الكشف عن مؤشرات جديدة وأهداف التدخل المحتملة لأمراض الخلايا بودوسيت
Jun 13, 2024
وتنقسم هذه الدراسة إلى قسمين، البحوث السريرية والبحوث الحيوانية. الجزء البحثي السريري عبارة عن دراسة متعددة المراكز قامت بتحليل المعدل الإيجابي للأجسام المضادة للنيفرين في المرضى الذين يعانون من أمراض الكبيبات البالغة (بما في ذلك MCD، FSGS، MN، اعتلال الكلية المناعي A [IgAN]، والأجسام المضادة السيتوبلازمية المتعادلة [ANCA] والتهاب كبيبات الكلى والذئبة. التهاب الكلية [LN])، والأطفال الذين يعانون من المتلازمة الكلوية مجهول السبب (INS) والضوابط. ومن الجدير بالذكر أن البيانات الخاصة بالمرضى البالغين والأطفال تأتي بشكل رئيسي من أوروبا (ألمانيا وإيطاليا وفرنسا).
الجزء الخاص بالأبحاث على الحيوانات هو إنشاء نموذج فأر ذي صلة، وتحديدًا فئران ذكور من النوع البري BALB/c التي تلقت تحصينًا تحت الجلد باستخدام الفأر المؤتلف نيفرين ومساعد فرويند الكامل. تلقت فئران المجموعة الضابطة مساعد فرويند الكامل الممزوج بمحلول ملحي بالفوسفات.
بالطبع، استخدمت هذه الدراسة الترسيب المناعي بشكل مبتكر للكشف عن مضادات النيفرين. طرق الفحص السابقة، مثل Blot، ELISA، وما إلى ذلك، لا يمكن أن تحدد بدقة أو تحدد كمية الأجسام المضادة للنيفرين، ولكن طريقة الترسيب المناعي مختلفة. على وجه التحديد، تم تحديد حالة الأجسام المضادة للنيفرين عن طريق الترسيب المناعي باستخدام المجال الخارجي للنيفرين البشري المؤتلف (الأحماض الأمينية من A36 إلى L1052). تم تحضين البروتينات بالمصل البشري أو البلازما طوال الليل، ثم تمت إضافة البروتين G. تم جمع الرواسب المناعية، وإخضاعها للرحلان الكهربائي، وتم مسحها، وتحليلها بحثًا عن النيفرين باستخدام جسم مضاد مضاد للنيفرين (AF4269؛ أنظمة البحث والتطوير). تم تحليل العينات بطريقة عمياء، ولم يتم الكشف عن تشخيص المرض والبيانات السريرية إلا بعد تحديد حالة الأجسام المضادة للنيفرين. للحصول على قراءات كمية للأجسام المضادة للنيفرين، تم إنشاء اختبار هجين يشمل الترسيب المناعي والقياس الكمي للنيفرين المناعي. مثل هذا الاختبار يسمح بالكشف الأوضح والأكثر وضوحًا عن الأجسام المضادة للنيفرين.
1 المعلومات الأساسية
تم تضمين ما مجموعه 656 مشاركًا في هذه الدراسة، بما في ذلك 357 بالغًا مصابًا بمرض الكبيبات، و182 طفلًا مصابًا بمرض الكبيبات، و117 مجموعة مراقبة (67 بالغًا و50 طفلاً). وشملت الأمراض المحددة للمرضى الذين يعانون من أمراض الكبيبات MCD، FSGS، MN، اعتلال الكلية المناعي A (IgAN)، التهاب الكلية المرتبط بالأجسام المضادة السيتوبلازمية المضادة للعدلات (ANCA-GN)، التهاب الكلية الذئبي (LN)، والمتلازمة الكلوية مجهول السبب.
