب باستخدام NS ، بالطرد المركزي عند 3500 دورة / دقيقة ، 30 دقيقة ، وتم أخذ supernatant لقياس المؤشرات الكيميائية الحيوية. كان هناك 3 فئران في كل مجموعة ، وتم أخذ القلوب لصنع عينات من المجهر الإلكتروني.

1-4 تحديد المؤشرات البيوكيميائية

تم استخدام طريقة autoxidation pyrogallol لتحديد نشاط ديسموتاز الفائق أكسيد عضلة القلب (SOD). تم استخدام طريقة DTNB لتحديد نشاط السيلينيوم والجلوتاثيون بيروكسيديز (Se-GSH-Px) في عضلة القلب استخدم طريقة TBA لتحديد محتوى منتج بيروكسيد الدهون في عضلة القلب مالونديالدهيد (MDA) ؛ يستخدم تحديد كمية البروتين طريقة CBB-SDS التي تسمى طريقة CPK لتحديد نشاط فوسفوكيناز الكرياتين في المصل (CPK).

1.5 المجهر الإلكتروني لأنسجة عضلة القلب

تم إصلاح قمة القلب بنسبة 4٪ glutaraldehyde وحمض 1٪ ، وتجفيف مع الأسيتون ، وجزءا لا يتجزأ من Epon 812 ، ولوحظ تحت المجهر الإلكتروني الناقل مع تلطيخ إلكترون الرصاص اليورانيوم JEM-100CX I.

1.6 المعالجة الإحصائية

يتم تمثيل جميع البيانات بواسطة Wang Shi s. بعد اختبار البيانات التجريبية لتجانس التباين ، يتم استخدام اختبار F واختبار q للمعالجة الإحصائية. مستوى التفتيش a = 0.05.

2 النتائج

2.1 تأثيرجليكوسيدات سيستانشعلى المؤشرات البيوكيميائية لعضلة القلب المصابة ب Dox موضحة في الجدول 1.

2. 1- 1 تأثيرجليكوسيدات سيستانشعلى نشاط SOD من عضلة القلب المصابة Dox.

بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، خفضت مجموعة إصابة Dox نشاط SOD لعضلة القلب بنسبة 41.1٪ (P V0.01). مقارنة بمجموعة إصابات Dox ، زادت بنسبة 30.9٪ و 33.2٪ و 36.5٪ و 34.9٪ (جميع P<0.01), the="" gcs1="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05)، وكانت المجموعات المتبقية جميعها أقل من المجموعة الضابطة.

2.1.2 تأثير GCs على نشاط عضلة القلب المصاب ب Dox Se-GSH-Px.

بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، فإن مجموعة إصابات Dox لديها انخفاض بنسبة 26.2٪ في نشاط عضلة القلب Se-GSH-Px (P<0.01), gcs,="" gcs,="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" the="" gcs,="" group,="" and="" vit="" e="" group="" increased="" by="" 19.2%,="" 21.1%,="" 25.0%,="" and="" 26.1%="" respectively=""><0.01), which="" were="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0 . 05).

2-1-3 أثرجليكوسيدات سيستانشعلى محتوى MDA من عضلة القلب المصابة ب Dox بنسبة 16.7٪ ، 17.3٪ ، 18.6٪ ، و 17.3٪ على التوالي مقارنة بالمجموعة المصابة ب Dox (Fall V0.01) ، والتي كانت جميعها قريبة من المجموعة الضابطة (P>0.05).

2.1.4 تأثير GCs على نشاط CPK في المصل في الفئران المصابة في Dox.

زاد نشاط CPK في المصل في مجموعة إصابات Dox بنسبة 87.3٪ (<0.01),>جليكوسيدات سيستانشأناجليكوسيدات سيستانشالمجموعة ، و Vit مقارنة بمجموعة إصابة Dox ، انخفضت المجموعة E بمقدار 26. 6٪ و33.1٪ و37.4٪ و36. 7٪ (جميع F<0.01), which="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" control="">

2.2 المجهر الإلكتروني لعضلة القلب الفأر

2.2.1 في المجموعة الضابطة ، كانت ساركوما ألياف عضلة القلب سليمة ، وتم ترتيب myofibrils بطريقة منظمة ، وكانت نطاقات sarcomere منظمة بوضوح ، وتم ترتيب الميتوكوندريا بدقة ، وكان الهيكل طبيعيا ، وكان الهيكل النووي طبيعيا.

2.2.2 مجموعة إصابات دوكس

يمكن ملاحظة أن هناك تغييرات واضحة في البنية الفائقة لألياف عضلة القلب ، وخلايا عضلة القلب منتفخة ، وينمو ساركومير داخل السيتوبلازم ، ويتسع النطاق الساطع ، وتظهر نطاقات انكماش غير طبيعية في بعض المناطق ، وتزداد مادة خط Z. كانت الميتوكوندريا منتفخة بشكل منتشر ، ومفرطة البلاستيك ، ومرتبة بشكل ضئيل ، ومكسورة ، وفارغة. تتوسع الشبكة الساركوبلازمية ، وتزداد الليزوسومات الثانوية ، ويمكن رؤية التنكس البؤري. يزداد حجم النواة ويتسع الفضاء شبه النووي.

