Cistanche Deserticola Polysaccharides تخفف من التدهور المعرفي في الفئران النموذجية للشيخوخة عن طريق استعادة محور الأمعاء الميكروبيوتا الدماغي
Mar 05, 2022
جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com
Yuan Gao 1، *، Bing Li 1، *، Hong Liu 1، Yajuan Tian 2، Chao Gu 1، Xiaoli Du 1، Ren Bu 1، Jie Gao 1، Yang Liu 1، Gang Li 1
نبذة مختصرة
تشير الأدلة الحديثة إلى أن التغييرات في محور ميكروبيوتا الأمعاء قد تؤدي إلى ضعف إدراكي مع تقدم العمر. في هذه الدراسة ، لاحظنا أن إعطاء D-galactose لفترات طويلة للفئران تسبب في التدهور المعرفي ، وخلل التنسج الجرثومي المعوي ، والالتهاب المحيطي ، والإجهاد التأكسدي. في هذا النموذج من التدهور المعرفي المرتبط بالعمر ،Cistanche Deserticola السكريات(CDPS) تحسن الوظيفة الإدراكية في الفئران المعالجة بـ D- الجالاكتوز عن طريق استعادة التوازن الجرثومي المعوي ، وبالتالي تقليل الإجهاد التأكسدي والالتهاب المحيطي. تم إلغاء التأثيرات المفيدة لـ CDPS في هذه الفئران النموذجية الشيخوخة من خلال استئصال ميكروبات الأمعاء بالمضادات الحيوية أو كبت المناعة باستخدام السيكلوفوسفاميد. أظهر التنميط الأيضي في المصل أن مستويات الكرياتينين ، الفالين ، L-methionine ، o-Toluidine ، N-ethylaniline ، حمض البوليك والبرولين قد تغيرت جميعها في الفئران النموذجية الشيخوخة ، ولكن تم استعادتها بواسطة CDPS. أظهرت هذه النتائج أن CDPS يحسن الوظيفة الإدراكية في نموذج الشيخوخة الذي يسببه D-galactose في الفئران عن طريق استعادة التوازن في محور ميكروبيوتا الأمعاء - الدماغ ، مما خفف من اختلال توازن الأحماض الأمينية والالتهاب المحيطي والإجهاد التأكسدي. وهكذا يُظهر CDPS الإمكانات العلاجية للمرضى الذين يعانون من اضطرابات الذاكرة والتعلم ، وخاصة تلك المتعلقة بخلل التنسج الجرثومي المعوي.
Cistanche Deserticolaالسكريات
المقدمة
يؤدي التناول المطول لـ D-galactose (D-gal) وأملاح البريليوم إلى حدوث الشيخوخة في النماذج الحيوانية التجريبية وفي مزارع الخلايا الأولية في المختبر ، ويتم استخدامه لتحديد الآليات الكامنة وراء عملية الشيخوخة الطبيعية [1-4]. تشير الدراسات السابقة إلى أن الانخفاض المعرفي في الفئران النموذجية للشيخوخة التي يسببها D-galactose مرتبط بانخفاض مستويات بروتين عامل نمو الأعصاب (NGF) وزيادة أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) في الدماغ ، وكلاهما يسبب انحطاط الخلايا العصبية الحُصينية ويقلل تكوين الخلايا العصبية [3 ، 4]. أظهرت الدراسات الحديثة أيضًا أن تكوين وعدد الكائنات الحية الدقيقة في الأمعاء البشرية يتغير بشكل كبير أثناء عملية الشيخوخة [5].
Cistanche Deserticolaهو عشب ينمو بشكل رئيسي في المنطقة الصحراوية الشمالية الغربية من الصين ويستخدم في الطب الصيني التقليدي. ومن المعروف عادة باسم "الجينسنغ الصحراء". تحتوي مستخلصات Cistanche deserticola على العديد من المركبات النشطة دوائيًا ، بما في ذلك جليكوسيدات الفينيثانويد ، والأيريويد ، والليغنوز ، والسكريات قليلة السكاريد ، والسكريات المتعددة ، والأحماض الأمينية ؛ ترتبط هذه المركبات بخصائص مضادة للالتهابات ، ومضادة للأكسدة ، ومضادة للشيخوخة ، وقائية للأعصاب ، وخصائص مناعية [6 ، 7]. على سبيل المثال ، تم استخدام السكريات المستخرجة من Cistanche deserticola في الطب الصيني التقليدي لعلاج سرطان القولون والمستقيم [8]. تم عزل مجموعة واسعة من السكريات ضعيفة السمية ذات الأنشطة الحيوية المفيدة من العديد من الكائنات الحية ، مثل عديد السكاريد Chuanqiong و Ganoderma lucidum polysaccharide و Lycium barbarum polysaccharide [9-11]. CDA-
0 05 عبارة عن جالاكتوجلوكان معزول من Cistanche deserticola الذي يعزز نمو العديد من البكتيريا المفيدة في الأمعاء ، بما في ذلك العديد من أنواع Bacteroides و Lactobacillus [12].
إن الآليات الأساسية لعملية الشيخوخة الطبيعية متورطة أيضًا في العديد من الأمراض التي تصيب الإنسان مثل الاضطرابات العصبية التنكسية وتصلب الشرايين التاجية والسكري من النوع 2 (T2DM) وارتفاع ضغط الدم [13 ، 14]. أظهرت الدراسات الحديثة أن التغيرات في الجراثيم المعوية تلعب دورًا مهمًا في شيخوخة الإنسان [15]. أظهرت العديد من الدراسات أن إعطاء D-galactose لفترات طويلة في الفئران والجرذان التجريبية يحاكي عملية الشيخوخة الطبيعية وهو نموذج مفيد لدراسة الأنماط الظاهرية المرتبطة بالشيخوخة مثل تدهور الإدراك [16]. علاوة على ذلك ، تظهر الفئران النموذجية الشيخوخة التي يسببها D-galactose تغيرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء [17]. لذلك ، افترضنا أن التغييرات في تركيبة الكائنات الحية الدقيقة في الأمعاء قد تسبب تدهورًا معرفيًا في الفئران النموذجية للشيخوخة التي يسببها D- الجالاكتوز ، وبحثنا فيما إذا كان Cistanche Deserticola Polysaccharides (CDPS) قد يخفف من التدهور المعرفي عن طريق استعادة دسبيولوجيا الأمعاء الدقيقة.
Cistanche Deserticola
النتائج
تُظهر الفئران النموذجية للشيخوخة التي يسببها D-galactose تدهورًا معرفيًا و dysbiosis الجرثومية المعوية
قمنا بتحليل الأداء السلوكي للفئران من النوع البري (WT) وتلك التي عولجت بـ 150 مجم من D-gal لكل كيلوغرام من وزن الجسم لمدة شهرين (نموذج أو Mod) باستخدام التعرف على الأشياء الجديدة واختبارات Morris Water maze (MWM). تم تخفيض قيم الفهرس التفضيلية في اختبار التعرف على الكائن الجديد بشكل كبير في مجموعة الفئران Mod مقارنة بفئران مجموعة WT (الشكل 1A ، 1B). أظهرت نتائج اختبار MWM أن وقت استجابة الهروب بعد اليوم السادس قد زاد بشكل كبير في مجموعة Mod مقارنة بمجموعة WT (الشكل 1C ، 1D). علاوة على ذلك ، تم تقليل معابر المنصة المستهدفة وأوقات السباحة داخل الربع المستهدف بشكل كبير في مجموعة Mod مقارنة بمجموعة WT (الشكل 1E ، 1F). أظهرت هذه النتائج انخفاضًا كبيرًا في قدرات التعلم والذاكرة لفئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D- gal.
قمنا بعد ذلك بتحليل الاختلافات في وفرة وتكوين الكائنات والأجناس والأنواع الميكروبية في الأمعاء في عينات البراز لمجموعتي Mod و WT من الفئران باستخدام بيانات تسلسل 16S ribosomal RNA (rRNA) من عينات البراز. كانت الفلورا المعوية السائدة في فئران مجموعة WT و Mod هي Firmicutes و Bacteroides. ومع ذلك ، تم تقليل وفرة Bacteroides بشكل كبير وزادت وفرة Firmicutes بشكل كبير في مجموعة Mod مقارنة بمجموعة WT (الشكل 2 أ). بعد ذلك ، أجرينا تحليل تمييزي خطي (LDA) لتحديد درجات حجم تأثير LDA (LEfSe) متبوعًا باختبارات Kruskal-Wallis و Wilcoxon لتقييم الوفرة النسبية لأصناف مختلفة في فئران مجموعة WT و Mod. يتم عرض نتائج LDA في الشكل 2 ب. علاوة على ذلك ، قمنا ببناء cladograms التي تظهر الإثراء التفاضلي لمختلف الأجناس والأنواع التي تنتمي إلى Bacteriodes and Firmicutes phyla في WT ومجموعات النماذج (الشكل 2C). بشكل عام ، أظهرت نتائجنا ضعف القدرة المعرفية و dysbiosis الجرثومية المعوية في الفئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D- الجالاكتوز.
