شينجيانغ Cistanche Deserticola السكريات لها تأثيرات مضادة للأكسدة

خلاصة

تمت دراسة النشاط المضاد للأكسدة لعديد السكاريد Cistanche deserticola في المختبر. أخذ حمض الأسكوربيك كعنصر تحكم، مع أخذ التفاعل الشبيه بالفنتون لإنتاج جذور الهيدروكسيل، وتفاعل الأكسدة الذاتية للدوبامين لإنتاج جذور أنيون الأكسيد الفائق، وتفاعل هيبوكلوريت الصوديوم مع بيروكسيد الهيدروجين لإنتاج الأكسجين المفرد، وجذور الهيدرازين ثنائي الفينيل المر كنموذج تجريبي ، وتأثيرات السكريات Cistanche deserticola على جذور أنيون الأكسيد الفائق، وجذور الهيدروكسيل DPPH · الجذور الحرة (جذر هيدرازين ثنائي الفينيل المر)، وتأثير الكسح للأكسجين القميص. أظهرت النتائج أن السكريات المتعددة من Cistanche deserticola كان لها تأثيرات واضحة على الجذور الحرة المذكورة أعلاه، وكان تأثير الكسح مرتبطا بشكل إيجابي مع تركيز السكريات.

الكلمات الدالة :سيستانكهو توبولأوسا بوليساكهريد. الجذور الحرة

1 المقدمة

ينتج الجسم باستمرار العديد من الجذور الحرة للأكسجين التفاعلية (ROS) في عملية التمثيل الغذائي التأكسدي لأنشطة الحياة، وهو المنتج الوسيط لتفاعل الأكسدة والاختزال في التمثيل الغذائي الهوائي.لقد وجدت الأبحاث أن الجذور الحرة الزائدة ستهاجم الجزيئات الحيوية والعضيات المختلفة، مما يسبب أضرارًا مختلفة على المستوى الجزيئي ومستوى الخلية والأنسجة والأعضاء، مما يسرع عملية شيخوخة الجسم ويسبب أمراضًا مثل تجلط الدم والسكري وتصلب الشرايين. الأورام، الخ. [1]. نظرًا لسمية مضادات الأكسدة المركبة كيميائيًا لجسم الإنسان، فقد أصبح البحث عن مضادات الأكسدة الطبيعية ذات الكفاءة العالية والسمية المنخفضة التي يمكنها إزالة الجذور الحرة للأكسجين موضوعًا بحثيًا ساخنًا في مجالات الطب والغذاء والهندسة الكيميائية وغيرها من المجالات في السنوات الأخيرة.

سيستانش ديزيرتيكولا(YCMa.)هو دواء صيني تقليدي نادر ويعرف باسم "الجينسنغ الصحراوي" [2]. Cistanche deserticola أماهيعد السكاريد أحد المكونات النشطة بيولوجيًا الرئيسية في Cistanche deserticola، ولكن لا يوجد تقرير حول ما إذا كان عديد السكاريد Cistanche deserticola له تأثير في التخلص من الجذور الحرة. في هذا البحث، تم تحديد التأثيرات الكسحية لسكريات Cistanche deserticola على جذر أنيون الأكسيد الفائق، وجذر الهيدروكسيل، والجذور الحرة DPPH·، والأكسجين المفرد عن طريق التحليل الطيفي، لتقييم نشاطه المضاد للأكسدة وتوفير أساس علمي للتطوير الكامل والاستفادة من هذا المورد الطبيعي.

عشبة سيستانش الصينية

2. الجزء التجريبي

2.1 الأدوات والكواشف

مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية والمرئية UV-2401 (شيمادزو، اليابان)؛ LumatLB9507 مقياس الإضاءة الأنبوبي فائق الحساسية (ألمانيا

بيرثولد تكنولوجيز)؛ RE-52المبخر الدوار CS (مصنع شنغهاي يارونج لأدوات الكيمياء الحيوية)؛ حمام مائي ترموستاتي إلكتروني HW-SY (مصنع Jintan Xinhang Instrument)؛ مقياس درجة الحموضة PHS -3 C (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.)؛ فرن التجفيف بالفراغ DZF-6020 (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.). Cistanche deserticola: تم شراؤه من شركة Kuitun Pharmaceutical Corporation. اللومينول (سيجما، الولايات المتحدة الأمريكية)، الدوبامين (المعهد الصيني لمراقبة المنتجات الصيدلانية والبيولوجية)، FeSO4، EDTA، فيتامين C، H2O2، NaClO، Na2CO3، NaHCO3، وما إلى ذلك كلها كواشف تحليلية محلية. الماء التجريبي هو الماء المقطر بالتبادل الأيوني.

