دراسة الملامح الكيميائية والمستقلبات للكيستانش الخام والمعالج في الفئران بواسطة UPLC-Q-TOF-MSE

تواصل بالبريد الاكترونيtina.xiang@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

الملخص

خلفية: معالجة المواد الطبية الصينية هي تقنية دوائية مميزة وفريدة من نوعها في الطب الصيني التقليدي (TCM) تستخدم لتقليل الآثار الجانبية ، وزيادة أو حتى تغيير الفعالية العلاجية للأعشاب النيئة. التغييرات في المكونات الأساسية الناتجة عن إجراء المعالجة الأمثل هي المسؤولة بشكل أساسي عن زيادة فعالية النباتات الطبية. تأثير تنشيط الكلى يانغ من الأرز المطبوخ على البخارCistanche Deserticola(C.deserticola) كان أقوى من الخام C.deserticola (CD).

طُرق: تم إجراء تحليل مقارنة باستخدام UPLC-Q-TOF-MS 'مع منصة المعلوماتية UNIFl لتحديد تأثير المعالجة. أجريت دراسات في المختبر لتوصيف المكونات وكذلكالمستقلباتفي الجسم الحي. تم تحديد المكونات الكيميائية في قرص مضغوط ومنتجاته المصنعة. أجريت التحليلات الإحصائية متعددة المتغيرات لتقييم الاختلافات فيما بينها بينما تم استخدام OPLS-DA لمقارنة ثاني أكسيد الكربون الزوجي.

نتائج: كشفت نتائج هذه الدراسة عن اختلافات كبيرة في جليكوسيدات الفينيثانويد (PhGs) وإيريديويدبعد المعالجة. تم اكتشاف ما مجموعه 97 مركبًا في مستخلصات القرص المضغوط ونواتجها المصنعة. PhGs التي لديها 4- مجموعة O-caffeoyl في 8- O - - جزء D-glucopyranosyl ، مثل acteoside و cistanoside C و campneoside Il و osmanthuside بعد معالجتها ، بينما انخفض PhGs مع 6 ' زادت مجموعة -O-caffeoyl في 8- O - - جزء D-glucopyranosyl ، مثل isoacetoside و isocistanoside C و isocampneoside l و isomartynoside ، خاصة في مجموعة CD-NP. كما زادت أيضًا شدة إشيناكوزيد وسيستانوسيد ب الذي يمتلك هيكله 6'-O - - شق D-glucopyranosyl. في دراسة في الجسم الحي ، تم اكتشاف 10 مكونات نموذجية و 44 مستقلبًا في بلازما الفئران والبراز والبول. أظهرت النتائج التي تم الحصول عليها أن المعالجة تؤدي إلى تباين كبير في المكونات الكيميائية للقرص المضغوط وأثرت على التخلص من المركبات في الجسم الحي ، وأن عمليات الأيض في الطور هي السلاسل الرئيسية لكل مركب ، وترتبط معظم المستقلبات مع إشيناكوسيد أو أكتيوسيد.

الاستنتاجات: هذا هو أول بحث مقارنة عالمي للقرص المضغوط الخام والمعالج. تضيف هذه النتائج إلى فهمنا لتأثير معالجة الأقراص المضغوطة وتعطي بيانات مهمة لتحقيقات الفعالية المستقبلية.

الكلمات الدالة: Cistanche Deserticola ، المعالجة ، UPLC-Q-TOF-MS5 ، الملامح الكيميائية ، المستقلبات في الجسم الحي

مقدمة

أظهرت معالجة المواد الطبية الصينية (CMM) قابلية تطبيق كبيرة في الممارسة السريرية للطب الصيني التقليدي (TCM) ، واعتبرت علاجًا قابلاً للتطبيق لعدة قرون. هذه تقنية دوائية فريدة مشتقة من نظرية الطب الصيني التقليدي. بعد المعالجة ، تم تحديد اختلافات كبيرة في المظهر والمكونات الكيميائية والخصائص والأهمية الطبية لجميع أنواع الطب الصيني التقليدي ، مما أدى إلى افتراض أن المعالجة يمكن أن تحسن الفعالية أو تقلل من التأثيرات السامة للطب الصيني التقليدي.

لمئات السنين،Cistanche Deserticola(Rou Cong Rong باللغة الصينية ، CD) شائع الاستخدام في الممارسة السريرية للطب الصيني التقليدي لتكملة وظائف الكلى. كما أنه يساعد في ترطيب الأمعاء مما يؤدي إلى إرخاء الأمعاء [1].سيستانشتم تسجيله أولاً في ShenNongBencaoJing. توجد بشكل شائع في الموائل القاحلة وشبه القاحلة عبر أوراسيا وشمال إفريقيا ، بما في ذلك إيران والصين والهند ومنغوليا [2]. تم تنفيذ معالجة القرص المضغوط عن طريق تبخير نبيذ الأرز تحت الضغط العادي ، وهي طريقة تحضير موثقة في الأدوية الصينية (Jiucongrong باللغة الصينية ، ويشار إليها فيما يلي باسم "CD-NP"). ويعد تبخير الأقراص المضغوطة مع نبيذ الأرز تحت ضغط مرتفع طريقة تحضير أكثر فاعلية (يُشار إليها فيما بعد بـ "CD-HP") [3 ، 4]. تم الكشف عن العديد من الدراسات أن التأثيرات الدوائية للقرص المضغوط تختلف عن منتجاتها المصنعة [5]. قد يعمل القرص المضغوط على تقوية الكلى ويانغ وإرخاء الأمعاء ، بينما بعد التبخير بواسطة نبيذ الأرز ، سيتم تعزيز تأثير تجديد الكلى يانغ. في دراستنا السابقة ، وجد أن CD-NP يمكن أن يعزز تنغيم الكلى ويدعم اليانغ ، ويخفف من تأثير ترطيب الأمعاء والتغوط [6-8]. في الممارسة السريرية ، تعد المنتجات المصنعة هي الشكل الأكثر استخدامًا.

حتى الآن ، قامت العديد من الدراسات بتحليل المكونات الكيميائية للقرص المضغوط ، متبوعة بعزل وتحديد أكثر من 100 مركب [9-11] ، مثل جليكوسيدات فينيل إيثانول (PhGs) ،إيريديويد، قشور ، و oligosaccharides كمكوناتها الكيميائية الرئيسية. وقد تم الإبلاغ أيضًا عن وجود العديد من الأنشطة الدوائية للـ PhGs بما في ذلك تعديل المناعة ، وقائية الأعصاب ، وقائية الكبد ، ومضادات الالتهاب ، ومضادات الأكسدة ، وما إلى ذلك [12-14]. تمتلك إيريديويد أنشطة مضادة للالتهابات [15 ، 16]. كما تم الكشف عن طريق الدراسات السابقة أن بعض المكونات الكيميائية أظهرت اختلافات أثناء المعالجة [17-20]. بناءً على هذه التقارير ، يمكن افتراض أن المعالجة اللاحقة ، الاختلافات في التركيب الكيميائي تؤدي إلى تأثيرات دوائية مختلفة ، والتي تحتاج إلى مزيد من الاستكشاف.

