استقلاب البول يكشف عن التعافي غير الطبيعي بعد بذل أقصى جهد لدى مرضى ME/CFS الجزء الأول

لماذا سنتعب؟ كيف يمكننا حل مشاكل التعب؟

【الاتصال】البريد الإلكتروني: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

خلاصة:التهاب الدماغ والنخاع العضلي / متلازمة التعب المزمن (ME / CFS) هو مرض موهن مع مسببات غير معروفة أو علاجات فعالة. يعد الشعور بالضيق بعد المجهود (PEM) أحد الأعراض الرئيسية التي تميز مرضى ME / CFS. إن دراسة التغيرات في استقلاب البول بين مرضى ME / CFS والأشخاص الأصحاء بعد المجهود قد يساعدنا على فهم PEM. تهدف هذه الدراسة التجريبية إلى التوصيف الشامل لاستقلابات البول لدى ثمانية من الإناث الأصحاء المستقرات وعشرة مرضى ME / CFS استجابةً لاختبار تمرين القلب الرئوي الأقصى (CPET). قدم كل موضوع عينات البول في الأساس وبعد 24 ساعة من التمرين. تم الكشف عن إجمالي 1403 مستقلبات عبر LC-MS/MS بواسطة Metabolon®، بما في ذلك الأحماض الأمينية والكربوهيدرات والدهون والنيوكليوتيدات والعوامل المساعدة والفيتامينات والمركبات الغريبة الحيوية والمركبات غير المعروفة. باستخدام نموذج التأثيرات الخطية المختلطة، وتحليل مسار التخصيب، وتحليل الطوبولوجيا، والعلاقات بين مستويات مستقلبات البول والبلازما، تم اكتشاف فروق ذات دلالة إحصائية بين الضوابط ومرضى ME/CFS في العديد من الدهون (المنشطات، والأسيل كارنيتينات، والأسيل جلايسين) والمسارات الفرعية للأحماض الأمينية. (السيستين، الميثيونين، SAM، والتورين؛ الليوسين، الأيسولوسين، والفالين؛ البوليامين، التربتوفان، ودورة اليوريا، الأرجينين والبرولين). اكتشافنا غير المتوقع هو عدم وجود تغييرات في استقلاب البول لدى مرضى ME/CFS أثناء التعافي بينما يتم إحداث تغييرات كبيرة في الضوابط بعد CPET، مما يدل على عدم التكيف مع الإجهاد الشديد لدى مرضى ME/CFS.

يمكن أن يعمل Cistanche كمضاد للتعب ومعزز للقدرة على التحمل، وقد أظهرت الدراسات التجريبية أن مغلي Cistanche tubulosa يمكن أن يحمي بشكل فعال خلايا الكبد والخلايا البطانية التالفة في الفئران الحاملة للوزن، وينظم التعبير عن NOS3، ويعزز الجليكوجين الكبدي. التوليف، وبالتالي ممارسة فعالية مضادة للتعب. يمكن لمستخلص Cistanche tubulosa الغني بالفينيليثانويد أن يقلل بشكل كبير من مستويات الكرياتين كيناز في الدم، ونازعة هيدروجين اللاكتات، ومستويات اللاكتات، ويزيد من مستويات الهيموجلوبين (HB) والجلوكوز في الفئران ICR، وهذا يمكن أن يلعب دورًا مضادًا للإرهاق عن طريق تقليل تلف العضلات. وتأخير تخصيب حامض اللبنيك لتخزين الطاقة في الفئران. تعمل أقراص Cistanche Tubulosa على إطالة وقت السباحة مع تحمل الوزن بشكل ملحوظ، وزيادة احتياطي الجليكوجين الكبدي، وانخفاض مستوى اليوريا في الدم بعد التمرين في الفئران، مما يظهر تأثيره المضاد للتعب. يمكن لمغلي Cistanchis تحسين القدرة على التحمل وتسريع القضاء على التعب في ممارسة الفئران، ويمكن أيضًا أن يقلل من ارتفاع كيناز الكرياتين في الدم بعد تمرين التحميل والحفاظ على البنية التحتية للعضلات الهيكلية للفئران طبيعية بعد التمرين، مما يشير إلى أن له تأثيرات. لتعزيز القوة البدنية ومكافحة التعب. كما أدى Cistanchis أيضًا إلى إطالة فترة بقاء الفئران المسمومة بالنتريت بشكل ملحوظ وعزز القدرة على التحمل ضد نقص الأكسجة والتعب.