2.2 الطريقة التجريبية

2.2.1 طريقة الاستخراجسيستانش ديزيرتيكولاالسكاريد

خذ 30 جم من مسحوق Cistanche deserticola وضعها في دورق مخروطي سعة 500 مل. اغمره في الأثير البترولي (60-90 درجة)، والأثير، ومحلول ساخن من الإيثانول بنسبة 80% (30 درجة) لمدة 6 ساعات على التوالي، ويتم تطاير المادة المتبقية لتجفيف المذيب. انقع بقايا الفلتر في الماء بنسبة 1 ∶ 10 لمدة 24 ساعة، وسخنه عند 30 درجة، واستخرجه لمدة 100 دقيقة. بعد الاستخراج، الطرد المركزي للحصول على طاف. بعد تركيز المادة الطافية تحت ضغط مخفض، يتم ترسيبها باستخدام 95% إيثانول بحجم 3 أضعاف الحجم. يُسمح بالوقوف لمدة 24 ساعة عند 4 درجات. بعد الطرد المركزي، يتم جمعها والترسيب. بعد التجفيف بالفراغ، يمكن الحصول على السكاريد الخام من Cistanche deserticola. قم بوزن 1.00 جرام من مادة عديد السكاريد الخام، ثم قم بإذابتها بالماء، ثم ضعها في دورق حجمي سعة 50 مل في وضع الاستعداد.

الجينسنغ الصحراوي – مضاد للأكسدة

انقر هنا لعرض منتجات مسحوق Cistanche

【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.2.2 اختبار القدرة على الكسحسيستانش ديزيرتيكولاالسكاريد إلى O-2 · الجذور الحرة

تم اختبار قدرة الكسح لسكريات Cistanche deserticola على O {{0}} · عن طريق إنتاج الجذور الحرة للأكسيد الفائق (O -2 ·) من أكسدة الدوبامين [3]. أضف 3.0مل من {{10}}.1mmol/LpH=10.12 محلول كربونات منظم، 3.0مل من الماء، و{{18 }}.5 مل من محلول عينة السكاريد بتركيزات مختلفة في أنبوب اختبار التجفيف مع المقياس بدوره. بعد التسخين في حمام مائي بدرجة 30 لمدة 5 دقائق، أضف 1.0مل من 2.0 مليمول/لتر دوبامين مسخن مسبقًا في حمام مائي بدرجة حرارة 30 درجة، امزج على الفور وحدد الوقت، وحافظ على التفاعل عند 30 درجة لمدة 5 دقائق، وأوقف التفاعل فوراً باستخدام قطرتين من حمض الهيدروكلوريك 10 مول/لتر. استخدم المحلول المنظم كمرجع، وقم بقياس الامتصاصية (العينة A) عند 221 نانومتر، واستبدل العينة (الفارغة A) بـ 0.5 مل من الماء في المجموعة الفارغة، واستبدل العينة بـ 0.5 مل من حمض الأسكوربيك في المجموعة الضابطة ، قم بقياس كل عينة ثلاث مرات بالتوازي، وخذ القيمة المتوسطة. O-2 · معدل التصفية (%)=(فارغ - عينة)/فارغ × 100%

2.2.3 اختبار القدرة على الكسحسيستانش ديزيرتيكولاالسكاريد إلى · OH الجذور الحرة

Dعشبة سيستانش الحية -مضاد للأكسدة

تم استخدام نظام EDTA-Fe (Ⅱ) - أزرق الميثيلين - H2O2 لاختبار قدرة عديد السكاريد Cistanche deserticola على جذري الهيدروكسيل. المبدأ هو أن EDTA-Fe (Ⅱ) يتفاعل مع بيروكسيد الهيدروجين لإنتاج · OH الجذور الحرة، مما يقلل من ذروة الامتصاص المميزة لمحلول الميثيلين الأزرق عند 660 نانومتر.