في الدراسة الحالية ، تم إجراء طريقة حساسة وفعالة ، مثل تحليل كروماتوجرافي سائل فائق الأداء مقترنًا بـ TOF-MSE (UPLC-Q-TOF-MSE) للتحليل المقارن ، وتم إجراء دراسات في المختبر لتحليل المستخلصات نوعيًا من CD و CD-NP و CD-HP لتوضيح ملامحهم الكيميائية. بشكل عام ، تم اعتبار المواد الكيميائية الخارجية ذات التعرض العالي في الأعضاء المستهدفة مكونات فعالة. لذلك ، في الفئران ، تم إعطاء القرص المضغوط ومنتجاته المعالجة عن طريق الفم على التوالي ، متبوعًا بتوصيفها. تكشف الدراسة الحالية عن دراسة مقارنة (في المختبر وفي الجسم الحي) للقرص المضغوط الخام والمعالج لأول مرة. ستوسع النتائج التي تم الحصول عليها فهمنا فيما يتعلق بتأثير معالجة الأقراص المضغوطة ، والتي قد تكون مفيدة لمزيد من الدراسات.

المواد والأساليب

المواد

تم توفير المركبات القياسية من ajugol (180120) و 2'-acetyl-acetoside (M0601AS) بواسطة Chendu Pure Chem-Standard Co. ، Ltd (تشنغدو ، الصين). تم توفير Cistanoside F (MUST -17022620) ، و echinacoside (D1105AS) ، و cistano-side A (M0906AS) ، و isoacteoside (M0106AS) من قبل شركة Must (Sichuan China) ؛ acteoside (O0618AS) ، salidroside (J0526AS) ، catalpol تم الحصول على (S0728AS) ، geniposide (A0407AS) ، وحمض geniposidic (MB 6001- S) من Dalian Meilun Bio.Co.، Ltd (داليان ، الصين). 8- epide oxyloganic acid (B31123) كان تم الحصول عليها من Shanghai Yuanye Biological Technology Co.، Ltd ، الصين. كان الميثانول والأسيتونتريل من فئة MS وتم الحصول عليهما من Merck KGaA ، دارمشتات ، ألمانيا. تم توفير حمض الميثانويك (CH ، O ،) من HPLCgrade بواسطة Merck KGaA (دارمشتات ، ألمانيا). تمت معالجة المياه المستخدمة في الدراسة الحالية عبر نظام Milli-Q (18.2 MQ ، Millipore ، Ma ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم توفير نبيذ الأرز من قبل Brand Tower Shaoxing Wine Co.، Ltd. (Zhejiang ، الصين).

تم جمع Cistanch deserticola من شركة Neimenggu wangyedi cistanche Co.Ltd. تم تحديد العينات من قبل البروفيسور يانجون تشاي (كلية الصيدلة ، جامعة لياونينغ في الطب الصيني التقليدي). تم تقديم العينات إلى جامعة لياونينغ للطب الصيني التقليدي.

الحيوانات

تم توفير ذكور الجرذان Sprague-Dawley (درجة SPF) مع 180-220 جم من إجمالي وزن الجسم من قبل Liaoning Changsheng biotechnology Co. Ltd. (مركز موارد حيوانات المختبر في مقاطعة Liaoning ، رقم الترخيص: SCXK -2015 - 0001). تم إيواء هذه الفئران في غرفة تكاثر ذات درجة حرارة جيدة ورطوبة ، أي 20-26 درجة ، 50-70 في المائة لمدة أسبوع واحد. تم تغذية الفئران بالطعام والماء المعتاد في المختبر قبل التجربة. صامت الحيوانات طوال الليل ، ومع ذلك ، تم توفير الماء بالشهرة قبل التجربة. تم إعدام الجرذان بنسبة 10 في المائة من مخدر هيدرات الكلورال. وافقت لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية في مستشفى مقاطعة لياونينغ للطب الصيني على جميع البروتوكولات التجريبية (2019.3.25 ، 2019015).

تحضير CD و CD NP و CD خلاصة HP

تمت معالجة CD-NP و CD-HP من نفس الدفعة من Cistanch deserticola. لتحضير CD-NP ، تم ترطيب قطع CD جافة (بسمك 5 مم ، 100 جم) بنبيذ الأرز (30 مل) وتم طهيها على البخار عند 100 درجة لمدة 16 ساعة ، متبوعة بالتجفيف عند 55 درجة عن طريق فرن التجفيف. بينما تم تحضير CD-HP عن طريق تسلل قطع CD جافة (بسمك 5 مم ، 100 جم) مع نبيذ الأرز (30 مل) ، متبوعًا بالبخار عند 1.25 ضغط جوي لمدة 4 ساعات. ثم تجفف في فرن تجفيف عند 55 درجة.

في دورق قياس 100 مل ، تم نخل جرام واحد من المسحوق عبر منخل رقم 4 ، متبوعًا بإضافة 50 بالمائة من الميثانول (50 مل) ثم تغطيته بإحكام وخلطه. تم وزن هذا الخليط ، متبوعًا بنصف ساعة. النقع. بعد النقع ، تم تسخين الخليط بالموجات فوق الصوتية (قوة 250 واط ، تردد 35 كيلو هرتز) لمدة 40 دقيقة ، متبوعًا بالتبريد ، والوزن مرة أخرى. تمت إعادة ملء فقدان الوزن بنسبة 50 في المائة من الميثانول ، وخلطه بشكل صحيح ، واتركه للوقوف ، متبوعًا بترشيح المادة الطافية ثم استخدام المرشح الذي تم الحصول عليه كمحلول اختبار.

تحليل MSE للمكونات النشطة

تحضير المواد القياسية: tubuloside-A (3. {11}} 2 mg) ، echinacoside (3. 00 mg) ، 2'-acetylacteoside (2.34 mg) ، acteoside (2.45 mg) ، isoacteoside (0.61) mg) ، cistanoside-F (2.14 مجم) ، salidroside (3.39 mg) ، geni poside (2.84 mg) ، ajugol (1.58 mg) ، catalpol (2.39 mg) ، geniposidic acid (2.56 mg) ، و 8- epideoxyloganic تم إضافة حمض (2.34 مجم) إلى قارورة حجمية سعة 10 مل ، تمت إضافة حجم ثابت للميثانول إلى الحجم ، وتم خلطه في محلول مرجعي للتركيز المقابل. تم خلط كل من 100 ميكرولتر في محلول مرجعي مختلط.

حالة تحليل MS: تم تصحيح قيمة كتلة Te قبل التجربة ، واستخدم وضع الأيونات السالبة. تراوح نطاق الكتلة بين 5 0 و 1200 داكن ، وتم حقن العينة عبر مضخة حقن بالتدفق. كانت سرعة المخروط 100 لتر / ساعة ، وتم ضبط معدل تدفق المذيب عند 800 لتر / ساعة. تم إصلاح الفولتية الشعرية والمخروطية عند 2500 و 40 فولت ، وفقًا لذلك. كانت درجة حرارة مصدر الأيونات والغاز المذيب 100 درجة و 400 درجة على التوالي ، وكان تردد اكتساب الإشارة 0.5 S 1.

تحليل UPLC-Q-TOF-MS لمستخلص القرص المضغوط (15-16 دقيقة) ، 65 بالمائة إلى 55 بالمائة أ (16-18 دقيقة). كان معدل التدفق 0. 3 مل دقيقة -1 ، بينما كانت درجة حرارة غرفة أخذ العينات الأوتوماتيكية والعمود 3 0 درجة و 8 درجات على حدة. كان حجم الحقن 1.0 ميكرولتر.