انقر على التعب المفاجئ خلال النهار

الكلمات الدالة:أنا/لجنة الأمن الغذائي العالمي؛ التمثيل الغذائي. البول. يمارس

1 المقدمة

التهاب الدماغ والنخاع العضلي / متلازمة التعب المزمن (ME / CFS) هو مرض موهن يؤثر على ما يقدر بنحو 1.5-3 مليون من البالغين والأطفال في الولايات المتحدة وحدها [1،2]. غالبية مرضى متلازمة التعب المزمن/متلازمة التعب المزمن غير قادرين على العمل بسبب مرضهم، مما يؤدي إلى تأثير اقتصادي لا يقل عن 35-51 مليار دولار أمريكي سنويًا في التكاليف الطبية وفقدان الإنتاجية مجتمعة [1]. تشمل أعراض هذا المرض الجهازي المكتسب بداية جديدة للتعب الجسدي والعقلي المستمر الشديد بما يكفي لمنع الأنشطة العادية، والنوم غير المنعش، والألم، والضعف الإدراكي، وعدم التحمل الانتصابي، والمظاهر المناعية مثل الأعراض الشبيهة بالأنفلونزا المتكررة والتهاب الحلق، والغدد الصم العصبية. مظاهر مثل عدم تحمل الحرارة والبرودة [3].

بالإضافة إلى ذلك، فإن العرض المميز لـ ME/CFS هو الشعور بالضيق بعد الجهد (PEM)، وهو تفاقم الأعراض بعد أي نوع من المجهود، بما في ذلك المجهود البدني والمعرفي، بدءًا من مباشرة بعد المجهود وحتى أكثر من 24 ساعة بعد ذلك. [4]. قد يستمر PEM من ساعات إلى أشهر، وتختلف المدة بشكل كبير حتى بالنسبة للمرضى الأفراد [4،5]. لذلك، على عكس معظم الأمراض المزمنة، التي تكون فيها التمارين الرياضية مفيدة، فإن الأشخاص الذين يعانون من ME/CFS لا يتحملون ممارسة الرياضة. يمكن تقييم عدم تحمل التمارين سريريًا باستخدام اختبار التمارين القلبية الرئوية (CPET) لمدة يومين.

في بروتوكول CPET لمدة يومين، يتم استخدام CPET الأول لقياس "القدرة الوظيفية الأساسية" أثناء تحفيز PEM [6]. يقيس CPET الثاني، بعد 24 ساعة، ضعف الأداء في الوقت الذي يعاني فيه معظم المرضى بالفعل من أعراض PEM من CPET الأول. يمكن للأشخاص الذين يعانون من أمراض مختلفة أخرى أن يؤدوا أداءً مشابهًا في CPET لمدة يومين متتاليين، في حين أن مرضى ME/CFS غير قادرين على الأداء أيضًا في اليوم الثاني [7،8]. يمكن توثيق قدرة الأداء المنخفضة هذه من خلال تدابير موضوعية بما في ذلك انخفاض الحد الأقصى لاستهلاك الأكسجين وذروة عبء العمل أكبر من التباين النموذجي للاختبارات المتكررة، على الرغم من احتفاظ الأشخاص بنسبة تبادل تنفسي (RER) أعلى من 1.1، وهو ما يتوافق مع الحد الأقصى للجهد [6].

على الرغم من وجود قدر متزايد من المعرفة التي تصف الفيزيولوجيا المرضية لـ ME/CFS، إلا أن مسببات المرض لا تزال غير معروفة ولا توجد حاليًا أي اختبارات معملية تشخيصية أو علاجات معتمدة من إدارة الغذاء والدواء. على الرغم من عدم وجود مؤشرات حيوية تشخيصية، هناك العديد من التغيرات الفيزيولوجية المرضية الجزيئية الموثقة التي تحدث في ME/CFS، بما في ذلك في عملية التمثيل الغذائي [9،10].