أضف 1.0 مل من محلول 5mmol/L LFeSO4، 1.2 مل من محلول LEDTA 5mmol/L، 2.0mL من 0.03mol/L NaH2PO{ {12}} Na2HPO4 (pH=7.4) محلول منظم، و1.3 مل من 20 ملي مول/لتر من محلول بيروكسيد الهيدروجين في سلسلة من 1 0 مل من أنابيب الاختبار ذات السدادات، رجّ جيدًا، وأضف 0.7 مل من محلول أزرق الميثيلين 0.2 ملمول/لتر، ثم أضف 1.0 مل من المحلول المراد اختباره وفيتامين C1.0 بتركيزات مختلفة على التوالي، ثم خفف إلى 10.00 مل مع الماء، يخلط جيدا، ويحفظ عند 37 درجة لمدة 30 دقيقة، ويقاس قيمة الامتصاص لكل محلول عند 660 نانومتر، استبدلت المجموعة الفارغة محلول العينة بالماء. وتقاس كل عينة ثلاث مرات بالتوازي، وتؤخذ القيمة المتوسطة. · معدل الكسح الجذري OH للعينة (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × في صيغة 100%: A0 -- الامتصاص قيمة الأنبوب غير التالف. A1 - قيمة الامتصاص للأنبوب التالف؛ أ2 -- القيمة الضوئية بعد إضافة العينة.

2.2.4 اختبار على DPPH · قدرة الكسحسيستانش ديزيرتيكولاالسكاريد

خذ {{0}}.1 مل من محلول عديد السكاريد Cistanche deserticola وأضفه إلى محلول 5.0 مل LDPPH · امزجه بسرعة، واتركه لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة،

حدد تغير الامتصاص عند الطول الموجي 517 نانومتر [4]. وتقاس كل عينة ثلاث مرات بالتوازي، وتؤخذ القيمة المتوسطة. معدل تصفية العينة لـ DPPH · (%)=1 - [(AB)/A0] × في صيغة 100%: A0 -- قيمة الامتصاص لـ DPPH · (1.9mLDPPH ·+0.1mL50% إيثانول) بدون عينة؛ أ - قيمة الامتصاصية للعينة بعد التفاعل مع DPPH ·؛ B -- قيمة الامتصاص للعينة الفارغة (العينة 0.1 مل +1.9 مل 50٪ إيثانول).

2.2.5سيستانش ديزيرتيكولااختبار الأكسجين المفرد الكاسح للسكاريد 1O2

يتم إنتاج الأكسجين أحادي الخط (1O2) عن طريق التفاعل الكيميائي لـ NaClO وH2O2 عند درجة حرارة 37 درجة [5]. الحل المستخدم لتحديد 1O2 هو محلول NaClO 100 ميكرولتر L2.8mmol/L، محلول 400 ميكرولتر L5mmol/LNaOH، محلول 300 ميكرولتر L10mmol/LH2O2، محلول 50 ميكرولتر L1mmol/Luminol. أثناء التفاعل، تتم إضافة محلول التفاعل إلى محلول العينة، ويقوم جهاز التألق الكيميائي تلقائيًا بتسجيل عملية التفاعل في نفس الوقت. خذ NaClO-H2O2-NaOH-Luminol كعنصر التحكم الفارغ. ابدأ التفاعل، وأضف محلول التفاعل إلى أنبوب العينة من زجاجة تخزين أداة التألق الكيميائي وفقًا للكمية التي حددها الإجراء. ثم يتم تسجيل شدة التألق الكيميائي لخليط التفاعل على ورقة التسجيل كل 5 ثوان، ويتم قياس كل عينة ثلاث مرات بالتوازي، ويتم أخذ متوسط ​​القيمة.

