تحفز Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides موت الخلايا المبرمج في خلايا سرطان الكبد H22 من خلال مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية

خلفية

يحتل سرطان الكبد المرتبة السادسة من حيث الإصابة بالسرطان والرابع من حيث الوفيات الناجمة عن السرطان في جميع أنحاء العالم. علاوة على ذلك، فقد احتلت المرتبة الرابعة من حيث حالات الإصابة بالسرطان والأولى من حيث وفيات السرطان في البلدان ذات المؤشر الاجتماعي والديموغرافي المنخفض [1]. في الصين، يعد سرطان الكبد السبب الرئيسي الثالث للوفاة المرتبطة بالسرطان في عام 2015 [2]. أكثر من 90% من حالات سرطان الكبد الأولية هي سرطان الخلايا الكبدية (HCC) في العالم [3]. حاليا، استئصال الكبد هو الخيار الرئيسي لعلاج سرطان الكبد. ومع ذلك، فإن أقل من 30% من المرضى الذين يعانون من سرطان الكبد استوفوا معايير الاستئصال الكبدي العلاجي ولا يزال معدل البقاء على قيد الحياة الإجمالي لمدة 5-عامًا منخفضًا يصل إلى 35-50% بسبب ارتفاع معدل التكرار [4، 5] . إن توافر خيارات العلاج للمرضى الذين يعانون من سرطان الكبد السرطاني المتوسط ​​إلى المتقدم محدود للغاية. Sorafenib، وهو دواء مستهدف جزيئيًا، تمت الموافقة عليه من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) كعلاج الخط الأول لسرطان الخلايا الكبدية المتقدم. ومع ذلك، فإن سورافينيب يطيل فقط حوالي 3 أشهر من البقاء على قيد الحياة ومعدل الاستجابة أقل من 4٪ [6، 7]. ومن الملح تطوير أدوية أو استراتيجيات جديدة ضد سرطان الكبد.

تم استخدام الطب الصيني التقليدي (TCM) بمفرده أو مع استراتيجيات أخرى لعلاج سرطان الكبد وأظهر فوائد سريرية بما في ذلك فترة البقاء الطويلة، وتحسين نوعية الحياة، وتقليل التفاعلات الضارة، وما إلى ذلك [8، 9]. Cistanche، وهو نوع من الطب الصيني التقليدي، له وظائف بيولوجية مختلفة، مثل مضادات الأكسدة، ومكافحة الالتهاب، ومكافحة الشيخوخة، والحماية العصبية [10، 11]. تعتبر جليكوسيدات فينيليثانويد المكونات النشطة الرئيسية لسيستانش، والتي لها أنشطة متنوعة بما في ذلك مضادات الأكسدة، ومكافحة الالتهاب، وحماية الكبد، والوقاية العصبية [12-15]. وقد أبلغت مجموعتنا ذلكCistanche tubulosa جليكوسيدات الفينيليثانويد (CTPG)يمكن أن يحفز موت الخلايا المبرمج في خلايا سرطان الجلد B16-F10 ويمنع نمو الأورام في الفئران [16]. في هذه الدراسة، قمنا بقياس التأثير المضاد للورم لـ CTPG على خلايا HCC H22 سواء في المختبر أو في الجسم الحي ودرسنا آلياته. لقد وجدنا أن CTPG يسبب موت الخلايا المبرمج في خلايا H22 من خلال مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية ويقمع نمو أورام H22 في الفئران.

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

طُرق

خط الخلية

تم الحصول على خلايا سرطان الكبد H22 من مختبر شينجيانغ الرئيسي للموارد البيولوجية والهندسة الوراثية، جامعة شينجيانغ (أورومتشي، شينجيانغ، الصين) وتم تربيتها في وسط RPMI 1640 (جيبكو) مع 100 وحدة / مل من البنسلين و 100 ميكروغرام / مل الستربتومايسين، و10% من مصل الأبقار الجنيني المعطل بالحرارة (جيبكو) عند 37 درجة في جو رطب بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون.