يحسن علاج CDPS القدرة المعرفية في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D- gal
قمنا بتحليل ما إذا كان علاج CDPS يخفف من التدهور المعرفي في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal. أثناء ال
شهرين من الإعطاء ، تم قياس وزن الجسم كل يوم. كانت أوزان جسم النموذج ومجموعات CDPS من الفئران متشابهة (الشكل 3 أ). إجراء تجارب سلوكية بعد آخر جرعة. أظهر التعرف على الأشياء الجديدة ونتائج اختبار متاهة موريس المائية أن الذاكرة قصيرة المدى كانت أعلى بشكل ملحوظ في مجموعات CDPS من الفئران مقارنة بمجموعة الفئران النموذجية. كانت الذاكرة طويلة المدى في مجموعة الفئران CDPS أعلى ولكنها غير ذات أهمية إحصائية مقارنة بمجموعة نموذج الفئران (الشكل 3 ب ، 3 ج). هذا يشير إلى أن علاج CDPS ألغى فقدان ذاكرة التعرف على الأشياء على المدى القصير في الفئران المعالجة بـ D-gal.
تم تقييم التعلم المكاني والذاكرة لهذه الفئران عن طريق اختبار Morris Water Maze ، وأظهرت النتائج أن أوقات زمن الهروب لمجموعة CDPS من الفئران كانت قابلة للمقارنة مع مجموعة الفئران WT وأقصر بكثير من مجموعة الفئران Mod (الشكل ثلاثي الأبعاد) ). علاوة على ذلك ، كانت أوقات كمون الهروب أقل بشكل ملحوظ في إدارة اليوم السادس بعد CDPS مقارنة بمجموعة النموذج (الشكل 3E). كان وقت السباحة داخل الربع المستهدف أعلى بكثير في مجموعات CH و CM مقارنة بمجموعة النموذج. مجموعة CL أعلى من مجموعة النموذج ولكن لا دلالة إحصائية (الشكل 3F). علاوة على ذلك ، كان عدد معابر المنصة أعلى بشكل ملحوظ في مجموعتي CM و CL مقارنة بمجموعة الطراز. ومع ذلك ، فإن مجموعة CH أعلى من مجموعة النموذج وليس لها دلالة إحصائية (الشكل 3 G). أظهرت هذه النتائج أن علاج CDPS يحسن التعلم المكاني والذاكرة في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal.
يستعيد علاج CDPS التوازن لتكوين ميكروبيوتا الأمعاء في الفئران النموذجية D-galactose-Ageing
السكريات الأحادية والسكريات هي العناصر الغذائية الأساسية اللازمة لنمو البكتيريا [18-21]. يُذكر أيضًا أن CDPS ينظم تكوين ميكروبيوتا الأمعاء [22]. لذلك ، قمنا بتحليل ما إذا كانت علاجات CDPS قد خففت من خلل التنسج الجرثومي المعوي في فئران المجموعة النموذجية من خلال تقييم بيانات تسلسل 16S rRNA لعينات البراز من مجموعات الفئران WT والنموذج و CDPS.
أولاً ، قمنا بحساب مؤشرات تنوع ألفا لتقييم الثراء الكلي للجراثيم البرازية والاختلاف الهيكلي بين هذه المجموعات. قمنا بتحليل فهارس تنوع ألفا (-التنوع) مثل الأنواع المرصودة ، قيم شانون ، تشاو 1 ، إيس ، وسيمبسون لتحديد التغيرات في تكوين الأنواع البكتيرية المختلفة في عينات البراز لمجموعات الفئران المختلفة. كانت مؤشرات التنوع (الأنواع المرصودة ، شانون ، تشاو 1 ، مؤشرات ACE ، وسيمبسون) أعلى في مجموعات الفئران WT و CDPS مقارنة بمجموعة النموذج ، ولكن لوحظت الأهمية الإحصائية فقط لقيم مؤشر Chao 1 بين CM المجموعة ومجموعة وزارة الدفاع. أشارت إلى أن الإدارة مع CDPS يزيد من ثراء الميكروبيوم (الشكل 4A-4E). بعد ذلك ، قمنا بتحليل فهارس التنوع لتحديد الاختلافات في الأنواع الميكروبية المعوية بين مجموعات الفئران WT ، والنموذج ، و CDPS باستخدام مقياس متعدد الأبعاد غير متري (NMDS) ، وتحليل الإحداثيات الرئيسية (PCoA) ، وتحليل المكونات الرئيسية ( PCA). أظهر PCA اختلافات في التركيب الميكروبي في القناة الهضمية لفئران المجموعة النموذجية أثناء عملية الشيخوخة ، بما في ذلك تقليل الأبعاد والحفاظ على الأنماط والاتجاهات (الشكل 4 و). تم تحديد الاختلافات في الجراثيم البرازية بين مجموعات WT والنموذج و CDPS بناءً على PCoA لمسافات UniFrac غير الموزونة لجينات الرنا الريباسي 16S (الشكل 4G). أظهر تحليل المجموعات اختلافات كبيرة في NMDS بين مجموعة النموذج ومجموعات WT و CDPS (الشكل 4H).
قمنا بتقييم أفضل 10 شعب من الكائنات الحية الدقيقة في القناة الهضمية ووجدنا أن وفرة مجموعة Bacteroides كانت أعلى بشكل ملحوظ في مجموعة CH و CM و CL مقارنة بالمجموعة النموذجية (الشكل 4I). هذا يشير إلى أن CDPS أعاد التوازن لميكروبات الأمعاء في الفئران المعالجة بـ D-gal. أظهرت cladograms إثراءًا تفاضليًا لمختلف الأجناس والأنواع التي تنتمي إلى Bacteriodes و Firmicutes phyla في WT والنموذج ومجموعات CDPS (الشكل 4J). كما هو موضح في خرائط الحرارة ، قللت علاجات CDPS من الوفرة النسبية من Thermoplasmata ، و Bacilli ، و Actinobacteria غير محددة ، و Fusobacteriia ، و Elusimicrobia غير محدد ، وزادت الوفرة النسبية من Methanobacteria ، Spirochaetia ، Deltaproteobacteria ، مجهول الهوية _. ، Erysipelotrichia ، والبكتيريا الزرقاء غير المحددة _ مقارنة بمجموعة النموذج (الشكل 4K). أظهرت هذه النتائج أن علاج CDPS أعاد إلى حد كبير التوازن لميكروبات الأمعاء في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal.
يخفف علاج CDPS من التنكس العصبي في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal عن طريق تقليل الإجهاد التأكسدي
قمنا بعد ذلك بتحليل تأثيرات CDPS على الالتهاب عن طريق تحليل مستويات المصل من السيتوكينات المؤيدة للالتهابات (IL -2 و TNF-) والسيتوكينات المضادة للالتهابات (IL -4 و IL -10 ) في مجموعات مختلفة من الفئران. كانت مستويات المصل من IL -2 و TNF- أقل بشكل ملحوظ وكانت مستويات المصل من IL -4 و IL -10 أعلى بشكل ملحوظ في مجموعة CH و CM و CL مقارنة بالنموذج مجموعة. يتضح أن CDPS له تأثيرات مضادة للالتهابات (الشكل 5A-5D).
ينتج الإجهاد التأكسدي عن زيادة إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) وهو أحد العوامل الرئيسية التي تعزز الشيخوخة [23]. لذلك ، قمنا بتحليل تأثيرات CDPS على الإجهاد التأكسدي في نموذج الماوس الشيخوخة الذي يسببه D-gal من خلال تقييم مستويات المصل من إنزيم مضادات الأكسدة ، SOD ، ومنتج بيروكسيد الدهون ، malondialdehyde (MDA). كانت مستويات مصل MDA أعلى بشكل ملحوظ وانخفضت مستويات SOD في مصل الدم بشكل كبير في مجموعة Mod مقارنة بمجموعة WT ، لكن علاج CDPS عكس هذه التأثيرات (الشكل 5E ، 5F). أظهرت هذه النتائج أن الإجهاد التأكسدي كان مرتفعًا في الفئران النموذجية التي يسببها D-gal للشيخوخة ، ولكن تم تقليله بواسطة علاج CDPS.