تلقى استقلاب البلازما لدى مرضى ME/CFS قدرًا كبيرًا من الاهتمام لأكثر من عقد من الزمن، على الرغم من أنه غالبًا ما يكون بأحجام أترابية محدودة، مع زيادة عدد المستقلبات المقاسة (من ما يزيد قليلاً عن 20 إلى حوالي 1200 مستقلب في الآونة الأخيرة) [11-22 ]. على العكس من ذلك، فإن الدراسات السابقة حول استقلاب البول لدى مرضى ME/CFS محدودة للغاية. قامت الدراسات القليلة المنشورة بقياس 28-42 مستقلبًا فقط، والتي كانت في المقام الأول عبارة عن أحماض أمينية [19،20،23،24]. في حين أن معظم النتائج لم تكن متسقة بين الدراسات، فقد وجدت دراستان أن الفينيل ألانين بتركيزات أقل لدى مرضى ME/CFS مقارنة بالأشخاص الأصحاء [23،24]. على الرغم من دراسة واحدة أجراها ماكجريجور وآخرون. فحص مستقلبات البول في سياق PEM المبلغ عنها ذاتيًا [19]، ونشرت مجموعتنا مؤخرًا بحثًا شاملاً عن مستقلب البلازما (1157 مستقلبًا) قبل وبعد التمرين [25]، لم تقم أي دراسات لمرضى ME / CFS بقياس المستقلبات في البول بعد تحدي التمرين المتعمد.

يعد قياس المركبات في البول مفيدًا نظرًا لسهولة جمع العينات بطريقة غير جراحية مما يجعله مثاليًا للتشخيص. بالإضافة إلى ذلك، فإن تغيير إفراز المستقلبات لدى مرضى ME/CFS بعد تحدي التمرين قد يؤدي إلى رؤى حول الفيزيولوجيا المرضية لـ PEM التي تكمل التغييرات الموثقة في استقلاب البلازما. تهدف هذه الدراسة التجريبية إلى إجراء تحقيق شامل في التغيرات في استقلاب البول لدى ثمانية من الإناث الأصحاء المستقرات وعشرة من مرضى ME / CFS استجابةً لاختبار التمرين القلبي الرئوي الأقصى (CPET). تمثل هذه الدراسة زيادة بمقدار 30- أضعاف تقريبًا في عدد المستقلبات المقاسة في بول مرضى متلازمة التعب المزمن/متلازمة التعب المزمن، من أقل من 50 في الدراسات السابقة إلى 1403 في الدراسة الحالية.

يكشف تحليلنا الشامل عن اختلافات عديدة وهامة في استقلاب البول لدى ME/CFS والمجموعات الضابطة في الاستجابة للتمرين، على الرغم من العدد الصغير من الموضوعات التي تمت دراستها. توجد مثل هذه التغييرات في الغالب في المسارات الأيضية للدهون والأحماض الأمينية. لقد وجدنا عددًا كبيرًا من المستقلبات مع زيادة مستوياتها في بول عناصر التحكم بعد 24 ساعة من التمرين. لم تحدث زيادة في إفراز البول بعد التمرين لدى مرضى ME/CFS، وهو دليل على خلل التنظيم الأيضي أثناء التعافي من التمرين.

2. النتائج

2.1. تصميم الدراسة وخصائص الموضوع

قدمت ثمانية من الإناث الأصحاء المستقرات وعشرة من مرضى ME / CFS عينة بول أساسية في الصباح قبل اختبار التمرين (الشكل 1). أجرى جميع الأشخاص اختبار CPET على دراجة ثابتة وتم مراقبتهم للتأكد من أنهم استخدموا أقصى جهد (RER> 1.1). تم جمع عينة بول بعد التمرين من جميع الأشخاص بعد 24 ساعة. تم قياس المستقلبات في جميع عينات البول بواسطة Metabolon® باستخدام منصة الأيض العالمية Precision Metabolomics™ LC-MS/MS.