فحص MTT

تم شراء CTPG من شركة Hetian Dichen Biotech Co., Ltd. (Hetian، Xinjiang، الصين) وتم تأهيل المركبات الرئيسية لـ CTPG وقياسها بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء [16]. تم تقييم صلاحية الخلية بواسطة 3- (4، 5- ثنائي ميثيل ثيازول -2-yl) -2، 5- بروميد ثنائي فينيل تيترازوليوم (MTT) (Sigma، St. Louis، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية) الفحص. تم تلقيح خلايا H22 في صفائح البئر بكثافة 2 × 104 خلايا في 100 ميكرولتر لكل بئر وتم تربيتها عند 37 درجة. بعد 24 ساعة، عولجت الخلايا بتركيزات مختلفة من CTPG (0، 100، 200، 300، و400 ميكروغرام/مل) أو 0.3% DMSO (مساوي لذلك الموجود في 400 ميكروغرام/مل CTPG) لمدة 24 و48 و72 ساعة. على التوالى. بعد الطرد المركزي عند 1000 دورة في الدقيقة لمدة 7 دقائق، تم التخلص من الطاف وأضيف 100 ميكرولتر من محلول MTT (5 مجم / مل في PBS) إلى كل بئر. تم تحضين الأطباق عند 37 درجة لمدة 4 ساعات وأضيف 100 ميكرولتر من DMSO لإذابة بلورات الفورزان المشكلة. تم اكتشاف قيم OD490 بواسطة 96-قارئ صفيحة جيدة (Bio-Rad Laboratories، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). تم حساب صلاحية الخلية وفقًا للصيغة: صلاحية الخلية (٪)=(ODtreated/ODuntreated) × 100%.

الكشف عن موت الخلايا المبرمج

تمت معالجة خلايا H22 بتركيزات مختلفة من CTPG (0، 100، 200، 300، و400 ميكروغرام / مل) أو 0.3٪ DMSO لمدة 24 ساعة، ثم تم صبغها باستخدام Annexin VFITC / Propidium. مجموعة أدوات الكشف عن موت الخلايا المبرمج لليوديد (PI) (YEASEN، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم تحليل العينات عن طريق قياس التدفق الخلوي (BD FACSCalibur، الولايات المتحدة الأمريكية).

الكشف عن إمكانات غشاء الميتوكوندريا

تمت معالجة خلايا H22 بتركيزات مختلفة من CTPG (0 و200 و400 ميكروغرام/مل) لمدة 24 ساعة، ثم تم صبغها بصبغة JC-1 المنفذة للغشاء (Beyotime، الصين) لمدة 20 دقيقة عند 37 درجة. بعد الغسيل مرتين باستخدام المخزن المؤقت JC -1، تمت إعادة تعليق العينات باستخدام 300 ميكرولتر من المخزن المؤقت JC -1 وتحليلها بواسطة قياس التدفق الخلوي (BD FACSCalibur، الولايات المتحدة الأمريكية).

تحليل دورة الخلية

تم تلقيح خلايا H22 في أطباق زراعة بحجم 60 مم وتم علاجها بتركيزات مختلفة من CTPG (0، 100، 200، 300، و400 ميكروغرام / مل) أو 0.3٪ DMSO لمدة 24 ساعة. تم جمع جميع الخلايا وغسلها مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني. تم إصلاح الخلايا في 70٪ من الإيثانول المثلج عند -20 درجة لمدة ساعتين وغسلها مرتين باستخدام PBS، ثم أعيد تعليقها في 300 ميكرولتر من محلول تلطيخ بروبيديوم يوديد / RNase (BD Biosciences). بعد 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة، تم جمع العينات عن طريق قياس التدفق الخلوي (BD FACSCalibur، الولايات المتحدة الأمريكية)، وتم تحليل توزيع دورة الخلية باستخدام برنامج ModFit LT 3.0.

هويشت 33258 تلطيخ

تم تحليل التغيرات المورفولوجية لنواة خلية H22 بواسطة صبغة ربط الحمض النووي النفاذية للغشاء هويشت 33،258. تم زرع خلايا H22 في 6- صفيحة بئر بتركيز 1 × 1 0 5 خلايا / بئر في وسط سعة 2 مل. بعد التقاء 60٪ ~ 70٪، عولجت الخلايا بـ CTPG (0، 100، 200، 300 و 400 ميكروغرام / مل) لمدة 24 ساعة. تم جمع الخلايا وتثبيتها باستخدام بارافورمالدهيد بارد بنسبة 4٪ عند درجة حرارة 4 لمدة 10 دقائق. بعد الغسيل باستخدام PBS، تم تلوين الخلايا بـ Hoechst 33,258 (Beyotime، الصين) عند 4 درجات لمدة 10 دقائق. تمت ملاحظة العينات بواسطة مجهر مضان مقلوب (Nikon Eclipse Ti-E، اليابان).

