النشاط المضاد للألم والمضاد للالتهابات الذي تسببه Cistanche Deserticola في القوارض

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

لي وي لين وآخرون

الملخص

في هذه الدراسة ، فإن جذورسيستانشالصحراء(Orobanchaceae ، والمختصرة باسم CD) تم استخلاصها بنسبة 50 في المائة من الإيثانول وعزلها بشكل منظم بواسطة أسيتات الإيثيل ، ن- بيوتانول ، والماء. المسكن ومضاد-التهاباتتم تقييم تأثيرات مستخلص القرص المضغوط وثلاث طبقات في عدة نماذج حيوانية. قرص مضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلصات تمنع بشكل فعال الاستجابة المتلوية التي يسببها حمض الأسيتيك بنسبة 1 في المائة واستجابات اللعق ثنائية الطور الناتجة عن 1 في المائة من الفورمالين ، كما تقلل الوذمة التي يسببها 1 في المائة من الكاراجينان ولكن ليس الزيموسان. علاوة على ذلك ، الطبقات البوتانوية والمائية للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)لا يقلل المستخلص من الألم الناجم عن حمض الأسيتيك والفورمالين فحسب ، بل يقلل أيضًا من الوذمة التي يسببها الكاراجينان. تأثيرات الطبقة البوتانوية للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص أفضل من مستخلص الطبقة المائية. بالإضافة إلى تأثير الطبقة البوتانوية للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)لم يتم إلغاء المستخلص بواسطة النالوكسون. أظهرت هذه النتائج أن لها مسكنات ومضاد-التهاباتالتأثيرات ، والطبقات البوتانوية والمائية هي مكونات نشطة بشكل رئيسي. علاوة على ذلك ، فإن مسكن ومضاد-التهاباتآثار الطبقة البوتانوية للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)لم يكن المستخلص مرتبطًا بمستقبلات الأفيون والجهاز المناعي.

الكلمات الدالة:Cistanche Deserticola ؛ نشاط مسكن نشاط مضاد للالتهابات

1 المقدمة

سيستانشالصحراءأماه. (Orobanchaceae ، يُختصر باسم CD) ، وهو عشب محلي في الصين يستخدم على نطاق واسع في الطب التقليدي للعديد من العلاجات العلاجية بما في ذلك المؤشرات المهدئة والمسكنة والمعززة للمناعة (Lee ، 1986). أشارت الدراسات الدوائية الحديثة إلى القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)يمتلك المستخلص تعزيزًا للمناعة (Chin and Su ، 1993) ، وتأثير إزالة الجذور الحرة (Hsu et al. ، 1995) ، وزيادة نشاط SOD (Chang et al. ، 1995). في دراسة حديثة ، لعب تفاعل الجذور الحرة دورًا مهمًا في العمليات الالتهابية (Arrigoni-Martelli ، 1985). لذلك ، تمت محاولة الدراسة الحالية للتحقيق في التأثيرات المسكنة المفترضة للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص في الفئران باستخدام اختبار التلوي الناجم عن حمض الأسيتيك (تابر وآخرون ، 1969) واختبار اللعق الناجم عن الفورمالين (شيباتا وآخرون ، 1989). ثانيًا ، درسنا أيضًا الممكنمضاد-التهاباتأنشطة القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)مقتطف من العملية الالتهابية الكلاسيكية باستخدام اختبار الوذمة التي يسببها الكاراجينان (وينتر وآخرون ، 1962) وعملية الالتهاب البديلة باستخدام اختبار الوذمة التي يسببها الزيموسان (Tarayre et al. ، 1989). أخيرًا ، بحثنا عن طبقات نشطة من مستخلص القرص المضغوط مفصولة بمذيبات مختلفة. "