علاوة على ذلك ، قمنا بتقييم مستويات الإجهاد التأكسدي في أنسجة المخ من خلال تحليل مستويات منتج البروتين المؤكسد المتقدم (AOPP) ، وبيروكسيد الدهون المباشر (LPO) ، و MDA بالإضافة إلى أنشطة إنزيمات مضادات الأكسدة مثل الجلوتاثيون بيروكسيديز (GSH-Px). ) وديسموتاز الفائق (SOD) في متجانسة أنسجة المخ. أظهرت أدمغة فئران مجموعة Mod انخفاضًا ملحوظًا في أنشطة SOD و GSH-PX وزيادة كبيرة في مستويات AOPP و LPO و MDA مقارنة بمجموعة WT ، ولكن تم عكس هذه التأثيرات في مجموعة CH و CM و CL (الشكل 6A- 6E).
علاوة على ذلك ، أجرينا تلطيخًا نسيجيًا لقسم الدماغ باستخدام بقع H&E و Nissl لتقييم التأثيرات الوقائية لـ CDPS على أدمغة فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal. أظهرت فئران مجموعة Mod انخفاضًا كبيرًا في أعداد وحجم الخلايا العصبية ، وزيادة الفجوة بين الخلايا العصبية ، والترتيب غير المنتظم للخلايا العصبية ، والتضخم النووي في منطقة الحصين CA1 مقارنة بمجموعة WT ، ولكن تم تقليل هذه التغييرات المرضية بشكل كبير بواسطة علاجات CDPS ( الشكل 6F). أظهرت هذه النتائج أن علاجات CDPS قللت بشكل كبير من الإجهاد التأكسدي وأمراض الدماغ في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D- gal.
يقلل علاج CDPS من الالتهاب المحيطي والإجهاد التأكسدي عن طريق الحفاظ على التوازن الجرثومي المعوي في الفئران النموذجية التي يسببها D-gal
بعد ذلك ، قمنا بتحليل ما إذا كانت التغييرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء مرتبطة بزيادة الالتهاب المحيطي والإجهاد التأكسدي أثناء الشيخوخة. لتحقيق ذلك ، استخدمنا كوكتيلًا ثلاثيًا من المضادات الحيوية (مجموعة ABX) أو سيكلوفوسفاميد (مجموعة Cy ؛ راجع أيضًا المواد والطرق) لإزالة ميكروبيوتا الأمعاء أو للحث على تثبيط المناعة في الفئران النموذجية المُعالجة بالـ CDPS. ألغى العلاج بالمضادات الحيوية الآثار المفيدة للعلاج CDPS في الفئران النموذجية الشيخوخة. لاحظنا ضعف التعلم والذاكرة (الشكل 7 أ) ، والتعديلات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء (الشكل 7 ب ، 7 ج) في مجموعة الفئران ABX مقارنة بالمجموعة المعالجة بـ CDPS. تشير النتائج المذكورة أعلاه إلى أنه حتى إدارة CDPS لا يمكنها زيادة قدرة الفئران على التعلم والذاكرة بعد تغيير الجراثيم المعوية. علاوة على ذلك ، لاحظنا زيادة مستويات السيتوكينات المؤيدة للالتهابات في الدماغ ومصل الفئران مجموعة ABX مقارنة بمجموعة CDPS (الشكل 7D-7N). أظهرت نتائج مجموعة ABX ومجموعة CY أنه بعد تدمير الجراثيم المعوية ووظيفة المناعة ، لم يستطع حتى إعطاء CDPS تحسين قدرة الفئران على التعلم والذاكرة. تشير هذه النتائج إلى أن علاج CDPS قلل من الالتهاب المحيطي والإجهاد التأكسدي والتدهور المعرفي في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D- gal عن طريق منع dysbiosis الأمعاء.
ثم استخدمنا عقار سيكلوفوسفاميد المثبط للمناعة [24] لتحديد دور الالتهاب في التأثيرات المفيدة لـ CDPS. أظهرت الفئران CDPS المعالجة بسيكلوفوسفاميد (مجموعة Cy) ضعفًا في التعلم والقدرة على الذاكرة ، وتغيرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء ، ومستويات شاذة من السيتوكينات المؤيدة والمضادة للالتهابات في الدماغ والمصل مقارنة بالفئران البرية ومجموعة CDPS. ومع ذلك ، لا توجد أهمية مقارنة مع النموذج ومجموعة ABX. (الشكل 7 أ - 7 ن). توضح هذه البيانات أن التغييرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء تزيد من الالتهاب المحيطي في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal.
يمنع CDPS الشيخوخة التي يسببها D-gal عن طريق تنظيم استقلاب الأحماض الأمينية
يتأثر الجهاز المناعي للمضيف بالمستقلبات التي تولدها ميكروبيوتا الأمعاء [25]. تمثل المستقلبات البرازية قراءة وظيفية لعملية التمثيل الغذائي الميكروبي في الأمعاء والتكوين الميكروبي للأمعاء [26]. علاوة على ذلك ، تدخل مستقلبات الجراثيم المعوية في الدورة الدموية وتؤثر على استقلاب العائل والصحة [26 ، 27]. تم تحديد ما مجموعه 1058 مستقلبات في عينات مصل الدم من الفئران fWT و Mod و CDPS. بعد ذلك ، قمنا بتحليل هذه المستقلبات باستخدام BioCyc وموسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG) وقاعدة بيانات المستقلب البشري (HMDB) ووجدنا أنه تم التعبير عن 65 مستقلبًا بشكل مختلف في مجموعة Mod مقارنة بمجموعة WT. علاوة على ذلك ، وجدنا أن مستويات 8 مستقلبات (الكرياتينين ، الفالين ، L - (-) - الميثيونين ، o-Toluidine ، N- إيثيلانيلين ، وحمض البوليك ، والبرولين ، والفينيل ألانين) تختلف اختلافًا كبيرًا بين مجموعات WT و Mod و CDPS . أظهر تحليل إثراء المسار لهذه المستقلبات الثمانية باستخدام MetaboAnalyst [28 ، 29] أن هذه المستقلبات كانت مرتبطة باستقلاب الأرجينين والهيستيدين والأرجينين والبرولين والبيورين (الشكل 8 أ ، 8 ب). 7 مستقلبات مختلفة من مجموعة MOD ومجموعة CDPS في مجموعة WT.
ثم قمنا بتحليل ما إذا كانت التغييرات في استقلاب الأحماض الأمينية مرتبطة بالتغيرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء. لاحظنا أن 7 مستقلبات مختلفة من مجموعات WT و Mod و CDPS (الكرياتينين ، فالين ، L - (-) - ميثيونين ، o-Toluidine ، N-Ethylaniline ، حمض البوليك ، والبرولين) انخفضت بشكل ملحوظ في ABX ، Cy ، ومجموعات Mod مقارنة بمجموعات WT و CDPS. علاوة على ذلك ، لا توجد أهمية بين مجموعات ABX و Cy (الشكل 8C). أخيرًا ، من أجل استكشاف هناك علاقة بين التمثيل الغذائي التفاضلي والأمراض الأخرى المرتبطة بالشيخوخة. قمنا بتحليل العلاقة بين هذه المستقلبات السبعة المعبر عنها تفاضليًا والأمراض البشرية باستخدام قاعدة بيانات MetaboAnalyst ووجدنا أن هذه المستقلبات مرتبطة بمرض الزهايمر (ص =0 00173 ؛ الشكل 8 د ، 8 هـ). بشكل عام ، تشير هذه البيانات إلى أن CDPS يحمي من الشيخوخة التي يسببها D-gal عن طريق تنظيم استقلاب الأحماض الأمينية.
نقاش
يعد التدهور التدريجي في الوظيفة المعرفية سمة مميزة للشيخوخة. أظهرت الدراسات السابقة أن علاج CDPS أدى إلى تحسن كبير في التعلم والذاكرة في الفئران النموذجية مع تقدم العمر [30-33]. في هذه الدراسة ، أظهرنا أن علاج CDPS يحسن الوظيفة الإدراكية عن طريق تثبيط الالتهاب المحيطي والإجهاد التأكسدي من خلال استعادة التوازن الجرثومي المعوي في الفئران النموذجية للشيخوخة التي يسببها D-gal (الشكل 9). أظهرت فئران Sprague-Dawley التي تتغذى على عديد السكاريد Cistanche نموًا متزايدًا لبكتيريا الأمعاء المفيدة وتنوعًا جرثوميًا محسّنًا في الأمعاء [34]. CDA -0. 05 ، عديد السكاريد المتعادل Cistanche ، يحسن نمو العصيات اللبنية بروبيوتيك [22]. تشير هذه البيانات إلى أن عديدات السكاريد Cistanche حسنت التوازن في بكتيريا الأمعاء.