كما هو متوقع، سجل مرضى ME/CFS درجات أقل بشكل ملحوظ في مقاييس متعددة للوظيفة البدنية، بما في ذلك مقياس الإعاقة Bell والمكون الجسدي SF-36. على مقياس بيل، كان متوسط ​​عناصر التحكم 90، وهو ما يتوافق مع "لا توجد أعراض أثناء الراحة؛ أعراض خفيفة مع النشاط؛ مستوى النشاط العام الطبيعي؛ القدرة على العمل بدوام كامل دون صعوبة" [26]. كان متوسط ​​مرضى ME/CFS 30، وهو ما يتوافق مع "أعراض متوسطة إلى حادة أثناء الراحة. أعراض حادة مع أي تمرين؛ انخفض مستوى النشاط الإجمالي إلى 50% من المتوقع. عادة ما يقتصر الأمر على المنزل. غير قادر على أداء أي مهام شاقة . قادر على أداء العمل المكتبي لمدة 2-3 ساعات يوميًا، ولكنه يحتاج إلى فترات راحة" [26]. كان لدى مرضى ME/CFS مجموعة واسعة من مدة المرض تتراوح بين 2-27 سنة (متوسط ​​7.5 سنة).

2.2. تظهر العديد من الاختلافات في استقلاب البول لدى مرضى ME/CFS والضوابط من خلال تحليل التغيرات بين عينات ما قبل وبعد التمرين

اكتشف Metabolon® ما مجموعه 1403 مستقلبات في هذه العينات باستخدام منصة الأيض العالمية Precision Metabolomics™ LC-MS/MS. من بين المستقلبات الـ 1403 التي تم قياسها، هناك 886 مستقلبًا معروفًا، و64 عبارة عن جزيئات مميزة جزئيًا، و453 عبارة عن مركبات غير معروفة (الملف التكميلي S1 - البيانات الأولية). تم تطبيع الأسمولية لجميع البيانات لمراعاة الاختلافات في التركيز الكلي لكل عينة بول. تظهر بيانات الأسمولية لكل مجموعة تجريبية في الشكل التكميلي S1 ولم تكن مختلفة بشكل كبير بين مرضى ME / CFS والضوابط في أي من النقطتين الزمنيتين. كان هناك اتجاه نحو زيادة الأسمولية في عناصر التحكم على مدار 24 ساعة بعد التمرين (P <0.1، نموذج التأثيرات الخطية المختلطة، متبوعًا بمقارنات زوجية مع اختبار توكي اللاحق). من خلال التطبيع إلى الأسمولية، تأكدنا من أن أي اختلافات تم اكتشافها في مستويات الأيض بين ME/CFS ومجموعات التحكم ومن خط الأساس إلى ما بعد التمرين داخل الأتراب ليست مجرد انعكاس للتغيرات في الأسمولية.

تم احتساب القيم المفقودة بالحد الأدنى كما أوصى Metabolon®، باستثناء حالة المخدرات والتبغ، حيث تم احتساب القيم المفقودة بـ 0. كانت بيانات كل مستقلب متمركزة في المتوسط ​​على 1، وتم تحويل جميع البيانات إلى سجل 10 باستخدام MetaboAnalystR (متوفر على www.metaboanalyst.ca، تم الوصول إليه في 14 ديسمبر 2022). تم تطبيق التصفية للتخلص من المركبات التي تحتوي على كمية كبيرة من البيانات المفقودة من التحليل وفقًا لقاعدة 80% المعدلة: يتم تضمين المستقلب إذا تم اكتشافه في 80% على الأقل من العينات في مرضى ME/CFS، وعناصر التحكم. أو كلا الفريقين [27]. في المجموع، استوفى 1154 مستقلبًا المعايير وتم تضمينها في التحليل.

تم استخدام نموذج التأثيرات الخطية المختلطة (LMM) لكل مستقلب لتحديد الاختلافات بين ME/CFS ومجموعات التحكم في كل نقطة زمنية (خط الأساس أو ما بعد التمرين)، والتغيير بمرور الوقت داخل ME/CFS ومجموعات التحكم، وأي مستقلبات كانت تتغير بشكل مختلف بعد التمرين في مجموعات ME/CFS والمجموعات الضابطة. صيغة النموذج هي كما يلي:

المستقلب ~ حالة المرض ∗ النقطة الزمنية + العمر + مؤشر كتلة الجسم + (1|الموضوع)

تم تعديل القيم p لكل مستقلب لإجراء مقارنات متعددة باستخدام إجراء Benjamini-Hochberg (BH) مع عتبة أهمية q <0.1 (الملف التكميلي S2 - نتائج النموذج الخطي المختلط) [28]. نظرًا لأننا قمنا بتعديل عمر المُربك ومؤشر كتلة الجسم، فإن الاختلافات المهمة التي اكتشفناها مع هذا النموذج لا ترجع إلى الاختلاف في مؤشر كتلة الجسم في المجموعتين.

