تحدد Exosomes البولية المسارات الالتهابية في إصابة الكلى الحادة المرتبطة بالفانكومايسين

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

Linda Awdishu 1، *، Amy Le 1، Jordan Amato 1، Vidhyut Jani 1، Soma Bal 2، Robert H. Mills 1، Marvic Carrillo-Terrazas 1، David J. Gonzalez 1، Ashita Tolwani 3، Anjali Acharya 4، Jorge Cerda 5، Melanie S. Joy 6،7، Paola Nicoletti 8، Etienne McDo 2، Sucheta Vaingankar 2، Ravindra Mehta 2، Satish P. Ramachandra Rao 9 وبالنيابة عن المحققين المباشرين †

1 مدرسة Skaggs للصيدلة والعلوم الصيدلانية ، جامعة كاليفورنيا ، سان دييغو ، كاليفورنيا 92093 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ a6 le@ucsd.edu (AL) ؛ jegilmor@ucsd.edu (JA) ، vgjani@ucsd.edu (VJ) ، rhmills@health.ucsd.edu (RHM) ؛ mac215@health.ucsd.edu (MC-T.) ؛ djgonzalez@ucsd.edu (DJG)

2 كلية الطب ، جامعة كاليفورنيا ، سان دييغو ، كاليفورنيا 92093 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ sobal@ucsd.edu (SB) ؛ emacedo@ucsd.edu (EM) ؛ svaingankar@health.ucsd.edu (SV) ، rmehta@ucsd.edu (جمهورية مقدونيا)

3 School of Medicine, University of Alabama, Birmingham, AL 35233, USA; atolwani@uab.edu

4 Albert Einstein College of Medicine, The Bronx, NY 10461, USA; anjali2526@gmail.com

5 كلية ألباني الطبية ، ألباني ، نيويورك 12208 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ jorge.cerda82@gmail.com

6 قسم أمراض الكلى وارتفاع ضغط الدم ، مدرسة Skaggs للصيدلة والأدوية ، Aurora ، CO 80045 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ MELANIE.JOY@cuanschutz.edu

7 كلية الطب ، جامعة كولورادو ، أورورا ، 80045 ، الولايات المتحدة الأمريكية

8 كلية ماونت سيناي للطب ، نيويورك ، نيويورك 10029 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ paola.nicoletti@mssm.edu

9 قسم الطب الخلوي والجزيئي ، النظام الطبي بجامعة ميشيغان ، آن أربور ، MI 48109 ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ satishpr@med.umich.edu

* المراسلات: lawdishu@ucsd.edu ؛ هاتف: بالإضافة إلى 858-534-3919

† يتم توفير عضوية المحققين المباشرين في الشكر والتقدير.

الملخص:

خلفية:يشيع استخدام الفانكومايسين كعلاج من الدرجة الأولى للكائنات إيجابية الجرام مثل المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين. الحادة التي يسببها فانكومايسينالكلىإصابةتم الإبلاغ عن (V-AKI) في ما يصل إلى 43 في المائة من المرضى ، خاصة في أولئك الذين لديهم تركيزات أعلى مستهدفة في الحوض الصغير. لا تزال الآلية الدقيقة للإصابة في البشر بعيدة المنال ، مع وجود أدلة حديثة موجهة نحو موت الخلايا المبرمج القريب. في هذه الدراسة ، قمنا بفحص محتويات البروتين في exosomes البولي في المرضى الذين يعانون من V-AKI لتوضيح المؤشرات الحيوية لآليات الإصابة والاستجابات المحتملة. الطريقة: تم تضمين عينات البول من المرضى الذين يعانون من V-AKI الذين تم تسجيلهم في دراسة DIRECT وعناصر تحكم صحية متطابقة من UAB-UCSD O'Brien CenterBiorepository في التحليل. تم استخراج Exosomes باستخدام مبدأ استبعاد المذيبات والترسيب الناجم عن البولي إيثيلين غليكول. تم تحديد هوية البروتين والقياس الكمي عن طريق قياس الطيف الكتلي السائل اللوني السائل (LC / MS). كان متوسط ​​ذروة الكرياتينين في الدم 3.7 ± 1.4 مجم / ديسيلتر والوقتالكلىإصابةكان 4. 0 ± 3. 0 يوم. أظهر 90 في المائة من المرضى تعافيًا جزئيًا عند الخروج من المستشفى. اختبر 33 في المائة من الشفاء التام بحلول اليوم 28. كشفت التحليلات البروتينية على خمس عينات من V-AKI و 7 عينات تحكم عن 2009 بروتينات في جميع العينات و 251 بروتينًا مرتبطة بشكل كبير بـ V-AKI (درجة Pi> 1). كانت البروتينات التمييزية الأعلى هي C3 ، المكمل C4 ، بروتين رابط الجالكتين -3- ، الفيبرينوجين ، ألفا -2 ماكروغلوبولين ، الغلوبولين المناعي الثقيل مو ، و serotransferrin.

استنتاج:تكشف exosomes البولية عن التنظيم الأعلى للبروتينات الالتهابية بعد الإصابة السامة للكلية في V-AKI. مزيد من الدراسات ضرورية لعينة كبيرة من المرضى لتأكيد هذه النتائج لتوضيح الآليات الفيزيولوجية المرضية والتحقق من صحة المؤشرات الحيوية للإصابة المحتملة.

الكلمات الدالة:فانكومايسين. AKI. السمية الكلوية. exosomes. التهاب. مديح؛ مسارات المناعة