2. المواد والأساليب

2.1. المواد النباتية والمستخلصات

جذور القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)تم شراؤها من سوق تايوان وأكدها الأستاذ MT Hsieh. تم الاحتفاظ بعينة قسيمة (رقم CMC-ICPS -000626) في المعشبة التابعة لمعهد العلوم الصيدلانية الصينية ، كلية الطب الصينية للرجوع إليها في المستقبل. استخراج وعزل القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)تم اتباعها مثل التقارير السابقة (لو ، 1998). قرص مضغوط(Cistancheالصحراء)تم استخدام المستخلص (العائد بنسبة 34.2 بالمائة) وثلاث طبقات * / طبقة أسيتات الإيثيل وطبقة البوتانول والطبقة المائية (عوائدها في 3.4 و 10.2 و 30.6 بالمائة) (يتم اختصارها كـ CDE و CDB و CDW ، على التوالي) * / في تحضير المستخلصات.

2.2. تحضير المستخلصات والأدوية

قرص مضغوط(Cistancheالصحراء)استخراج ({0}. 1 ، 0.3 ، 1 جم / كجم) وثلاث طبقات من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلصات ({0}. 0 3 ، 0. 1 ، 0. 3 جم / كجم) تمت إذابتها في 0.5 بالمائة من كربوكسي ميثيل سلولوز وتم إعطاؤها شفويًا قبل 60 دقيقة لحقن محفز. تم تحضير حمض أسيتيل الساليسيليك (ASA) (100 ، 300 مجم / كجم) والإندوميتاسين (IN DOL) (10 مجم / كجم) كمعلق مع 0.5 في المائة من كربوكسي ميثيل سلولوز وإعطائه داخل الصفاق قبل حقن محفز. تم إذابة النالوكسون (1 مجم / كجم) بمحلول ملحي عادي.

2.3 الحيوانات

تم استخدام ذكور جرذان Sprague-Dawley (200-250 جم) لدراسةمضاد-التهاباتأنشطة. تم استخدام ذكور فئران ICR (20-25 جم) لاختبار التأثيرات المسكنة. تم استخدام جميع الحيوانات في التجارب وفقًا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام حيوانات المختبر. تم إيواؤهم لمدة أسبوع على الأقل قبل بدء التجربة في 239 / 1 8 درجة حرارة بيئة منظمة و 60 بالمائة من الرطوبة مع إمكانية الوصول المجاني إلى الأطعمة القياسية في الكريات (تم توفيرها وتصميمها بواسطة Fwusow Industry Co.، Taiwan ) ومياه الصنبور ، حيث تم الحفاظ على 12-12 دورة الضوء / الظلام (مرحلة الإضاءة: 08: 00-20: 00 ساعة). ثم كانت تدار الأدوية والمسكنات ومضاد-التهاباتتم إجراء المقايسات بطريقة التعمية المزدوجة. بعد القياس السلوكي ، تم قتل جميع الحيوانات بثاني أكسيد الكربون.

2.4 دراسة Antinociceptive

2.4.1. استجابة تتلوى البطن التي يسببها حمض الخليك في الفئران

تم تقسيم الفئران بشكل عشوائي إلى عدة مجموعات. تم إعطاء كل فأر محلول حمض الأسيتيك بنسبة 1 في المائة داخل الصفاق (10 مل / كجم من وزن الجسم). تم وضع الفئران في صناديق المراقبة الفردية. كانت أعراض التهاب البطن الناجم عن حمض الأسيتيك مماثلة لتلك التي وصفها تابر وآخرون. (1969). تلقت حيوانات التحكم حلول المركبات في نفس التجارب. بعد خمس دقائق من حقن حمض الأسيتيك ، تم حساب عدد الاستجابات المتلوية لكل فأر لمدة 10 دقائق أثناء تلوي البطن الناجم عن حمض الأسيتيك. أخيرًا ، سمح لنا عدد الردود المتلألئة بالتعبير عن النسبة المئوية للحماية باستخدام النسبة التالية: (متوسط ​​التحكم في المعالجة) / 100 / متوسط ​​التحكم.