تم إجراء تقييم قياس الطيف الكتلي عبر Waters XEVO G {0} XS QTOF MS (شركة Waters Corporation ، ميلفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، والذي يشتمل على مصدر ESI. تم تثبيت معدل تدفق غاز النيتروجين عند 800 لتر في الساعة -1 مع درجة حرارة 400 درجة ، وتم تثبيت درجة حرارة المصدر عند 100 درجة ، وتم ضبط غاز المخروط عند 50 لترًا في الساعة. تم تعديل جهد المخروط والشعرية عند 40 و 2000 فولت ، وفقًا لذلك. تم استخدام طاقة الاصطدام للمنحدر في نطاق 20-30 فولت. تم الحصول على البيانات المركزية لجميع العينات من 50 إلى 1200 Da ، مع وقت مسح 5- 0.5 ثانية خلال وقت تحليل يبلغ 10 دقائق . تم استخدام LockSpray TM للتحقق من دقة الكتلة. تم استخدام أيون الليوسين إنكيفالين (200 بيكوغرام · ميكرولتر معدل تدفق التسريب 10 ميكرولتر دقيقة) عند m / z 554.2615 ككتلة قفل. تم استخدام برنامج Te MassLynx V4.1 (Waters Co. ، Milford ، الولايات المتحدة الأمريكية) للكتلة الدقيقة ، وتكوين أيونات السلائف ، وحساب أيونات الشظايا.

تحليل البيانات في منصة Masslynx

علاوة على ذلك ، تم إنشاء مكتبة داخلية تضم اسم المركب وهيكله والصيغة الجزيئية (بالمول) بناءً على الأدبيات. تمت الإشارة إلى جميع المركبات في قالب خاص مصنوع في Excel. بالإضافة إلى ذلك ، تم أيضًا حفظ ملفات mol (Chemdraw Ultra 8. 0 ، Cam-bridge soft ، الولايات المتحدة الأمريكية) وملفات Excel لجميع الهياكل المركبة الفردية على جهاز الكمبيوتر المحلي. تم استيراد ورقة Excel التي تحتوي على بيانات مهمة مباشرة إلى المكتبة العلمية في UNIFI

تم استخدام UNIFI 1.8.2 ، ووترز ، مانشستر ، المملكة المتحدة لتقييم الخصائص الهيكلية ، خاصة بالنسبة للشظايا المميزة وتجزئة MS. تم تعيين منطقة ذروة لا تقل عن 5 0 0 لاكتشاف الذروة ثنائي الأبعاد. أثناء الكشف عن القمم ثلاثية الأبعاد ، تم اختيار كثافة ذروة طاقة منخفضة لأكثر من 300 حساب وشدة ذروة طاقة مرتفعة لأكثر من 80 عددًا. تم العثور على خطأ في الكتلة يصل إلى ± 10 جزء في المليون للمركبات المعروفة ، وتم تعيين تفاوت وقت الاستبقاء في نطاق ± 0.1 دقيقة. اخترنا المقاربات السلبية التي تحتوي على -H ، بالإضافة إلى HCOOH. تم تنفيذ معالجة البيانات الأولية التي تم الحصول عليها من MS عبر برنامج UNIFI مبسط لتحديد المكونات الكيميائية التي تفي بالمعايير بسرعة مع قاعدة البيانات الذاتية ومكتبة الطب التقليدي الداخلية.

بعد ذلك ، للتحقق من التركيب الكيميائي لكل مركب مستهدف ، تم تمييز الأيزومرات من خلال أنماط تجزئة MS المميزة التي تم الكشف عنها في الدراسات المبلغ عنها ، ومن خلال مقارنة أوقات الاحتفاظ بالمعايير المرجعية.

تحليل الأيض على أساس التحليل الإحصائي متعدد المتغيرات

قبل معالجة البيانات الأولية ، تم تعيين المعلمات ، مثل الكتلة التي تتراوح من 15 0 إلى 12 0 0 دا ، نطاق وقت الاحتفاظ (0 إلى 20 دقيقة) ، شدة العتبة ( 2000 عدد) ، والتسامح الشامل ، أي 5 MDA ، بينما كانت النافذة الزمنية للكتلة والاحتفاظ 0.20 دقيقة و 0.05 دا على التوالي. في القائمة اللاحقة لقاعدة البيانات ، كان معرف الأيونات هو RT-m / أزواج فيما يتعلق بأوقات شطفها. تم اعتبار نفس القيم لـ RT و m / z في دفعات مختلفة من العينات نفس المركب.

تم إجراء تحليل إحصائي متعدد المتغيرات لتقييم المؤشرات الحيوية الفعالة التي ساهمت بشكل كبير في الاختلافات بين المجموعات المختلفة. أثناء التحليل ، تم استخدام تحليل المكون الرئيسي (PCA) للإشارة إلى الحد الأقصى للاختلافات والتعرف على الأنماط للحصول على نظرة عامة وتصنيف. OPLS-DA هي أداة نمذجة توفر تصورًا لتحميل المكون التنبئي OPLS-DA للمساعدة في تقييم النموذج. تم استخدام الأهمية المتغيرة للإسقاط (VIP) لتقييم تقييم المكونات المختلفة ، والمستقلباتwith VIP values>1. 0 والقيمة الاحتمالية<0.05 were="" regarded="" as="" effective="" markers.="" furthermore,="" a="" permutation="" test="" was="" conducted="" for="" providing="" reference="" distributions="" for="" the="" r²/o²values="" that="" could="" show="" the="" statistical="">

تم تصنيف فئران التجارب على الحيوانات بشكل عشوائي إلى أربع مجموعات (ن =6 لكل مجموعة) ، متبوعة بالإعطاء الفموي للمستخلصات المختلفة: (1) مجموعة التحكم الفارغة: أعطيت الفئران محلول ملحي طبيعي (2 مل / 100 جم) ؛ (2) مجموعة الأقراص المضغوطة: أعطيت الفئران مستخلص قرص مضغوط (2 مل / 100 جم) ؛ (3) مجموعة CD-NP: أعطيت الفئران مستخلص CD-NP (2 مل / 100 جم) ؛ (4) مجموعة CD-HP: أعطيت الفئران مستخلص CD-HP (2 مل / 100 جم). تم إجراء التصنيف الإضافي لجميع المجموعات إلى ثلاث مجموعات فرعية للبلازما والبول والبراز ، وفقًا لذلك. بعد ساعتين ، تم إعطاء كل فأر عن طريق الفم بنفس المقدار المتساوي من المستخلصات.

بعد الإعطاء ، تم إجراء جمع عينات الدم عند الساعة 1. 0 ساعة و 2. 0 ساعة و 4. 0 ساعة في أنابيب بوليثين 1.5 مل مملوءة بالهيبارين (من الأوردة المدارية) ، متبوعًا بالطرد المركزي (عند 4500 دورة في الدقيقة) لجميع العينات لمدة 15 دقيقة.

بالنسبة لعينات البول والبراز ، تم وضع الفئران في أقفاص التمثيل الغذائي ، ثم تم جمع عينات البول والبراز لمدة 24 ساعة بعد تناولها. تم إجراء الطرد المركزي لعينات البول عند 45 0 0 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة ، بينما تم تجفيف عينات البراز في الظل وطحنها إلى مسحوق ، ثم تم أخذ 0.2 جم وإضافتها إلى 0.5 مل من محلول ملحي المحلول ، والموجات فوق الصوتية لمدة 5 دقائق ، والطرد المركزي عند 12 ، 000 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة. تم الاحتفاظ بجميع العينات الحيوية عند درجة 80- حتى التحليل.