2 توزيع الأجسام المضادة للنيفرين في المرضى البالغين
من بين المرضى البالغين، تم العثور على 46 (44٪) من 105 مرضى MCD و 7 (9٪) من 74 مريضًا من مرضى FSGS الأساسيين كانوا إيجابيين بالنسبة للأجسام المضادة لـ Nephrin، في حين لم يكن هناك أي مرضى تقريبًا (ن أقل من أو يساوي 1) مع غيرهم من المرضى. كانت أمراض الكبيبات إيجابية بالنسبة للأجسام المضادة للنيفرين. إذا لم يتلق مرضى MCD أي علاج مثبط للمناعة، فإن المعدل الإيجابي للأجسام المضادة للنيفرين كان يصل إلى 69٪ (24/35)، وهو أعلى من مرضى MCD الذين تلقوا علاجًا مثبطًا للمناعة (36/59).
3 أطفال مرضى
في الأطفال الذين يعانون من المتلازمة الكلوية مجهول السبب (INS)، كانت النسبة الإجمالية للأجسام المضادة الإيجابية للنيفرين 52٪. في المجموعة الفرعية التي لم تتلقى العلاج المثبط للمناعة، كانت النسبة الإجمالية للأجسام المضادة الإيجابية للنيفرين مرتفعة حتى 90٪، بينما في الأطفال الأصحاء، كانت الأجسام المضادة للنيفرين سلبية تقريبًا، مع ظهور مريض واحد فقط نتائج إيجابية. ومن الجدير بالذكر أنه بما أن الأطفال نادرًا ما يخضعون لخزعة الكلى، فإن هذه البيانات لها أهمية توجيهية سريرية قوية.
4 العلاقة بين الفحص الإيجابي والخصائص السريرية
سواء في البالغين أو الأطفال، فإن المرضى الذين لديهم أجسام مضادة إيجابية لمضادات النيفرين لديهم نسبة أعلى من بروتين الكرياتينين في البول (UPR) أو نسبة الكرياتينين في ألبومين البول (UACR)، في حين أن المرضى الذين لديهم أجسام مضادة سلبية لمضادات النيفرين عادة ما يكون لديهم نسبة UACR أو UPCR من<0.3.
بالإضافة إلى ذلك، إذا تغير مستوى الأجسام المضادة لـ Nephrin بعد أن يتلقى المريض علاجًا فعالًا لتثبيط المناعة، فإن مستوى UACR الخاص بالمريض سيتغير أيضًا. على سبيل المثال، أظهر تقرير حالة لمريض أن مستويات الأجسام المضادة للنيفرين والبيلة البروتينية لدى المريض انتعشت بعد تلقي العلاج بالجلوكوكورتيكويدات والسيكلوسبورين A، بينما بعد تلقي ريتوكسيماب، استمرت مستويات الأجسام المضادة للنيفرين وUACR في الانخفاض وكانت قريبة من { {3}}. وبطبيعة الحال، هذه ليست حالة معزولة، والعديد من المرضى لديهم نتائج مماثلة. أظهر تحليل البيانات أن هناك علاقة قوية بين جميع مستويات الأجسام المضادة للنيفرين المقاسة ونسبة ألبومين البول إلى الكرياتينين (r=0.64).
ملخص الدراسات السريرية
بشكل عام، توجد الأجسام المضادة المضادة للنيفرين على نطاق واسع لدى البالغين MCD والأطفال ISN وهي مؤشرات حيوية فعالة للتنبؤ بالبول البروتيني لدى المرضى، ويمكن لعيار الأجسام المضادة المضادة للنيفرين توجيه الدواء السريري. لذلك، تعد الأجسام المضادة لـ Nephrin علامة بيولوجية تصنيفية جديدة لمرض الخلايا الرجلية ومعيارًا جديدًا للتصنيف المرضي، والذي يمكن استخدامه لمراقبة نشاط المرض، والتنبؤ بالتشخيص، وتوجيه العلاج.