2.4.2. استجابة لعق التي يسببها الفورمالين في الفئران

تمثل هذه الطريقة تعديلاً لتلك التي وصفها شيباتا وآخرون. (1989). تم وضع كل فأر في غرفة المراقبة على أرضية صفيحة شفافة من الأكريليك لمدة 5 دقائق قبل حقن الفورمالين. تحت الأرض ، تميل مرآة كبيرة بزاوية 458 للسماح بمراقبة واضحة لأقدام الحيوان. تم إعطاء الحيوانات 25 مل من 1٪ فورمالين في الجزء السفلي الأيمن. بعد ذلك ، تمت إعادة كل حيوان إلى الغرفة وتم ملاحظة فترتين متميزتين من استجابة اللعق المكثفة. تم تسجيل الفترة الأولى (المرحلة المبكرة) 0 / 5 دقائق بعد حقن الفورمالين والفترة الثانية (المرحلة المتأخرة) تم تسجيلها بعد 10/35 دقيقة بعد الحقن. تم قياس الوقت (الأوقات) الذي يقضيه في لعق استجابات القدم المحقونة كمؤشر على استجابة الألم.

2.5 دراسة مضادة للالتهابات في الفئران

المضاد-التهاباتتم تحديد النشاط في الفئران عن طريق قياس متوسط ​​الزيادة في حجم المخلب الخلفي بعد الحقن تحت الأخمص للعوامل الالتهابية مثل الكاراجينان (وينتر وآخرون ، 1962) أو زيموسان (تاراير وآخرون ، 1989). تم حقن الحيوانات بـ 0. 1 مل 1 في المائة كاراجينان أو 2 في المائة زيموسان في القدم الخلفية اليمنى تحت صفاق أخمصي. تم تقدير كمية الالتهاب من حيث المليلتر باستخدام مقياس التحمل (7150 أوغو باسيلي) ، والذي سجل اختلافات صغيرة في مستوى الماء بسبب إزاحة الحجم. قبل أي علاج ، تم تحديد متوسط ​​حجم الكفوف الخلفية لكل حيوان (Vo) بثلاثة قياسات لا تختلف عن أكثر من 4 بالمائة (دقة الجهاز). ثم بعد 30 ، 60 ، 90 ، 120 ، 150 ، 180 ، 210 ، 240 دقيقة بعد حقن العوامل الالتهابية ، تم تحديد متوسط ​​حجم الكفوف الخلفية لكل حيوان (Vt) بثلاثة قياسات لم تختلف عن أكثر من 4 بالمائة.

تم حساب النسب المئوية للوذمة في كل سجل بمقارنة متوسط ​​حجم الكفوف الخلفية لكل حيوان (Vt) بعد حقن العوامل الالتهابية مع متوسط ​​حجم الكفوف الخلفية لكل حيوان (Vo) قبل أي علاج (Palanichamy و Nagarajan ، 1990). تم الحصول على نسب التثبيط لكل مجموعة باستخدام النسبة التالية: [(Vt-Vo) control / (Vt-Vo) المعالج] -100 / (Vt-Vo).

2.6. تحليل احصائي

جميع البيانات التي تم الحصول عليها خلال مسكن ومضاد-التهاباتتم التعبير عن النشاط من حيث الأخطاء المتوسطة والمعيارية ومزيد من التحليل باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه ANOVA ، متبوعًا باختبار شيف. عندما كان الاحتمال (P) أقل من 0. 05 ، كان الفارق مهمًا.