سيستانش هيربايمكن أن يعالج إصابة الكلى

تشنغدو Wecistanche لديهاcistancheمنتجات لعلاج اصابات الكلى

1 المقدمة

فانكومايسين هو مضاد حيوي ببتيد جليكوبتيد يستخدم لعلاج عدوى المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين في المرضى المصابين بأمراض خطيرة. تعتبر السمية الكلوية حدثًا ضارًا خطيرًا يؤثر على 10-20 في المائة من المرضى المعالجين ويرتبط بزيادة مدة الإقامة في المستشفى ، و 30- معدلات إعادة الدخول إلى المستشفى النهاري ، وجميع الأسباب 30- الوفيات النهارية [1]. الفانكومايسين الحادة المرتبطةالكلىإصابة(V-AKI) مرتبط بالجرعة ويبدأ العلاج من 4 إلى 17 يومًا. على الرغم من أن V-AKI قد تم الاعتراف به منذ فترة طويلة باعتباره أحد الآثار الجانبية الرئيسية للفانكومايسين ، إلا أن آليات السمية الكلوية ظلت غير مفهومة جيدًا. إن فهم الاستجابات الخلوية والجزيئية التي يطلقها الفانكومايسين له أهمية رئيسية لفهم الآليات وتطوير الاستراتيجيات لتقليل مخاطر V AKI والتكاليف المرتبطة به مع زيادة فعاليته في علاج العدوى. يبدو أن الاستجابة الكلوية السامة ناتجة عن التأثير المباشر للفانكومايسين على ظهارة الأنابيب القريبة [2]. حتى الآن ، تم تطبيق مناهج الجينوميات السمية القياسية لدراسة V-AKI في نماذج الفئران ، ولكن الدراسات البشرية تفتقر إلى [3-5]. تظهر النماذج الحيوانية أن إعطاء الفانكومايسين يسبب الإجهاد التأكسدي الذي قد يساهم في إصابة الكلى [6،7]. تتمثل إحدى الآليات المحتملة للإصابة في محاصرة الدواء في الخلايا الأنبوبية القريبة حيث يتم نقله بواسطة ناقلات الكاتيون العضوي (OCTs) عبر الغشاء الجانبي الجانبي وإلى الخلية الأنبوبية القريبة ، ولكن لم يتم تحديد آليات نقل التدفق النشط [6) –8].

Exosomes هي حويصلات ميكروية مشتقة من الغشاء تلعب دورًا رئيسيًا في التواصل بين الخلايا وتوصيل البروتين / الحمض النووي وتوفر إمكانية اكتشاف مؤشرات حيوية جديدة للمساعدة في التشخيص السريري لـالكلىإصابة[9]. لقد تم اقتراح أن الإكسوسومات تتمتع بقدر أكبر من الخصوصية والحساسية لاكتشاف المرقم الحيوي ، ويعزى ذلك إلى ثبات العينات مقارنة بالنهج النسبي والبروتيني باستخدام عينات المصل والبول التقليدية [9]. في هذه الدراسة ، اختبرنا الفرضية القائلة بأن التغيير في البروتينات الخارجية البولية استجابةً لـ V-AKI يساعد في توضيح آليات الإصابة وتحديد المؤشرات الحيوية الجديدة بين المرضى الذين يعانون من إصابة كلوية مؤكدة ناجمة عن تعاطي المخدرات. لهذا الغرض ، قمنا بتوظيف أشخاص من دراسة اتحاد الإصابات الكلوية المستحثة بالأدوية (DIRECT) ، وهي مجموعة دولية متعددة المراكز من الحالات التي تم الفصل فيها سريريًا للحالات الحادة الناجمة عن الأدوية.الكلىإصابةوالضوابط المستندة إلى السكان لفحص تنبؤات علم الصيدلة الجيني باستخدام ارتباط على مستوى الجينوم. تم وصف تفاصيل الدراسة المباشرة في قسم الأساليب ومنشور حديث من مختبرنا [10].

2. النتائج

تم تضمين عينات بول من 22 شخصًا و 10 حالات V-AKI و 12 عنصر تحكم في التحليلات. كانت التركيبة السكانية للمريض متشابهة بين حالات V-AKI والضوابط وتم تلخيصها في الجدول 1. كما هو متوقع ، كان انتشار ارتفاع ضغط الدم والسكري وفشل القلب أعلى في حالات V-AKI مقارنةً بالضوابط (الجدول 1).

طورت جميع حالات V-AKI المرحلة الثانية من AKI أو أعلى على النحو المحدد في معايير تحسين النتائج العالمية لأمراض الكلى (KDIGO) (الشكل 1) [11]. حدثت بداية V-AKI بعد 4. 0 ± 3. 0 أيام بعد بدء الفانكومايسين. يوضح الشكل 1 المسار الزمني للتغييرات في كرياتينين المصل (Scr) بعد دخول المستشفى للخروج من المستشفى ، وبعد ذلك.

الشكل 1. التغييرات في مصل الكرياتينين على مسار V-AKI. يصور هذا الرقم التغيرات في كرياتينين المصل في 10 حالات على مدار العلاج الحاد المرتبط بالفانكومايسينالكلىإصابةمن دخول المستشفى حتى اليوم 90 بعد الإصابة. تتوافق النقاط الزمنية مع النقاط الزمنية لدراسة الإصابات الكلوية المستحثة بالأدوية (DIRECT). الاختصارات: SCr=كرياتينين المصل ، المستشفى=دخول المستشفى ، Predrug=قبل التعرض للعقار ، DIRI=استيفاء تعريف الإصابة الكلوية التي يسببها الدواء ، DrugDC {8} } إيقاف الدواء أو تقليل الجرعة ، Nadir Scr=أدنى مصل بعد V-AKI ، قرص المستشفى=الخروج من المستشفى

تشمل عوامل الخطر الأساسية في حالات V-AKI تعفن الدم (30 في المائة) ، وأمراض القلب (30 في المائة) ، ومرض السكري (30 في المائة) ، وفقر الدم (20 في المائة) ، والتعرض للأشعة (10 في المائة) ، وأمراض الكبد (10 في المائة) ، و نقص ألبومين الدم (10 بالمائة) (الشكل 2).

على الأكثر ، تلقت حالات V-AKI نوبات جرعات من ثلاثة أدوية من الفانكومايسين. تراوحت جرعات الفانكومايسين اليومية من 1 0 00 إلى 4000 مجم. يوضح الشكل 3 متوسط ​​(المدى الربيعي (IQR)) عدد الأيام التي قضاها في كل حلقة جرعات. تم رفع متوسط ​​(الانحراف المعياري (SD)) تركيزات حوض الفانكومايسين في البلازما المرتبطة بحلقات الجرعات 1-3 عند 20.6 ± 8.1 ، 29.6 ± 16.3 ، 38.0 ± 13 مجم / لتر ، على التوالي. ومع ذلك ، فإن الاختلاف في التركيزات بين كل حلقة لم يكن ذا دلالة إحصائية (الحلقة 1 مقابل 2 ص=0. 5 ، الحلقة 2 مقابل 3 ص=0. 41)

تم تلخيص بيانات النتائج الأخرى في الجدول 2. نظرًا لشدة الإصابة ، احتاج 20 بالمائة من المرضى إلى علاج بديل كلوي. كان معدل الوفيات داخل المستشفى 10 بالمائة. عند الخروج من المستشفى ، لم يتعاف 90 بالمائة من المرضى من V-AKI. ستة مرضى تم قياس سكر الدم لديهم في اليوم 28 بعد الإصابة وأربعة في اليوم 90. بحلول اليوم 28 ، كان اثنان من ستة (33 بالمائة) مرضى مصابين بمرض AKD ولكن لم يكن أي من أربعة مرضى متبقين مصابًا بمرض AKD بحلول اليوم 90.الكلىأجريت الخزعات في 20 بالمائة من حالات V-AKI (الجدول 2).