2. 2.3 تورم ألياف عضلة القلب في جليكوسيدات سيستانشتم تخفيض مجموعتي.

هيكل الساركومير طبيعي في الأساس ، لكن الساركومير لا يزال أوسع من المجموعة الضابطة. تم تقليل تورم الميتوكوندريا ، وزيادة كثافة المصفوفة ، وزيادة كثافة الميتوكوندريا ، والميتوكوندريا الفردية لا تزال تتغير. زيادة الليزوسومات الثانوية في السيتوبلازم.

2.2.4 بنية ألياف عضلة القلب في جليكوسيدات سيستانشأنا ، أنا مجموعة تعافى أساسا إلى وضعها الطبيعي.

يتم ترتيب Myofibrils بدقة ، وهيكل sarcomere طبيعي ، ويعود هيكل الميتوكوندريا إلى طبيعته.

3 مناقشة

Dox هو نوع من المضادات الحيوية البصل ، والتي لها خصائص طيف واسع مضاد للورم وتأثير قوي. ومع ذلك ، يمكن أن يسبب Dox سمية عضلة القلب الشديدة ، مثل عدم انتظام ضربات القلب المختلفة في المرحلة المبكرة من الدواء ، والاعتماد على الجرعة ، وفشل القلب الاحتقاني في المرحلة المتأخرة ، مما يحد من تطبيقه السريري. الآلية الرئيسية ل Dox التي تسبب سمية عضلة القلب هي إنتاج الجذور الحرة التفاعلية المفرطة للأكسجين التي تسبب تلف عضلة القلب. تقارب Dox مع أنسجة عضلة القلب أعلى بكثير من الأنسجة الأخرى. بعد دخول خلايا عضلة القلب ، يتحول Dox إلى شبه dox ، والذي يعمل على جزيئات الأكسجين لتحويلها إلى جذور حرة أنيون فائقة الأكسيد (Oxid) ، مصحوبة بإنتاج بيروكسيد الهيدروجين (H2O2). زاد محتوى MDA من Ol و H2O2 في مجموعة إصابات Haber-Weiss Dox بنسبة 25.8٪ مقارنة بالمجموعة الضابطة (P<0.01), and="" the="">جليكوسيدات سيستانش|,جليكوسيدات سيستانش1,جليكوسيدات سيستانشتم تخفيض المجموعة ، ومجموعة Vit E بنسبة 16.7٪ مقارنة بمجموعة إصابات Dox. , 17. 3%, 18. 6٪ و17. 3٪ (Fall V0.01) ، وكلها قريبة من المجموعة الضابطة (P>0.05). ينتج التفاعل أو تفاعل فنتون جذور الهيدروكسيل (OH • ). 0$ و OH • كمية كبيرة من التراكم يمكن أن تسبب بيروكسيد الدهون في الأنسجة وأغشية الخلايا وتسبب أضرارا للجزيئات البيولوجية الكبيرة.

في التجربة ، لوحظ أنه بعد 48 ساعة من الحقن داخل الصفاق من Dox (17.5 mg / kg) للفئران ، تم تقليل أنشطة SOD و Se-GSH-Px في عضلة القلب الفأر بشكل كبير ، وزاد محتوى منتج بيروكسيد الدهون MDA بشكل كبير. ارتفاع ، يزيد نشاط CPK في المصل. تحت المجهر الإلكتروني ، تضررت البنية الفائقة لعضلة القلب ، وتجلت في تورم واضح في الميتوكوندريا ، وتمزق الميتوكوندريا ، وتنكس الفجوة ، وتقليل كثافة المصفوفة ، وتوسع الشبكة الساركوبلازمية.

يمكن لجميع مجموعات الجرعات من GCs أن تزيد بشكل كبير من أنشطة إنزيمات إزالة الجذور الحرة SOD و Se-GSH-Px في عضلة القلب لدى الفئران المصابة ب Dox ، وتقلل من محتوى MDA وتقلل من إطلاق CPK. ويقترح ما يلي:جليكوسيدات سيستانش يمكن أن تقلل من أضرار بيروكسيد الدهون الناجمة عن دوكس عن طريق زيادة نشاط إنزيمات إزالة الجذور الحرة في الجسم. Cistanche glycosides ، مجموعات تحمي بشكل كبير البنية الفائقة لألياف عضلة القلب من تلف دوكس.تم اكتشافه في المختبر باستخدام تقنية تحليل التلألؤ الكيميائي الحديثة ووجد أنجليكوسيدات سيستانشيمكن القضاء عليها بشكل فعال. فقط جذور الأكسجين النشطة مثل OH • و H2O2 صحيحة. تأثير الكسح من العقدة مهم بشكل خاص "(2). يقترح أن جليكوسيدات Cistanche يمكن أن تزيل OR الناجم عن شبه dox في عضلة القلب ، وبالتالي مقاطعة التفاعل المتسلسل للجذور الحرة والعمل كمانع لسلسلة بيروكسيد الدهون.