3. النتائج والمناقشة

الحيوانات المعالجة بجرعات فموية من قرص مضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص (0. 1-1 جم / كجم) نتج عنه تثبيط كبير يعتمد على الجرعة وتثبيط الاستجابة المتلوية التي يسببها حمض الأسيتيك (الجدول 1) والمراحل ثنائية الطور لاستجابات لعق الفورمالين في الفئران ( الشكل 1 (أ)). التثبيط الناجم عن القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص بتركيز 1 جم / كجم على الاستجابة المتلوية التي يسببها حمض الأسيتيك واستجابات اللعق التي يسببها الفورمالين كانت حوالي 54 و 45 في المائة على التوالي. حمض أسيتيل الساليسيليك ذو التحكم الإيجابي عند 0. 1-0. كما أدى 3 جم / كجم إلى تقليل الاستجابة الملتوية التي يسببها حمض الأسيتيك مع تثبيط بنسبة 45-64 في المائة (الجدول 1). ومع ذلك ، فإن الإندوميتاسين الضبط الإيجابي الآخر عند 10 ملغم / كغم قد منع فقط المرحلة المتأخرة وليس المبكرة من استجابة اللعق التي يسببها الفورمالين في الفئران بتثبيط أقصى قدره 32 في المائة (الشكل 1 (أ)). علاوة على ذلك ، فقط الطبقات البوتانولية والمائية بين ثلاث طبقات من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص في 0. 1-0. نتج أيضًا عن 3 جم / كجم تأثير مضاد للألم ، وكانت التأثيرات المسكنة هذه للطبقة البوتانولية أفضل من تلك الخاصة بالطبقة المائية (الجدول 1 والشكل 1 (ب)) . ثانيًا ، قمنا بتقييممضاد-التهاباتنشاط القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص وثلاث طبقات ضد تكون الوذمة الكلاسيكية (التي يسببها الكاراجينان) والبديلة (التي يسببها الزيموسان). وجدنا هذا القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص في 0. 1-1 جم / كجم أيضًا منع بشكل كبير تكوين الوذمة التي يسببها الكاراجينان بطريقة مرتبطة بالجرعة ، كما أدى الإندوميتاسين عند 10 مجم / كجم بشكل فعال إلى تثبيط تكوين الوذمة التي يسببها الكاراجينان في الفئران (الشكل 1 ب). 2). ومع ذلك ، لم يتم تثبيط تكوين الوذمة التي يسببها zymosan بواسطة القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)استخراج في 0. 1-1 جم / كجم في الجرذان (البيانات غير معروضة). علاوة على ذلك ، فقط طبقة البوتانوليك بين ثلاث طبقات من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)المستخلص في 0. 1-0. 3 جم / كجم أيضًا منع بشكل كبير تكوين الوذمة التي يسببها الكاراجينان في الفئران (الشكل 2). وفقًا لتقارير الكيمياء النباتية ، فإن حمض الأكتوزيد والسكسينيك ، ينتميان إلى مكونات طبقة البوتانوليك من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)مقتطف (Hsu et al. ، 1994 ، 1995) ، يمتلكمضاد-التهاباتالنشاط على تكوين الوذمة الناجمة عن المواد الكيميائية (موراي وآخرون ، 1995 ؛ كاباتشني وآخرون ، 1987). من بياناتنا الحالية والتقارير السابقة الأخرى ، اقترحنا جذور القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)يمتلك مسكن ومضاد-التهاباتالنشاط في القوارض ، والمكونات النشطة تخرج بشكل رئيسي في الطبقة البوتانولية للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)مقتطف. سواء أكتيوسيد وحمض السكسينيك من المكونات النشطة للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)يجب علينا عزل وتقييم مسكناتهم ومضاد-التهاباتنشاط في المستقبل.

الشكل 1. تأثير القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)مستخلص ({0}. 1 ، 0.3 و 1 جم / كجم) ، أسيتات إيثيل ، طبقات بيوتانوليك ومائية من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)استخراج (CDE و CDB و CDW) ({0}. 0 3 ، 0. 1 و 0. 3 جم / كجم) والإندوميتاسين (INDOL ، 1 0 مجم / كجم) في وقت مبكر (0/5 دقائق) والمرحلة المتأخرة (10/35 دقيقة) من استجابة لعق التي يسببها الفورمالين في الفئران. يتم تمثيل كل قيمة كمتوسط ​​9 / SE (N / 7). * PB / 0.05 ، *** PB / 0.001 ، مقارنة بمجموعة VEH.