تحضير العينات البيولوجية. تمت إضافة عينات البلازما والبول والبراز باستخدام 3 أحجام من الميثانول ، متبوعة بالدوامة لمدة 3 دقائق. بعد ذلك ، تم إجراء الطرد المركزي (عند 12 ، 000 دورة في الدقيقة) للخلائط لمدة 10 دقائق ، متبوعًا بنقل المادة الطافية إلى أنبوب EP ، ثم تجفيفها بالنيتروجين عند 37 درجة. علاوة على ذلك ، تم إضافة 200 ميكرولتر من محلول HCN - H2O (50 بالمائة). عشرة ، تم استخدام الدوامة للخلط (دقيقة واحدة) ، متبوعة بالطرد المركزي (عند 12 ، 000 دورة في الدقيقة) لمدة 5 دقائق. تم حقن المادة الطافية (5 ميكرولتر) للعينات المعالجة في نظام UPLC-Q-TOF-MSE.

حالة الكروماتوغرافيا السائلة وطيف الكتلة تحليلالمستقلباتتم إجراءه أيضًا بواسطة أداة Waters UPLC من خلال واجهة ESI. تم إجراء عمليات الفصل باستخدام عمود Acquity UPLC HSS T3 (1 0 0 مم × 2.1 مم ، 1.8 ميكرومتر) ، وكان الطور المتحرك 0.1 بالمائة حمض الفورميك (أ): أسيتونتريل (ب) ، كانت حالة شطف التدرج 0-3 دقيقة (99.8 بالمائة → 98 بالمائة أ). 3-5 دقيقة (98 بالمائة → 95 بالمائة أ) ، 5-8 دقيقة (95 بالمائة → 90 بالمائة أ) ، { {18}} دقيقة (90 بالمائة → 85 بالمائة أ) ، 12-17 دقيقة (85 بالمائة → 70 بالمائة أ) ، 17-22 دقيقة (70 بالمائة ← 60 بالمائة أ) ، 22-23 دقيقة (60 بالمائة → 58 بالمائة أ) ، 23-25 دقيقة (58 بالمائة أ) ، 25-32 دقيقة (58 بالمائة → 45 بالمائة أ) ، 32-37 دقيقة (45 بالمائة → 35 بالمائة أ) ) ، 0.4 مل دقيقة -1 كان معدل التدفق. تم ضبط درجة حرارة العمود وغرفة العينة عند 40 درجة و 8 درجات على التوالي. تم استخدام شروط مطياف الكتلة المذكورة أعلاه.

استراتيجية للتحليل المنهجي للأيضات في العينات الحيوية تم استخدام برنامج UNIFI (1.8.2) لمعالجة البيانات. تم استخدام وظيفة Binary Compare لتحديد المستقلبات الفعالة. لم تكن المستقلبات التي تم تقييمها موجودة في عينة التحكم المكافئة أو كانت موجودة بكثافة أيونات منخفضة. تم تعيين عتبة الشدة النسبية عند 3 أو 5 ، ويمكن تقييم المستقلبات التي تفي بالمعايير التي تحتها خط. ثم تم تحديد المستقلبات الشائعة والتي يمكن التنبؤ بها بواسطة EIC. للبحث عن مستقلبات مرحلتين ، تم تطبيق وظيفة NLF. على سبيل المثال ، في برنامج UNIFI ، يمكن ضبط المعلمات على 176.0321 للبحث عن اتحادات حمض الجلوكورونيك المحتملة. بعد المعالجة ، يمكن تعيين خسارة محايدة في الطريقة أو تحديدها. تم استخدام MassFragment لتحديد أو توصيف هياكل المستقلبات المكتشفة ، وظيفة التفسير الطيفي لـ UNIFI هي الوظيفة الرئيسية المستخدمة لتحليل التجزئة الثانوية للمكونات الرئيسية. يمكن استخدام هذه الوظيفة للتحقق السريع من مسار التجزئة سواء كان ذلك معقولًا.

نتائج

قاعدة تجزئة كتلة جليكوسيدات الفينيثانويد والأيريويد

جليكوسيدات فينيلثانويد هي المكونات الكيميائية الرئيسية للقرص المضغوط. الحلول القياسية لإيزوكتيوسيد ،

تم أخذ cistanoside F و tubuloside A و echinacoside و acteoside و 2'-acetyl-acteoside ، متبوعًا بتوفير مستوى مختلف من طاقات الاصطدام (الجدول 1) ، ثم تم الحصول على خرائط MS2 المقابلة (الشكل 1).

كشف التحليل الطيفي الكتلي أن جليكوسيدات الفينيثانويد لها أنماط تجزئة طيفية متشابهة ، وتشمل مسارات الانقسام في وضع الأيونات السالبة بشكل أساسي (1) انقسام رابطة استر: فقدان مجموعة الكافويل المحايدة (C ، H ، O162.03) والأسيتيل المحايد. المجموعة (C ، H ، O ، 42. 00) ؛ (2) انقسام الجليكوزيد: فقدان بقايا رامنوز المحايدة (C.HIO ، 146.05) وبقايا الجلوكوز المحايدة (CgHO ، 162.05). من قياس الطيف الكتلي عالي الدقة ، يمكن تمييز الكافويل (162.03) وبقايا الجلوكوز (162.05).

تم أخذ Iridoids ajugol و catalpol و geniposidic acid و geniposide و 8- المحاليل المعيارية لحمض oxyloganic epide ، متبوعة بتوفير طاقات تصادم مختلفة ، وتم الحصول على خرائط MS المقابلة (الشكل 2).

تحتوي جليكوسيدات القزحية على أنماط تجزئة طيفية متشابهة ، وتشمل مسارات الانقسام في وضع الأيونات السالبة بشكل أساسي (1) الانقسام الجليكوسيدي: فقدان بقايا الجلوكوز المحايدة (CHoO ، 162.05) ؛ (2) فقدان ثاني أكسيد الكربون المحايد ، (43.99) و H ، O (18.01).

تحديد المركبات في مقتطفات CD و CD-NP و CD-HP

تحليل UPLC-QTOF-MSE

تم تحسين الظروف الكروماتوغرافية. بعد ذلك ، تم تقييم مركبات CistancheHerba في كل من أوضاع الأيونات السالبة والموجبة مع CEs العالية والمنخفضة. أوضحت النتائج المتحصل عليها أن توافق الوضع السلبي كان أعلى مقارنة بالوضع الإيجابي لهذه المركبات. أظهر الشكل 3 MS الأساسية ذروة أيون (BPI) كروماتو جرام متتبعة مع قمم مرقمة. تم تطبيع شدة كل أيون تم اكتشافه في تحليل UPLC-Q-TOF-MS فيما يتعلق بعدد الأيونات الكامل لتوليد مصفوفة البيانات التي تتكون من قيمة m / z ومنطقة الذروة الطبيعية ووقت الاستبقاء.