لم يتم الكشف عن فروق ذات دلالة إحصائية بين الضوابط والمرضى ME/CFS في الأساس (الشكل 2A). في 24 ساعة بعد التمرين، كانت أربعة مركبات مختلفة بشكل كبير، وكلها كانت بتركيزات أقل في مرضى ME/CFS مقارنة بعناصر التحكم (الشكل 2B). تضمنت المركبات الأربعة ثلاثة أسيل جلايسين ومركب واحد غير معروف.

أظهرت المجموعة الضابطة تغيرات واسعة النطاق في استقلاب البول عند مقارنة عينات البول الأساسية وما بعد التمرين، مع 255 مركبًا تم تغييرها بشكل ملحوظ عند عتبة q < 0.1 (الشكل 2C). أظهرت جميع المركبات باستثناء خمسة تركيزات متزايدة بعد التمرين. وهذا يتناقض بشكل صارخ مع مجموعة ME/CFS، التي لم نكتشف فيها أي مركبات ذات تغييرات كبيرة في التركيز بسبب التمرين (الشكل 2D).

يُظهر التفاعل الكبير بين حالة المرض (ME/CFS مقابل التحكم) والنقطة الزمنية (خط الأساس مقابل ما بعد التمرين) في نموذج التأثيرات الخطية المختلطة أي المستقلبات تتغير بشكل مختلف في ME/CFS ومجموعات المراقبة أثناء التعافي من التمرين (أي ، متأخر , بعد فوات الوقت). يعرض الشكل 2E 110 مستقلبات مختلفة بشكل كبير عند عتبات q < 0.1 (النقاط الحمراء)، كما أن 35 مستقلبًا أقل أيضًا من q < 0.05 (1.3 على المحور y -Log10q في الشكل 2E ). في هذه المؤامرة البركانية، يكون التغير في أضعاف log2 عبارة عن نسبة من النسب؛ نسبة متوسط ​​نسب ما بعد التمرين/خط الأساس في مرضى ME/CFS إلى متوسط ​​نسب ما بعد التمرين/خط الأساس في عناصر التحكم. تُظهر نسبة ما بعد التمرين/خط الأساس لكل موضوع ما إذا كان المستقلب قد زاد أو انخفض في البول في كل موضوع أثناء التعافي من التمرين. يُظهر متوسط ​​التركيزات الطبيعية لعناصر التحكم ومرضى ME/CFS في كلا النقطتين الزمنيتين للمركبات الـ 56 المعروفة المدرجة في هذه المركبات الـ 110 أنه بالنسبة لمعظم المركبات، هناك زيادة بعد التمرين في عناصر التحكم التي لم تظهر في ME/ مرضى CFS (الشكل التكميلي S2). لذلك، فإن المركبات التي تتغير بشكل مختلف أثناء التعافي في مجموعات التحكم ومجموعات ME/CFS يتم زيادتها في الغالب بعد التمرين في المجموعة الضابطة ولا تتغير بشكل ملحوظ في مجموعة ME/CFS، مما يؤدي إلى تغيير سلبي في سجل 2 أضعاف لـ ME/CFS مقابل السيطرة على نسب ما بعد التمرين/خط الأساس. في المجمل، 102 من أصل 110 مركبًا تتغير بشكل مختلف مع مرور الوقت لدى المرضى مقابل مجموعة التحكم، تزداد أيضًا بشكل ملحوظ في مجموعة التحكم بعد التمرين.

إن حقيقة وجود تغييرات في المستقلبات في عناصر التحكم وليس في المرضى لا ترجع إلى زيادة التباين في مستويات المستقلبات لدى مرضى ME / CFS مقارنةً بالضوابط. لا يوجد اتجاه نحو الانحراف المعياري الأعلى في مجموعة ME/CFS عند مقارنة الانحرافات المعيارية لـ ME/CFS مع عناصر التحكم لكل مركب (الشكل التكميلي S3). بالإضافة إلى ذلك، تم اكتشاف هذه التغييرات على الرغم من عودة الأسمولية البولية إلى طبيعتها، والتي تتجه نحو زيادة عناصر التحكم من خط الأساس إلى ما بعد التمرين (الشكل التكميلي S1). لزيادة ملحوظة بعد التطبيع، يجب أن تزيد مستويات المستقلب أعلى من أي زيادة في التركيز الإجمالي للبول.