احتوت العينات الـ 12 التي تم تأهيلها للتحليلات بعد فرض المرشح لمطابقة الببتيدات مع أطيافها المماثلة ، على إجمالي 2009 بروتينات تم تحليل هذه البروتينات بشكل أكبر. أولاً ، تم إجراء تحليل إحداثيات رئيسي (PCoA) لمقارنة البروتين الكلي لكل عينة. كشف هذا التحليل عن فصل كبير (PERMANOVA p-value=0. 037) بين AKI وعينات التحكم (الشكل 4) ، مع تلخيص النمط الظاهري على مستوى النظام على مستوى البروتين الخارجي أيضًا ، وبالتالي زيادة ثقتنا في مجموعات البيانات هذه . تم تصنيف قوة الارتباط بين كل بروتين وحالة V-AKI باستخدام مقياس قيمة pi ، والذي يجمع أهمية قيمة p مع تغيير أضعاف [12].

الشكل 4. يميز التركيب البروتيني Exosomes البولي لمرضى V-AKI وعناصر التحكم. (أ) الرئيسي ينسق تحليل عينة البروتينات. تم استخدام مقياس المسافة Bray-Curtis لحساب الاختلافات بين عينة البروتين ويظهر مخطط الإحداثيات الرئيسية. لوحظ الفصل على طول المحورين 1 و 3 بين عينات AKI (الأحمر) وعينات التحكم (الأزرق). (ب) Boxplot يلخص مسافة Bray-Curtis بين عينات التحكم وعينات AKI. تم اختبار الفصل الإحصائي بين عينات AKI وعينات التحكم الموضحة في (A) باستخدام تحليل التباديل لاختبار التباين (PERMANOVA). يتم عرض Boxplots تلخيصًا للنتائج عند مقارنة مسافات التحكم أو عينات AKI للتحكم في العينات.

بعد ذلك ، أسفرت المقارنات الثنائية بين عينات V-AKI وعينات التحكم عن 42 بروتينًا مرتبطة بشكل كبير بالنمط الظاهري لـ AKI و 26 بروتينًا مرتبطة بالنمط الظاهري للتحكم (درجة Pi> 1) (الجدول الإضافي S1). ويرد في الشكل 5 أ مؤامرة بركان توضح الأهمية وتغيير الطية المرتبط بكل بروتين. كانت البروتينات التمييزية الأعلى لحالات V-AKI هي الفيبرينوجين ، والمكمل C3 ، والمكمل C4 ، وبروتين ربط الجالكتين -3- ، وغلوبولين ألفا -2 ، والغلوبولين المناعي الثقيل مو ، وسيروترافرين (الشكل 5 ب). تم إجراء تحليل إثراء مجموعة الجينات بين البروتينات المهمة لتحديد فئات البروتينات التي تم تغييرها في مرضى V-AKI وتم تلخيص النتائج في الجدول التكميلي S1. تبين أن العديد من البروتينات المرتبطة بالنمط الظاهري لـ AKI لها وظائف مرتبطة بالالتهاب و / أو التوسط في النمط الظاهري الالتهابي. لاختبار ما إذا كانت هذه التغييرات البروتينية قد تكون مرتبطة بالتغيرات في إشارات السيتوكينات الأساسية ، تم إجراء استدلال خلوي ، مما يشير إلى وجود علاقة قوية بين البروتينات المرتبطة بـ AKI والسيتوكينات IL10 و IL6 و TNF. احتوت هذه السيتوكينات على 2.8 و 2.3 و 2. 1- أضعاف عدد الوصلات بالبروتينات المرتبطة بـ AKI مقارنة بالبروتينات المرتبطة بالتحكم ، على التوالي ، كما تم تلخيصه في الشكل 5C. أظهرت شبكات تفاعل البروتين والبروتين للبروتينات المرتبطة بـ AKI والسيتوكينات المستنبطة في الغالب اتصالات مسببة للالتهابات بين البروتينات المرتبطة بـ AKI كما تم تلخيصها في الشكل 5 د.

الشكل 5. ارتباطات مستوى البروتين بـ V-AKI. (أ) مؤامرة بركان تعرض أهمية تغيير الطية واختبار t لكل بروتين إلى حالة V-AKI. تظهر أفضل 10 بروتينات مرتبطة بـ AKI وحالة التحكم باللونين الأزرق والأحمر على التوالي. تظهر البروتينات الأخرى المرتبطة بناءً على درجة Pi> 1 باللون الأصفر. (ب) تم حساب درجة Pi ، والتي تمثل أهمية كل من تغيير الطية وأهمية اختبار t لكل بروتين ويتم رسم البروتينات ذات الارتباطات الأقوى. (ج) Topcytokines المرتبطة بـ AKI أو بروتينات التحكم. تم اتباع نهج الاستدلال الخلوي المستند إلى الشبكة ويتم عرض السيتوكينات التي تُظهر أقوى درجات الإثراء تجاه البروتينات المرتبطة بـ AKI أو التحكم. تمثل الأشرطة الحمراء السيتوكينات المرتبطة بالبروتينات المرتبطة بـ AKI ، وتمثل الأشرطة الزرقاء السيتوكينات المرتبطة بالبروتينات المرتبطة بالتحكم. (د) شبكة تفاعل البروتين البروتين للبروتينات المرتبطة بـ AKI والسيتوكينات المستنبطة المستنتجة من AKI. يتم تلوين الحافة الخارجية للعقد البروتينية اعتمادًا على ارتباطات السيتوكينات المؤيدة أو المضادة للالتهاب. يمثل حجم كل عقدة قوة الارتباط الإحصائي لكل بروتين لحالة AKI.

