الفئران المطلقة من ديامين أوكسيديز ليست شديدة الحساسية للهستامين الذي يتم تناوله عن طريق الفم أو تحت الجلد

خلاصة

1 - الهدف

لتقييم مساهمة ديامين أوكسيديز داخلي المنشأ (DAO) في تعطيل الهيستامين الخارجي ، للعثور على سلالة فأر مع زيادة حساسية الهيستامين ، واختبار فعالية rhDAO في نموذج تحدي الهيستامين.

2. الطرق

تم تحدي الفئران بالضربة القاضية من ديامين أوكسيديز (KO) باستخدام الهيستامين الذي يتم تناوله عن طريق الفم وتحت الجلد بالاشتراك مع بروبرانولول مانع الأدرينرجيك ، مع مثبطين هيستامين- N- ميثيل ترانسفيراز (HNMT) ميثوبرين وتاكرين ، مع حمض الفوليك لتقليد إصابة الكلى الحادة ومعالجتها مع DAO البشري المؤتلف. تم قياس درجة حرارة الجسم الأساسية باستخدام شريحة ميكروية مزروعة تحت الجلد وتم قياس مستويات بلازما الهيستامين باستخدام مقايسة مضان متجانسة يتم حلها بمرور الوقت.

3. النتائج

لم تكن درجة حرارة الجسم الأساسية ومستويات الهستامين في البلازما مختلفة بشكل كبير بين الفئران من النوع البري (WT) و DAO KO بعد تحدي الهيستامين الفموي وتحت الجلد مع وبدون إصابة الكلى الحادة أو إعطاء مثبطات HNMT. قلل العلاج باستخدام DAO البشري المؤتلف المنطقة المتوسطة تحت المنحنى (AUC) لفقدان درجة حرارة الجسم الأساسية بنسبة 63 بالمائة (p =0. 002) والنتيجة السريرية بنسبة 88 بالمائة (p<0.001). The AUC of the histamine concentration was reduced by 81%.

4 - نتائج

لا يتم تعطيل نشاط الهيستامين الخارجي عن طريق التدهور الأنزيمي وترشيح الكلى. أدى العلاج باستخدام DAO البشري المؤتلف إلى تقليل فقدان درجة حرارة الجسم الأساسية الناجم عن الهيستامين ، وتركيزات الهستامين ومنع تطور الأعراض السريرية الشديدة.

الكلمات الدالة

أمين أوكسيديز (يحتوي على النحاس) · هيستامين إن ميثيل ترانسفيراز · إصابة الكلى الحادة · الأيض · تاكرين · ميتوبرين · درجة حرارة الجسم

انقر هنا لشراء ملحق Cistanche

مقدمة

يتم تخزين أكثر من 95 في المائة من كل الهيستامين في البشر في الخلايا البدينة والخلايا القاعدية. من المحتمل أن يكون الأمر نفسه صحيحًا بالنسبة للعديد من الثدييات. في البشر ، تكون كثافة الخلايا البدينة أعلى في الجهاز الهضمي والجلد والرئتين [1] ، وبالتالي ، تظهر هذه الأعضاء أعراضًا يسببها الهيستامين في الأمراض مع مشاركة واضحة في تنشيط الخلايا البدينة. يمكن أن تصل التركيزات الخلالية الموضعية للهستامين بعد التحلل الحاد إلى 10-1000 ميكرومتر [2 ، 3 ، انظر الموارد عبر الإنترنت]. في البشر ، على غرار الكلاب والخنازير ، تقل تركيزات الهستامين في البلازما الطبيعية عن 1 نانوغرام / مل (9 نانومتر) وتبدأ الأعراض في الظهور عند بضع نانوجرامات لكل مليلتر [4-7]. يمكن قياس انخفاض ضغط الدم الملحوظ مع زيادة معدل ضربات القلب من 5 نانوغرام / مل وعندما ترتفع المستويات فوق 10 نانوغرام / مل يمكن أن يؤدي تطور التشنج القصبي وعدم انتظام ضربات القلب وانخفاض ضغط الدم الشديد والتشنج التاجي إلى اختلال وظيفي متعدد الأنظمة يهدد الحياة [8 ، 9]. لا يشارك الهيستامين فقط في توسع الأوعية ، وزيادة نفاذية الأوعية الدموية ، ونقص الأكسجة ، وتطور الوذمة الوعائية ، ولكنه يوضح أيضًا المشاركة المؤيدة للالتهابات التي تؤثر على جهاز المناعة التكيفي عن طريق التجنيد والنضج وتنشيط الخلايا المناعية. بالإضافة إلى ذلك ، يلعب دورًا في الجهاز المناعي الفطري من خلال التفاعل مع الخلايا المتغصنة والخلايا القاتلة الطبيعية والخلايا المحببة [10 ، 11].

تتراوح تركيزات الهستامين الأساسية في الفئران والجرذان بين 20 و 100 نانوغرام / مل عند قياسها باستخدام طرق موثوقة ، وبالتالي فهي أعلى بعدة مرات من تلك الموجودة في البشر [6 ، 7]. ليس من الواضح ما إذا كانت مستويات الهيستامين العالية تلعب أي دور فسيولوجي. تشتهر القوارض بمقاومة الهيستامين بجرعات قاتلة تبلغ 50 في المائة (LD50) في سلالات الفئران المختلفة من 3000-4000 و 400-500 ملغم / كغم بعد الإعطاء الفموي والوريد ، على التوالي [12 ، 13]. سيكون تركيز الهستامين في البلازما الذروة بعد إعطاء جرعة 400 مجم / كجم في فأر 20 جم حوالي 8 مجم / مل بافتراض أن حجم البلازما 1 مل. عندما تم إحداث الحساسية المفرطة في البشر عن طريق التحكم في لدغة الدبابير ، ارتبطت تركيزات الهيستامين البالغة 140 نانوغرام / مل مع انخفاض ضغط الدم الشديد الذي يهدد الحياة [14]. كيف يتم استقلاب الهستامين وتعطيله؟

يُظهر الهستامين 13 بالمائة من متوسط ​​ارتباط بروتين البلازما ويتم ترشيحه بحرية في الكلى [15]. يمكن أن يساهم معدل الترشيح الكبيبي (GFR) نظريًا بحوالي 15-20 في المائة في نصف العمر من 3-4 دقائق الموجود في المتطوعين الأصحاء [5 ، انظر الموارد عبر الإنترنت]. عند معدل الترشيح الكبيبي الطبيعي 100 مل / دقيقة وحجم البلازما 3000 مل ، يكون نصف عمر الهستامين 20 دقيقة. في الفئران ، يؤدي معدل الترشيح الكبيبي الطبيعي البالغ 10 ميكرولتر / دقيقة / جم إلى نصف عمر للهستامين يبلغ 3 دقائق [16 ، راجع الموارد على الإنترنت]. ومع ذلك ، يُظهر الهيستامين معدل استخراج مرتفعًا في الكلى ، يتجاوز المعدلات بناءً على معدل الترشيح الكبيبي ، ويُعزى هذا الاستخراج إلى امتصاص وإعادة امتصاص الخلايا الأنبوبية القريبة عبر ناقل الكاتيون العضوي 2 (OCT2) ، متبوعًا بالتثبيط الأنزيمي [17 ، انظر أقل]. في البشر ، تم العثور على أقل من 1 في المائة من الهيستامين المشع المحقون في البول خلال أول 6 ساعات [18]. تم تأكيد انخفاض معدل إفراز الهيستامين في البشر ، والذي يظهر أيضًا في الكلاب والقطط ، من قبل الآخرين [19]. في أنسجة الفئران والجرذان ، يوجد أكثر من 50 في المائة من النشاط الإشعاعي المحقون في الكلى ، وأقل من 2 في المائة على شكل هيستامين بعد 30 دقيقة من الإعطاء في الوريد [20]. كانت الكلى أيضًا العضو الأكثر نشاطًا إشعاعيًا بعد تناول جرعات عالية من الهيستامين في الفئران [21]. يتم التعبير عن ناقل OCT2 بشكل كبير في الكلى البشرية والقوارض وقد يكون مسؤولاً عن كل من استخراج الهيستامين من حجرة البلازما وإعادة امتصاص الهيستامين في ترشيح البول الأولي في الخلايا الأنبوبية القريبة [22 ، انظر أدناه].