في هذه الدراسة ، أظهرنا أن CDPS له تأثيرات مضادة للالتهابات ويحسن القدرة المعرفية لفئران نموذج الشيخوخة عن طريق تعديل وفرة الأجناس البكتيرية المعوية مثل Bacteroidetes و Firmicutes و Proteobacteria. ومن ثم ، قد تكون CDPs مفيدة علاجياً للأمراض المرتبطة بالشيخوخة من خلال إعادة تشكيل تركيبة ميكروبيوتا الأمعاء [35 ، 36]. علاوة على ذلك ، أظهرت الدراسات السابقة أن مستويات السيتوكينات الالتهابية في المصل والقولون مرتبطة بالوفرة النسبية للأجناس البكتيرية مثل Bacteroidetes و Firmicutes و Proteobacteria [37 ، 38]. علاوة على ذلك ، فإن التركيب الميكروبي للأمعاء ينظم وظائف المخ عن طريق تعديل مستويات الدورة الدموية للعديد من السيتوكينات [39-43]. أظهرت النتائج التي توصلنا إليها أن علاج CDPS قلل من الوفرة النسبية للثيرموبلازما ، العصيات ، البكتيريا الشعاعية غير المحددة ، البكتيريا المغزلية ، و Elusimicrobia غير المحددة ، وزادت الوفرة النسبية للميثانوبكتيريا ، Spirochaetia ، Deltaproteobacteria ، مجهول الهوية _ مولود البكتيريا. Erysipelotrichia ، والبكتيريا الزرقاء غير المحددة _.
يتم إطلاق المستقلبات الميكروبية المعوية في مجرى الدم وتنظم صحة واستقلاب العائل [26 ، 27]. يمكن تقدير المستقلبات الميكروبية في الأمعاء عن طريق تقييم تكوين المستقلب البرازي ، والذي يتغير مع التغيرات في تكوين ميكروبات الأمعاء [44]. أظهرت الدراسات الحديثة أن مستويات البلازما من سيترولين ، برولين ، أرجينين ، أسباراجين ، فينيل ألانين وثريونين مرتبطة بالاضطرابات التنكسية العصبية بما في ذلك مرض الزهايمر [45 ، 46]. أظهرت دراستنا أن مستويات المصل من الكرياتينين ، والفالين ، و L-methionine ، و o-Toluidine ، و N- إيثيلانيلين ، وحمض البوليك ، والبرولين كانت مرتبطة بالشيخوخة التي يسببها D-gal في الفئران.
تلعب الأذرع الفطرية والتكيفية للجهاز المناعي دورًا مهمًا في الحفاظ على التوازن الجرثومي المضيف في السطح اللمعي المعوي [47]. تلعب الجراثيم المعوية أيضًا دورًا مهمًا في تنظيم الجهاز العصبي المركزي (CNS) والمناعة من خلال إطلاق السيتوكينات والمستقلبات في مجرى الدم [48 ، 49]. تلعب السيتوكينات المؤيدة للالتهابات دورًا رئيسيًا في العديد من الأمراض العصبية التنكسية [50-52]. على سبيل المثال ، يرتبط التنكس البقعي المرتبط بالعمر (AMD) والزرق بالتراكم خارج الخلية للأميلويد (A) والترسب داخل الخلايا لمادة تاو مفرطة الفسفرة (p- tau) والحديد في الخلايا العقدية للشبكية (RGC) [44]. علاوة على ذلك ، يلعب الالتهاب دورًا مهمًا في التسبب في الإصابة بالجلوكوما [53]. ضعف البصر هو أحد الأعراض المبكرة لمرض الزهايمر (AD) ويتجلى قبل بداية التدهور المعرفي [54]. أظهرت دراستنا أن CDPS يحمي من التدهور المعرفي والالتهاب المحيطي من خلال الحفاظ على التوازن في ميكروبيوتا الأمعاء.
وهناك العديد من القيود المفروضة على هذه الدراسة. أولاً ، العلاقة بين استقلاب الأحماض الأمينية وتكوين ميكروبيوتا الأمعاء غير معروفة جيدًا. ثانياً ، التركيب والتركيب الجزيئي لـ CDPS غير معروفين. لذلك ، هناك حاجة لدراسات مستقبلية لمواصلة استكشاف الدور التنظيمي لـ CDPS في التخفيف من مرض الزهايمر من خلال محور إشارات الأمعاء الدقيقة - الدماغ.
في الختام ، أوضحت دراستنا أن CDPS حسنت القدرة الإدراكية في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-gal من خلال استعادة التوازن في ميكروبيوتا الأمعاء ، وبالتالي استعادة عدم توازن الأحماض الأمينية ، والالتهاب المحيطي ، والإجهاد التأكسدي. تشير هذه النتائج إلى أن CDPS هو علاج محتمل للمرضى الذين يعانون من اضطرابات التعلم والذاكرة ، وخاصة تلك المرتبطة بخلل التنسج الهضمي.
المواد والأساليب
تحضير CDPS
حوالي 1. 0 كلغ من Cistanche deserticola النظيف تم تجفيفه بالهواء في الفرن عند 40 درجة مئوية وسحقه إلى مسحوق خام. تم استخلاص المسحوق في إيثانول ساخن لمدة 3 ساعات. يرشح المتبقي من خلال شاش لإزالة المرشح ثم يخفف بالماء (8X) ويعاد تكثيفه بالتتابع لمدة ساعتين و 1.5 ساعة و 1 ساعة عند 90 درجة مئوية. ويجمع مع الترشيح البني والأحمر. بعد ذلك ، تم تركيز ناتج الترشيح تحت ضغط منخفض ، وتم تبريده إلى درجة حرارة الغرفة ، وإضافته ببطء إلى 95 بالمائة من الإيثانول (3X) ، وتركه للوقوف عند 4 درجات مئوية لمدة 24 ساعة. بعد ذلك ، تم الطرد المركزي للمحلول عند 6000 دورة / دقيقة لمدة 20 دقيقة عند 4 درجات مئوية. تم جمع الراسب بعد تكرار استخلاص الماء وترسيب الكحول ثلاث مرات. تمت إعادة تكوين الراسب في الماء ، ونزع البروتينات ، وغسيله ، وتجفيفه بالتجميد للحصول على عديد السكاريد الخام Cistanche deserticola (CDPs). كان محتوى السكاريد أكثر من 90 في المائة كما تم تقييمه بواسطة القياس الطيفي فوق البنفسجي.
مجموعات الحيوانات والعلاجات
تم شراء فئران كونمينغ من الذكور يبلغ عمرها ثمانية أسابيع (رقم ترخيص SCXK. 2019-0010) من شركة SPF Biotechnology Co. Ltd (بكين ، الصين) ، وتم وضعها في غرفة خفيفة ودرجة الحرارة يتم تغذيتها بالطعام والماء. أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقًا للبروتوكولات المعتمدة من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية بجامعة منغوليا الطبية الداخلية. تم إجراء التجارب وفقًا لدليل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) لرعاية واستخدام حيوانات المختبر.
بعد أسبوع واحد من التكيف مع المحيط الجديد ، تم تقسيم 120 فأرًا إلى المجموعات السبع التالية: (1) التحكم من النوع البري (WT) ؛ مجموعة النماذج (150 مجم / كجم / يوم D-gal ؛ Mod) ؛ (3) CH: D-gal plus 100 مجم / كجم CDPS ؛ (4) سم: D-gal plus 50 مجم / كجم CDPS ؛ (5) CL: D-gal plus 25 مجم / كجم CDPS ؛ (6) مجموعة ABX: المضادات الحيوية بالإضافة إلى D-gal plus 50 mg / Kg CDPS ؛ (7) مجموعة Cy: cyclophosphamide plus D-gal plus 50mg / kg CDPS.