تقييم المكونات من القرص المضغوط ومنتجاته المصنعة على منصة UNIFl

تم تحديد ما مجموعه 97 مركبًا باستخدام الوضع -SEM (ن =6) من القرص المضغوط ومنتجها المعالج (الجدول 2) ، بما في ذلك جليكوسيدات الفينيثانويد (PhGs) ، إيريديويد ، قشور ، و oligosaccharides. تم اكتشاف مكونات 95،91 و 94 في CD و CD-NP و CD-HP وفقًا لذلك. من بينها ، تم تحديد 64 نوعًا من مركبات فينيل إيثانويد ، و 13 نوع إيريديود ، و 20 نوعًا آخر من المركبات. كان هناك تشابه في التركيب الكيميائي للقرص المضغوط ومنتجه المعالج ، ومع ذلك ، تم العثور على كمية المكونات لتكون مختلفة بين القرص المضغوط ومنتجها المعالج.

الاختلافات في المكونات الكيميائية للمنتجات المعالجة تم استخدام برنامج Simca-P 13. 0 لتحليل مصفوفة البيانات متعددة المتغيرات. قبل PCA ، كانت جميع المتغيرات تتمحور حول المتوسط ​​ومقاسة باريتو ، متبوعة بتحديد المتغيرات التمييزية المحتملة. في مخطط نقاط PCA ، أظهرت كل نقطة عينة فردية. كانت العينات التي أظهرت تشابهًا في مكوناتها الكيميائية مبعثرة بجوار بعضها البعض ، بينما تم تقسيم العينات التي أظهرت اختلافات في مكوناتها. كما هو موضح في PCA (الشكل 4) ، تم فصل مجموعة CD-HP عن مجموعتي CD و CD-NP.

To distinguish CD from CD-HP and CD-NP, OPLS-DA, permutation test, S-plot, and VIP value were developed. (Figs.5, 6,7)The obtained results revealed that many components were key characteristic components of each product. The screening condition was the VIP>1 و ص<0.05. from="" the="" date="" of="" the="" s-plot,="" the="" characteristic="" components="" were="" evaluated,="" which="" were="" commonly="" existing="" in="" the="" three="">

من الشكل 8 ، وجدنا شدة أكتيوسيد (54) ، سيستانوسيد C (74) ، كامبنيوسيد I (43) ، أوسمانثوسيد (75) ، و 2-أكتيلاكتوزيد (80) التي تحتوي على مجموعة 4'-O-caffeoyl في انخفض جزء 8- O - - D-glucopyranosyl (انظر الشكل 9) بعد معالجته بواسطة نبيذ الأرز ، في حين أن شدة isoacetoside (60) ، هي castanoside (71) ، iso-campneoside I (69) ، زاد إيزومارتينوسيد (86) الذي يحتوي على مجموعة 6'-O-caffeoyl (انظر الشكل 9) ، خاصة بالنسبة لمجموعة CD-NP. على الرغم من أن tubuloside B (72) يحتوي على مجموعة 6'-O-caffeoyl ، مثل isoacteoside ، فقد انخفضت شدته بسبب مجموعة 2'-acetyl. زادت شدة إشنكوسايد (38) وسيستانوسيد ب التي تحتوي على مجموعات شظية 6'-O - - D-glucopyranosyl ، لكن شدة tubuloside A (55) انخفضت أيضًا بسبب مجموعة 2'-acetyl.

درس فريقنا البحثي أيضًا الاستقرار الحراري لأكتيوزيد وإيزوكتيوسيد ووجدوا أن جانب الأكتيو كان غير مستقر في الماء والميثانول ومحلول نبيذ الأرز الأصفر ، ويمكن تحويله إلى إيزوكتيوزيد جزئيًا تحت ظروف التدفئة. لكن الثبات الحراري لـ isoacteoside كان أفضل ، خاصة في محلول نبيذ الأرز الأصفر. أظهر الشكل 10 التغييرات المحتملة لـ PhGs في القرص المضغوط أثناء المعالجة:

تحديد المستقلبات في الفئران من بيانات قياس الطيف الكتلي عالية الدقة ، تم تحليل ومقارنة الوزن الجزيئي الدقيق والتركيب الأولي للأيضات ومركبات الجزيء الأولي. نظرًا لأن نفس أنواع المركبات في الطب الصيني التقليدي أظهرت تشابهًا في التعديلات الأيضية ، فإن ارتباط المكونات الكيميائية النباتية في المختبر يمكن أن يمتد إلى نواتجها في الجسم الحي. وفي الوقت نفسه ، بناءً على مسارات التحول الأحيائي التقليدية ، تم استنتاج تغيير معقول في الوزن الجزيئي. أخيرًا ، تم تحديد المستقلبات من خلال تحليل أطياف الكتلة MSE للمستقلبات ومسار تجزئة المركبات الأولية في الطيف الكتلي [21 ، 22]. بالمقارنة مع العينة الفارغة ، تم تحديد مكوناتها في الجسم الحي بناءً على المعلومات المقدمة من الطيف الكتلي اللوني ، وإمكانية حدوث تفاعل استقلابي ، وخصائص التركيب المركب ، وقاعدة تجزئة الطيف الكتلي. انظر الجدول 3.

تحديد المستقلبات ذات الصلة بفينيل إيثانول جليكوسيدات

تم استخدام منصة UNIFI للمعالجة. أظهر الشكل 11 كروماتوجراف TIC للبول والبراز والبلازما للقرص المضغوط ومنتجاته المصنعة. مقارنة بالعينات الفارغة ، تم تحديد ما مجموعه 54 مستقلبًا في الفئران ، بما في ذلك 10 مكونات نموذجية و 44 مستقلبًا ، حيث كان 24 و 49 و 6 في البراز والبول والبلازما ، وفقًا لذلك.

بناءً على الكتلة الدقيقة ، وتسلسل التجزئة ، والخسائر المحايدة التي يمكن التنبؤ بها عن طريق التحول الأحيائي ، تم تقييم ما مجموعه 35 من المستقلبات المرتبطة بجليكوسيدات الفينيثانويد بشكل مؤقت. تحتوي المستقلبات ذات الصلة من جليكوسيدات فينيل إيثانويد على أنماط تجزئة طيف جماعية مماثلة ، مثل جزء ديكافويل النموذجي m / z 461.16 0 5 ، ثم تتحلل بالماء عن طريق روابط الجليكوسيد والإستر في الجسم الحي ، ويتم استقلابه في هيدروكسي إيروسول (HT) (م / z153.0504 ، C.HO 4.73 دقيقة) وحمض الكافيين (CA) (م / z179.0389 ، CH ، O0.77 دقيقة) ، انظر الشكل 12 أ.

تشير M11 إلى [MH] ~ عند m / 153.0504 مع صيغة أي ، C.HO ، ويتم تحديدها على أنها HT. قدم M16 [MH] - عند m / z 329.0851 ، والذي كان مرتفعًا بمقدار 176 Da من HT ، مما يكشف عن أنه قد يكون مستقلبًا يحتوي على غلوكورونيد لـ HT. كان [MH]-of M26 عند m / z 343.1037،14 Da أعلى من HT-glucuronide. لذلك ، تم تحديد M26 على أنه جلوكورونيد HT الميثيل. تم تحديد M17 على أنه كبريتات HT على أساس [MH] - عند m / z 233.0112،80 Da فوق HT ، والذي يمكن ميثليته ، ثم إنتاج M22 ، والذي أظهر m / z 247.0278 ، مما يشير إلى أنه HT- مستقلب كبريت ميثيل. تم اعتبار M7 (م / 167.0335) و M5 (م / ض 167.0762) من منتجات الأكسدة و HT الميثيل ، على التوالي (الشكل 12 ب).