سيكون النقل السريع للهيستامين خارج الخلية من السائل الخلالي بعد إطلاقه من الخلايا البدينة أو البلازما إلى أجزاء أخرى بعيدًا عن الخلايا البطانية احتمالًا آخر لتعطيل الهيستامين. قد يمنع هذا تحريض انخفاض ضغط الدم الشديد وتسرب الأوعية الدموية بوساطة إشارات أكسيد النيتريك سينثيز البطانية (NOS) والربط بمستقبلات الهيستامين [23-25]. ومع ذلك ، لا توجد بيانات حيوانية في الجسم الحي تدرس معدلات نقل الهيستامين من الدوران الجهازي إلى الخلايا البطانية أو المتني. في العديد من الدراسات في المختبر ، يتم نقل الهستامين بشكل ثنائي الاتجاه باستخدام OCT2 ، و OCT3 [22 ، 26 ، 27] منخفض التقارب وعالي السعة. يعتبر الهستامين ركيزة ممتازة لناقل الفئران OCT2 و OCT3 ، حيث يُظهر كفاءة نقل أعلى مقارنة ببروتينات OCT البشرية المكافئة [26].

هيربا سيستانش

عند استخدام تركيزات منخفضة من الهيستامين المشع في الفئران ، يبدو أن المثيلة عبر هيستامين-إن-ميثيل ترانسفيراز (HNMT) هي الطريق الرئيسي للتثبيط. ومع ذلك ، فإن الفئران التي تواجه جرعات أعلى من الهيستامين ، تحول عملية التمثيل الغذائي إلى حمض الخليك إيميدازول (IMAA) وتقارن الريبوسيد ، مع اكتشاف كمية صغيرة فقط من المشتقات الميثيلية [28-30]. زيادة خمسة أضعاف تركيزات الهستامين في مصل الدم الأساسي في الفئران الضربة القاضية HNMT تدعم هذه البيانات [31]. يتم إنتاج حمض الإيميدازوليسيتيك عن طريق أكسدة الهيستامين بواسطة ديامين أوكسيديز (DAO) الذي يطلق إيميدازول أسيتالديهيد ، والذي يتم تحويله إلى مشتقات IMAA وريبوزيد ، بشكل رئيسي في الكبد. يبدو أن أكسدة الهيستامين عبر DAO تلعب دورًا أكبر في هدم الهيستامين بعد التحدي الفموي في الفئران ، وهو أمر ليس مفاجئًا بالنظر إلى أن تعبير DAO في الفئران مرتفع فقط في الجهاز الهضمي [30]. عندما يتم إجراء تحدي الهستامين الفموي في البشر ، فإن نزع الأمين التأكسدي عبر DAO هو المسار التقويضي السائد مع IMAA باعتباره المستقلب البولي الرئيسي [18].

ديامين أوكسيديز هو أمين أوكسيديز يحتوي على النحاس وواحد من اثنين من الإنزيمات القادرة على تعطيل الهيستامين [32]. في الأنسجة المختارة ، بشكل رئيسي الأمعاء الدقيقة والخلايا الأنبوبية القريبة من الكلى ، يوجد DAO في هياكل حبيبية غير محددة بشكل جيد داخل الخلايا ومرتبط خارج الخلية ببروتيوجليكان كبريتات الهيباران ، بينما HNMT موجود فقط في السيتوبلازم [33 ، 34]. ينتشر التعبير عن HNMT في جميع أنحاء الجسم ، مع وجود مستويات أعلى في الجهاز العصبي المركزي والمثانة والقلب والكلى والكبد والرئة والأنسجة الدهنية.

بعد تثبيط DAO باستخدام aminoguanidine ، أظهرت الأغنام أعراضًا سريرية واسعة لسمية الهيستامين بعد تحدي الهيستامين الفموي مقارنةً بالضوابط دون المعالجة المسبقة للأمينوجوانيدين [35]. أسفرت تجربة مماثلة على الخنازير عن مراضة ووفيات شديدة في الحيوانات التي عولجت مسبقًا بأمينوجوانيدين ثم تم تحديها باستخدام الهيستامين الفموي [36]. زاد متوسط ​​تراكيز الهيستامين في البلازما 20- أضعاف في الخنازير مع تثبيط DAO. أدى علاج الفئران بأمينوجوانيدين متبوعًا بتحدي الهيستامين عن طريق الفم إلى زيادة IMAA البولي وانخفاض تركيز الهيستامين بحوالي خمسة أضعاف [37]. أشارت هذه البيانات إلى أن DAO يلعب دورًا مهمًا في تدهور الهيستامين الخارجي عن طريق الفم.

في الفئران ، أدى العلاج بالأمينوجوانيدين إلى زيادة تركيز الهيستامين في الأمعاء بقوة بعد تحدي الهيستامين في الوريد [30]. ومع ذلك ، فإن الأمينوغوانيدين ليس مثبطًا محددًا لـ DAO ، ولكنه يمنع أيضًا جميع إنزيمات NOS الثلاثة ويبدو أنه يمنع نقل الهيستامين في الدم إلى الأنسجة [38 ، 39]. أظهر إعطاء البوريماميد ، وهو مضاد لمستقبلات الهيستامين 2 ، تأثيرات ضارة مع زيادة معدل الوفيات في نموذج صدمة الدورة الدموية في الفئران. ومع ذلك ، في الوقت نفسه ، تم نشر أن البوريماميد هو مثبط قوي لـ DAO [40 ، 41]. في الكلاب ، تسبب البورميد في زيادة 17- أضعاف في متوسط ​​تركيز الهيستامين في البلازما وانخفاض قوي في متوسط ​​الضغط الشرياني [42]. كان يعتقد أن التأثير يرجع إلى تنشيط الخلايا البدينة المحتمل.

وبالمثل ، تمت دراسة دور HNMT باستخدام ميثيل الهيستامين كمثبط لـ HNMT ، لكن ميثيل الهيستامين هو أيضًا ركيزة ممتازة لـ DAO [43]. الأمودياكين والكيناكرين من مثبطات HNMT القوية [44-46] ولكنهما يثبطان أيضًا DAO بتركيز مثبط بنسبة 50 بالمائة (IC50) من حوالي 500 نانومتر [47 ، بيانات غير منشورة]. لذلك ، يجب تفسير البيانات المشتقة باستخدام المثبطات ، والتي غالبًا ما تستخدم بتركيزات عالية ، بحذر ، لأن التأثيرات غير المستهدفة المعروفة وغير المعروفة من المحتمل أن تشوه بشكل كبير الصلة الفسيولوجية للدراسات في الجسم الحي.

قد توفر الدراسات الأيضية بعض المؤشرات على أهمية الإنزيمين في تحلل الهيستامين ، ولكن يمكن فصل تقويض الهيستامين عن التأثيرات الفسيولوجية أو الفيزيولوجية المرضية. يمكن أن تكون تركيزات الهستامين المجزأة حرجة وقد يكون التمثيل الغذائي في اتجاه مجرى النهر.