لطخة غربية

تم شراء Anti-caspase -3، وanti-cleaved caspase -3، وAnti-Bcl -2، وantiBax من Beyotime Biotech Co., Ltd. (شنغهاي، الصين). مضاد الكاسبيز -7، مضاد الكاسبيز المشقوق -7، مضاد الكاسبيز -8، مضاد الكاسبيز المشقوق -8، مضاد الكاسبيز -9، مضاد -cleaved-caspase-9، وanti-PARP، وanti-cleaved PARP، وantimouse IgG-HRP، وanti-rabbit IgG-HRP تم شراؤها من Cell Signaling Technology. تم شراء Anti- -actin من شركة Beijing ComWin Biotech Co., Ltd. (بكين، الصين).

تمت معالجة خلايا H22 بتركيزات مختلفة من CTPG (0، 100، 200، 300، و400 ميكروغرام / مل) أو 0.3٪ DMSO لمدة 24 ساعة. تم جمع الخلايا وإزالتها باستخدام Cell Lysis Solution RIPA (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd) لمدة 30 دقيقة على الجليد. تم نسج العينات (12 ، 000 جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات) لجمع المواد الطافية وتم قياس تركيزات البروتين بواسطة BCA Kit (Thermo Fisher Scientific، الولايات المتحدة الأمريكية). تم عزل كمية متساوية من البروتين في كل عينة بنسبة 12% SDS-PAGE ونقلها إلى أغشية PVDF (Biosharp، الصين). بعد الحظر باستخدام محلول TBST الذي يحتوي على 5٪ من الحليب الخالي من الدسم، تم تحضين الأغشية بالأجسام المضادة الأولية المقابلة والأجسام المضادة الثانوية المرتبطة ببيروكسيداز الفجل الحار (HRP)، على التوالي. بعد الغسيل باستخدام TBST، تم اكتشاف البروتينات المستهدفة بواسطة مجموعة فحص ECL (Beyotime، الصين).

بيان الحيوانات والأخلاق

6-8 تم شراء فئران كونمينغ الذكور البالغة من العمر أسابيع من مركز مختبر الحيوانات بجامعة شينجيانغ الطبية (أورومتشي، شينجيانغ، الصين). تم الاحتفاظ بالفئران في منشأة حيوانية ذات دورة خفيفة يتم التحكم بدرجة حرارتها في جامعة شينجيانغ. تم إجراء جميع الدراسات على الحيوانات وفقًا لإرشادات لجنة رعاية واستخدام الحيوان بجامعة شينجيانغ. تمت الموافقة على البروتوكول من قبل لجنة أخلاقيات التجارب على الحيوانات في مختبر شينجيانغ الرئيسي للموارد البيولوجية والهندسة الوراثية (BRGE-AE001)، جامعة شينجيانغ.

دراسة الورم الفأري

لتحريض نموذج فأر الورم، تم حقن فئران كونمينغ الذكور تحت الجلد بـ 1 × 1 0 6 خلايا H22 في 1 0 0 ul PBS في الجهة اليمنى. بعد 3 أيام، تم تقسيم الفئران عشوائيا إلى 3 مجموعات (7 فئران لكل مجموعة). تم حقن المجموعة الضابطة بـ 0.1 مل من DMSO تحت الجلد حول الورم. تم حقن مجموعات CTPG-200 وCTPG-400 تحت الجلد بـ 200 أو 400 مجم/كجم CTPG في 0.1 مل DMSO حول الورم. تم علاج الفئران كل يومين لمدة تصل إلى 21 يومًا. تم قياس أحجام الورم باستخدام الفرجار لمدة تصل إلى 25 يومًا وتم حساب حجم الورم وفقًا للصيغة: حجم الورم (مم3)=(الطول × العرض2)/2. وبعد 25 يومًا، تمت مراقبة بقاء الفئران السرطانية على قيد الحياة يوميًا حتى نهاية هذه الدراسة.

تحليل احصائي

تم حساب الأهمية الإحصائية عن طريق تحليل التباين في اتجاه واحد بين مجموعات العلاج والسيطرة. تم التعبير عن جميع البيانات على أنها الانحراف المعياري المتوسط ​​(SD). تم اعتبار p <0.05 ذات دلالة إحصائية.