الشكل 2. تأثير القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)مستخلص ({0}. 1 ، 0.3 و 1 جم / كجم) ، أسيتات إيثيل ، طبقات بيوتانوليك ومائية من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)استخراج (CDE و CDB و CDW) ({0}. 0 3 ، {{1 0}. 1 و 0.3 جم / كجم) وإندوميتاسين (إندول ، 10 ملغم / كغم) على وذمة القدم التي يسببها الكاراجينان في الجرذان. يتم تمثيل كل قيمة كمتوسط ​​9 / SE (N / 6). * PB / 0.05، ** PB / 0.01 مقارنة بمجموعة VEH

علاوة على ذلك ، شيباتا وآخرون. (1989) يشير إلى أن المرحلة المبكرة من استجابة اللعق التي يسببها الفورمالين كانت مرتبطة بالبراديكينين والمادة P ، وأن المرحلة المتأخرة كانت مرتبطة بالبراديكينين والأوتوكرين والبروستاجلاندين. أشارت بياناتنا الحالية إلى أن النالوكسون لم يلغيمضاد-التهاباتنشاط طبقة البيوتانول للقرص المضغوط(Cistancheالصحراء)استخلاص على كلتا مرحلتي استجابة اللعق التي يسببها الفورمالين (الشكل 3) والتأثير المسكن على الاستجابة المتلوية التي يسببها حمض الأسيتيك (الجدول 1). لذلك ، فإن مسكن ومضاد-التهاباتقد لا تكون تأثيرات طبقة البيوتانول لمستخلص القرص المضغوط مرتبطة بمستقبلات المواد الأفيونية. علاوة على ذلك ، CD(Cistancheالصحراء)المستخلص وطبقة البيوتانوليك الخاصة به تمنع فقط تكوين الوذمة التي يسببها الكاراجينان في الفئران. الوذمة التي يسببها الكاراجينان عن طريق تسلل خلايا الدم البيضاء متعددة النوى ونظام الكينين المنشط خاصة البراديكينين يختلف عن الوذمة التي يسببها الزيموسان عن طريق تدفق الوحيدات والجهاز المناعي المنشط (داماس وآخرون ، 1990 ؛ داوسون وآخرون ، 1991). حمض السكسينيك ، أحد مكونات الطبقة البوتانولية من مستخلص القرص المضغوط ، يثبط وظيفة الكريات البيض متعددة الأشكال (Rotstein et al. ، 1985). أظهرت هذه النتائج أن المسكن ومضاد-التهاباتآثار طبقة البيوتانول من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)قد يكون المستخلص مرتبطًا بنظام الكينين ولكن ليس بمستقبلات المواد الأفيونية وأنظمة المناعة على الرغم من القرص المضغوط(Cistancheالصحراء)يمتلك التأثير المناعي (تشين وسو ، 1993). لتفصيل الية مسكن ومضاد-التهاباتالنشاط ، يجب علينا إجراء مزيد من التحقيق مع الطبقات النشطة أو مكونات مستخلص القرص المضغوط.

سيستانشتوبولوساله العديد من التأثيرات ، انقر هنا لمعرفة المزيد

مراجع

Arrigoni-Martelli، E.، 1985. علم الأدوية من إزالة الجذور الحرة في الالتهاب. المجلة الدولية لتفاعلات الأنسجة 7 ، 513/519.
Chang، Y.، Wu، H.، Wang، SN، Cheng، HC، 1995. دراسة عن التأثيرات القوية لـسيستانشالصحراءما. ، Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck و Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. المجلة الصينية للمواد والطب الصيني 26 ، 143/146.
Chin، HL، Su، YC، 1993. دراسة عن التأثيرات الدوائية لـسيستانشالصحراءأماه. المجلة الصينية للمواد والطب الصيني 19 ، 143/146.
داماس ، ج. ، بوردون ، ف ، ريماكل-فولون ، ج. ، آدم ، أ ، 1990. الكينين والإفرازات البريتونية التي يسببها الكاراجينين والزيموسان في الفئران. المجلة البريطانية لعلم الأدوية 101 ، 418/422.