في هذه التجربة ، تم استخدام Vit E كعنصر تحكم إيجابي. أظهرت النتائج أن Vit E له تأثير وقائي معين على تلف عضلة القلب الحاد الناجم عن Dox في الفئران. يمكن أن يقلل من محتوى MDA عضلة القلب ويزيد من أنشطة SOD و Se-GSH-Px. وفقا للأدبيات [13] ، فإن التقارير متسقة.

المكون الرئيسي ل جليكوسيدات سيستانشهو فينيثيلامين، وهيكله مشابه ل Vit E ، أي أنه يحتوي على مجموعة هيدروكسيل فينولية ومجموعة هيدروكسيل. لذلك ، هناك تكهنات بأن جليكوسيدات سيستانشيمكن أن توفر ذرات الهيدروجين على مجموعة الهيدروكسيل الفينولية من تركيبها الجزيئي إلى جذر الدهون (LOO -) ، الذي يحولها إلى هيدروبيروكسيد ليبو (LOOH) ، والذي يتحلل بعد ذلك إلى هيدروكسيل غير سام بواسطة GSH-Px. يمنع بيروكسيد الأحماض الدهنية غير المشبعة في البيوفيلم بواسطة الجذور الحرة ، وبالتالي تقليل تلف Dox إلى الخلايا العضلية القلبية. ولا تزال الآلية بحاجة إلى دراسة متعمقة.

مراجع:

[1] Baser RL, Green MD. أحد مضاعفات العلاج: استراتيجيات للوقاية من سمية القلب أنثراسيكلين [J ]. السرطان مداس Rer, 1993,19; 57.

[2] دوروشو جيه إتش. تأثير المضادات الحيوية أنثراسيكلين على تكوين الأكسجين الجذري في الفئران سمعت [J] السرطان ريس, 1983,43; 460.

[3] وانغ شياو وين، لي لينلين، مو هو ياتي، وآخرون. تأثير مضاد للأكسدة من Roxuanrong على أنسجة الفئران]· المجلة الصينية للعتاد الصيني الطبي ، 1998 ، 23 (9): 554-556.

[4] ماو شينمينغ، وانغ شياو وين، لي لينلين، وآخرون. التأثير الوقائي ل Rou Nu Rong Xi على نقص تروية عضلة القلب في الفئران □] ، الطب العشبي الصيني ، 1999 ، 30 (2): 118-120.

[5] لي لينلين، وانغ شياو وين، وانغ شيويفي، وآخرون. بيروكسيد مضاد للدهون وتأثير مضاد للإشعاع من إجمالي معجون رماد اللحم [J]. المجلة الصينية للمواد الصينية الطبية ، 1997 ، 22 (6): 364-367.

[6] زو غولين، غوي شينغ فين، تشونغ شياو لينغ، إلخ. طريقة تحديد SOD - تحسين طريقة الأكسدة الذاتية للبيروغالاول [J]. التقدم في الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية ، 1986 ، 4: 17 ،

[7] شيا ييمينغ، تشو ليانزين. تحديد نشاط الجلوتاثيون بيروكسيديز في الدم والأنسجة. الطريقة الأولى DTNB الطريقة المباشرة [J] ، أبحاث النظافة ، 1987 ، 16 (4): 29-32.

[8] تشن شونزي، جين يويو. مقارنة بين ثلاث طرق لتطوير لون بيروكسيد الدهون TBA. مجلة علوم المختبرات السريرية. 1984, 2(4); 8-10.

[9] ماكارت إم♦ جيربوت إل. تحسين طريقة ربط الصبغة الزرقاء coomassie مما يسمح بحساسية جيدة لبروتينات فاراس: التطبيق على السائل الدماغي الشوكي [J] ، Clin Chem Acta ، 1982,112: 93.

[10] شو شويون، بيان رويوان، تشن شيو، منهجية التجربة الدوائية [م]. الطبعة الثانية ، بكين: دار النشر الطبية الشعبية ، 1991.922.

[11] هاليويل ب ، جوتريدج JMC. الجذور الحرة في علم الأحياء والطب CM J. 2nd ed. مطبعة جامعة أكسفورد في نيويورك * 1989.543-550.

L12]وانغ شياو وين، جيانغ شياويان، إليا ييمينغ، وآخرون. مسح الجذور الحرة والآثار الوقائية على تلف الحمض النووي الناجم عن OH -[J]. المجلة الصيدلانية الصينية ، 2001 ، 36 (1): 29 -31.

[13] وو يولينغ ، شو قوانغيوان. دراسة تجريبية على السمية القلبية الحادة والتأثير الوقائي ل Vit E في الفئران التي يسببها الأدرياميسين[J]. مجلة جامعة داليان الطبية ، 1991 ، 13 (1): 22-27.