نتائج

خفض CTPG من صلاحية خلايا H22 في المختبر

لاستكشاف التأثير المضاد للورم لـ CTPG على سرطان الكبد، تمت معالجة خلايا H22 بتركيزات مختلفة من CTPG (0 و100 و200 و300 و400 ميكروغرام/مل) في المختبر. بعد 24 ساعة، لوحظ مورفولوجية خلايا H22 باستخدام مجهر مقلوب. لقد وجدنا أن شكل خلايا H22 قد تغير بشكل كبير عن طريق علاج CTPG. مع زيادة تركيز CTPG، أصبحت الخلايا صغيرة ومستديرة، كما انخفض عدد الخلايا بشكل كبير (الشكل 1 أ). تم استخدام اختبار MTT لتحليل صلاحية خلايا H22 بعد علاج CTPG لمدة 24 و48 و72 ساعة على التوالي. قلل CTPG بشكل كبير من صلاحية خلايا H22 بطريقة تعتمد على الجرعة والوقت (الشكل 1 ب). وصل CTPG عند 300 ميكروغرام / مل إلى أفضل معدل مثبط (الشكل 1 ج). تبلغ قيم IC50 لـ CTPG لخلايا H22 236 ميكروغرام/مل عند 24 ساعة و169.8 ميكروغرام/مل عند 48 ساعة.

سيستانش توبولوسا الطبيعي لتحسين الذاكرة PHGS75% ECH 30% ACT 12%

CTPG يسبب موت الخلايا المبرمج في خلايا H22

للتحقق مما إذا كان انخفاض صلاحية خلايا H22 يتم بوساطة تحريض موت الخلايا المبرمج، تمت معالجة خلايا H22 بتركيزات مختلفة من CTPG (0، 100، 200، 300 و 400 ميكروغرام / مل) لمدة 24 ساعة وملطخة بـ PI و Annexin V. أظهرت نتائج قياس التدفق الخلوي أن CTPG تسبب بشكل كبير في موت الخلايا المبرمج للخلايا H22 (بما في ذلك موت الخلايا المبرمج المبكر والمتأخر) بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 2 أ). على الرغم من أن الجرعة العالية من CTPG أدت أيضًا إلى زيادة نخر خلايا H22 بشكل ملحوظ، إلا أن النخر يلعب دورًا ثانويًا في تثبيط نمو خلايا H22 بسبب انخفاض نسبته (8.3٪) مقارنةً بموت الخلايا المبرمج (52.6٪). علاوة على ذلك، تم عزل البروتينات الكلية لخلايا H22 بعد علاج CTPG، وتم اكتشاف تعبيرات سرطان الغدد الليمفاوية للخلايا B المضادة لموت الخلايا المبرمج 2 (Bcl-2) وبروتين X المرتبط بـ BCL-2- المرتبط بالاستماتة (Bax) بواسطة الغرب. لطخة. أظهرت بيانات المسح بالتدرج الرمادي أن مستويات التعبير لـ Bax وBcl-2 قد زادت وانخفضت على التوالي. تمت زيادة نسبة Bax / Bcl -2 بشكل ملحوظ (الشكل 2 ب). تشير هذه النتائج إلى أن CTPG يستحث موت الخلايا المبرمج في خلايا H22.

يستحث CTPG تكثيف الكروموسومات وتوقف دورة الخلية في خلايا H22

تم الإبلاغ عن أن تلف الحمض النووي وتوقف دورة الخلية الناجم عن الأدوية يمكن أن يمنع نمو الخلايا السرطانية ويسبب موت الخلايا المبرمج في الخلايا السرطانية [17، 18]. للكشف عن مورفولوجيا النوى في خلايا H22 بعد علاج CTPG لمدة 24 ساعة، تم تلوين خلايا H22 بواسطة Hoechst 33,342 وتم ملاحظتها باستخدام المجهر الفلوري المقلوب. أظهرت الخلايا المعالجة بـ CTPG زيادة تعتمد على الجرعة في كروماتين النوى المكثف، في حين أظهرت الخلايا غير المعالجة نوى ملطخة بشكل متجانس (الشكل 3 أ). تم تحليل توزيع دورة الخلية في خلايا H22 بشكل أكبر عن طريق تلطيخ PI بعد ذلكعلاج CTPGلمدة 24 ساعة. كما هو مبين في الشكل 3 ب، أدى علاج CTPG إلى زيادة كبيرة في نسبة خلايا الطور G 0 / G 1- وG2 / M وانخفض بشكل ملحوظ نسبة خلايا الطور S، مما يشير إلى أن CTPG يسبب G اعتقال 0/G1 وG2/Mphase في خلايا H22. كما أدت الجرعة العالية من CTPG إلى زيادة كبيرة في نسبة الخلايا تحت G1.