Dawson، J.، Sedgwick، AD، Edwards، JC، Lees، P.، 1991. دراسة مقارنة للاستجابات الخلوية والنضحية والنسيجية للكاراجينان والديكستران والزيموسان في الماوس. المجلة الدولية لتفاعلات الأنسجة 13 ، 171/185.

Hsu، WH، Chu، SH، Chao، CH، Hsu، Y.، Yuan، KW، Yen، CH، Chi، CY، Chan، C.، 1994. دراسة عن المكونات الكيميائية لـسيستانشالصحراءأماه. المجلة الصينية للمواد والطب الصيني 25 ، 509/513.
Hsu، WH، Chu، SH، Sheng، LC، Yuan، KW، Mao، CN، 1995. دراسة عن المكونات الكيميائية والتأثيرات الدوائية لـسيستانشالصحراءأماه. و Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. الأدوية العشبية الصينية التقليدية 26 ، 143/146.
Kabachnyi، VI، Chernykh، VP، Drogovoz، SM، Golubenko، Iu.A.، Bogutskaia، EE، 1987. ابحث عنمضاد-التهاباتالمستحضرات من بين مشتقات حمض السكسينيك هيتيريل أميدات. Farmakologiia i Toksikologiia 50، 94/97.
لي ، سي إل ، 1986. بين-تساو-كون-مو. المعهد القومي لبحوث منشورات الطب الصيني ، تايبيه ، ص. 20.
Lu، MC، 1998. دراسات حول التأثير المهدئ لـسيستانشالصحراء. مجلة علم الادوية الاثنية 59 ، 161/165.
Murai ، M. ، Tamayama ، Y. ، Nishibe ، S. ، 1995. Phenylethanoids في عشب Plantago lanceolata وتأثير مثبط على وذمة الأذن التي يسببها حمض الأراكيدونيك. بلانتا ميديكا 61، 479/480.
Palanichamy، S.، Nagarajan، S.، 1990. نشاط مسكن لخلاصة كاسيا اتا leat و kemp Eerol 3-0- Sophoroside. مجلة علم الادوية الاثنية 29 ، 73/78.
Rotstein، OD، Pruett، TL، Fiegel، VD، Nelson، RD، Simmons، RL، 1985. حمض السكسينيك ، منتج ثانوي استقلابي لأنواع البكتيريا ، يثبط وظيفة الكريات البيض متعددة الأشكال. العدوى والمناعة 48، 402/408.
Shibata، M.، Ohkubo، T.، Takahashi، H.، Inoki، R.، 1989. اختبار الفورمالين المعدل: استجابة مميزة للألم ثنائية الطور. ألم 38 ، 347/352.
Taber، RI، Greenhouse، DD، Rendell، JK، Irwin، S.، 1969. التفاعلات المناهضة والمضادة للمواد الأفيونية على تمدد البطن الناجم عن حمض الأسيتيك في الفئران. مجلة علم الأدوية والعلاج التجريبي 169 ، 29/38.
Tarayre، JP، Delhon، A.، Aliaga، M.، Barbara، M.، Bruniquel، F.، Caillol، V.، Puech، L.، Consul، N.، Tisne-Versailles، J.، 1989.
الدراسات الدوائية على التهاب الزيموسان في الجرذان والفئران. الشكل 1: وذمة القدم التي يسببها Zymosan في الجرذان والفئران. البحوث الدوائية 21 ، 375/384.
Winter ، CA ، Risley ، EA ، Nuss ، GW ، 1962. الوذمة التي يسببها الكاراجينان في مخلب الجرذ الخلفي كمقايسة لـمضاد-التهاباتالمخدرات. جمعية وقائع البيولوجيا التجريبية والطب 111 ، 544/547.