توضح هذه النتائج معًا أن التمرين يؤدي إلى زيادة كبيرة في العديد من المستقلبات في البول على مدار 24 ساعة بعد التمرين في الضوابط الصحية المستقرة، ويعتبر عدم وجود هذه التغييرات في مرضى ME / CFS عنصرًا رئيسيًا في حالة مرضهم ويمكن أن يكون مرتبطًا لممارسة التعصب.

2.3. نهجان لتحليل التخصيب يكشفان عن المسارات الفرعية الأيضية ذات التغييرات الأكثر أهمية

أجرينا بعد ذلك تحليل التخصيب باستخدام التعليقات التوضيحية لمسار Metabolon® وChemRICH (في R) [29,30}. لا يعتمد هذا التحليل على أي خلفية أو مستقلب مرجعي ويحتوي على تعيينات مسار غير متداخلة لكل مستقلب. على عكس تحليل ChemRICH القياسي الذي يعين المستقلبات إلى مجموعات عن طريق التشابه الكيميائي، استخدم هذا التحليل تعيينات مسار غير متداخلة بواسطة Metabolon®. من خلال النظر إلى المسارات بدلاً من المستقلبات الفردية، يمكننا تحديد مجموعات المستقلبات التي تم تغييرها بشكل كبير كمجموعة، في حين أن المستقلبات الفردية في تلك المجموعة ربما لم تحقق أهمية في LMM بمفردها. بالإضافة إلى ذلك، يمكننا أن نصف بشكل شامل التغيرات في استقلاب البول التي تحدث بعد التمرين وكيف تتغير بشكل كبير لدى مرضى ME/CFS. المدخلات في هذا التحليل هي التغير الطي في متوسط ​​التركيز الطبيعي لكل مقارنة والقيم p من تباينات LMM للمركبات المعروفة البالغ عددها 734 من إجمالي 1154 التي تم تحليلها (تم تعيينها إلى 84 مسارًا فرعيًا من أصل 92 مسارًا فرعيًا لجميع المستقلبات المكتشفة) . يتم تقييم التخصيب باستخدام اختبار Kolmogorov – Smirnov، مع تصحيح BH FDR (عتبة الأهمية q <0.05).

يوضح الشكل 3 المسارات الفرعية التي تم تغييرها بشكل كبير لنفس المقارنات كما في الشكل 2: ME/CFS مقابل عناصر التحكم عند خط الأساس، وبعد التمرين، ونسب ما بعد التمرين/خط الأساس، والتغيير بعد التمرين في مجموعة التحكم وحدها . قمنا أيضًا بتحليل التغيير بعد التمرين لدى مرضى ME/CFS، ولكن لم تكن هناك مسارات متغيرة بشكل كبير.

في هذا الشكل، يتم تنظيم المسارات الفرعية بواسطة Metabolon® عن طريق التشابه الكيميائي ثم يتم تنظيم المسارات الفائقة أبجديًا، مع الأحماض الأمينية أولاً، تليها الكربوهيدرات والدهون والنيوكليوتيدات والفيتامينات والعوامل المساعدة، وأخيرًا المواد الغريبة الحيوية. تعني النسبة المتغيرة 1 أن كل مركب قمنا بقياسه في المسار قد تم تغييره بشكل كبير (p < 0.05 في LMM). تشير الفقاعات الحمراء إلى أن جميع المركبات التي تم تغييرها بشكل ملحوظ زادت في تلك المقارنة، وتشير الفقاعات الزرقاء إلى أن جميع المركبات التي تم تغييرها بشكل كبير انخفضت في تلك المقارنة. أجرينا أيضًا تحليل ChemRICH باستخدام رموز عناوين الموضوعات الطبية (MeSH) ونظام إدخال خط الإدخال الجزيئي المبسط (SMILES) لتعيين مركبات للمجموعات بناءً على التشابه الكيميائي (الشكل التكميلي S4). يمكن مطابقة 516 مركبة فقط مع رموز SMILES لهذا التحليل. لقد اخترنا عتبة أهمية q < 0.15 لإثراء علم الوجود في MeSH، لأننا لم نرغب في استبعاد النتائج المثيرة للاهتمام لهذه الدراسة التجريبية، وفي q < 0.15 جميع المجموعات في الأصل كان ع < 0.025. بالنسبة لإثراء المسار الفرعي Metabolon®، فقط عند q <0.05 كانت جميع المجموعات المهمة أيضًا عند p <0.05.