Cistanche tubulosaيمكن أن يعالج إصابة الكلى

3. مناقشة

أبلغنا عن نهج جديد لاستخدام exosomes البولية لإبلاغ الآليات الفيزيولوجية المرضية المشاركة في المخدرات التي يسببهاالكلىإصابةباستخدام الفانكومايسين كمادة سامة كلوية نموذجية. تتمثل إحدى نقاط القوة في هذه الدراسة في دمج بيانات جيدة التوصيف على مستوى المريض من دراسة DIRECT [10] التي تم تطويرها لتوضيح الآليات بما في ذلك الجينوميات الناتجة عن الأدوية.الكلىإصابة. تعرض الأشخاص الذين يعانون من المرحلة 2 أو أعلى من القصور الكلوي الحاد لعوامل الخطر التقليدية في الأساس. كان لدى جميع الأشخاص الخاضعين للدراسة تراكيز مرتفعة بشكل ملحوظ من الفانكومايسين في البلازما على الرغم من تلقي جرعات يومية أقل من عتبة السمية الكلوية المقبولة عمومًا والتي تبلغ 4 جم يوميًا [13]. لم يتعاف العديد من الأشخاص تمامًا من V-AKI عند الخروج من المستشفى وكانوا يعانون من مرض الكلى الحاد للشهر التالي للإصابة. كما هو متوقع ، تلقى عدد قليل من المرضى خزعة الكلى.

أظهرت بروتينات الجسيمات الخارجية البولية / الحويصلة خارج الخلية (EV) أن البروتينات التمييزية المستهدفة لحالات V-AKI تشتمل على مكمل C3 ومكمل C4 وجالكتين -3- وبروتين رابط فيبرينوجين وألفا -2 ماكروغلوبولين وغلوبولين مناعي ثابت مو ، و serotransferrin. تُعلم نتائج هذه الجسيمات الخارجية آليات الإصابة على المستوى تحت الخلوي / فوق الجزيئي لـ V-AKI ومن المحتمل أن تكون بمثابة مؤشرات حيوية على طول السلسلة المتصلة لعملية المرض التي يسببها الدواء.

تلعب Exosomes الموجودة في الدم والبول دورًا مهمًا في الاتصال بين الخلايا والتخثر وإدارة النفايات [14]. بعد السموم الحادة المرتبطةالكلىإصابة، قد تطلق exosomes من الخلايا الظهارية الأنبوبية إشارات إصابة لتجنيد تسلل البلاعم وتعزيز الالتهاب الأنبوبي الخلالي [15]. لقد استنتجنا أن محتويات البروتين في exosomes ستختلف بين حالات V-AKI والضوابط الصحية. تم اختلال مائتين وخمسين بروتينًا في V-AKI ، ويبدو أن هذه البروتينات متورطة في الغالب في مسارات الالتهاب والتخثر. من بين هذه البروتينات البالغ عددها 251 ، أظهر تحليلنا أن مكمل C3 ، ومكمل C4 ، وبروتين رابط الجالكتين -3- ، والفيبرينوجين ، و macroglobulin -2 ألفا ، والغلوبولين المناعي الثقيل مو ، وسيروترافرين كانت مرتبطة بشكل كبير بحالات V-AKI.

استنادًا إلى نتائجنا التي تفيد بأن C3 و C4 كانا من بين البروتينات الخارجية المميزة لـ V-AKI ، نقترح أن تنشيط نظام مكمل متورط في الإصابة الأنبوبية الكلوية التي يسببها الفانكومايسين. هذا أيضًا يتفق جيدًا مع الأدبيات المنشورة بأن تنشيط النظام التكميلي يلعب دورًا في التهاب كبيبات الكلى المعقد المناعي ومجموعة متنوعة من أمراض الكلى [16]. تم ربط تلف الكلى الناجم عن التنشيط التكميلي في القصور الكلوي الحاد بسبب نقص التروية أو التعرض للسموم الكلوية بالأحداث الالتهابية الجهازية التي تسبب وتساهم في إصابة الأعضاء البعيدة ووفيات المرضى [17]. في نماذج الإصابة بنقص التروية - ضخه (IR) ، ينتج عن نقص الأكسجة ونضوب ATP وتلف الميتوكوندريا توليد جذور أكسجين حرة عند إعادة التروية [18]. تعمل السيتوكينات والكيموكينات والتفعيل التكميلي على تضخيم الالتهاب ، مما يؤدي إلى إصابة أنبوبية حادة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الفئران التي تعاني من نقص في مستقبلات C3a و C5a محمية من إصابة الأشعة تحت الحمراء [19،20]. لقد ثبت أن إصابة الأشعة تحت الحمراء تعمل على تنظيم الإنتاج المحلي للمكونات التكميلية بواسطةالكلىالخلايا البطانية والأنبوبية [16،21]. حددت العديد من الدراسات التي أجريت على النماذج الحيوانية والأشخاص البشريين ترسبًا متزايدًا لمنتجات البروتين التكميلية مثل C3 و C4 على طول الغشاء القاعدي الأنبوبي بعد الصدمة أو الإصابة فيالكلى. لم يتم العثور على هذه المستويات المتزايدة من الترسبات بشكل ملحوظ في المنطقة المحيطة بالنبيبات أو الكبيبات ، ولكنها تتركز بشكل كبير في الغشاء الأنبوبي ، كما هو واضح في خزعات من البشر والحيوان نموذج الكلى [17]. يمكن أن تنقل Exosomes و EVs مكونات تكملة الدورة الدموية عندما يكون التنشيط التكميلي غير منظم [22 ، 23]. أكدت العديد من التجارب الخلوية والملاحظات السريرية أن المركبات الكهربائية التي تم إطلاقها تحمل البروتينات المكملة وتعديلها ، وفي نفس الوقت ، فإن إنتاجها في ظل حالة التهابية قادر أيضًا على التأثير على عدد حويصلات الدورة الدموية [23]. يؤدي هذا الترابط بين العمليتين إلى استنتاج مفاده أن المركبات الكهربائية تُظهر إمكانية كونها مصادر للعلامات الحيوية وأهدافها وعوامل توصيل علاجية تجاه المركبات التكميلية والمُعدلة للمناعة التي لها صلة وثيقة بنطاق آليات الالتهاب في القصور الكلوي الحاد. يوضح اكتشافنا أن عينات V-AKI مقارنة بالضوابط الصحية ، توضح دور الاستجابات المناعية في السمية المباشرة للفانكومايسين في الخلايا الأنبوبية للكلى. بالإضافة إلى كل محتوى البروتين أعلاه ، فإن exosomes / EVs المشتقة من البول تمثل أيضًا مؤشرات حيوية غير غازية محتملة كبدائل لخزعة الكلى للكشف والإبلاغ عن دور النظام التكميلي في الأدوية التي يسببهاالكلىإصابة.