لذلك ، قررنا استخدام فأرة DAO الضربة القاضية (KO) لدراسة دور DAO في تدهور الهيستامين الخارجي. كان الهدف الرئيسي الثاني هو تطوير نموذج فأر مع زيادة حساسية الهيستامين لتمكيننا من دراسة دور الهيستامين في سلالات متحولة جينية مختلفة واختبار فعالية DAO البشري المؤتلف في نموذج تحدي الهيستامين.

كبسولات Cistanche

المواد والطرق

نماذج حيوانية

تم إجراء التجارب باستخدام 1 0 - 18- أسبوعًا من C57BL6 / J Aoc1tm1b (EUCOMM) Hmgu (DAO) KO الفئران وزملاء فضلات من النوع البري (WT). تم توفير أجنة متغايرة الزيجوت من قبل الأرشيف الأوروبي للماوس المتحولة ، ميونيخ ، ألمانيا ، وزُرعت في الفئران C57BL6 / N الكاذبة. تم تأكيد نسل الفئران المتخالف C57BL6 / J باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (انظر الموارد عبر الإنترنت) واستخدمت أيضًا لتربية فئران DAO KO في قسم الأبحاث الطبية الحيوية ، الجامعة الطبية في فيينا ، بواسطة بروتوكول الحيوان GZ 66. 00 9 / { {14}} WF / V / 3b / 2016. تم إجراء جميع التجارب على الحيوانات وفقًا للبروتوكول GZ 66. 00 9 / 0258- V / 3b / 2019. تمت الموافقة على البروتوكولات التجريبية من قبل وزارة التعليم والعلوم والبحوث النمساوية. تم الاحتفاظ بالحيوانات في الساعة 12:12 صباحًا بدورة نهار وليلة عند 22 درجة مع الماء والغذاء بالشهرة. بالنسبة لقياسات درجة الحرارة غير الغازية ، تم زرع جهاز مرسل مستجيب (IPTT -300 ، شركة BioMedic Data Systems Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية) تحت الجلد قبل أسبوعين من التجربة باستخدام تخدير قصير من الأيزوفلورين. يقيس جهاز الإرسال والاستقبال درجة الحرارة ثلاث مرات في غضون ثانية واحدة ويتم تسجيل متوسط ​​هذه القياسات من خارج القفص باستخدام قارئ. ثم يتم استخدام هذه القيمة المتوسطة لإجراء مزيد من العمليات الحسابية. تُستخدم هذه المرسلات المستجيبة تحت الجلد لتجنب التلاعب المفرط بالحيوانات ولمنع الإصابة من الإدخال المتكرر لمجسات درجة حرارة المستقيم [48]. في العديد من أنواع الحيوانات بما في ذلك القوارض ، ثبت أن إعطاء الهيستامين يخفض درجة حرارة الجسم ويعتبر أحدث قراءة لتأثيرات الهيستامين [49 ، 50]. خلال فترة المراقبة ، تم تقييم الأعراض السريرية من قبل طبيب بيطري متمرس وفقًا لدرجة فرط الحساسية المنشورة [51]. تراوحت النتيجة من 0 (لا توجد أعراض) إلى 1 (فرك وخدش الرأس والأنف) ، 2 (انخفاض النشاط مع زيادة معدل التنفس و / أو انخفاض النشاط ، الانتفاخ حول الفم والعينين) ، 3 (صعوبة التنفس ، زرقة حول الذيل والفم والصفير) و 4 (لا يوجد نشاط بعد الوخز أو الرعاش والتشنج). درجة 5 تعني الموت. بدأت جميع تجارب التحدي بين الساعة 9:00 و 11:00 صباحًا لتجنب الاختلافات التي تعتمد على الوقت من اليوم [52].

الإعداد التجريبي العام

تم تطبيق جميع المواد بحجم 5 مل / كجم. تم إذابة Propranolol (P0884 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) في محلول ملحي وتم وضعه داخل الصفاق (IP) بتركيز 2 مجم / كجم قبل 20 دقيقة من تحدي الهيستامين لزيادة حساسية الهيستامين [53]. تم إذابة الهستامين ثنائي هيدروكلوريد (H7250 ، سيجما الدريتش ، النمسا) في ماء مقطر مزدوج (dd) H2O وتم تخفيفه في محلول ملحي. تشير جميع تركيزات الهيستامين المذكورة إلى قاعدة الهيستامين (111.15 دالتون).

1. تناول الهيستامين عن طريق الفم وتحت الجلد

تم صيام الفئران لمدة 60 دقيقة في المجموع. بعد 40 دقيقة من الصيام ، تم إعطاء بروبرانولول وبعد 20 دقيقة تم وضع الهستامين بتركيز 30 مجم / كجم لكل نظام تشغيل باستخدام تزقيمية عن طريق الفم. بالنسبة لفئران نموذج التحدي تحت الجلد (sc) إما تلقت الهستامين بتركيز 50 مجم / كجم بدون بروبرانولول أو 5 مجم / كجم مع بروبرانولول. لتحديد تركيزات الهستامين في البلازما تم تخدير مجموعة فرعية من الفئران في نقاط زمنية مختلفة بعد اختبار الهيستامين باستخدام 10 ملجم / كجم من الزيلازين و 100 ملجم / كجم من الكيتامين. تم جمع بلازما السيترات من الفئران المخدرة باستخدام ثقب القلب. تم استخدام واحد إلى خمسة فئران لكل نقطة زمنية ونمط وراثي.

2. ما يصاحب ذلك من تثبيط الهيستامين ‑ N methyltransferase (HNMT)

تم إذابة ميتوبرين (M338835 ، تورونتو ريسيرش كيماويات ، كندا) في 10 في المائة من حمض اللاكتيك (L1875 ، سيجما الدريتش ، النمسا) ، ثم تم تخفيفه في محلول ملحي وتم إعطاؤه IP عند 3 مجم / كجم 1 ساعة قبل التحدي مع 5 مجم / كجم من الهيستامين. تم إذابة Tacrine (A79922 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) في ddH2O ، ثم تم تخفيفه في محلول ملحي ، وبعد ذلك تم تطبيق 10 مجم / كجم في 1 ساعة قبل 25 مجم / كجم من الهستامين و 2 مجم / كجم من بروبرانولول. تم استخدام تركيز 2 مجم / كجم من Tacrine ip مع 30 مجم / كجم من الهيستامين مع 2 مجم / كجم من بروبرانولول.

نظام معياري

3. تحريض إصابة الكلى الحادة (AKI) قبل تحدي الهيستامين

Folic acid (F7876, Sigma-Aldrich, Austria) was reconstituted in ddH2O, further diluted in saline, and applied i.p. at a concentration of 100 mg/kg 48 h before challenge with 5 mg/kg s.c. histamine and 2 mg/kg propranolol. The degree of acute kidney injury was estimated using plasma creatinine values. As a cut-off for inclusion, a creatinine value of at least threefold above the mean baseline value was used as described [54]. Baseline plasma creatinine concentrations of 0.11 and 0.17 mg/dl were measured in two mice and therefore an inclusion cut-off of>تم اختيار 42 مجم / ديسيلتر. تم استخدام بلازما السيترات المسحوبة عن طريق ثقب القلب لقياس الكرياتينين باستخدام محلل Cobas (محلل Cobas C311 ، روش ، سويسرا). لتحديد تركيزات الهيستامين في البلازما في نقاط زمنية مختلفة أثناء تحدي الهستامين مع بروبرانولول في إصابة الكلى الحادة ، تم تخدير 2 إلى 4 فئران في كل نقطة زمنية ، وتم جمع بلازما السترات عن طريق ثقب القلب.