أشارت M1 إلى [MH] - عند m / z 179.0389 ، كانت الصيغة الجزيئية الموضحة هي CH-O وتم تحديدها على أنها حمض الكافيين (CA). أظهر M25 [MH] - عند m / 355.0704 ، والتي كانت 176 Da أعلى من CA ، يظهر أنه قد يكون مستقلب غلوكورونيد من CA. كان M27 يحتوي على m / z 258.994 ، والذي كان أعلى بمقدار 80 Da من مثيله في CA ، لذلك أوضحنا أنه كبريتات CA ، ويمكن أن ينتج M35 (m / z 273.0064). نظرًا لأن M4 يعطي [MH] 7 عند m / z 193.0524،14 Da أعلى من CA ، فقد تم تحديده على أنه مستقلب CA الميثيل. كان M39 مستقلبًا لنزع الهيدروكسيل CA ، مع m / z 163.04 ، ويمكن أن يتحول إلى كبريتات إلى M32 (m / z 242.9951).

M33 (m / z 181. 0 491 ، C.HO ، 9.06 دقيقة) كان ناتج الاختزال لـ CA ، أي 3 ، 4- حمض ثنائي هيدروكسي بنزينبروبيونيك ، والذي يمكن ميثيلته إلى M19 (م / ض 195.0623 ، C10H12O4 ، 0.93 دقيقة). يمكن تجفيف M33 إلى M43 ، أي 3- HPP (م / ض 165.0558 ، C9H10O3 ، 11.29 دقيقة) ، و M31 (م / ض 341.0942 ، C15H17O9 ، 8.90 دقيقة) و M29 (م / ع 245.0125 ، C9H10O6S ، 8.52 دقيقة) كانت المنتجات المعالجة بجلوكورونيد وكبريتات (الشكل 12 ج).

بالنسبة إلى المستقلبات المرتبطة بجليكوسيدات الفينيثانويد ، كانت سلاسل الأيض الرئيسية هي تفاعلات التمثيل الغذائي في المرحلة الثانية ، أي الغلوكورونيد ، والمثيلة ، والكبريت. تم توضيح السلاسل الأيضية المقترحة من phenylethanoids في الشكل 13.

تحديد المستقلبات ذات الصلة بالقزحية

من خلال تحليل التركيب الأولي للمستقلبات ، وتجزئة MSE ، والأدبيات المرتبطة بها ، تم تقييم ما مجموعه 19 من المستقلبات المرتبطة بالقزحية. تم تحلل جليكوسيدات إيريدويد بواسطة روابط جليكوسيدية لتشكيل aglycones المقابلة لها. كان m / z 185.117 لـ M8 ، 162 Da أقل من أجوجول ، والذي نتج عن فقدان بقايا الجلوكوز.

كان M40 (m / z 199.0641 ، Rt 10.91 دقيقة) هو المنتج منزوع الجليكوزيلات من الكاتالبول. M45 m / z 169.0487، Rt 12.15 min) أقل من 30 Da من مستقلب catalpol deglycosylated ، وتم تحديده على أنه إزالة جزيء من مستقلب CH ، O. M34 (m / z 151.0352 ، Rt 9.08 دقيقة) ، كان المزيد من فقدان مستقلب H ، O.

M44 (m / z 211.0665 ، Rt 11.31 دقيقة) كان مستقلبًا منزوع الجليكوزيلات من جينيبوزيد ، وكان M37 (م / ض 197.0833 ، Rt 15.03 دقيقة) إزالة الجليكوزيل من 8- حمض الإيبيدوكسيلوجنيك. يمكن الكشف عن التفاعلات الأيضية للأيريويد على أنها المرحلة الأولى من التمثيل الغذائي للجليكوزيل (الشكل 12 د).

مقارنة التنميط الأيضي في البلازما والبول والبراز بين القرص المضغوط ومنتجاته المصنعة

تمت مقارنة نموذجين في البلازما و 7 في البول و 3 في البراز. كان هناك 7 نماذج أولية تم امتصاصها في القرص المضغوط ، و 7 نماذج أولية تم امتصاصها في CD-NP ، و 8 نماذج أولية في CD-HP. تم اكتشاف M21 فقط في مجموعة براز CD-NP ، وتم اكتشاف M38 و M51 فقط في مجموعات بول من CD-HP. بالمقارنة مع المستقلبات ، كانت المستقلبات المتطابقة في البلازما والبول والبراز 4 و 42 و 21 على التوالي. كان هناك 34 مستقلبًا تم امتصاصه في مجموعة الأقراص المضغوطة ، و 39 في CD-NP ، و 40 في مجموعة CD-HP. تم اكتشاف M5 و M7 و M40 و M52 فقط في مجموعات CD-NP ، بينما تم اكتشاف M24 و M4l و M48 في مجموعات CD-HP.

لوحظت اختلافات في الامتصاص وكذلك التمثيل الغذائي للمركبات النشطة في منتجات معالجة متنوعة من القرص المضغوط. من الشكل 14 ، وجدنا أن شدة اقتران كبريتات HT (M17) كانت الأعلى في البول ، متبوعًا بـ 3- اقتران كبريتات HPP (M29) ، اقتران كبريتات HT الميثيل (M22) ، كبريتات CA منزوعة الهيدروكسيل الاقتران (M32) ، و 3 ، 4- اقتران كبريتات حمض البروبيونيك ثنائي هيدروكسي بنزين (M19). كان محتوى المنتجات الأيضية في المجموعة المعالجة أعلى منه في مجموعة الأقراص المضغوطة ، خاصة بالنسبة لـ M22 ، M29 ، M27 ، M16 ، M19 ، M1 ، M2. سلائفها 6'-O-caffeoyl في الجزء 8- O - - D-glucopyranosyl ، تحتوي المركبات ، مثل hydroxytyrosol ، على خصائص مضادة للأورام ، ومضادة للالتهابات ، ومضادة للبكتيريا ، ومضادة للفيروسات ، ومضادة للفطريات [ 23]. يمتلك حمض الكافيين أنشطة مضادة للالتهابات ومضادة للسرطان ومضادة للفيروسات [24]. كان متسقًا مع الاستخدام السريري للقرص المضغوط ومنتجاته المعالجة.

مناقشة

القرص المضغوط هو TCM ، وقد تم توثيق مكوناته الحيوية النشطة ، بما في ذلك PhGs و iridoids و polysaccharides من خلال دراسات بحثية مختلفة. في الممارسة السريرية للطب الصيني التقليدي ، تم استخدام المنتجات المصنعة من القرص المضغوط على نطاق واسع مقارنةً بالمنتجات الخام. سيتم تغيير التركيب الكيميائي أثناء المعالجة ، مما قد يؤدي إلى تغييرات في التأثيرات الطبية (الشكل 14).