على الرغم من أن العديد من الدراسات السابقة (انظر الجمل القليلة التالية لمراجع محددة) قد ركزت على دور الجالكتين -3 (غال -3) فيالكلىإصابة، هناك القليل من البيانات حول بروتين ربط الجالكتين -3 (غال -3- بي بي). يتم التعبير عن Gal -3 في الأنابيب المجمعة للكلية ووظائفها لتعزيز تكوّن الكلية ، وتعديل تفاعلات الخلايا الخلوية والمصفوفة الخلوية ، وتنظيم الالتهاب [24-26]. هندرسون وآخرون. راجع دور Gal -3 في الالتهاب ووجد أن Gal -3 هو مكون رئيسي في الالتهاب المزمن وفي حالة تكرار إصابة الأنسجة. يسهل "عزل" إصابة الأنسجة ، مما يؤخر انتشار الإصابة [27]. بالإضافة إلى ذلك ، Nishiyama et al. أظهر في الفئران المصابة بنقص تروية AKI أن Gal -3 mRNA قد تم تنظيمه ، وأظهرت عملية إعادة التروية التالية ، الكيمياء النسيجية المناعية زيادة غال -3 عبر مقاطع النيفرون [25]. تسوتشياما وآخرون وجد أن إعطاء غال -3 في الفئران المصابة بالتهاب الكلية المصلي السام للكلية أدى إلى انخفاض في إفراز البروتين في البول ، وتكوين الهلال ، وانخفاض تسلل البلاعم إلى الكبيبات [28]. يشير هذا إلى أنه بعد الإصابة الإقفارية أو الإصابة بوساطة المناعة ، يلعب جال -3 دورًا في التجدد. بصفته الشريك المتعارف عليه لـ Gal -3 ، فإن الدور الأساسي لـ Gal -3- bp ، وسبب تنظيمه في الإصابة بالتسمم الكلوي بسبب الفانكومايسين وعوامل أخرى ، سيكون التركيز الأساسي في التحقيقات المستقبلية.

وجدت دراستنا أيضًا أن جميع الوحدات الفرعية الثلاثة من الفيبرينوجين غير منظمة ، في توافق جيد مع البيانات المنشورة سابقًا. الفيبرينوجين هو جزيء بلازما ثنائي القطب قابل للذوبان ويتكون كل ثنائي من ثلاثة ببتيدات: ألفا وبيتا وغاما [29]. يلعب دورًا رئيسيًا في الإرقاء والتخثر ولكن ثبت أيضًا أنه مهم في تنظيم الحالات الالتهابية التي تتوسطها [30-32]. أجاي وآخرون. أظهر أن توافر الفيبرينوجين مهم لوظيفة الكلى ، والتهاب ، والبقاء على قيد الحياة [33]. علاوة على ذلك ، قد يكون للفيبرينوجين تأثير مضاد للالتصاق على الخلايا الظهارية في الكلى والذي قد يكون مفيدًا من خلال المساعدة في منع انسداد الأنبوب [34]. يزداد الفيبرينوجين بشكل ملحوظ وينظم في القصور الكلوي الحاد وقد تم تقييمه مسبقًا كواسم حيوي محتمل للكشف المبكر عن القصور الكلوي الحاد [29]. درس هوفمان وزملاؤه التغيير في الفيبرينوجين بعد نقص التروية / ضخه وإعطاء سيسبلاتين في الفئران ، وتم إعادة تنظيم mRNA بعد 30 دقيقة من إصابة الأشعة تحت الحمراء الثنائية ووصل إلى ذروته في 48-72 ساعة ، بينما في إعطاء سيسبلاتين ، كان تعبير الرنا المرسال عن الفيبرينوجين تم الكشف عنها في 24 ساعة [29]. تم اكتشاف الفيبرينوجين البولي في وقت مبكر من 3 ساعات بعد إصابة نقص تروية ضخه و 24 ساعة بعد إعطاء سيسبلاتين المقابلة مع زيادات كبيرة فيالكلىإصابةالجزيء 1 (كيم -1) [29].

فوائد Cistanche: يمكن علاجهاإصابة في الكلى

من الناحية التاريخية ، تم قبول آليتين مختلفتين فيزيولوجية مرضية لـ V-AKI بشكل عام ، النخر الأنبوبي الحاد من التأثيرات السمية المباشرة والتهاب الكلية الخلالي الحاد. تخضع الظهارة الأنبوبية الدانية الكلوية لفقدان سلامة الهيكل الخلوي والنخر والاستماتة في نخر أنبوبي حاد [35]. تطلق الخلايا الميتة جزيئات تعمل على تنظيم جهاز المناعة الفطري مما يؤدي إلى التهاب وتسريع الإصابة الأنبوبية [35]. في الدراسة الحالية ، أظهرنا علامات الالتهاب في EVs البولية لمرضى V-AKI. بالإضافة إلى ذلك ، وجدنا علاقة مسببة للالتهابات بين السيتوكينات IL10 و IL6 و TNF وأعلى بروتينات تمييز AKI لدينا. مجتمعة ، تشير هذه البيانات إلى أن الفيزيولوجيا المرضية لـ V-AKI هي واحدة من السمية الأنبوبية مع زيادة تنظيم الالتهاب خلال فترة 24-72 ساعة بعد الإصابة.

وهناك العديد من القيود المفروضة على دراستنا. يحد حجم العينة الصغير المكون من 22 مريضًا من الذكور وغالبيتهم من القوقاز من قابلية تعميم نتائجنا على الأجناس والأعراق والأعراق الأخرى. كان القيد الثاني لدراستنا هو أن العينة الخارجية البولية لكل مريض تحتوي على كميات متفاوتة من البروتين الكلي ، مما يجعل قياس بروتينات معينة أمرًا صعبًا ، خاصة بالنسبة للكميات المطلقة الأقل. في حين أن هذا ليس بالضرورة الحد من هذه الدراسة في حد ذاتها ، نظرًا لأن قدرة كل فرد على حزم البروتينات في الخارج في البول متغيرة بشكل طبيعي ، فإن الكميات المنخفضة من البروتينات لدى بعض الأفراد تحد من قدرتنا على إجراء مزيد من التحليلات واستخلاص استنتاجات ذات مغزى قابلة للتعميم على عدد أكبر من السكان. القيد الثالث هو عينة النقطة الزمنية المفردة التي تحد من فهمنا للتغيرات الخلوية التي تحدث في مراحل مختلفة من سلسلة AKI المستمرة ، على سبيل المثال ، مرحلة الإصابة الفورية ، ومرحلة الإصلاح ، إلخ. التغيرات ، الإجهاد التأكسدي الناجم عن تراكم الأدوية ، وانتظام مسارات المناعة في الإصلاح. شملت الدراسة الحالية المرضى على النحو المحدد بواسطة عتبات Scr. مصل الكرياتينين هو علامة حيوية وظيفية غير كاملة في الكلى لأن الارتفاعات في Scr غالبًا ما تتخلف عن الإصابة [36]. هذا يحد من حساسية ونوعية Scr للكشف المبكرالكلىإصابة[36] ، وقد ظهرت دراسات تحددالكلىإصابةالمؤشرات الحيوية مثلالكلى إصابةالجزيء 1 (KIM1) وليبوكالين المرتبط بالجيلاتيناز العدلات (NGAL) للكشف المبكر عن السمية الكلوية [37،38]. كما ورد سابقًا ، فإن المؤشرات الحيوية لديها القدرة على اكتشاف المستويات العلنية وشبه السريرية من الأدوية التي يسببها الدواءالكلىإصابة[39,40].