4. الإنقاذ DAO بعد تناول الهيستامين

تم تطبيق المؤتلف البشري (rh) DAO مع شكل متحور مرتبط بالهيبارين (موصوف في Gludovacz et al. [55]) عن طريق الوريد (4) بتركيز 4 مجم / كجم 40 دقيقة قبل تطبيق 2 مجم / كجم من بروبرانولول و 60 دقيقة قبل التحدي مع 5 ملغ / كغ sc هيستامين.

لتحديد تركيزات الهيستامين و DAO في البلازما ، عولجت الفئران إما بـ 4 مجم / كجم من DAO أو المخزن المؤقت IV لمدة 60 دقيقة قبل التحدي باستخدام 5 مجم / كجم من الهيستامين مع 2 مجم / كجم من بروبرانولول. تم تخدير الفئران في نقاط زمنية مختلفة. تم جمع سيترات البلازما باستخدام ثقب القلب من اثنين إلى ثلاثة فئران لكل نقطة زمنية. تم جمع الدم في 3.8 في المائة من سترات الصوديوم وتم خلط جزء واحد على الفور مع ديمينازين أسيتورات (D7770 ، سيجما الدريتش ، النمسا) مما أدى إلى تركيز نهائي قدره 10 ميكرومتر لمنع تحلل الهيستامين بواسطة rhDAO.

تحليل التعبير الجيني

تم تجميد عينات الأنسجة بالصدمات في النيتروجين السائل وتم الحصول على إجمالي الحمض النووي الريبي باستخدام مجموعة FATRK Tissue Total RNA (FATRK 0 01 ، فافورجين ، تايوان) بعد تجانس الأنسجة باستخدام أنابيب lysing (Lysing Matrix E ، MP Biomedicals ، ألمانيا) على جهاز Precellys 24 (بيرتين إنسترومنتس ، فرنسا). تم إجراء النسخ العكسي باستخدام مجموعة توليف OneScript Plus (كدنا) (G236 ، ABM Good ، كندا). بالنسبة إلى PCR الكمي ، تم استخدام BrightGreen Express 2 × Mastermix (MasterMix-EL ، ABM Good ، كندا). تم تصميم الاشعال الممتد من Exon لـ DAO و HNMT و هيستيدين ديكاربوكسيلاز (HDC) باستخدام برنامج Primer3 (جدول الموارد عبر الإنترنت 1). تم استخدام جين التدبير المنزلي RPLP0 للتطبيع [56].

لطخة غربية

لتحليل اللطخة الغربية ، تم تحليل عينات الأنسجة المجمدة في محلول فوسفات K-phosphate 2 0 (درجة الحموضة 7.2) باستخدام أنابيب lysing (أنابيب Lysing Matrix E ، MP Biomedicals ، ألمانيا) على Precellys 24 (Bertin Instruments ، فرنسا) . تم تحديد تركيز البروتين الكلي باستخدام QuantiPro BCA Assay Kit (QPBCA -1 KT ، Sigma ، النمسا). بالنسبة إلى البولي أكريلاميد الكهربائي للهلام ، تم فصل 40 ميكروغرام من البروتين الكلي و 40 نانوغرام من الفئران المؤتلفة DAO (مقدمة من EG ، جامعة الموارد الطبيعية وعلوم الحياة ، فيينا ، النمسا ، باستخدام الطرق الموضحة في [57]) باستخدام 12 بالمائة من Tris – glycine gel ( 4561043 ، بيو راد ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام الجسم المضاد ABP1 أحادي النسيلة (sc -515908 ، سانتا كروز ، الولايات المتحدة الأمريكية) لاكتشاف DAO بتركيز 0.4 ميكروغرام / مل ، وتم استخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة GAPDH (2118 ، Cell Signal Technology ، الولايات المتحدة الأمريكية) كتحميل التحكم بتخفيف 1: 2 000. تم استخدام الأجسام المضادة IgG-HRP أحادية النسيلة المضادة للفأر (A2554 ، Sigma Aldrich ، النمسا) والأجسام المضادة IgG-HRP المضادة للأرنب (A0545 ، Sigma Aldrich ، النمسا) كأجسام مضادة للكشف بتخفيف 1: 40000. تم الحصول على الصور باستخدام Clarity Max Western ECL Substrate (1705062 ، BioRad ، الولايات المتحدة الأمريكية) على نظام التصوير ChemiDoc (17001401 ، Bio-Rad ، الولايات المتحدة الأمريكية).

Cistanche tubulosa

قياس نشاط DAO

تم قياس نشاط ديامين أوكسيديز لمتجانسات الأنسجة المختلفة والتثبيط بواسطة الميثوبرين والتاكرين كما هو موصوف [58]. تم تحليل عينات الأنسجة المجمدة في محلول فوسفات K-phosphate 20 ملي مولار (الرقم الهيدروجيني 7.2) باستخدام أنابيب lysing على Precellys 24. تم تحديد تركيز البروتين الكلي باستخدام QuantiPro BCA Assay Kit وتم تحضين 500 ميكروغرام من مستخلصات البروتين الكلية للأنسجة المختلفة لمدة 120 دقيقة باستخدام ortho-aminobenzaldehyde (oABA) وإما ddH2O أو 200 ميكرومتر كادافيرين (CAD). دلتا -1- piperidine ، منتج التدوير التلقائي لـ CAD بعد نزع الأمين بواسطة DAO ، يتكثف مع oABA مكونًا فلوروفور ، والذي يمكن قياسه عند EX440 / 30 و EM620 / 40 نانومتر. لتحديد تثبيط DAO ، تم تحضين مادة rhDAO مسبقًا بالميثوبرين والتاكرين بتركيزات مختلفة لمدة 30 دقيقة وتم قياسها كما هو موصوف أعلاه.

لتحديد نشاط DAO ، تم خلط متجانسات الأنسجة بتركيز بروتين 200 ميكروغرام / مل مع HRP (التركيز النهائي 1.2 ميكروغرام / مل ، P6782 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) وأمينوغوانيدين (التركيز النهائي 10 ميكرومتر ، 396494 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) أو تمت إضافة محلول فوسفات K (pH 7.2) واحتضانه لمدة 15 دقيقة عند 37 درجة. تمت إضافة Amplex red ™ (التركيز النهائي 100 ميكرومتر ، A12222 ، Thermo Scientific ، الولايات المتحدة الأمريكية) وبدأت التفاعلات بإضافة 200 ميكرومتر من تركيز البوتريسين النهائي (51799 ، Sigma-Aldrich ، النمسا). تم استخدام محلول فوسفات البوتاسيوم (pH 7.2) كعنصر تحكم سلبي. تم تحضين العينات عند 37 درجة وتم قياسها كل 10 دقائق لمدة 120 دقيقة باستخدام EX550 و EM590 نانومتر. تم حساب الإشارة الخاصة بـ DAO عن طريق طرح عينات مع aminoguanidine ، وهو مثبط DAO قوي وغير قابل للانعكاس ، من العينات مع K-phosphate العازلة.