تلقت الفئران من مجموعات النموذج ، ABX ، Cy ، و CDPS حقنًا تحت الجلد لمحلول ملحي مذاب
15 0 ملغم / كغم D-gal يوميًا لمدة شهرين. تم حقن مجموعة WT تحت الجلد بكمية متساوية من المحلول الملحي لمدة شهرين. تم أيضًا إعطاء فئران مجموعة CDPS يوميًا بحقن داخل المعدة تحتوي على 1 {{1 0} 0 مجم / كجم ، 5 0 مجم / كجم أو 25 مجم / كجم CDPS لمدة شهرين . تلقت فئران مجموعة ABX مياه الشرب مع أمبيسيلين 0.1 مجم / مل و 0.5 مجم / مل من الستربتومايسين لمدة شهرين بالإضافة إلى حقن D-gal و CDPS. قبل إعطاء D-gal ، تلقت الفئران حقنًا تحتوي على 0.1 مجم / مل من الأمبيسيلين ، و 0.5 مجم / مل من الستربتومايسين ، و 0.1 مجم / مل من الكوليستين لمدة 7 أيام في مجموعة ABX. تلقت الفئران مجموعة Cy حقن داخل الصفاق من 20 ملغ / كغ سيكلوفوسفاميد كل يومين (qod) لمدة شهرين بالإضافة إلى الحقن اليومية من D-gal و CDPS.
اختبار التعرف على الأشياء الجديدة
إجراء تجارب سلوكية بعد آخر جرعة. اشتمل اختبار التعرف على الأشياء على مراحل التعرف والتدريب والاختبار. أثناء مرحلة التعارف ، تم تعويد الفئران في غرفة اختبار فارغة لمدة 10 دقائق لمدة يومين. بعد ذلك ، في اليوم الثالث (يوم التدريب) ، تم وضع جسمين من نفس الحجم والشكل واللون (A1 و A2) على طرفي نقيض من الغرفة. ثم تم منح كل فأر 10 دقائق لاستكشاف الشيئين المتشابهين. بعد 1- ساعة (في اليوم الثالث) و 24- ساعة (في اليوم الرابع) فواصل زمنية من التدريب إلى الاختبار ، تم استبدال أحد العناصر المتشابهة (A1 أو A2) بـ B أو C كائن مختلف في الحجم واللون والشكل في يوم الاختبار. أثناء مرحلة الاختبار ، تم اختبار كل فأر لمدة 5 دقائق وتم حساب الفهرس التفضيلي لتحديد ذاكرة التعرف على كائن جديد (B أو C) باستخدام الصيغة التالية: الفهرس التفضيلي=الوقت على الكائن B أو C / ( الوقت المستغرق في الكائن B أو C بالإضافة إلى الوقت على الكائن A) × 100 بالمائة.
اختبار متاهة موريس المائية
تم إجراء اختبار متاهة موريس المائية في بركة دائرية بعمق 45 سم وقطرها 90 سم. البروتوكول الذي وصفه Ruediger S ، وآخرون. (2011) [55] وود آر إيه وآخرون. (2018) [56] كان يعمل هنا. كان عمق الماء في البركة 30 سم ودرجة حرارة الماء 20 ± 1 درجة مئوية وكان قطر المنصة 6 سم و 1 سم تحت الماء. كان وقت التدريب والاختبار 60 ثانية لكل منهما. للتدريب ، أجرينا أربع تجارب كل منها 60 ثانية بمنصة خفية كل يوم لمدة خمسة أيام متواصلة. إذا لم يتم اكتشاف المنصة بواسطة الفئران في 60 ثانية ، فقد تم توجيهها إلى المنصة ووضعها على المنصة لمدة 5 ثوانٍ. أثناء مرحلة الاختبار ، تم تسجيل وتحليل زمن الوصول للوصول إلى المنصة المخفية في جلسات التدريب والتحقيق ، وعدد العبور فوق موقع المنصة الذي تمت إزالته ، والوقت الذي يقضيه في الربع المستهدف (المنصة)
فحوصات ELISA
تم تحليل مستويات المصل من السيتوكينات المؤيدة للالتهابات مثل IL -2 () و IL -4 و IL -10 و TNF- لكل مجموعة من الفئران باستخدام مجموعات ELISA المشتراة من Shanghai Yi شركة Li Biological Technology Co.، Ltd. (شنغهاي ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. تم تحليل نشاط إنزيم مضاد للأكسدة ، ديسموتاز الفائق (SOD) ، ومستويات منتج بيروكسيد الدهون ، malondialdehyde (MDA) ، في مصل كل مجموعة من الفئران عن طريق مجموعات الفحص التي تم شراؤها من معهد Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing ، الصين) . تم تقدير مستويات منتجات بروتين الأكسدة المتقدمة (AOPP) في عينات قرن آمون الفئران باستخدام مجموعة ELISA من Shanghai Yi Li Biological Technology Co. Ltd. (شنغهاي ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة.
تقدير الإجهاد التأكسدي في أدمغة الفئران
قمنا بتجانس 1 0 من نسيج قرن آمون مع 0.9 مل من محلول ملحي مبرد بالثلج وتم الطرد المركزي عند 12000 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة عند 4 درجات مئوية. تم تحليل محتوى البروتين في المادة الطافية باستخدام مجموعة اختبار البروتين BCA ( Beyotime Biotechnology ، شنغهاي ، الصين). تم تحليل مستويات بيروكسيد الدهون (LPO) و malondialdehyde (MDA) ، وأنشطة GSH-Px و SOD في عينات الحصين عن طريق قياس الألوان باستخدام مجموعات من معهد Nanjing Jiancheng Bioengineering (Nanjing ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة.
تكوين ميكروبيوتا الأمعاء
تم جمع عينات البراز من جميع الفئران وتخزينها على الفور عند -80 درجة مئوية. منصة QIIME مفتوحة لتحديد ملفات تعريف الأمعاء الدقيقة.
تحليل LC / MS لمستقلبات المصل
تم تحضين عينات المصل لمدة 0 دقيقة باستخدام ميثانول مبرد مسبقًا بنسبة 1: 3 لترسيب البروتينات. تم طرد العينات عند 12 {14}} 00r / min لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية. تم تحليل المواد الطافية بواسطة Thermo Scientific Dionex UltiMate3000 Rapid Resolution Liquid Chromatography و QExactive الكتلي. يتم عرض الظروف الكروماتوجرافية في الجدول 1. تم فصل المواد التحليلية في عمود كروماتوغرافي XBridge BEH Amide (2.1 × 100 مم ؛ شركة ووترز ، ميلفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) باستخدام حمض الفورميك بنسبة 0.1 في المائة والأسيتونتريل كمرحلتين متحركتين A و B ، على التوالى. تم ضبط معدل التدفق عند 0.4 مل / دقيقة ، وكان حجم الحقن 5 ميكرولتر ، وتم ضبط درجة حرارة العمود عند 25 درجة مئوية (الجدول 1). تم الحصول على إشارات الطيف الكتلي باستخدام أوضاع مسح الأيونات الموجبة والسالبة. يتم عرض جهد رش الأيونات ومعلمات MS المحددة الأخرى في الجدول 2.
تحليل احصائي
Statistical analysis was performed using the SPSS 13.0 software (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). The data plots were generated using GraphPad Prism 8.0.1 (GraphPad Software, La Jolla, California, USA). Partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) of SIMCA-P+13.0 (Umetrics, AB, Umeå, Sweden) and Principal Components Analysis (PCA) were used to assess normalized GC-MS spectral data. Variable Influence on Projection (VIP) values were used to identify significant variables with VIP values >1 - 0 وص< 0.05.="" these="" significant="" variables="" were="" used="" to="" identify="" the="" spectral="" peaks.="" the="" student's="" t-test="" was="" used="" to="" analyze="" differences="" between="" two="" groups="" of="" data.="" the="" taxonomic="" rank="" differential="" between="" groups="" was="" determined="" using="" student's="" test="" (v3.1.2;="" r="" programming="" language).="" the="" correlation="" between="" genera="" abundance="" and="" mouse="" behavior="" was="" calculated="" using="" spearman="" correlation="" coefficients="" (r="" language).="" p="" <="" 0.05="" was="" considered="" statistically="" significant.="" the="" data="" are="" presented="" as="">
المراجع
1. Coates SS، Lehnert BE، Sharma S، Kindell SM، Gary RK. يحفز البريليوم الشيخوخة المبكرة في الخلايا الليفية البشرية. هناك أكسب فارماكول ي. 2007 ؛ 322: 70-79. https://doi.org/10.1124/jpet.106.118018 بميد: 17395767
2. Shwe T ، Pratchayasakul W ، Chattipakorn N ، Chattipakorn SC. دور شيخوخة الدماغ التي يسببها د-الجالاكتوز وإمكاناته المستخدمة في التدخلات العلاجية. أكسب جيرونتول. 2018 ؛ 101: 13-36. https://doi.org/10.1016/j.exger.2017.10.029 PMID: 29129736
3. Ho SC، Liu JH، Wu RY. إنشاء تأثير الشيخوخة المحاكي في الفئران الناجم عن D-galactose. علم الأحياء. 2003 ؛ 4: 15-18. https://doi.org/10.1023/a:1022417102206 PMID: 12652185
4.Song X ، Bao M ، Li D ، Li YM. جلايكيشن متقدم في نموذج شيخوخة الفئران التي يسببها الجالاكتوز. التنمية الميكانيكية للشيخوخة. 1999 ؛ 108: 239 - 51.