PhGs هي نوع من المركبات الفينولية التي تتميز بهيكل جلوكوبيرانوسيد الذي يحمل جزء هيدروكسي-فينيل إيثيل مثل aglycone. غالبًا ما تشتمل هذه المركبات على حمض الكافيك ورامنوز المرتبطين ببقايا الجلوكوز من خلال روابط الإستر أو الجليكوسيد على التوالي. في الدراسة الحالية ، التحليلات النوعية للقرص المضغوط CD-NP. و CD-HP ، وتم تحديد ما مجموعه 97 مركبًا ، بما في ذلك جليكوسيدات فينيلثانويد (PhGs) ، إيريديويد ، وما إلى ذلك. أظهرت النتائج التي تم الحصول عليها اختلافات في التركيب الكيميائي قبل وبعد المعالجة. شدة PhGs التي تحتوي على مجموعة 4'-O-caffeoyl في الجزء 8- O - - D-glucopyranosyl ، مثل acteoside و cistanoside C و campneoside II و osmanthus-side انخفضت بعد معالجتها ، بينما انخفضت درجة PhGs مع

مثل isoacetoside ، isocistanoside ، isocampneoside I ، زيادة isomartynoside ، خاصة في مجموعة CD-NP. زادت أيضًا شدة إشيناكوسيد وسيستانوسيد ب الذي يمتلك هيكله 6'-O - - شق D-glucopyranosyl. غالبًا ما تنخفض مركبات PhG التي تحتوي على مجموعة 2-acetyl بسبب تفاعل التحلل المائي أثناء العملية ، مثل tubuloside B ، 2- acetylacteoside.

تم إجراء التحقيق في المستقلبات الممتصة في الجسم الحي بعد تناول الأقراص المضغوطة عن طريق الفم ومنتجاتها المصنعة. كانت عمليات التمثيل الغذائي للمرحلة الثانية هي الشلالات الرئيسية وكانت معظم المستقلبات عبارة عن كبريتات وجلوكورونيد وتقارن ميثيل. جليكوسيدات الفينيثانول لها امتصاص واستخدام منخفض عن طريق الفم. يصعب امتصاصها في الدم وتعمل كسلاف لتلعب أدوارها بعد تنشيط التمثيل الغذائي في الجسم الحي. يتم إنتاج Phenylethanoids في phenyletha-nolaglycone ، مثل hydroxytyrosol (HT) وحمض الكافيين (CA) ومشتقاته 3- hydroxyphenylpropionic acid (3- HPP) ، ويمكن امتصاص هذه المستقلبات بسهولة أكبر في البلازما ولها تأثير طبي أفضل.

القرص المضغوط ومنتجاته المصنعة. يكون اقتران كبريتات HT-sulfate (M17) أعلى كثافة في البول ، متبوعًا بـ 3- اقتران كبريتات HPP (M29) ، اقتران كبريتات HT الميثيل (M22) ، اقتران كبريتات CA منزوع الهيدروكسيل (M32) ، و 3 ، {{ 7}} اقتران كبريتات حامض بنزينبروبيونيك ثنائي هيدروكسي (M19). كان محتوى المنتجات الأيضية في المجموعة المعالجة أعلى منه في مجموعة الأقراص المضغوطة ، خاصة بالنسبة لـ M22 ، M29 ، M27 ، M16 ، M19 ، M1 ، M2.

بشكل عام ، يمكن أن تكون المكونات ذات التعرض العالي في الأعضاء المستهدفة فعالة. تم تقييم وتحديد كمية كافية من مركبات الفينيثانويد ومشتقاتها في المختبر. Acteoside هو المركب المميز ، الذي انخفض محتواه بعد معالجته بواسطة نبيذ الأرز ، وزاد محتوى isoacteoside ، isocistanoside C ، isocampneoside I بالمقابل. يمكن تقييم منتجات تحلل الـ PhGs ، مثل مشتقات CA و HT ، في العينات الحيوية ، ويمكن أن تعزز معالجة نبيذ الأرز امتصاص المستقلبات في الجسم الحي.

استنتاج

في هذه الدراسة ، تم الكشف عن 97 مركبًا في مستخلصات القرص المضغوط ونواتجها المصنعة. حدث تحلل عدد قليل من الجليكوسيدات تحت درجة حرارة مرتفعة ونتيجة لذلك ، تم تصنيع بعض الأيزومرات والمركبات الجديدة. في دراسة في الجسم الحي ، تم تحديد مكونات النموذج الأولي (10) والمستقلبات (44) أو تقييمها مبدئيًا في بلازما الفئران والبراز والبول. كانت عمليات التمثيل الغذائي في المرحلة الثانية هي الشلالات الرئيسية ، حيث ارتبطت معظم المستقلبات مع إشنكوسايد أو أكتيوسيد ، مثل HT ، CA ومشتقاتها 3- حمض هيدروكسي فينيل بروبيونيك 3- HPP. يمكن امتصاص هذه المستقلبات بسهولة أكبر في البلازما ولها تأثير طبي أفضل. أظهرت النتائج التي تم الحصول عليها أن التركيب الكيميائي للقرص المضغوط كان مختلفًا وأثر على التخلص من المركب في المختبر وفي الجسم الحي.

الاختصارات

PhGs: جليكوسيدات فينيلثانويد ؛ القرص المضغوط: Cistanche deserticola ؛ CMM: المواد الطبية الصينية ؛ الطب الصيني التقليدي: الطب الصيني التقليدي. CD-NP: Gistanche deserticola المُعالجة بالبخار مع نبيذ الأرز تحت الضغط العادي CD-HP: Cistanche deserticola معالج بالبخار مع نبيذ الأرز تحت ضغط مرتفع ؛ UPLC-Q-TOF-MS: تحليل كروماتوجرافي سائل فائق الأداء مقترن بـ TOF-MS ؛ PCA: تحليل المكون الرئيسي ؛ VIP: أهمية متغيرة للإسقاط ؛ CA: Caffeicacid ؛ HA: هيدروكسي إيروسول.

شكر وتقدير

لا ينطبق.

مساهمات المؤلفين

شارك LZ ، LBN ، SJ في صياغة وكتابة المخطوطة. ساعدت RJ و LPP في التجارب على الحيوانات وصاغت وصياغة جميع الأشكال والجداول. ZC ، HY. ساعدت ITZ في تصميم وأداء هذه الدراسة وراجعت المخطوطة. كل الكتاب قراءة وافقت على المخطوط النهائي.

التمويل

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة: 81874345) ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة لياونينغ (رقم المنحة: 2020- ماجستير العلوم -223).

توافر البيانات والمواد

تتوفر مجموعات البيانات المستخدمة و / أو التي تم تحليلها أثناء الدراسة الحالية من المؤلف المقابل بناءً على طلب معقول.

الإعلانات

موافقة الأخلاق والموافقة على المشاركة

تم الحصول على الموافقة الأخلاقية على استخدام حيوانات التجارب لهذه الدراسة من لجنة الأخلاقيات الطبية بجامعة لياونينغ للطب الصيني التقليدي (رقم الموافقة: 2018YS (DW) -044-01) ، وكانت جميع الإجراءات التجريبية في هذه الدراسة وفقًا للمعايير الأخلاقية لـ لجنة أخلاقيات الطب بجامعة لياونينغ للطب الصيني التقليدي.

الموافقة على النشر

لا ينطبق.

تضارب المصالح

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم تضارب في الكشف عن المصالح.

تفاصيل المؤلف

قسم الأدوية ، جامعة لياونينغ للطب الصيني التقليدي ، داليان ، لياونينغ ، الصين. 'معهد أبحاث الأدوية لمجموعة مونوس ، أولان باتور 14250 ، منغوليا.