4. المواد والطرق

4.1 اختيار المريض

تم تضمين عينات بول من 10 مرضى مصابين بـ V-AKI ، والذين تم تسجيلهم في الدراسة المباشرة [10] و 12 عينة بول صحية من UAB-UCSD O'Brien Center Biorepository في التحليل. تمت مطابقة المواد الضابطة حسب الجنس والعرق والعمر مع موضوعات الدراسة ولم يكن لديهم أي تعرض للفانكومايسين أو معروفالكلىإصابة. دراسة DIRECT هي دراسة دولية تبحث في تنبؤات علم الوراثة الدوائية التي يسببها الدواءالكلىإصابةباستخدام دراسة الارتباط على مستوى الجينوم للحالات والضوابط السكانية [1 0]. تمت الموافقة على الدراسة المباشرة من قبل مجلس البحث المؤسسي (IRB # 121651) وتم الحصول على موافقة مستنيرة مكتوبة من جميع المشاركين قبل التسجيل والتي تضمنت توفير استخدام العينات المخزنة للتحليلات المستقبلية. تم تعريف AKI في DIRECT على أنه انخفاض مفاجئ في وظائف الكلى تم إثباته بواسطة أي من المعايير التالية: (1) الزيادة المطلقة في الكرياتينين في الدم (Scr) (أكبر من أو يساوي 0.3 مجم / ديسيلتر أو أكبر من أو يساوي 26.4 ميكرو مول / L) (في غضون 48- نافذة زمنية) من قيمة Scr المرجعية ، (2) زيادة النسبة المئوية في Scr أكبر من أو يساوي 50 بالمائة (1.5 ضعفًا من المرجع) خلال سبعة أيام ، (3) انخفاض في البول الإخراج (قلة البول الموثقة<0.5 ml/kg/h="" for="">6 ح) على الرغم من الإنعاش الملائم بالسوائل عند الاقتضاء ، (4) النقص المطلق في Scr أكبر من أو يساوي 0. 3 مجم / ديسيلتر أو أكبر من أو يساوي 26.4 ميكرولتر / لتر (ضمن 48- h نافذة زمنية) من Scr المرجعي ، و (5) انخفاض نسبي في Scr أكبر من أو يساوي 50 بالمائة (1.5 ضعفًا من المرجع) خلال سبعة أيام. تم تسجيل المرضى الذين يعانون من المرحلة 2 من AKI أو أعلى بعد التعرض للفانكومايسين في الدراسة. تم جمع البيانات السريرية بما في ذلك التركيبة السكانية والتاريخ الطبي ونتائج الفحص البدني والعلامات الحيوية وكيمياء الدم والبول ونتائج الخزعة وبيانات جرعات الأدوية في النقاط الزمنية التالية: (1) دخول المستشفى ، (2) بدء الفانكومايسين ، ( 3) ذروة الإصابة ، (4) إيقاف الدواء أو تقليل الجرعة ، (5) حل الإصابة ، (6) الخروج من المستشفى ، (7) 28 يومًا - و (8) 90 يومًا بعد الإصابة. تم تعريف حلقة جرعات الفانكومايسين على أنها تغيير في الجرعة أو التردد. يُعرَّف مرض الكلى الحاد (AKD) بأنه استمرار المرحلة 1 من القصور الكلوي الحاد أو أكبر من أو يساوي 7 أيام بعد التعرض [41]. تم تصنيف المرضى المصابين بمرض AKD عند الخروج من المستشفى إذا استمرت المرحلة 1 أو أكبر من AKI وكان الوقت من التعرض للخروج من المستشفى أكبر من سبعة أيام. تم الحصول على عينات من البول والدم الكامل من جميع المشاركين. تم الفصل في جميع حالات V-AKI من قبل اثنين من أطباء الكلى المستقلين (EM ، JC ، RL) لتحديد السببية. سبق نشر وصف كامل للطرق [10].

4.2 تحضير Exosome وجمع البيانات البروتينية

تم جمع عينات من البول والدم من المشاركين في الدراسة المباشرة وتم تجميد العينات عند درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل تحضير الجسيمات الخارجية. تم اختيار عينات البول المستخدمة في هذا التحليل من الفترة الزمنية الأقرب لإصابة الكلى والتي تتراوح من 24 إلى 72 ساعة بعدالكلىإصابة. تم استخراج Exosomes من عينات بول AKI المجمدة باستخدام بروتوكول داخلي تم تطويره بناءً على مبدأ استبعاد المذيبات باستخدام الترسيب الناتج عن البولي إيثيلين جليكول (PEG) ، كما هو موضح في Rao et al. المنشور الأخير [42] صفحة البروتينات الخارجية تم إجراؤها قبل عملية التربسين الهلامية باستخدام هلام الآبار NuPAGE bisTris 10 بالمائة أكريلاميد 12 لحل 40 ميكرولتر من البروتين من exosomes لعينات بول التحكم و AKI.