1 نتائج خزعة الكلى والخصائص السريرية
تلقت فئران BALB/c من الذكور البرية تحصينًا تحت الجلد باستخدام الفأر المؤتلف Nephrin ومساعد Freund الكامل (مجموعة التدخل). تلقت فئران المجموعة الضابطة مساعد فرويند الكامل الممزوج بمحلول ملحي بالفوسفات. طورت فئران مجموعة التدخل المتلازمة الكلوية بسرعة بعد 3 أسابيع.
أظهرت الخزعات الكلوية لمجموعتي الفئران أنه على الرغم من عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعتين في فحص تلطيخ PAS، أظهر المجهر الإلكتروني محوًا واسع النطاق لعمليات القدم البودوسيت وعدم وجود رواسب كثيفة الإلكترون في فئران مجموعة التدخل، في حين لم يكن هناك ظاهرة مماثلة في المجموعة الضابطة. على وجه التحديد، أظهر وضع العلامات المناعية على IgG الفأري في فئران مجموعة التدخل أنه تم توطينه على وجه التحديد في الحجاب الحاجز بين مناطق انحسار عمليات القدم البودوسيت.
بالإضافة إلى ذلك، أظهرت فئران مجموعة التدخل إعادة توزيع النيفرين من الغشاء إلى السيتوبلازم، مع إيجابية IgG للفأر في نمط منقط دقيق، ومتمركز جزئيًا مع النيفرين، وعدم وجود تسلل للخلايا المناعية، أو انخفاض عدد الخلايا الرجلية، أو ترسب مكمل.
2 الآلية الجزيئية
لتوضيح ما إذا كانت الأجسام المضادة الذاتية المضادة للنيفرين لها تأثير مباشر على إشارات النيفرين والمسارات النهائية، أجرى الباحثون تحليلات بروتينية وبروتينية فسفورية على الكبيبات المعزولة من فئران التحكم. وأظهرت النتائج زيادة الفسفرة في Nphs1، وهي بقايا التيروزين المقابلة لـ Y1176 من النيفرين البشري.
من المعروف أن موقع الفسفرة هذا متورط في إشارات النيفرين، مما يؤدي إلى تجميع الأكتين، وإعادة تنظيم الهيكل الخلوي، والالتقام الخلوي للنيفرين. أظهرت البروتينات أنه في كبيبات فئران مجموعة التدخل، زادت مستويات البروتينات المحولة مثل ShcA (Shc1) والكلاثرين (Cltc) المشاركة في نقل النيفرين الداخلي، في حين تم تقليل تنظيم البروتين المرتبط بالحجاب الشق الأساسي بشكل كبير، وهو أمر سبب مهم للآفات بودوسيت. وهذا يعني أن الأجسام المضادة المضادة للنيفرين تسبب المتلازمة الكلوية، وفسفرة النيفرين، وإعادة ترتيب الخلايا على المستوى البروتيني، مما يؤدي إلى تغييرات في البنية التحتية نموذجية لـ MCD.
كيف يعالج Cistanche أمراض الكلى؟
سيستانشهو دواء عشبي صيني تقليدي يستخدم لعدة قرون لعلاج الحالات الصحية المختلفة، بما في ذلككليةمرض. وهو مشتق من السيقان المجففة منسيستانشdeserticolaوهو نبات موطنه صحاري الصين ومنغوليا. المكونات النشطة الرئيسية للcistanche هيفينيليثانويدجليكوسيدات, echinacoside، وcom.acteoside، والتي وجد أن لها آثار مفيدة علىكليةصحة.
يشير مرض الكلى، المعروف أيضًا باسم مرض الكلى، إلى حالة لا تعمل فيها الكلى بشكل صحيح. وهذا يمكن أن يؤدي إلى تراكم النفايات والسموم في الجسم، مما يؤدي إلى أعراض ومضاعفات مختلفة. قد يساعد سيستانش في علاج أمراض الكلى من خلال عدة آليات.