تم الاستلام: 31 مايو 2021 القبول: 17 سبتمبر 2021 ، النشر على الإنترنت: 28 سبتمبر 2021

Zhe Li1 و Lkhaasuren Ryenchindorj2 و Bonan Liu1 و Ji Shi1 * و Chao Zhang1 و Yue Hua1 و Pengpeng Liu1 و Guoshun Shan1 و Tianzhu Jia1

مراجع

1. لجنة دستور الأدوية الصينية. دستور الأدوية في جمهورية الصين الشعبية ، المجلد. أولا بكين: مطبعة العلوم الطبية الصينية ؛ 2020. ص. 140.
2. Li Z، Lin H، Gu L، Gao J، Tzeng CM. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): أحد أفضل الهدايا الصيدلانية للطب الصيني التقليدي. فارماكول الجبهة. 2016 ؛ 07:41.
3. Liu BN، Shi J، Zhang C، Li Z، Hua Y، Liu PP، Jia TZ. تأثيرات طرق معالجة التجفيف المختلفة لـ Fresh Cistanche deserticola على محتوياتها. J تشين ميد ماتر. 2020 ؛ 10: 2414-8.
4. Liu BN ، Shi J ، Jia TZ ، Lv TT ، Li Z. تحسين عملية التبخير بالضغط العالي لـ Cistanches Herba. تشين طراد براءات الاختراع ميد. 2019 ؛ 11: 2576–80.
5. Fan YN ، Huang YQ ، Jia TZ ، Wang J ، La-Sika ، Shi J. آثار عشبة Cistanches قبل وبعد المعالجة على وظيفة مكافحة الشيخوخة والوظيفة المناعية للفئران الشيخوخة التي يسببها D-galactose. تشين آرك تراد تشين ميد ، 2017 ؛ 11: 2882-2885.
6. Gao YJ، Jiang Y، Dai F، Han ZL، Liu HY، Bao Z، Zhang TM، Tu PF. دراسة عن المكونات الملينة في Cistanche deserticola YMCA. ميد تشين الحديثة. 2015 ؛ 17 (4): 307-10.
7. Liu BN، Shi J، Li Z، Zhang C، Liu P، Yao W، Jia T. دراسة عن وظيفة الغدد الصم العصبية المناعية لـ Cistanche deserticola ومنتجات تبخير نبيذ الأرز في نموذج الفئران المستحث بالجلوكوكورتيكويد. مكمل قائم على الأدلة من التيرنات ميد. 2020 ؛ 22: 5321976.
8. Guo Y، Wang L، Li Q، Zhao C، He P، Ma X. تم تجفيف تعزيز وظيفة تنشيط الكلى في نموذج الفأر بواسطة Cistanches herba بسرعة عند درجة حرارة متوسطة عالية. J ميد فوود. 2019 ؛ 22 (12): 1246–53.
9. Wang T ، Zhang X ، Xie W. Cistanche deserticola YC Ma ، "Desert ginseng": مراجعة. أنا J تشين ميد. 2012 ؛ 40 (6): 1123-1141.
10. Fu Z ، Fan X ، Wang X ، Gao X. Cistanches Herba: نظرة عامة على خصائصها في الكيمياء ، والصيدلة ، والحرائك الدوائية. J إثنوفارماكول كول. 2018 ؛ 219: 233–47.
11. Lei H ، Wang X ، Zhang Y ، Cheng T ، Mi R ، Xu X ، Zu X ، Zhang W. Herba Cistanche (Rou Cong Rong): مراجعة للكيمياء النباتية والصيدلة. تشيم فارم بول. 2020 ؛ 68 (8): 694-712.
12. Geng X ، Tian X ، Tu P ، Pu X. التأثيرات الوقائية العصبية لإشنكوسايد في نموذج MPTP الفأري لمرض باركنسون. فارماكول Eur J. 2007 ؛ 564: 66-74.

13. Deng M، Zhao JY، Ju XD، Tu PF، Jiang Y، Li ZB. التأثير الوقائي لـ tubuloside B على موت الخلايا المبرمج الذي يسببه ألفا TNF في الخلايا العصبية. أكتا فارماكول سين. 2004 ؛ 25 (10): 1276–84.
14. Nan ZD، Zhao MB، Zeng KW، Tian SH، Wang WN، Jiang Y، Tu PF. إيريدويدات مضادة للالتهابات من سيقان نبات القزحية المزروعة في صحراء تاريم. تشين جي نات ميد. 2016 ؛ 14 (1): 61-5.
15. Nan ZD، Zeng KW، Shi SP، Zhao MB، Jiang Y، Tu PF. جليكوسيدات فينيلثانويد مع أنشطة مضادة للالتهابات من سيقان Cistanche Deserticola المستزرعة في صحراء تاريم. فيتوتيرابيا. 2013 ؛ 89: 167–74.
16. Morikawa T و Pan Y و Ninomiya K و Imura K و Yuan D و Yoshikawa M و Hayakawa T و Muraoka O. Iridoid و monoterpene glycosides و kankanosides L و M و N و O و P من Cistanche tubulosa. تشيم فارم بول. 2010 ؛ 58 (10): 1403-7.
17. Li SL ، Song JZ ، Qiao CF ، et al. استراتيجية جديدة لاستكشاف العلامات الكيميائية المحتملة بسرعة للتمييز بين Radix Rehmanniae الخام والمعالج بواسطة UHPLC-TOF-MS مع التحليل الإحصائي متعدد المتغيرات. J فارم بيوميد الشرج. 2010 ؛ 51 (4): 812–23.
18. Peng F ، Chen J ، Wang X ، Xu CQ ، Liu TN ، Xu R. التغيرات في مستويات جليكوسيدات الفينيثانويد ، نشاط مضادات الأكسدة ، وخصائص الجودة الأخرى في شرائح Cistanche deserticola عن طريق المعالجة بالبخار. تشيم فارم بول. 2016 ؛ 64: 1024-30.
19. ما ZG ، تان YX. التغييرات في محتويات ستة جليكوسيدات الفينيثانويد تحت وقت التبخير يمتد مع النبيذ في Desertliving Cistanche. تشين طراد بات ميد. 2011 ؛ 33 (11): 1951-4.
20. Peng F ، Xu R ، Wang X ، Xu C ، Liu T ، Chen J. تأثير عملية التبخير على جودة فراء ما بعد الحصاد للاستخدام الطبي أثناء التجفيف بالشمس. بيول فارم بول. 2016 ؛ 39 (12): 2066–70.
21. Cui Q و Pan Y و Zhang W و Zhang Y و Ren S و Wang D و Wang Z و Liu X و Xiao W. المستقلبات من أكتيوسيد الغذائي: الملامح والعزل والتعرف والقدرات الواقية للكبد. جي أغريك فود تشيم. 2018 ؛ 66 (11): 2660–8.
22- Cui Q، Pan Y، Bai X، Zhang W، Chen L، Liu X. -السيدة. كروماتوجر بيوميد. 2016 ؛ 30 (9): 1406-15.
23. Bertelli M، Kiani AK، Paolacci S، Manara E، Kurti D، Dhuli K، Bushati V، Miertus J، Pangallo D، Baglivo M، Beccari T، Michelini S. Hydroxytyrosol: مركب طبيعي له أنشطة دوائية واعدة. ياء Biotechnol. 2020 ؛ 309: 29-33.
24. طويبية م ، جان فرانسوا جيه ، دويرون ج. كافيك أسيد ، دوائية متعددة الاستعمالات: نظرة عامة. ميني ريف ميد تشيم. 2011 ؛ 11 (8): 695-713.

ملاحظة الناشر

تظل Springer Nature محايدة فيما يتعلق بالمطالبات القضائية في الخرائط المنشورة والانتماءات المؤسسية.