لقياسات نشاط DAO البلازمية في الفئران التي تتلقى IV Rhoda ، تم استخدام اختبار هجين باستخدام جسم مضاد أحادي النسيلة من استنساخ خط خلية الورم الهجين المضاد لـ DAO 8/119 المقدم من البروفيسور كواروني (جامعة كورنيل ، إيثاكا ، نيويورك) ، وتم استخدام Amplex red ™. تم طلاء صفائح مضان سوداء عالية البروتين ملزمة (475،515 ، Thermo Scientific Nunc ، الدنمارك) بـ 1 0 0 ميكرولتر من 5 ميكروغرام / مل مضاد لـ DAO 8/119 في محلول مؤقت كربونات-بيكربونات سعة 50 ملي مولار ( C3041 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) ، تم تحضينها طوال الليل عند 4 درجات وتم حظرها لاحقًا بـ 120 ميكرولتر 1 بالمائة BSA (A4503 ، Sigma-Aldrich ، النمسا) لمدة 50 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. بعد حجب 100 ميكرولتر من عينات ومعايير البلازما ، تمت إضافة 1:10 المخفف مسبقًا في PBS واحتضانها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك تمت إضافة 90 ميكرولتر من بيروكسيداز الفجل (التركيز النهائي 1.2 ميكروغرام / مل) و Amplex red ™ (التركيز النهائي 100 ميكرومتر) في PBS مع 0.1 بالمائة من مساحة سطح الجسم وبدأت التفاعلات بإضافة 10 ميكرولتر بوتريسين (التركيز النهائي 200 ميكرومتر) أو PBS. تم قياس الإسفار عند 37 درجة كل 5 دقائق لمدة 120 دقيقة باستخدام EX550 و EM590 نانومتر. كان محلول الغسيل 0.1 بالمائة توين -20 (P1379 ، سيجما ألدريتش ، النمسا) في برنامج تلفزيوني. تم تحضير منحنى قياسي من 3-30 نانوغرام / مل rhDAO في بلازما الفئران. تم إجراء جميع القياسات في نسختين.

قياسات الهستامين

تم استخدام بلازما السيترات التي تحتوي على 10 ميكرومتر من ثنائي أسيتورات (D7770 ، سيغما الدريتش ، النمسا) لقياس تركيزات الهيستامين باستخدام مجموعة ديناميكية مضان متجانسة للهيستامين (HTRF) (62HTMDPET ، Cisbio ، فرنسا). تم استخدام المجموعة وفقًا للتعليمات التي قدمتها الشركة المصنعة. تم استخدام منحنى قياسي للهستامين في البلازما المجمعة للفئران C57Bl / 6J للتقدير الكمي. تشير جميع تركيزات الهيستامين إلى قاعدة الهيستامين وتم إجراء جميع القياسات في نسختين.

تحليل احصائي

تم إجراء التحليلات الإحصائية باستخدام GraphPad Prism الإصدار 8.4. 0. (شركة GraphPad Software Inc. سان دييغو). تم حساب الدلالة الإحصائية للاختلافات في نشاط DAO في متجانسات الأنسجة باستخدام مقاييس متكررة ANOVA مع تصحيح Geisser-Greenhouse. تمت مقارنة المنطقة الواقعة تحت المنحنيات (AUC) من قياسات درجة حرارة الجسم الأساسية الفردية والنتائج السريرية أثناء التجربة باستخدام اختبارات t على الوجهين وغير المزدوجة دون تصحيح ويلش. تمت مقارنة تركيزات الهستامين في البلازما بين المجموعات مع ANOVA ثنائي الاتجاه. للمقارنة بين تركيزات الهيستامين في البلازما بعد sc التحدي بين الفئران ذات الأنماط الجينية المختلفة ، مع وبدون إصابة الكلى الحادة وتلقي إما DAO أو المخزن المؤقت ، تم تجميع البيانات في فترات زمنية لحساب القيم المفقودة في المجموعات الفرعية الفردية (الأنماط الجينية: 5 ، 1 {{ 14}} ، 2 0 ، 30 ، 40 ، 45 ، 60 دقيقة ؛ إصابة الكلى الحادة: 0 ، 10-15 ، 20-30 ، 40-45 و 60 دقيقة ؛ DAO: 0 ، 10 ، 30 و 45 دقيقة). تم استخدام اختبار t من جانبين وغير مزدوج لاختبار الفروق في تركيزات الكرياتينين في البلازما من الفئران التي عولجت مع وبدون 100 ملغم / كغم من حمض الفوليك. تم تعريف الدلالة الإحصائية على أنها p<0.05 in all tests.

مستخلص سيستانش

خاتمة

كانت الفئران DAO KO لا يمكن تمييزها بشكل أساسي عن الفئران WT باستخدام تحديات الهستامين الفموية وتحت الجلد الخارجية. تورط HNMT في تعطيل الهيستامين مما يؤدي إلى انخفاض الأعراض - علم الطبلة معتدل في أحسن الأحوال ولكن النتائج من تثبيط علم الأدوية يمكن اعتبارها أولية. أظهرت البيانات باستخدام تثبيط HNMT بالميثوبرين اتجاهًا نحو مشاركة DAO الداخلي في تثبيط الهستامين. تشارك الكلى في الاستخراج السريع للهيستامين من الدورة الدموية ، ولكن الفئران المرتفعة 509 ديامين أوكسيديز ذات السبعة أضعاف ليست شديدة الحساسية للإعطاء عن طريق الفم أو تحت الجلد… 1 3 لم تترجم تركيزات الهيستامين إلى نمط ظاهري مبالغ فيه تم قياسه باستخدام درجة الحرارة المركزية الخسارة كقراءات نمطية. قد يدعم استخدام DAO البشري أو الفأر المؤتلف أو يساعد في استبعاد تورط الهيستامين في نماذج حيوانية مختلفة مع تحلل الخلايا البدينة المشتبه به مصحوبًا بإطلاق الهيستامين السريع والهائل ، أو مع التحريض المعزز لإنزيم هستيدين ديكاربوكسيلاز متبوعًا بإطلاق سراح مركب حديثًا الهيستامين على مدى ساعات. إن تربية فأرة KO مزدوجة حقيقية مع نسخ غير نشطة من كل من جين DAO و HNMT ، إذا كان ذلك ممكنًا ، قد يكون أمرًا يستحق الدراسة. لا تظهر الفئران KO الفردية لأي من DAO أو HNMT أنماطًا ظاهرية واضحة. [بيانات غير منشورة ، 31] وبالمثل ، فإن اختبار تورط ناقلتي الهيستامين الرئيسيين ، OCT2 و OCT3 ، في التعديلات المظهرية التي يسببها الهيستامين قد يسمح لنا باكتساب فهم أفضل للآليات الكامنة وراء تطور الأعراض التي يتوسطها الهيستامين في القوارض و وبالتالي يحتمل أيضا في البشر. على الرغم من الجهود البحثية الكبيرة لأكثر من 100 عام منذ اكتشافه ، لا يزال أمامنا بعض الطريق لنقطعه قبل أن نكتسب فهمًا حقيقيًا لتقويض الهستامين.

مراجع

1. بوم تي ، ريستل آر ، جوزيف إس ، وآخرون. اختلالات الأيض والدهون خلال حدث تنشيط الخلايا البدينة الحاد في مريض يعاني من كثرة الخلايا البدينة الجهازية البطيئة. ي ألرجي كلين إمونول. 2021. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.03.043. 2. باكارد كا ، خان مم. آثار الهيستامين على Th1 / Th

2 توازن السيتوكين. إنت إمونوفارماكول. 2003 ؛ 3: 909-20. https://doi.org/ 10.1016 / S 1567-5769 (02) 00235-7.

3. Hesterberg R ، Sattler J ، Lorenz W ، et al. محتوى الهيستامين ونشاط أوكسيديز ثنائي الأمين ونشاط الهيستامين ميثيل ترانسفيراز في الأنسجة البشرية: حقيقة أم خيال؟ وكلاء الإجراءات. 1984 ؛ 14: 325-34. https://doi.org/10.1007/BF01973821.

4. داير جي ، وارن ك ، ميرلين إس ، وآخرون. قياس الهيستامين في البلازما: وصف طريقة محسنة وقيم طبيعية. ي ألرجي كلين إمونول. 1982 ؛ 70: 82-7. https://doi.org/10.1016/ 0091-6749 (82) 90233-0.