أولاً، وجد أن السيستانش له خصائص مدرة للبول، مما يعني أنه يمكن أن يزيد إنتاج البول ويساعد في التخلص من الفضلات من الجسم. وهذا يمكن أن يساعد في تخفيف العبء على الكلى ومنع تراكم السموم. من خلال تعزيز إدرار البول، قد يساعد سيستانش أيضًا في تقليل ارتفاع ضغط الدم، وهو أحد المضاعفات الشائعة لأمراض الكلى.
علاوة على ذلك، فقد ثبت أن السيستانش له تأثيرات مضادة للأكسدة. يلعب الإجهاد التأكسدي، الناتج عن عدم التوازن بين إنتاج الجذور الحرة ودفاعات الجسم المضادة للأكسدة، دورًا رئيسيًا في تطور مرض الكلى. تساعد على تحييد الجذور الحرة وتقليل الإجهاد التأكسدي، وبالتالي حماية الكلى من التلف. كانت جليكوسيدات الفينيليثانويد الموجودة في السيستانش فعالة بشكل خاص في التخلص من الجذور الحرة وتثبيط بيروكسيد الدهون.
بالإضافة إلى ذلك، وجد أن السيستانش له تأثيرات مضادة للالتهابات. الالتهاب هو عامل رئيسي آخر في تطور وتطور أمراض الكلى. تساعد خصائص Cistanche المضادة للالتهابات على تقليل إنتاج السيتوكينات المؤيدة للالتهابات وتمنع تنشيط المسارات الإلزامية للالتهاب، وبالتالي تخفيف الالتهاب في الكلى.
علاوة على ذلك، فقد ثبت أن السيستانش له تأثيرات مناعية. في أمراض الكلى، يمكن أن يكون الجهاز المناعي غير منظم، مما يؤدي إلى التهاب مفرط وتلف الأنسجة. يساعد Cistanche على تنظيم الاستجابة المناعية عن طريق تعديل إنتاج ونشاط الخلايا المناعية، مثل الخلايا التائية والبلاعم. يساعد هذا التنظيم المناعي على تقليل الالتهاب ومنع المزيد من الضرر للكلى.
علاوة على ذلك، تم العثور على سيستانش لتحسين وظائف الكلى من خلال تعزيز تجديد الأنابيب الكلوية بالخلايا. تلعب الخلايا الظهارية الأنبوبية الكلوية دورًا حاسمًا في ترشيح وإعادة امتصاص النفايات والإلكتروليتات. في أمراض الكلى، يمكن أن تتلف هذه الخلايا، مما يؤدي إلى تلف وظائف الكلى. تساعد قدرة Cistanche على تعزيز تجديد هذه الخلايا على استعادة وظائف الكلى المناسبة وتحسين صحة الكلى بشكل عام.
بالإضافة إلى هذه التأثيرات المباشرة على الكلى، وجد أن السيستانش له تأثيرات مفيدة على أعضاء وأنظمة أخرى في الجسم. هذا النهج الشامل للصحة مهم بشكل خاص في أمراض الكلى، حيث أن الحالة غالبًا ما تؤثر على أعضاء وأنظمة متعددة. وقد ثبت أن تشي له آثار وقائية على الكبد والقلب والأوعية الدموية، والتي تتأثر عادة بأمراض الكلى. من خلال تعزيز صحة هذه الأعضاء، يساعد cistanche على تحسين وظائف الكلى بشكل عام ومنع المزيد من المضاعفات.
في الختام، سيستانش هو دواء عشبي صيني تقليدي يستخدم لعدة قرون لعلاج أمراض الكلى. مكوناته النشطة لها تأثيرات مدرة للبول، ومضادات الأكسدة، ومضادة للالتهابات، ومعدلة للمناعة، وتجديدية، مما يساعد على تحسين وظائف الكلى وحماية الكلى من المزيد من الضرر. ، cistanche له آثار مفيدة على الأعضاء والأنظمة الأخرى، مما يجعله نهجا شاملا لعلاج أمراض الكلى.