يتم حساب معدل الخلوص وفقًا للمعادلة التالية: معدل الخلوص (%)=(التحكم في شدة الإضاءة - شدة الإضاءة في العينة)/التحكم في شدة الإضاءة × 100%

3. النتائج والمناقشة

3.1 تأثير الكسحسيستانش ديزيرتيكولاعديد السكاريد على O-2 ·

فوائد cistanche tubulosa — Antioxidant

الخاصية الكيميائية لـ O-2 · نشطة، والتي يمكن أن تجعل الأحماض الدهنية الموجودة على الأغشية الحيوية تنتج البيروكسيد، ومن ثم تدمر الخلايا [6]. في هذا البحث تم استخدام طريقة الدوبامين لتحديد قدرة O-2 على الكسح. يظهر الشكل 1 قدرة Cistanche deserticola على الكسح إلى O-2 ·. وأظهرت النتائج أن عديد السكاريد Cistanche deserticola يمكن أن يمنع O-2 · الناتج عن الأكسدة الذاتية للدوبامين، ويزداد مع زيادة التركيز ضمن نطاق التركيز المقاس (0-8 ملغم/مل)، ولكن قدرة الكسح كانت أقل من قدرة حمض الأسكوربيك.

3.2 تأثير الكسحسيستانش ديزيرتيكولاعديد السكاريد · OH

· OH هو أحد أكثر الجذور الحرة للأكسجين نشاطًا في أنواع الأكسجين النشطة. يمكن أن يتفاعل مع أي جزيء بيولوجي كبير تقريبًا في الخلايا الحية ويمكن أن يؤدي إلى عمليات كيميائية حيوية مثل بيروكسيد الدهون، وبلمرة البروتين، وإزالة البلمرة، وتكسير الحمض النووي، وما إلى ذلك في أنسجة الجسم، مما يسبب أمراض الأنسجة والخلايا، مما يؤدي إلى حدوث الأمراض المختلفة وتسريع شيخوخة الجسم[7]. يظهر الشكل 2 قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola على · OH. وأظهرت النتائج أن عديد السكاريد Cistanche deserticola كان له تأثير كسح جيد على · OH، وزاد مع زيادة التركيز.

3.3 قدرة عديد السكاريد Cistanche deserticola على التخلص من DPPH ·

DPPH · (جذر ثنائي فينيل الهيدرازين المر) هو جذر حر مستقر، وهو أرجواني في المذيبات العضوية وله امتصاص قوي بالقرب من 517 نانومتر. وبعد إضافة مضادات الأكسدة، تتم إزالة بعض الجذور الحرة، مما يضعف الامتصاص، ويمكن استخدامها لتقييم نشاط مضادات الأكسدة لهذه المادة [8]. انظر الشكل 3 لمعرفة DPPH · قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola. أظهرت النتائج التجريبية أن قدرة الكسح لـ Cistanche deserticola polysaccharide على DPPH · كانت مرتبطة بشكل إيجابي مع تركيزه، وكانت قدرة الكسح أكبر من قدرة حمض الأسكوربيك.

3.4 قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola على 1O2

الأكسجين أحادي الخط هو الأكسجين الجزيئي المثار ذو الخصائص الكيميائية النشطة. نظرًا لأن الإلكترونات غير المتزاوجة تميل إلى الاقتران، فإن الجذور الحرة تظهر خصائص كيميائية أكثر نشاطًا [9]. يظهر الشكل 4 قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola على 1O2. وأظهرت النتائج التجريبية أن قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola كانت أقل من قدرة حمض الأسكوربيك في نطاق 0-4.0 mg / مل، وكانت قدرة الكسح لعديد السكاريد Cistanche deserticola أعلى من قدرة حمض الأسكوربيك عندما كان التركيز أكبر من 4.0 ملغم/مل.

4. الخلاصة

تمت دراسة نشاط مضادات الأكسدة في عديد السكاريد Cistanche deserticola في المختبر بالتفصيل من خلال أنظمة جذرية تفاعلية مختلفة خالية من الأكسجين.من النتائج التجريبية، يمكن ملاحظة أنه ضمن نطاق التركيز التجريبي، فإن مستخلص السكاريد من Cistanche deserticola له تأثيرات كسح على O-2 ·، · OH، DPPH · و1O2، وتختلف تأثيرات الكسح باختلاف أنظمة.أظهرت النتائج أنيعتبر عديد السكاريد Cistanche deserticola أحد مضادات الأكسدة الطبيعية الخارجية الفعالة، وهو يستحق المزيد من البحث والتطوير والاستخدام الشامل..

سيستانش توبولوسا 200 ملغ—أنتيوxidant