https://doi.org/10.1016/s0047-6374(99)00022-6 PMID: 10405984
5. Yamauchi T، Oi A، Kosakamoto H، Akuzawa-Tokita Y، Murakami T، Mori H، Miura M، Obata F. أمعاء الأنواع البكتيرية ذات التأثير المميز على مستقلبات البيورين أثناء الشيخوخة في ذبابة الفاكهة. iScience. 2020 ؛ 23: 101477. https://doi.org/10.1016/j.isci.2020.101477 PMID: 32916085
6. لجنة دستور الأدوية الصينية ، دستور الأدوية لجمهورية الصين الشعبية Ver. 2015. مطبعة الصين للعلوم الطبية والتكنولوجيا ، بكين ، الصين. 2015.
7. Wang N ، Ji S ، Zhang H ، Mei S ، Qiao L ، Jin X.هيربا سيستانش: مضاد للشيخوخة. شيخوخة ديس. 2017 ؛ 8: 740-59. https://doi.org/10.14336/AD.2017.0720 PMID: 29344414
8. Fu Z ، Fan X ، Wang X ، Gao X.سيستانش هربا: نظرة عامة على خاصية الكيمياء والصيدلة والحركية الدوائية. ي إثنوفارماكول. 2018 ؛ 219: 233–47.
https://doi.org/10.1016/j.jep.2017.10.015 PMID: 29054705
9. Zhong C ، Liu Z ، Zhang X ، Pu Y ، Yang Z ، Bao Y. الخواص الفيزيائية للسكريات من Ligusticum chuanxiong وتحليل إمكاناتها المضادة للورم من خلال تنظيم المناعة. وظيفة الغذاء. 2 0 21 ؛ 12: 1719–31. https://doi.org/10.1039/d0fo02978e
PMID: 33502414
10.شي YJ ، Zheng HX ، Hong ZP ، Wang HB ، Wang Y ، Li MY ، Li ZH. التأثيرات المضادة للأورام لمختلف مسحوق أبواغ جانوديرما لوسيدوم في المقايسات الحيوية القائمة على الخلايا والأسماك الزرد. J Integr Med. 2021 ؛ 19: 177–84. https://doi.org/10.1016/j.joim.2021.01.004 PMID: 33495135
11. Zhang Z ، Liu H ، Yu B ، Tao H ، Li J ، Wu Z ، Liu G ، Yuan C ، Guo L ، Cui B. Lycium barbarum polysaccharide يخفف من إصابة عضلة القلب في الميكروفون عالي الدهون الذي يتغذى على النظام الغذائي من خلال التلاعب بالأمعاء الميكروبيوم والمستقلب البرازي. كثافة المواد الغذائية 2020 ؛ 138: 109778. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2020.109778 PMID: 33288164
12. Newgard CB، Sharpless NE. بلوغ سن الرشد: العوامل الجزيئية للشيخوخة والفرص العلاجية. ياء كلين إنفست. 2013 ؛ 123: 946-50. https://doi.org/10.1172/JCI68833 PMID: 23454756
13. وانغ إتش ، دواير ليندغرين إل ، لوفغرين كي تي ، راجاراتنام جي كي ، ماركوس جي آر ، ليفين ريكتور أ ، ليفيتز سي ، لوبيز إيه دي ، موراي سي جيه. معدل الوفيات حسب العمر والجنس في 187 بلدًا ، 1970-2010: تحليل منهجي لدراسة العبء العالمي للأمراض لعام 2010. لانسيت. 2012 ؛ 380: 2071–94.
https://doi.org/10.1016/S0140-6736(12)61719-X PMID: 23245603
14. Qabazard B، Stürzenbaum SR. H2S: نهج جديد لتحسين العمر والشيخوخة الصحية؟ هاندب أكسب فارماكول. 2015 ؛ 230: 269–87. https://doi.org/10.1007/978-3-319-18144-8_14 PMID: 26162840
15. Walrath T ، Dyamenahalli KU ، Hulsebus HJ ، McCullough RL ، Idrovo JP ، Boe DM ، McMahan RH ، Kovacs EJ. التغيرات المرتبطة بالعمر في المناعة المعوية والميكروبيوم. ي لوكوك بيول. 2020. [Epub قبل الطباعة]. https://doi.org/10.1002/JLB.3RI0620-405RR PMID: 33020981
16. Mishra B ، Manmode S ، Walke G ، Chakraborty S ، Neralkar M ، Hotha S. توليف عزر رباعي السكاريد ذو النواة المفرطة التشعب لفيروسات الكلور. أورغ بيومول تشيم. 2 0 21 ؛ 19: 1315 - 28. https://doi.org/10.1039/d0ob02176h PMID: 33459320
17. Gao Y و Liu Y و Ma F و Sun M و Song Y و Xu D و Mu G و Tuo Y. حقنة. وظيفة الغذاء. 2 0 21 ؛ 12: 373 - 86. https://doi.org/10.1039/d0fo02794d
PMID: 33325942
18. فرانسيسكو ÉC ، فرانكو TT ، Wagner R ، Jacob-Lopes E. تقييم الكربوهيدرات المختلفة كمصدر خارجي للكربون في زراعة البكتيريا الزرقاء. المعالجة الحيوية Biosyst المهندس. 2014 ؛ 37: 1497-505. https://doi.org/10.1007/s00449-013-1121-1 PMID: 24445336
19. Uhde A، Youn JW، Maeda T، Clermont L، Matano C، Krämer R، Wendisch VF، Seibold GM، Marin K. Glucosamine كمصدر للكربون لإنتاج الأحماض الأمينية الوتدية جلوتاميك. أبليت ميكروبيول Biotechnol. 2013 ؛ 97: 1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID: 22854894
1. Ladevèze S ، Laville E ، Despres J ، Mosoni P ، Potocki- Véronèse G. التعرف على Mannoside وتدهور البكتيريا. بيول القس Camb Philos Soc. 2017 ؛ 92: 1969-90.
https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID: 27995767
2. ليمولي دي إتش ، جونز سي جي ، وزنياك دي جي. السكريات البكتيرية خارج الخلية في تكوين البيوفيلم ووظيفته. طيف ميكروبيول. 2015 ؛ 3: 10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID: 26185074
3. Zeng H ، Huang L ، Zhou L ، Wang P ، Chen X ، Ding K. A galactoglucan المعزول من Cistanche deserticola Y.
سي. ما. ونشاطه الحيوي على سلالات البكتيريا المعوية. كربوهيدر بوليم. 2019 ؛ 223: 115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID: 31426978
4. سوبرامانيان V، Rodemoyer B، Shastri V، Rasmussen LJ، Desler C، Schmidt KH. متلازمة بلوم يرتبط نقص هليكاز الحمض النووي بالإجهاد التأكسدي وتغيرات شبكة الميتوكوندريا. ممثل العلوم 2021 ؛ 11:21.
https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID: 33495511
5. Mashima K و Oh I و Fujiwara K و Izawa J و Takayama N و Nakano H و Kawasaki Y و Minakata D و Yamasaki R و Morita K و Ashizawa M و Yamamoto C و Hatano K وآخرون. مقارنة بين alemtuzumab و anti-thymocyte globulin و cyclophosphamide بعد الزرع لمرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف و الكسب غير المشروع مقابل اللوكيميا في نماذج الفئران. بلوس واحد. 2021 ؛ 16: e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID: 33428661
6. روكس إم جي ، غاريت دبليو إس. ميكروبيوتا الأمعاء والمستقلبات ومناعة المضيف. نات ريف إمونول. 2016 ؛ 16: 341-52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID: 27231050
7. Zierer J ، Jackson MA ، Kastenmüller G ، Mangino M ، Long T ، Telenti A ، Mohney RP ، Small KS ، Bell JT ، Steves CJ ، Valdes AM ، Spector TD ، Menni C. ميكروبيوم الأمعاء. نات جينيه. 2018 ؛ 50: 790-95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID: 29808030
8. Wilmanski T، Rappaport N، Earls JC، Magis AT، Manor O، Lovejoy J، Omenn GS، Hood L، Gibbons SM، Price ND. يتنبأ أيض الدم بتنوع ميكروبيوم الأمعاء عند البشر. Nat Biotechnol. 2019 ؛ 37: 1217–28.
https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID: 31477923
9. Chagoyen M ، Pazos F. MBRole: إثراء تحليل البيانات الأيضية. المعلوماتية الحيوية. 2011 ؛ 27: 730-31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID: 21208985
1 0. شيا جي ، ويشارت دس. استخدام MetaboAnalyst 3.0 لتحليل بيانات الأيض الشامل. المعلوماتية الحيوية بروتوكولي العملة. 2016 ؛ 55: 14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID: 27603023
11. Miao X ، Zhang H ، Wu Y ، Liu D ، Zhang X ، Li G. التأثير الوقائي للجليكوزيدات Cistanche verbascum على إصابة الخلايا العصبية التي يسببها D-galactose. المجلة الصيدلانية الصينية. 2017 ؛ 52: 2071 - 78.