قلل CTPG من إمكانات غشاء الميتوكوندريا وزاد من إطلاق السيتوكروم ج

يلعب المسار المعتمد على الميتوكوندريا دورًا مهمًا في تحفيز موت الخلايا المبرمج [19، 20]. يمكن مراقبة التغيرات في إمكانات غشاء الميتوكوندريا (Δψm) عن طريق تلطيخ JC -1 لأن إجمالي JC -1 (مضان أحمر) يمكن أن يتفكك إلى مونومر (مضان أخضر) مع تقليل Δψm [21]. بعد علاج CTPG لمدة 24 ساعة، تم تلوين خلايا H22 بصبغة JC - 1. أظهرت بيانات قياس التدفق الخلوي أن التألق الأحمر في قناة FL -2 والتألق الأخضر في قناة FL -1 انخفض بشكل ملحوظ وزاد عند علاج CTPG. تمت زيادة نسبة خلايا PE− FITC + بشكل ملحوظ (الشكل 4 أ)، مما يشير إلى أن CTPG خفض Δψm في خلايا H22. وهذا يتوافق مع زيادة نسبة Bax/Bcl-2. وبالتالي، لاحظنا زيادة كبيرة في إطلاق السيتوكروم ج عند علاج CTPG (الشكل 4 ب). أشارت هذه النتائج إلى أن CTPG قد يحفز موت الخلايا المبرمج جزئيًا في خلايا H22 عبر مسار (جوهري) يعتمد على الميتوكوندريا.

قام CTPG بتنشيط مسار كاسباس ومنع إصلاح الحمض النووي

بعد ذلك، تم تحليل تنشيط الكاسباس الناجم عن CTPG عبر مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية. بعد علاج CTPG لمدة 24 ساعة، تم عزل البروتينات الكلية من خلايا H22 وتم اكتشاف مستويات الكاسبيز المؤيدة والمشقوقة بواسطة لطخة غربية. بالمقارنة مع التحكم غير المعالج أو التحكم في DMSO، فإن علاج CTPG ينظم بشكل كبير ليس فقط مستوى الكاسبيز المشقوق -8 (المسار الخارجي) ولكن أيضًا مستوى الكاسبيز المشقوق -9 (المسار الداخلي) (الشكل 1 أ). 5). بالتتابع، قام الكاسبيز المنشط -8 و-9 بتقسيم المصب الموالي للكاسبيز -3 و-7 الذي تمت ملاحظته في الشكل 5. قام الكاسبيز المنشط -3 بتقسيم الحمض النووي إصلاح إنزيم بوليميريز بولي (ADP-ribose) (PARP) لمنع إصلاح الحمض النووي وتراكم تلف الحمض النووي كما هو موضح في الشكل 3 أ.

أشارت هذه النتائج إلى أن CTPG تسبب في موت الخلايا المبرمج في خلايا H22 من خلال مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية.

يمنع CTPG نمو H22 HCC في الجسم الحي ويحسن معدل بقاء الفئران السرطانية

أخيرًا، تم تقييم التأثير المضاد للورم لـ CTPG على سرطان الكبد في نموذج فأر للورم، والذي تم إنشاؤه عن طريق الحقن تحت الجلد لخلايا H22. بعد 3 أيام من حقن خلايا H22، عولجت الفئران السرطانية بـ CTPG 8 مرات. تم رصد وزن الجسم من الفئران وأحجام الورم في نقاط زمنية محددة. كما هو مبين في الشكل 6 أ، فإن وزن جسم الفئران في كل مجموعة ليس له فرق كبير، مما يشير إلى أن الجرعات المختارة من CTPG ليس لها آثار جانبية واضحة.