5. بولوك الأول ، مردوخ أردي ، ليسوف إم إتش. هيستامين البلازما والتسامح السريري للهيستامين المشبع في المواد الطبيعية والتأتبية والشروية. وكلاء الإجراءات. 1991 ؛ 32: 359-65. https://doi.org/10. 1007 / BF01980899.

6. ليو جي ، وانغ إل ، هو دبليو ، وآخرون. تطوير طريقة UHPLC-MS / MS لتقدير الهستامين في البلازما في مختلف أنواع الثدييات. J تشروماتوجر ب. 2014 ؛ 971: 35-42. https: // doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.08.043.

7. Xu Y ، Kang T ، Dou D ، وآخرون. تقييم وتحسين النموذج الحيواني للتفاعل التأقاني الناجم عن الحقن. الآسيوية باك J الحساسية إمونول. 2015 ؛ 33: 330-8. https://doi.org/10.12932 / AP0619.33.4.2015.

8. ماينتس لام ، نوفاك ن. الهستامين وعدم تحمل الهيستامين. آم J كلين نوتر. 2007 ؛ 85: ​​1185-96. https://doi.org/10.1093/ajcn/85.5. 1185.

9. Ginsburg R ، Bristow MR ، Kantrowitz N ، et al. استفزاز الهيستامين لتشنج الشريان التاجي السريري: الآثار المتعلقة بإحداث الذبحة الصدرية المتغيرة. آم هارت ج. 1981 ؛ 102: 819 - 22. https://doi.org/10.1016/0002-8703(81) 90030-2.

10. O'Mahony L، Akdis M، Akdis CA. تنظيم الاستجابة المناعية والالتهابات بمستقبلات الهيستامين والهستامين. ي ألرجي كلين إمونول. 2011 ؛ 128: 1153–62. https: // دوى. org / 10.1016 / j.jaci.2011.06.051.

11. Thurmond RL، Gelfand EW، Dunford PJ. دور مستقبلات الهيستامين H1 و H4 في التهاب الحساسية: البحث عن مضادات الهيستامين الجديدة. نات ريف ديسكوف المخدرات. 2008 ؛ 7: 41-53. https://doi.org/10.1038/nrd2465.

12. بيريسين سي ، ثومان ب. مقارنة السمية الحادة للكلوكينول ، الهيستامين ، والكلوروفورم في سلالات مختلفة من الفئران. في: Chambers PL، Günzel P، editors. آلية التأثير السام على بعض الأعضاء المستهدفة. برلين: سبرينغر ؛ 1979. ص. 371-3.

13. لامانا سي ، روس هي. علاقة الجرعة السامة المميتة بوزن جسم الفأرة. توكسيكول أبل فارماكول. 1968 ؛ 13: 307-15. https://doi.org/10.1016/0041-008X(68)90104-X.

14. فان دير ليندن ف ، هاك سي ، بورتمان ي ، وآخرون. تحدي لدغة الحشرات في 138 مريضًا: العلاقة بين الشدة السريرية للتأق وتفعيل الخلايا البدينة. ي ألرجي كلين إمونول. 1992 ؛ 90: 110-8. https://doi.org/10.1016/S0091-6749(06) 80017-5.

15. ويليامز دبليو آر ، شيل دي جي. الإزاحة في المختبر للوسطاء النشطين في الأوعية من بروتينات البلازما: آلية محتملة للتفاعلات التحسسية الزائفة لأدوية الحجب العصبي العضلي. Br J أنايسث. 1992 ؛ 69: 508-10. https://doi.org/10.1093/bja/69.5.508.

16. Sasaki Y ، Iwama R ، Sato T ، وآخرون. تقدير معدل الترشيح الكبيبي في الفئران الواعية باستخدام معادلة مبسطة. مندوب فيسيول .2014 ؛ 2: e12135. https://doi.org/10.14814/phy2.12135.

17. Helander CG ، Lindell SE ، Westling H. الإزالة الكلوية لـ C 14- المسمى الهيستامين من الدم في الإنسان. مختبر سكاند جيه كلين للتحقيق. 1965. https://doi.org/10.1080/00365516509083360.

18. Sjaastad O، Sjaastad ÖV. تقويض الهستامين l4C الذي يتم تناوله عن طريق الفم في الإنسان. أكتا فارماكول توكسيكول. 1974 ؛ 34: 33-45. https://doi.org/10.1111/j.1600-0773.1974.tb02011.x.

19. Schayer RW. استقلاب الهيستامين في مختلف الأنواع. Br J فارم كيموث. 1956 ؛ 11: 472-3. https://doi.org/10.1111/j. 1476-5381. 1956.tb00020.x.

20. سنايدر ش ، أكسلورد ج ، باور هـ. مصير سي 14- الهستامين في أنسجة الحيوانات. هناك أكسب فارماكول ي. 1964 ؛ 144: 373-9.

21. روز ب ، براون JSL. توزيع ومعدل اختفاء الهيستامين المحقون عن طريق الوريد في الفئران. أنا J Physiol. 1938 ؛ 124: 412-20. https://doi.org/10.1152/ajplegacy.1938.124.2. 412.

22. Koepsell H ، Lips K ، Volk C. ناقلات الكاتيونات العضوية Polyspecifc: التركيب والوظيفة والأدوار الفسيولوجية والآثار الصيدلانية الحيوية. فارم الدقة. 2007 ؛ 24: 1227-51. https://doi.org/ 10.1007 / s 11095-007-9254- z.

23. Lantoine F ، Iouzalen L ، Devynck MA ، et al. يتطلب إنتاج أكسيد النيتريك في الخلايا البطانية البشرية التي يحفزها الهيستامين تدفق الكالسيوم زائد. بيوتشيم. 1998 ؛ 330: 695-9. https://doi.org/10.1042/ bj3300695.

24. Mikelis CM ، Simaan M ، Ando K ، وآخرون. يتوسط RhoA و ROCK تسرب الأوعية الدموية الناجم عن الهيستامين وصدمة الحساسية. نات كومون. 2015 ؛ 6: 6725. https://doi.org/10.1038/ncomms7725.

25. Ashina K ، Tsubosaka Y ، Nakamura T ، et al. يحث الهيستامين على نفاذية الأوعية الدموية عن طريق زيادة تدفق الدم واضطراب الحاجز البطاني في الجسم الحي. بلوس واحد. 2015 ؛ 10: e0132367. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132367.

26. Schömig E ، Lazar A ، Gründemann D. ناقل أحادي الأمين خارجي وعضوية 1 و 2: استعراض كفاءة النقل. في: Sitte HH، Freissmuth M، editors. الناقلات العصبية. برلين: سبرينغر ؛ 2006. ص. 151-80.

27. Ohtsu H. التقدم المحرز في أبحاث إشارات الحساسية على الخلايا البدينة: دور الهيستامين في أمراض المناعة والقلب والأوعية الدموية ونظام نقل الهيستامين في الخلية. علوم فارماكول ي. 2008 ؛ 106: 347-53. https://doi.org/10.1254/jphs.FM0070294.

28. Karjala SA، Turnquest B، Schayer RW. المستقلبات البولية للهستامين المشع. J بيول كيم. 1956 ؛ 219: 9-12. https: // دوى. org / 10.1016 / S 0021-9258 (18) 65762- X.

29. Schayer RW. تقويض الكميات الفسيولوجية من الهيستامين في الجسم الحي. القس فيزيول 1959 ؛ 39: 116-26. https://doi.org/10.1152/ physrev.1959.39.1.116.

30. رايلي MA ، Schayer RW. دراسات في الجسم الحي على هدم الهستامين وتثبيطه. فارماكول ياء. 1970 ؛ 38: 478-89. https: // دوى. org / 10.1111 / j. 1476-5381. 1970.tb10590.x.