في الأساس، كان استقلاب الزانثين فقط والمجموعة الكيميائية للزانثينات مختلفة بشكل كبير بين مرضى ME/CFS والضوابط، مع تركيزات أقل لجميع المركبات الموجودة في بول مرضى ME/CFS (الشكل 3، q < 0. 05 والشكل التكميلي S4، ف < 0.15). وتشمل الزانثينات الكافيين والثيوفيلين، لذلك تتأثر هذه المجموعة الكيميائية بالنظام الغذائي.

تم تغيير اثني عشر مسارًا فرعيًا من Metabolon® بشكل ملحوظ بعد التمرين في مرضى ME/CFS مقابل الضوابط، مرة أخرى مع تركيزات أيضية أقل في الغالب في مرضى ME/CFS (الشكل 3). تنتمي خمسة من هذه المسارات الفرعية إلى مسار الدهون الفائق وتشارك في استقلاب الأحماض الدهنية (بما في ذلك أسيل الجلوتامين وأسيل جلايسين وأسيل كارنيتين). ضمن المسار الفائق لاستقلاب الأحماض الأمينية، كان استقلاب التيروزين مختلفًا بشكل كبير على مدار 24 ساعة بعد التمرين وداخل استقلاب النوكليوتيدات، تم تغيير استقلاب البيريميدين المحتوي على اليوراسيل بشكل كبير. بعد 24 ساعة من التمرين، تم تغيير ثلاث مجموعات كيميائية فقط بشكل ملحوظ في مرضى ME / CFS باستخدام علم الوجود MeSH، بما في ذلك الأحماض الدهنية (10: 1)، والزانثينات، وأحماض السكر (الشكل التكميلي S4).

عند مقارنة التعافي من التمرين (التغير بمرور الوقت) لدى مرضى ME/CFS مقابل مجموعة التحكم باستخدام نسب ما بعد التمرين/خط الأساس، تم العثور على المزيد من المسارات التي تختلف بشكل كبير، وهي سبعة مسارات فرعية للأحماض الأمينية، وسبعة مسارات فرعية للدهون، واثنين المسارات الفرعية للكربوهيدرات. بالنسبة لهذه المقارنة، تختلف 13 مجموعة كيميائية بشكل كبير بين المرضى والضوابط (الشكل التكميلي S4).

تم العثور على أكبر عدد من مسارات Metabolon® الفرعية والمجموعات الكيميائية التي تم تغييرها بشكل ملحوظ في المجموعة الضابطة عند مقارنة النقاط الزمنية بعد التمرين والنقاط الزمنية الأساسية (الشكلان 3 وS4)، مع زيادة الغالبية العظمى من المركبات بعد التمرين (اللون الأحمر). فقط المسار الفرعي لاستقلاب البيورين المحتوي على الأدينين، والمسار الفرعي لاستقلاب الهيستيدين، والمجموعة الكيميائية للميثيل هيستامين كان لها كمية مماثلة من المركبات المتزايدة والمنقصة.

معظم مسارات Metabolon® الفرعية والمجموعات الكيميائية التي زادت في عناصر التحكم بعد التمرين هي نفسها التي تم تغييرها بشكل ملحوظ في ME/CFS مقابل عناصر التحكم عند مقارنة نسبة ما بعد التمرين/خط الأساس، مما يوضح أنها كانت تتغير بشكل مختلف أثناء التعافي من التمرين في مرضى ME / CFS مقابل الضوابط المستقرة الصحية. بالنسبة لكلتا المقارنتين، كان المسار الفرعي ذو أقل قيمة q لإثراء المسار الفرعي هو الكورتيكوستيرويدات. بشكل عام، تم تغيير 8/13 من المركبات بشكل ملحوظ في مرضى ME/CFS مقابل الضوابط (وكان لجميعهم نسب أقل بعد التمرين/خط الأساس لدى المرضى)، و11/13 من المركبات زادت بشكل ملحوظ في الضوابط بعد التمرين (P < {{7 }}.05 في LMM).