12. Wu Y، Zhang H، Bu R، Ma H، Su M، Li G. بحث عن التأثير الوقائي لعديد السكاريد Cistanche deserticola على نموذج الشيخوخة الحاد الناجم عن D-galactose. نشرة فارماكول الصينية. 2017 ؛ 33: 927 - 33.
13. Yin R ، Li G ، Yu T ، Ma H ، Ma T ، Guo M. التأثير الوقائي لعديد السكاريد Cistanche cistanche على اللدونة المتشابكة في الفئران مع التعلم الناجم عن السكوبولامين وضعف الذاكرة. نشرة فارماكول الصينية. 2014 ؛ 30: 801–07.
14. Ma H ، Yin R ، Guo M ، Bao Y ، Cui Z ، Li G. تأثير Cistanche cistanche polysaccharides على التعبير عن CREB في فئران نموذج الشيخوخة التي يسببها D-galactose. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي التجريبي. 2014 ؛ 20: 137 - 41.
15. Fu Z ، Han L ، Zhang P ، Mao H ، Zhang H ، Wang Y ، Gao X ، Liu E. Cistanche polysaccharides يعزز امتصاص echinacoside في الجسم الحي ويؤثر على ميكروبيوتا الأمعاء. إنت J بيول ماكرومول. 2020 ؛ 149: 732 40.
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID: 31987946
16. Bajaj JS، Gillevet PM، Patel NR، Ahluwalia V، Ridlon JM، Kettenmann B، Schubert CM، Sikaroodi M، Heuman DM، Crossey MM، Bell DE، Hylemon PB، Fatouros PP، Taylor-Robinson SD. تحليل بيولوجي للأنظمة الطولية لانسحاب اللاكتولوز في اعتلال الدماغ الكبدي. متعب الدماغ ديس. 2012 ؛ 27: 205-15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID: 22527995
17. Qian Y ، Yang X ، Xu S ، Wu C ، Song Y ، Qin N ، Chen SD ، Xiao Q. تغيير الميكروبات البرازية في المرضى الصينيين المصابين بمرض باركنسون. مناعة الدماغ Behav. 2018 ؛ 70: 194 - 202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID: 29501802
18. Sjögren YM، Tomicic S، Lundberg A، Böttcher MF، Björkstén B، Sverremark-Ekström E، Jenmalm MC. تأثير الجراثيم المعوية المبكرة على نضوج الغشاء المخاطي والاستجابات المناعية الجهازية في مرحلة الطفولة. كلين اكسب الحساسية. 2009 ؛ 39: 1842 - 51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x بميد: 19735274
19. Uhde A، Youn JW، Maeda T، Clermont L، Matano C، Krämer R، Wendisch VF، Seibold GM، Marin K. Glucosamine كمصدر للكربون لإنتاج الأحماض الأمينية الوتدية جلوتاميك. أبليت ميكروبيول Biotechnol. 2013 ؛ 97: 1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID: 22854894
20.Ladevèze S ، Laville E ، Despres J ، Mosoni P ، Potocki- Véronèse G. التعرف على Mannoside وتدهور البكتيريا. بيول القس Camb Philos Soc. 2017 ؛ 92: 1969-90. https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID: 27995767
21- ليمولي دي إتش ، جونز سي جي ، وزنياك دي جي. السكريات البكتيرية خارج الخلية في تكوين البيوفيلم ووظيفته. طيف ميكروبيول. 2015 ؛ 3: 10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID: 26185074
22. Zeng H ، Huang L ، Zhou L ، Wang P ، Chen X ، Ding K. A galactoglucan المعزول من Cistanche deserticola YC Ma. ونشاطه الحيوي على سلالات البكتيريا المعوية. كربوهيدر بوليم. 2019 ؛ 223: 115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID: 31426978
23.Subramanian V، Rodemoyer B، Shastri V، Rasmussen LJ، Desler C، Schmidt KH. متلازمة بلوم يرتبط نقص هليكاز الحمض النووي بالإجهاد التأكسدي وتغيرات شبكة الميتوكوندريا. ممثل العلوم 2021 ؛ 11:21.
https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID: 33495511
24- ماشيما ك ، أوه أنا ، فوجيوارا K ، إيزاوا جي ، تاكاياما إن ، ناكانو إتش ، كاواساكي واي ، ميناكاتا دي ، ياماساكي آر ، موريتا ك ، أشيزاوا إم ، ياماموتو سي ، هاتانو ك وآخرون. مقارنة بين alemtuzumab و anti-thymocyte globulin و cyclophosphamide بعد الزرع لمرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف و الكسب غير المشروع مقابل اللوكيميا في نماذج الفئران. بلوس واحد. 2021 ؛ 16: e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID: 33428661
25. Rooks MG، Garrett WS. ميكروبيوتا الأمعاء والمستقلبات ومناعة المضيف. نات ريف إمونول. 2016 ؛ 16: 341-52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID: 27231050
26.Zierer J ، Jackson MA ، Kastenmüller G ، Mangino M ، Long T ، Telenti A ، Mohney RP ، Small KS ، Bell JT ، Steves CJ ، Valdes AM ، Spector TD ، Menni C. ميكروبيوم الأمعاء. نات جينيه. 2018 ؛ 50: 790-95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID: 29808030
27. Wilmanski T، Rappaport N، Earls JC، Magis AT، Manor O، Lovejoy J، Omenn GS، Hood L، Gibbons SM، Price ND. يتنبأ أيض الدم بتنوع ميكروبيوم الأمعاء عند البشر. Nat Biotechnol. 2019 ؛ 37: 1217–28.
https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID: 31477923
28. Chagoyen M ، Pazos F. MBRole: تحليل تخصيب البيانات الأيضية. المعلوماتية الحيوية. 2011 ؛ 27: 730-31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID: 21208985
29. Xia J ، Wishart DS. استخدام MetaboAnalyst 3. 0 لتحليل بيانات الأيض الشامل. المعلوماتية الحيوية بروتوكولي العملة. 2016 ؛ 55: 14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID: 27603023
30. Miao X ، Zhang H ، Wu Y ، Liu D ، Zhang X ، Li G. التأثير الوقائي لـ Cistanche verbascum glycosides على إصابة الخلايا العصبية التي يسببها D-galactose. المجلة الصيدلانية الصينية. 2017 ؛ 52: 2071 - 78.
31. Wu Y، Zhang H، Bu R، Ma H، Su M، Li G. بحث عن التأثير الوقائي لعديد السكاريد Cistanche deserticola على نموذج الشيخوخة الحاد الناجم عن D-galactose. نشرة فارماكول الصينية. 2017 ؛ 33: 927 - 33.
32. Yin R ، Li G ، Yu T ، Ma H ، Ma T ، Guo M. التأثير الوقائي لعديد السكاريد Cistanche cistanche على اللدونة المتشابكة في الفئران مع التعلم الناجم عن السكوبولامين وضعف الذاكرة. نشرة فارماكول الصينية. 2014 ؛ 30: 801–07.
33. Ma H، Yin R، Guo M، Bao Y، Cui Z، Li G. تأثير Cistanche cistanche polysaccharides على تعبير CREB في فئران نموذجية للشيخوخة التي يسببها D-galactose. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي التجريبي. 2014 ؛ 20: 137 - 41.