31. Naganuma F ، Nakamura T ، Yoshikawa T ، et al. ينظم هيستامين إن ميثيل ترانسفيراز العدوان ودورة النوم والاستيقاظ. مندوب علوم .2017 ؛ 7: 15899. https://doi.org/10.1038/s41598-017-16019-8.

32. McGrath AP ، Hilmer KM ، Collyer CA ، et al. هيكل وتثبيط ديامين أوكسيديز الإنسان. الكيمياء الحيوية. 2009 ؛ 48: 9810-22. https://doi.org/10.1021/bi9014192.

33. Schwelberger HG. تحليل توطين الأنسجة والتوطين الخلوي للثدييات ديامين أوكسيديز عن طريق الفحص المجهري للمسح الضوئي بالليزر متحد البؤر. الدقة Infamm. 1998 ؛ 47: 60-1. https://doi.org/10.1007 / s000110050273.

34. Nishibori M ، Tahara A ، Sawada K ، et al. توطين الخلايا العصبية والأوعية الدموية للهستامين N- ميثيل ترانسفيراز في الجهاز العصبي المركزي البقري. Eur J Neurosci. 2000 ؛ 12: 415-24. https://doi.org/ 10.1046 / j. 1460-9568. 2000.00914.x.

35. Sjaastad ÖV. تقوية الأمينوجوانيدين لحساسية الأغنام للهيستامين عن طريق الفم. تأثير amino-guanidine على إفراز البول من الهيستامين الذاتية. إكسب فيسيول. 1967 ؛ 52: 319-30. https://doi.org/10.1113/expphysiol.1967.sp001 918.

36. Sattler J ، Häfner D ، Klotter HJ ، et al. الهيستامين الناجم عن الغذاء كمشكلة وبائية: ارتفاع الهستامين في البلازما وتعديلات الدورة الدموية بعد تناول الهيستامين عن طريق الفم وحصار أوكسيديز ديامين (DAO). وكلاء الإجراءات. 1988 ؛ 23: 361-5. https://doi.org/10.1007/BF02142588.

37. Bowman MA ، Simell OG ، Peck AB ، وآخرون. الحرائك الدوائية لإدارة الأمينوجوانيدين والتأثيرات على تواتر مرض السكري في الفئران المصابة بداء السكري غير البدينة. هناك أكسب فارماكول ي. 1996 ؛ 279: 790-4.

38. ماتيوفيتش إم ، كروزيكي أ ، مارتينكوفا الخامس ، وآخرون. تثبيط سينثاز أكسيد النيتريك الانتقائي أثناء تجرثم الدم الخنازير طويل الأمد. صدمة. 2004 ؛ 21: 458-65. https: // دوى. org / 10.1097 / 00024382-200405000-00010.

39. ألدرتون وك ، كوبر سي ، نولز آر جي. تركيبات أكسيد النيتريك: الهيكل والوظيفة والتثبيط. بيوكيم ج .2001 ؛ 357: 593-615. https://doi.org/10.1042/bj3570593.

40. Altura BM ، Halevy S. الإجراءات المفيدة والضارة لمناهضات مستقبلات الهيستامين H 1- و {2}} H في صدمة الدورة الدموية. PNAS. 1978 ؛ 75: 2941-4. https://doi.org/10.1073/pnas.75.6.2941.

41. Thomas LL، Bochner BS، Lichtenstein LM. تثبيط نشاط الهيستاميناز المشتق من كريات الدم البيضاء المتعددة الأشكال البشرية بواسطة مضادات H -2. Biochem فارماكول. 1978 ؛ 27: 2562-5. https: // doi.org/10.1016/0006-2952(78)90327-1.

42. Thermann M ، Lorenz W ، Schmal A ، et al. تأثير مضادات مستقبلات H 1- و H 2- على الدورة الدموية وتركيزات الهيستامين في البلازما الذاتية في الكلاب. وكلاء الإجراءات. 1977 ؛ 7: 97-101. https://doi.org/10.1007/BF01964888.

43. Elmore BO، Bollinger JA، Dooley DM. أوكسيديز ثنائي أمين الكلى البشري: تعبير غير متجانس وتنقية وتوصيف. J بيول إينورج كيم. 2002 ؛ 7: 565-79. https://doi.org/10. 1007 / ثانية 00775-001-0331-1.

44. Duch DS، Bowers SW، Nichol CA. ارتفاع مستويات الهيستامين في الدماغ بواسطة مثبطات ديامينوبيريميدين من الهيستامين N- ميثيل ترانسفيراز. Biochem فارماكول. 1978 ؛ 27: 1507-9. https: // دوى. org / 10.1016 / 0006-2952 (78) 90109-0.

45. Horton JR ، Sawada K ، Nishibori M ، et al. الأساس الهيكلي لتثبيط الهيستامين N- ميثيل ترانسفيراز بأدوية متنوعة. J مول بيول. 2005 ؛ 353: 334-44. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2005. 08.040.

46. ​​Horton JR ، Sawada K ، Nishibori M ، et al. شكلين متعددي الأشكال من الهيستامين البشري ميثيل ترانسفيراز: مقارنات هيكلية وحرارية وحركية. بناء. 2001 ؛ 9: 837-49. https: // doi.org/10.1016/S0969-2126(01)00643-8.

47. Duch DS ، Bacchi CJ ، Edelstein MP ، et al. مثبطات استقلاب الهستامين في المختبر وفي الجسم الحي: الارتباطات بالنشاط المضاد للطفيليات. Biochem فارماكول. 1984 ؛ 33: 1547–53. https: // doi.org/10.1016/0006-2952(84)90426-X.

48. Hox V ، Desai A ، Bandara G ، et al. يزيد الإستروجين من شدة الحساسية المفرطة في إناث الفئران من خلال تعبير سينثيز أكسيد النيتريك البطاني المحسن وإنتاج أكسيد النيتريك. ي ألرجي كلين إمونول. 2015 ؛ 135: 729-736. e5. https://doi.org/10.1016 / j.jaci.2014.11.003.

49. باكمان إي دبليو ، روسي جي في ، هاريسون جي دبليو إي. تأثير الهيستامين ومضادات الهيستامين على درجة حرارة الجسم. فارماكول ياء. 1953 ؛ 5: 301-10. https://doi.org/10.1111/j.2042-7158.1953.tb139 90.x.

50. موريس إس سي ، بيركنز سي ، بوتر سي وآخرون. تحسين تثبيط الأدوية للتأق بوساطة IgE في الفئران. ي ألرجي كلين إمونول. 2021 ؛ 149: 671–84. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.06.022.

51. Li XM ، Serebrisky D ، Lee SY ، وآخرون. نموذج الفئران للتأق الفول السوداني: استجابات الخلايا التائية والخلايا البائية لمسببات حساسية الفول السوداني الرئيسية تحاكي الاستجابات البشرية. ي ألرجي كلين إمونول. 2000 ؛ 106: 150-8. https://doi.org/10.1067/mai.2000.107395.

52. Hasegawa A ، Watanabe M ، Osada H ، et al. تأثير الجلوكوكورتيكويدات على الاختلافات التي تعتمد على الوقت من اليوم في الحساسية المفرطة الجهازية بوساطة عامل تنشيط IgE والهيستامين والصفائح الدموية في سلالات الفأر المختلفة. Biochem Biophys Res Commun. 2018 ؛ 495: 2184 - 8. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2017.12.099.

53. Fishel CW، Szentivanyi A، Talmage DW. تحسس الفئران وإزالتها من الهيستامين والسيروتونين بواسطة الأورام العصبية. ياء إمونول. 1962 ؛ 89: 8-18.