تم الجمع بين مستخلصات الجل مع محلول مؤقت لمنع تحلل البروتين الذي يحتوي على 75 ملي كلوريد الصوديوم (سيغما ، سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 3 في المائة من كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS ، فيشر ، Arnold AFB ، Tullahoma ، TN ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 ملي مولار NaF (سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 ملي جليسيروفوسفات بيتا (سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 ملي جليسيروفوسفات بيتا (سيجما ، سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 ملي مولار من الصوديوم orthovanadate (سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 0 ملي مولار بيروفوسفات الصوديوم (سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 1 ملي مولار من فلوريد فينيل ميثيل سلفونيل (PMSF ، سيجما) ، و 1 × Complete Mini EDTA قرص مثبط البروتياز الخالي في 50 مم HEPES (سيجما ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، درجة الحموضة 8.5. لتدمير البروتينات ، تمت إضافة حجم متساوٍ من 8 M Urea في 50 ملي مولار HEPES ، ودرجة الحموضة 8.5 ، وتم إجراء صوتنة المسبار باستخدام فترتين 10- ثانية بسعة 25 بالمائة. تم تقليل البروتينات ، وألكلةها ، وإخمادها باستخدام ديثيوثريتول ويودواسيتاميد ، كما هو موضح سابقًا [43]. تم ترسيب البروتينات عن طريق إضافة حمض ثلاثي كلورو الخليك (Sigma ، سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية) إلى عينات على الجليد ، وتكوير البروتينات من خلال الطرد المركزي عند 4 درجات مئوية. تم غسل كريات البروتين مرتين باستخدام الأسيتون المثلج. تم تجفيف كريات البروتين عند 56 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة ، ثم إعادة تعليقها في 1 مليون يوريا في 50 ملي HEPES ثم هضمها طوال الليل في درجة حرارة الغرفة مع 6 ميكروغرام من LysC (واكو ، ريتشموند ، كومنولث أوف فيرجينيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) متبوعة بـ {{27} } ح الهضم باستخدام درجة التريبسين المتسلسلة (Promega ، Fitchburg ، WI ، الولايات المتحدة الأمريكية) عند 37 درجة مئوية. تم تحلية العينات من خلال C18 Sep-Paks وتم تحديد كمية البروتينات [44]. تم تحليل ما مجموعه 1.0 ميكروغرام من البروتين لكل عينة باستخدام مقياس الطيف الكتلي الترادفي اللوني السائل (LC-MS [2]) باستخدام تدرج كروماتوغرافيا سائل 85 دقيقة على Easy-nLC 1000 (Thermo Fischer Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) متصل بمطياف الكتلة Orbitrap Fusion (Thermo Fischer Scientific).

تم إجراء الكروماتوغرافيا على عمود مسحوبة منزليًا ومعبأ 3 0 سم ثلاث مرات مع 0. 5 سم ، 0. 5 سم ، و 30 سم من 5 ميكرومتر C4 ، 3 ميكرومتر C18 و 1.8 ميكرومتر C18 على التوالي ويتم تسخينها إلى 60 درجة مئوية. تم تحميل الببتيدات لأول مرة عند 500 بار متبوعًا بتدرج كروماتوجرافي يتراوح من 6 إلى 25 بالمائة من الأسيتونيتريل على مدى 70 دقيقة متبوعًا بـ 5- من التدرج اللوني إلى 100 بالمائة من الأسيتونيتريل ، والذي تم الاحتفاظ به لمدة 10 دقائق. تم إجراء التأين بالرش الكهربائي عن طريق تطبيق 2000 فولت من خلال وصلة T من الفولاذ المقاوم للصدأ تربط العمود التحليلي ونظام Easy-nLC. تم اتباع كل عينة بغسلين يبدأان بتدرج من 3 إلى 100 بالمائة أسيتونيتريل على مدى 15 دقيقة مع 10 دقائق إضافية عند 100 بالمائة أسيتونيتريل. تم فحص نطاق الكتلة المراد شحنها (m / z) من 375-1500 بحثًا عن الببتيدات مع حالات الشحن بين 2-6. تم استخدام البيانات Centroided لتقدير القمم. تم إجراء الاستحواذ في وضع أيون إيجابي يعتمد على البيانات. تم البحث في الأطياف الأولية في Proteome Discoverer الإصدار 2.1 مقابل قاعدة البيانات المرجعية UniProt (www.uniprot.org (تم الوصول إليه في 5 نوفمبر 2017)) لـ Homo sapiens باستخدام خوارزمية Sequest [18] جنبًا إلى جنب مع نهج قاعدة البيانات العكسي المستخدم للتحكم في الببتيد والاكتشاف الخاطئ معدلات (FDR) إلى 1 بالمائة [17]. في silico trypsin هضم كما هو محدد في معلمات البحث جنبًا إلى جنب مع الحد الأدنى لطول الببتيد بستة أحماض أمينية. تضمنت إعدادات البحث أيضًا تعديلًا ديناميكيًا لأكسدة الميثيونين وتعديل ثابت لميثيل الكارباميدوم في السيستين. تم ضبط التسامح الكتلي للسلائف على 50 جزء في المليون وتحمل كتلة الشظايا 0.6 دا.

بالإضافة إلى التطابقات الطيفية والبروتينات التي تقتصر على<1% fdr,="" peptide="" matches="" were="" further="" screened="" to="" only="" include="" peptide="" spectral="" matches="" (psms)="" identified="" with="" high="" confidence.="" the="" summed="" abundance="" of="" the="" area="" under="" the="" curve="" of="" ms1="" peaks="" associated="" with="" psms="" was="" used="" to="" represent="" protein="" abundances.="" to="" help="" account="" for="" run-to-run="" variation="" in="" lc-ms2="" experiments,="" the="" raw="" protein="" abundances="" were="" next="" normalized="" by="" a="" two-step="" process.="" in="" the="" first="" step,="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" average="" abundance="" of="" a="" given="" protein="" throughout="" the="" experiment="" divided="" by="" the="" median="" of="" the="" protein="" averages="" observed="" throughout="" the="" experiment.="" in="" the="" second="" step,="" the="" adjusted="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundances="" observed="" within="" their="" respective="" samples="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundance="" observed="" in="" the="" entire="" experiment.="" records="" of="" the="" normalization="" and="" analysis="" of="" proteomics="" data="" are="" available="" in="" a="" jupyter="" notebook="" form="" at="">

4.3 تحليل بيانات البروتينات

تم تحميل سجلات تحليل بيانات البروتينات في شكل دفتر جوبيتر إلى مستودع جيثب (تم الوصول إليه في 3 مارس 2021)). تم إجراء تحليل إحداثيات المبدأ (PCoA) باستخدام Qiime2 (الإصدار 2019-7) [45]. تم استخدام أمر المقاييس الأساسية للتنوع الزمني لحساب المسافات بين العينة باستخدام مقياس Bray-Curtis والتصور باستخدام PCoA. تم إجراء التحليل الإحصائي للمسافات بين عينات التحكم وعينات V-AKI باستخدام اختبار بيرمانوفا الزوجي من خلال الأمر "أهمية مجموعة بيتا للتنوع qiime". تم إنشاء تصور Boxplot لهذه النتائج من خلال حزمة seaborn (تم الوصول إليها في 3 مارس 2021)). تم إجراء مقارنات ثنائية لحالات V-AKI وموضوعات التحكم باستخدام حزمة scipy ((تم الوصول إليها في 3 مارس 2021)) باستخدام اختبار t مستقل مع تباين غير متكافئ. تم تصنيف قوة الارتباط بين كل بروتين وحالة V-AKI باستخدام مقياس قيمة pi الذي يجمع أهمية قيمة p مع تغيير الطية [12]. كما تم وصفه سابقًا [46] في المرتبة الأولى ، تم تعريف الارتباطات المهمة على أنها ذات قيمة pi>|1 |. تم رسم كل ارتباط بروتيني بحالة V-AKI في مخطط بركان لإبراز موقع البروتينات الأعلى تصنيفًا -10. تم إجراء تحليل إثراء مجموعة الجينات باستخدام خادم DAVID [47] ، بمقارنة البروتينات المهمة (قيمة pi>|1 |) بخلفية جميع البروتينات المحددة في مجموعة البيانات. تم الإبلاغ عن مجموعات من الإثراء الوظيفي ذات الصلة في الجدول التكميلي S1.