34. فو زد ، هان إل ، زانج ف ، ماو إتش ، زانج إتش ، وانج واي ، جاو إكس ، ليو إي. إنت J بيول ماكرومول. 2020 ؛ 149: 732-40. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID: 31987946
35.Bajaj JS، Gillevet PM، Patel NR، Ahluwalia V، Ridlon JM، Kettenmann B، Schubert CM، Sikaroodi M، Heuman DM، Crossey MM، Bell DE، Hylemon PB، Fatouros PP، Taylor-Robinson SD. تحليل بيولوجي للأنظمة الطولية لانسحاب اللاكتولوز في اعتلال الدماغ الكبدي. متعب الدماغ ديس. 2012 ؛ 27: 205-15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID: 22527995
36. Qian Y ، Yang X ، Xu S ، Wu C ، Song Y ، Qin N ، Chen SD ، Xiao Q. تغيير الميكروبات البرازية في المرضى الصينيين المصابين بمرض باركنسون. مناعة الدماغ Behav. 2018 ؛ 70: 194 - 202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID: 29501802
37.Sjögren YM، Tomicic S، Lundberg A، Böttcher MF، Björkstén B، Sverremark-Ekström E، Jenmalm MC. تأثير الجراثيم المعوية المبكرة على نضوج الغشاء المخاطي والاستجابات المناعية الجهازية في مرحلة الطفولة. كلين اكسب الحساسية. 2009 ؛ 39: 1842 - 51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x بميد: 19735274
38.Rangel I، Ganda Mall JP، Willén R، Sjöberg F، Hultgren- Hörnquist E. درجة التهاب القولون ترتبط بالتركيب الميكروبي واستجابات السيتوكينات في القولون والأور لدى الفئران الناقصة 2-. FEMS Microbiol Ecol. 2016 ؛ 92: fiw098. https://doi.org/10.1093/femsec/fiw098 PMID: 27162181
39. Larbi A ، Pawelec G ، Witkowski JM ، Schipper HM ، Derhovanessian E ، Goldeck D ، Fulop T. J الزهايمر ديس. 2009 ؛ 17: 91-103.
https://doi.org/10.3233/JAD-2009-1015 PMID: 19494434
40.West CE، Rydén P، Lundin D، Engstrand L، Tulic MK، Prescott SL. ميكروبيوم الأمعاء وأنماط الاستجابة المناعية الفطرية في الأكزيما المرتبطة بـ IgE. كلين اكسب الحساسية. 2015 ؛ 45: 1419-1429. https://doi.org/10.1111/cea.12566 PMID: 25944283
41. Wong ML، Inserra A، Lewis MD، Mastronardi CA، Leong L، Choo J، Kentish S، Xie P، Morrison M، Wesselingh SL، Rogers GB، Licinio J. Inflammasome تؤثر الإشارات على القلق والسلوك الشبيه بالاكتئاب والأمعاء تكوين الميكروبيوم. مول الطب النفسي. 2016 ؛ 21: 797-805.
https://doi.org/10.1038/mp.2016.46 PMID: 27090302
42. Abildgaard A ، Elfving B ، Hokland M ، Wegener G ، Lund S. يقلل علاج البروبيوتيك من السلوك الشبيه بالاكتئاب في الفئران بشكل مستقل عن النظام الغذائي. علم الغدد الصماء العصبية. 2017 ؛ 79: 40-48. https://doi.org/10.1016/j.psyneuen.2017.02.014 PMID: 28259042
43.Bercik P، Verdu EF، Foster JA، Macri J، Potter M، Huang X، Malinowski P، Jackson W، Blennerhassett P، Neufeld KA، Lu J، Khan WI، Corthesy-Theulaz I، et al. يؤدي التهاب الجهاز الهضمي المزمن إلى سلوك شبيه بالقلق ويغير الكيمياء الحيوية للجهاز العصبي المركزي في الفئران. أمراض الجهاز الهضمي. 2010 ؛ 139: 2102 - 2112 هـ 1. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2010.06.063 PMID: 20600016
44- Yoshimoto S، Mitsuyama E، Yoshida K، Odamaki T، Xiao JZ. المستقلبات المخصبة التي يحتمل أن تعزز الأمراض المرتبطة بالعمر في الأشخاص الذين يعانون من جراثيم الأمعاء من النوع المسن. ميكروبات الأمعاء. 2021 ؛ 13: 1-11. https://doi.org/10.1080/19490976.2020.1865705 PMID: 33430687
45.شاتيرجي بي ، تشيونغ واي جي ، بهاتناغار أ ، جوزي ك ، وو واي ، مكاي إم ، مارتينز آي جي ، ليم دبليو إل ، بيدريني إس ، تيج إم ، فيليمان فل ، آسيه بي آر ، ديف بي ، وآخرون. مستقلبات البلازما المرتبطة بأدلة العلامات الحيوية على التنكس العصبي لدى كبار السن الطبيعيين من الناحية الإدراكية. ي نيوروتشيم. 2020. [Epub قبل الطباعة]. https://doi.org/10.1111/jnc.15128 PMID: 32679614
46. Mahajan UV ، Varma VR ، Griswold ME ، Blackshear CT ، An Y ، Oommen AM ، Varma S ، Troncoso JC ، Pletnikova O ، O'Brien R ، Hohman TJ ، Legido-Quigley C ، Thambisetty M. المتعلقة بنقل الميثيل الدماغي ومسارات البوليامين في مرض الزهايمر: دراسة استقلابية ودراسة ترانسكريبتوميك. بلوس ميد. 2020 ؛ 17: e1003012. https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1003012 PMID: 31978055
47. Duerkop BA، Vaishnava S، Hooper LV. الاستجابات المناعية للجراثيم على سطح الغشاء المخاطي المعوي. حصانة. 2009 ؛ 31: 368–76. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2009.08.009 PMID: 19766080
48. Forsythe P، Bienenstock J. التحوير المناعي بواسطة البكتيريا المتعايشة والبكتيريا بروبيوتيك. استثمار إمونول. 2010 ؛ 39: 429–48. https://doi.org/10.3109/08820131003667978 PMID: 20450286
49. ستيرنبرغ إم. التنظيم العصبي للمناعة الفطرية: استجابة مضيفة غير محددة منسقة لمسببات الأمراض. نات ريف إمونول. 2006 ؛ 6: 318-28. https://doi.org/10.1038/nri1810 PMID: 16557263
50.Colonna M ، Butovsky O. وظيفة الخلايا الدبقية الصغيرة في الجهاز العصبي المركزي أثناء الصحة والتنكس العصبي. Annu Rev Immunol. 2017 ؛ 35: 441-68. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-051116- 052358 PMID: 28226226
51. الخوري ج. التنكس العصبي والجهاز المناعي العصبي. نات ميد. 2010 ؛ 16: 1369–70. https://doi.org/10.1038/nm1210-1369 PMID: 21135838
52. فو W ، Vukojevic V ، Patel A ، Soudy R ، MacTavish D ، Westaway D ، Kaur K ، Goncharuk V ، Jhamandas J. التهاب الأعصاب ي. 2017 ؛ 14: 199. https://doi.org/10.1186/s12974-017-0972-9 PMID: 28985759
53. Yang X ، Zeng Q ، Tezel G. تنظيم وظائف caspase المميزة - 8 في الخلايا العقدية للشبكية و astroglia في الجلوكوما التجريبية. نيوروبيول ديس. 2021 ؛ 150: 105258. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2021.105258 PMID: 33434617
54. أشوك أ ، سينغ إن ، تشودري إس ، بيلامكوندا ف ، كريتيكوس إيه إي ، وايز أس ، رانا إن ، ماكدونالد دي ، أياغاري ر. تنكس الشبكية ومرض ألزهايمر: رابط متطور. علوم Int J Mol. 2020 ؛ 21: 7290. https://doi.org/10.3390/ijms21197290 بميد: 33023198
55. Ruediger S ، Vittori C ، Bednarek E ، Genoud C ، Strata P ، Sacchetti B ، Caroni P. نمو التوصيلية المثبطة للتغذية ذات الصلة بالتعلم اللازم لدقة الذاكرة. طبيعة سجية. 2011 ؛ 473: 514-18. https://doi.org/10.1038/nature09946 PMID: 21532590
56. Wood RA ، Bauza M ، Krupic J ، Burton S ، Delekate A ، Chan D ، O'Keefe J. توفر متاهة قرص العسل اختبارًا جديدًا لدراسة الملاحة المكانية المعتمدة على الحصين. طبيعة سجية. 2018 ؛ 554: 102–05. https://doi.org/10.1038/nature25433