54. Stallons LJ، Whitaker RM، Schnellmann RG. التكاثر الحيوي للميتوكوندريا المكبوت في إصابات الكلى الحادة التي يسببها حمض الفوليك والتليف المبكر. توكسيكول ليت. 2014 ؛ 224: 326-32. https: // دوى. org / 10.1016 / j.toxlet.2013.11.014.

55. Gludovacz E، Schuetzenberger K، Resch M، et al. تسمح الطفرات الحركية المرتبطة بالهيبارين لأكسيداز ثنائي الأمين البشري بتطوير عقار صيدلاني حيوي مهين للهستامين هو الأول في فئته. إليفي. 2021 ؛ 10: e68542. https://doi.org/10.7554/eLife. 68542.

56. عيسى N ، Kermarrec L ، حسين H ، وآخرون. ملاءمة الجينات المرجعية لتطبيع الحمض النووي الريبي المرسال في الفئران 2 ، 4- التهاب القولون الناجم عن حمض السلفونيك ثنائي النيتروجين (DNBS) باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي الكمي. مندوب علوم .2017 ؛ 7: 42427. https://doi.org/10. 1038 / سريب 422427.

57. Gludovacz E ، Maresch D ، Bonta M ، et al. توصيف أوكسيديز ثنائي الأمين البشري المؤتلف (rhDAO) المنتج في خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO). ياء Biotechnol. 2016 ؛ 227: 120-30. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.04.002.

58. Boehm T، Karer M، Gludovacz E، et al. تقدير كمية بسيطة وحساسة ومحددة لنشاط أوكسيديز ثنائي الأمين في المصفوفات المعقدة باستخدام الفلوروفورات المكتشفة حديثًا والمشتقة من ركائز طبيعية. الدقة Infamm. 2020 ؛ 69: 937-50. https://doi.org/10. 1007 / ثانية 00011-020-01359-5.

59. ماتسومورا Y، Tan EM، Vaughan JH. فرط الحساسية للهيستامين والتأق الجهازي في الفئران مع حصار بيتا الأدرينالي الدوائي: الحماية بالنيوكليوتيدات. ي ألرجي كلين إمونول. 1976 ؛ 58: 387-94. https://doi.org/10.1016/0091- 6749(76)90119-6.

60. Hunter AJ و Murray TK و Jones JA et al. علم الأدوية الكوليني لرباعي هيدرو أمينو أكريدين في الجسم الحي وفي المختبر. فارماكول ياء. 1989 ؛ 98: 79 - 86. https://doi.org/10.1111/j.1476-5381. 1989.tb16865.x.

61. Rabe M ، Schaefer F. نماذج الفئران غير المعدلة وراثيًا لأمراض الكلى. نفرون. 2016 ؛ 133: 53-61. https://doi.org/10.1159/00044 5171.

62. مياموتو واي ، ناكانو إس ، كانيكو إم وآخرون. التقييم السريري لمثبط البروتياز الاصطناعي الجديد في جراحة القلب المفتوح. التأثير على إفراز الهستامين والسيروتونين في البلازما والحفاظ على الدم. ASAIO. 1992 ؛ 38: M 395-8. https://doi.org/10.1097/00002480- 199207000-00063.

63. عرق الأورام - علم الأورام الدقيق. https: //www.raceoncology. كوم /. تم الوصول إليه في 23 تشرين الثاني (نوفمبر) 2021

64. Myers JW ، Von Hof DD ، Kuhn JG ، et al. تفاعلات تأقانية مرتبطة بحقن بيسانترين. عقاقير استقصائية جديدة. 1983 ؛ 1: 85-8. https://doi.org/10.1007/BF00180195.

65. رايلي MA ، Schayer RW. مزيد من الدراسات حول هدم الهستامين في الجسم الحي. فارماكول ياء. 1971 ؛ 43: 349-58.

66. مالينسكي تي ، تاها زد ، غرونفيلد إس ، وآخرون. رصد اختلاف أكسيد النيتريك في جدار الشريان الأورطي في الموقع بواسطة مستشعرات بورفيرينية دقيقة. Biochem Biophys Res Commun. 1993 ؛ 193: 1076-1082. https: // دوى. org / 10.1006 / bbrc.1993.1735.

67. Ginsburg M ، Wajda I ، Waelsch H. Transglutaminase وإدراج الهيستامين في الجسم الحي. Biochem فارماكول. 1963 ؛ 12: 251–64. https://doi.org/10.1016/0006-2952(63)90148-5.

68. Vowinckel J، Stahlberg S، Paulmann N، et al. الهيستامينيل لبقايا الجلوتامين هو تعديل جديد لما بعد الترجمة متورط في إشارات البروتين G. FEBS ليت. 2012 ؛ 586: 3819-24. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2012.09.027.

69. مكنالي دبليو ، روث إم ، يونج آر ، وآخرون. التحديد الكمي للتصوير الشعاعي الذاتي لكامل الجسم لتوزيع أنسجة تاكرين في الفئران بعد جرعة في الوريد أو عن طريق الفم. فارم الدقة. 1989 ؛ 6: 924-32. https://doi.org/10.1023/A:1015933210803.

70. Cumming P، Reiner PB، Vincent SR. تثبيط هيستامين دماغ الفئران بواسطة 9- amino -1، 2،3، 4- رباعي هيدرو أكريدين (THA). Biochem فارماكول. 1990 ؛ 40: 1345 - 50. https://doi.org/10. 1016 / 0006-2952 (90) 90402-7.

71. كافاليتو جيه سي ، نيكول كاليفورنيا ، برينكمان ود ، وآخرون. مثبطات الذوبان في الدهون من اختزال ثنائي هيدروفولات. 1. حركية وتوزيع الأنسجة ومدى استقلاب البيريميثامين والميثوبرين والإيتورفين في الجرذ والكلب والإنسان. التخلص من المخدرات. 1978 ؛ 6: 329-37.

72. نيشيبوري إم ، أوشي أر ، إيتوه واي ، وآخرون. 9- Amino -1، 2، 3، 4- Tetrahydroacridine هو مثبط قوي للهستامين N-methyltransferase. فارماكول Jpn J. 1991 ؛ 55: 539–46. https://doi.org/10.1254/jjp.55. 539.

73. Hough LB، Khandelwal JK، Green JP. تثبيط استقلاب الهيستامين في الدماغ بواسطة الميثوبرين. Biochem فارماكول. 19 86 ؛ 35: 307-10. https://doi.org/10.1016/0006-2952(86)90530-7.

74. Kaneko H ، Koshi S ، Hiraoka T ، وآخرون. تثبيط إصابة ما بعد ضخ الدم في الكلى بواسطة ديامين أوكسيديز. Biochim Biophys Acta. 1998 ؛ 1407: 193-9. https://doi.org/10.1016/S0925- 4439(98)00039-8.

75. Koshi S، Inoue M، Obayashi H، et al. تثبيط إصابة ما بعد ضخ الدم للأمعاء الدقيقة بواسطة ديامين أوكسيديز. Biochim Biophys Acta. 1991 ؛ 1075: 231-6. https://doi.org/10.1016/ 0304-4165 (91) 90271- هـ.

ماتياس كارر 1 · مارلين راجر ‑ Resch1 · تيريزا حيدر 2 · كارين بتروزي 1 · إليزابيث جلودوفاكز 3 · نيكول بورث 3 · بيرند جيلما 1 · توماس بوهم 1

1 قسم الصيدلة السريرية ، الجامعة الطبية فيينا ، واهرنجر جورتيل 18-20 ، 1090 فيينا ، النمسا

2 قسم الفسيولوجيا العصبية ، مركز أبحاث الدماغ ، الجامعة الطبية فيينا ، فيينا ، النمسا

3 قسم التكنولوجيا الحيوية ، جامعة الموارد الطبيعية وعلوم الحياة ، فيينا ، النمسا