أربعة مسارات فرعية، تنتمي جميعها إلى المسار الفائق للدهون، قد غيرت بشكل كبير التركيز في البول في جميع المقارنات الثلاثة: ME/CFS مقابل التحكم في نقطة زمنية ما بعد التمرين، ME/CFS مقابل التحكم في نسب ما بعد التمرين/خط الأساس، وبعد -التمرين مقابل خط الأساس في المجموعة الضابطة. تتضمن هذه المسارات الفرعية مسارين فرعيين لاستقلاب الأحماض الدهنية الأسيل كارنيتين (السلسلة المتوسطة والديكاربوكسيلات)، والمنشطات الاندروجينية، واستقلاب حمض الصفراء الثانوي.

هناك أيضًا العديد من المسارات الفرعية للأحماض الأمينية التي تزيد فيها معظم المركبات المتغيرة بشكل ملحوظ في البول في عناصر التحكم بعد التمرين وتنخفض عند مقارنة ME/CFS للتحكم في نسب ما بعد التمرين/خط الأساس. من بين هذه المسارات الفرعية، تكون النسبة المتغيرة هي الأعلى بالنسبة لاستقلاب البوليامينات (ولديها أدنى قيمة q بالنسبة إلى ME/CFS مقابل عناصر التحكم): يتم زيادة 6/9 المستقلبات بشكل ملحوظ في عناصر التحكم، وتنخفض 5/9 بشكل ملحوظ في ME/CFS مقابل الضوابط بعد التمرين/نسبة خط الأساس. تشتمل هذه المركبات على acisoga، (N(1)+N(8))-أسيتيل برميدين، ثنائي أسيتيل برميدين، N1,N12- ثنائي أسيتيل سبيرمين، وN-أسيتيل-إيزوبوتريانين (بالنسبة لهذا المسار الفرعي، تحتوي جميع المركبات أيضًا على q < {{ 15}}.1 في LMM).

إن المسار الفرعي لاستقلاب الأرجينين والبرولين لدورة اليوريا في المسار الفائق للأحماض الأمينية هو الوحيد الذي يحتوي على مستقلب يزداد في ME/CFS مقابل الضوابط الخاصة بنسب ما بعد التمرين/خط الأساس (إلى جانب المكونات الغذائية/النباتات)، مع 8 /10 تغيرت المستقلبات بشكل ملحوظ وكان الميثيل يوريا هو المستقلب المتزايد الوحيد (p < 0.05 في LMM). يتناقص ميثيلوريا أيضًا بشكل ملحوظ في عناصر التحكم بمرور الوقت (p < 0.05 في LMM) وهو الوحيد من بين 11 مركبًا تم تغييره في هذا المسار الفرعي الذي لا يتزايد. ومع ذلك، فإن التغييرات في يوريا الميثيل لم تكن كبيرة عند النظر في تحليل LMM أحادي المتغير مع عتبات q <0.1. ومع ذلك، فإن أربعة مركبات في هذا المسار الفرعي تحتوي على q < 0.1 في LMM لـ ME/CFS مقابل مقارنة عناصر التحكم بعد التمرين/خط الأساس: كربوكسي ميثيل أرجينين، وبرولين، وثنائي ميثيل أرجينين متماثل، وثنائي ميثيل أرجينين غير متماثل.

يمتلك المسار الفرعي للاستقلاب الليوسين والإيسولوسين والفالين أدنى قيمة q في عناصر التحكم في المسارات الفرعية في المسار الفائق للأحماض الأمينية. يحتوي هذا المسار الفرعي على 36 مركبًا، ستة منها تتغير بشكل مختلف مع مرور الوقت في ME/CFS مقابل عناصر التحكم: 3-ميثيل جلوتاريل كارنيتين، تيجلايل كارنيتين (C5)، فالين، بيتا هيدروكسي إيزوفاليرات، بيتا هيدروكسي إيزوفاليرويل كارنيتين، وميثيل سوكسينويل كارنيتين. تمت زيادة ستة عشر من أصل ستة وثلاثين مركبًا بشكل ملحوظ في عناصر التحكم، بما في ذلك جميع المركبات الستة التي تتغير بشكل مختلف مع مرور الوقت في مرضى ME/CFS مقابل عناصر التحكم.

【الاتصال】البريد الإلكتروني: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501