ومن المثير للاهتمام أن نمو الورم في الفئران المعالجة بكل من 200 مجم / كجم و 400 مجم / كجم من CTPG تم تثبيطه بشكل كبير (الشكل 6 ب). علاوة على ذلك، فإن جرعتي علاج CTPG حسنت بشكل كبير من بقاء الفئران السرطانية (3/7، 3/7) مقارنة بالمجموعة الضابطة (0/7) في نهاية التجربة (الشكل 6 ب). لقد وجدنا أيضًا أن CTPG عزز بشكل كبير تكاثر الخلايا الطحالية المعزولة من ذكور فئران كونمينغ بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 6 ج) ، مما يشير إلى أن CTPG له تأثير منبه مناعي.

أعلى جودة سيستانش توبولوسا لتحسين الوظيفة الجنسية PHGS75% ECH 30% ACT 12%

مناقشة

لقد تم استخدام الطب الصيني التقليدي لعلاج أمراض مختلفة بما في ذلك السرطان على مدى تاريخ طويل. تم الإبلاغ عن أن الطب الصيني التقليدي يمكن أن يحفز موت الخلايا المبرمج في أنواع مختلفة من الخلايا السرطانية من خلال مسارات الإشارات الخارجية (بوساطة مستقبلات الوفاة) والجوهرية (المعتمدة على الميتوكوندريا) لممارسة تأثيرات مضادة للأورام [22-25]. يمكن للمسارين تنشيط caspase -8 و -9، على التوالي [24، 26]. هنا، وجدنا أن CTPG يثبط بشكل كبير نمو خلايا H22 من خلال تحفيز موت الخلايا المبرمج وتوقف دورة الخلية. تم تنظيم مستويات الكاسبيز المشقوق -8 و-9 بشكل ملحوظ بواسطةعلاج CTPG، مما يشير إلى أن كلا من مسارات الإشارات الخارجية والداخلية كانت متورطة في تحريض موت الخلايا المبرمج. أظهرت دراستنا السابقة أن CTPG تسبب في موت الخلايا المبرمج في خلايا سرطان الجلد B 16- F10 عن طريق مسار يعتمد على الميتوكوندريا مما أدى إلى زيادة مستوى الكاسبيز المشقوق -9 ولكن ليس الكاسبيز -8 [16]. قد يقوم CTPG بتنشيط مسارات إشارات مميزة في أنواع مختلفة من الخلايا السرطانية.

يتم تنظيم سلامة غشاء الميتوكوندريا بإحكام من قبل أعضاء عائلة البروتين BCL -2 بما في ذلك Bax وBcl -2 [27، 28]. تلعب نسبة Bax إلى Bcl-2 دورًا حاسمًا في مسار موت الخلايا المبرمج المعتمد على الميتوكوندريا [29]. في خلايا H22 التي عولجت بواسطة CTPG، تم تنظيم نسبة Bax / Bcl -2 بشكل كبير، مما قد يتسبب في تقليل Δψm وإطلاق السيتوكروم c الذي لوحظ في هذه الدراسة. وبالتالي، تم تقسيم وتنشيط pro-caspase-9. أخيرًا، قام بادئو الكاسبيز النشط -8 و-9 بتنشيط منفذ الكاسبيز -3 لقطع PARP لمنع إصلاح الحمض النووي. مجتمعة، تشير هذه النتائج إلى أن CTPG تسبب في موت الخلايا المبرمج في خلايا H22 من خلال مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية.

في نموذج فأر الورم، قام CTPG بقمع نمو H22 HCC بشكل كبير وحسّن بشكل كبير بقاء الفئران السرطانية. ومن المثير للاهتمام أن CTPG عزز بشكل معتمد على الجرعة تكاثر الخلايا الطحالية من فئران كونمينغ، وهو ما يتوافق مع دراستنا السابقة [16]. تشير هذه النتائج إلى أن CTPG قد يوقف نمو H22 HCC في الفئران من خلال التأثير المباشر المضاد للأورام وتعزيز المناعة غير المباشر.

الاستنتاجات

قام CTPG بقمع نمو خلايا H22 سواء في المختبر أو في الجسم الحي وتسبب في موت الخلايا المبرمج في خلايا H22 من خلال مسارات الإشارات الخارجية والجوهرية. أشارت هذه البيانات إلى أن CTPG قد يكون مرشحًا محتملاً لعلاج سرطان الكبد.