To test for a relationship between V-AKI-associated proteins and inflflammatory cytokines, a recently developed network-based cytokine inference approach was utilized [48]. Briefly, a list of cytokines (TGFb, TNF, IFN, IL1-40, CXCL1-16, CCL1-27) was submitted alongside signifificantly altered proteins (pi-value > |1|) to the STRING-db tool [49]. Connections between proteins were determined using all interaction sources and a minimum interaction score >0 .4. تم ترشيح السيتوكينات أولاً بحيث تحتوي على خمسة وصلات على الأقل لبروتينات متغيرة بشكل ملحوظ. بعد ذلك ، تمت مقارنة نسبة الاتصالات بين كل سيتوكين وبروتينات مرتبطة بـ V-AKI أو مرتبطة بالسيطرة مع العدد الإجمالي للوصلات بين V-AKI أو البروتينات المرتبطة بالتحكم. لحساب الاختلافات في عدد الوصلات التي يمتلكها كل سيتوكين مع البروتينات الأخرى ، كانت هذه القيمة تالية مقارنة بعدد الوصلات التي يمتلكها كل سيتوكين مع جميع البروتينات التي تم تغييرها بشكل ملحوظ. تم رسم درجات التخصيب للسيتوكينات المختارة لارتباطاتها مع V-AKI- أو البروتينات المرتبطة بالتحكم. أخيرًا ، تم تصور بحث دقيق للبروتينات المرتبطة بـ V-AKI والسيتوكينات ذات الوصلات الغنية بالبروتينات المرتبطة بـ V-AKI لتفاعلاتها باستخدام Cytoscape الإصدار 3.5.1 [50]. تم تزيين شبكات تفاعل البروتين والبروتين من خلال تحديد حجم كل بروتين مرتبط بـ V-AKI وفقًا لارتباط درجة pi لحالة V-AKI وتم تلوينها من خلال وجود اتصال مستنتج بالسيتوكينات المخصبة ذات التأثيرات المؤيدة أو المضادة للالتهاب.

التنين الأعشاب cistancheيمكن أن يعالجإصابة في الكلى

5. الاستنتاجات

لقد سعينا إلى فهم أفضل لآلية إصابة V-AKI من الحالات التي تم الفصل فيها سريريًا ، ومن المثير للاهتمام أننا وجدنا بروتين ربط الجالكتين -3 والفيبرينوجين مرتبطين بشكل كبير بـ V-AKI. تشير نتائج الدراسات السابقة ودراساتنا إلى دور النظام التكميلي والمسارات الالتهابية في V-AKI. في حين أن هناك حاجة لدراسات أكبر للتحقق من صحة العمليات الجزيئية في الضرر الناجم عن الفانكومايسين ومسارات الإصلاح اللاحقة ، تشير النتائج إلى أن exosomes البولية قد تساهم في معلومات مهمة عن الآليات الفيزيولوجية المرضية وقد تعمل كمؤشرات حيوية للأدوية التي يسببهاالكلىإصابة.

الكاتب الاشتراكات:

المفاهيم ، LA و SPR ، المنهجية ، SV ، SPR ، DJG ، RM ؛ البرمجيات ، DJG ، RHM ، التحليل الرسمي ، LA ، AL ، RHM ؛ تحقيق ، AL ، JA ، VJ ، SB ، MC-T. ، PN ؛ الكتابة - إعداد المسودة الأصلية ، AL ، JA ، VJ ، LA ؛ كتابة - مراجعة وتحرير ، RHM ، DJG ، MC-T. ، AT ، AA ، JC ، MSJ ، EM ، RM ، PN ؛ الإشراف ، SV ، SPR ؛ إدارة المشروع ، لوس أنجلوس ؛ الحصول على التمويل ، لوس أنجلوس لقد قرأ جميع المؤلفين النسخة المنشورة من المخطوطة ووافقوا عليها.

التمويل:

تم تمويل هذا البحث من قبل الاتحاد الدولي للأحداث السلبية الخطيرة. تم دعم MCT بواسطة منحة التدريب T32 DK007202.

بيان مجلس المراجعة المؤسسية: أجريت الدراسة وفقًا لإرشادات إعلان هلسنكي ، وتمت الموافقة عليها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية (أو لجنة الأخلاقيات) بجامعة كاليفورنيا ، برنامج حماية أبحاث الموضوعات البشرية في سان دييغو (IRB # 121651).

بيان الموافقة المستنيرة: تم الحصول على الموافقة المستنيرة من جميع الأشخاص المشاركين في الدراسة

شكر وتقدير:

نود أن نعترف بمساهمات المحققين المباشرين: دينا كروز ، ستيوارت جولدشتاين ، باتريك موراي ، أندرو دافنبورت ، أندرو لوينجتون ، ديفيد سيليوسكي ، مايكل زابيتيللي ، مارليس أوسترمان ، لي يانغ ، بهافنا بانديا ، باتريك بروفي ، دانييلا بونس ، جوليا ستينكي ، جوزيه بوشارد ، كارلوس إرارازابال ، ديفيد أسكينازي ، نيتين كولهي ، رولاندوكلور-ديل جرانادو ، نادين بينادور ، كلير كاستلدين ، جوناثان بارات ، سونيل بهانداري ، أليسا رايلي ، آيز أكان أريكان ، تي كيه ديفيس ، كريستوفر فارمر ، مارك توماس ، فريد نجانج ، كار هوى ، هانسجورج روث.

تضارب المصالح:

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.

من: "الخلايا الخارجية البولية تحدد المسارات الالتهابية في إصابة الكلى الحادة المرتبطة بفانكومايسين" بقلم ليندا أوديشو

--- Int. جيه مول. علوم. 2021 ، 22 ، 2784