يرتبط ارتفاع عدد العدلات المرتبطة بالجيلاتيناز ليبوكالين مع شدة إصابة الكلى وسوء تشخيص المرضى الذين يعانون من COVID-19 - الجزء الأول

الاتصال: أودري هو واتساب / حصان: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

كاثرين Xu1 وآخرون

مقدمة:فقدان وظائف الكلى هو سمة مشتركة من سماتمرض كوفيد 19العدوى ، ولكن الكرياتينين في الدم (SCr) ليست علامة حساسة أو محددة لكليةالإصابة. اختبرنا ما إذا كانت المؤشرات الحيوية الجزيئية ل ارتبطت الإصابة الأنبوبية التي تم قياسها عند دخول المستشفى بالإصابات الحادةكليةالإصابة(AKI) في أولئك الذين يعانون منمرض كوفيد 19عدوى.

أساليب:هذه دراسة مستقبلية قائمة على الملاحظة الأترابية تتكون من 444 مريضا متتاليا يعانون من SARS-CoV-2 المسجلين في قسم الطوارئ بجامعة كولومبيا (ED) في ذروة الوباء في نيويورك (مارس 2020–أبريل 2020). تم جمع البول والدم في وقت واحد عند دخول المستشفى (متوسط الوقت: اليوم 0 ، النطاق الربيعي: 0-2 أيام) ، وتم تحليل المؤشرات الحيوية للبول بواسطة مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) وعصا قياس جديدة. تم فحص خزعات الكلى بحثا عن المؤشرات الحيوية الحمض النووي الريبي وللإصابات الأنبوبية الحادة النسيجية المرضية (ATI) الدرجات.

النتائج:ارتبط قبول مستوى الليبوكالين المرتبط بالجيلاتيناز البولي (uNGAL) ب تشخيص AKI (267 +- 301 مقابل 96+-139 نانوغرام / مل ، P< 0.0001)="" and="" staging;="" ungal="" levels="">150 نانوغرام / مل كان 80 ٪ الخصوصية والحساسية بنسبة 75٪ لتشخيص مراحل AKI من 2 إلى 3. مستوى القبول uNGAL كميا المرتبطة ب AKI لفترات طويلة ، غسيل الكلى ، الصدمة ، الاستشفاء لفترات طويلة ، والوفاة في المستشفى ، حتى عندما لم يكن مستوى القبول SCr مرتفعا. زاد خطر غسيل الكلى ما يقرب من 4 أضعاف لكل SD من uNGAL بشكل مستقل عن SCr الأساسي والأمراض المصاحبة والبيلة البروتينية (نسبة الاحتمالات [OR] [مجال الموثوقية 95٪]: 3.59 [1.83-7.45]، P< 0.001).="" in="" the="" kidneys="" of="" those="" with="">مرض كوفيد 19، توسع تعبير الحمض النووي الريبوزي المرسال (NGAL) بالتوازي مع الإصابة النسيجية المرضية الشديدة (ATI). على العكس من ذلك ، استبعدت مستويات UNGAL المنخفضة عند القبول المراحل من 2 إلى 3 AKI (القيمة التنبؤية السلبية: 0.95، مجال الموثوقية 95٪: 0.92-0.97) والحاجة إلى غسيل الكلى (القيمة التنبؤية السلبية: 0.98، مجال الموثوقية 95٪: 0.96-0.99). على الرغم من أن البيلة البروتينية والبول (u) KIM-1 كانا متورطين في إصابة أنبوبية ، كما لم يكن تشخيص مراحل AKI.

استنتاج:في المرضى الذين يعانون منمرض كوفيد 19، ارتبط مستوى uNGAL كميا بعلم الأنسجة المرضي الإصابة (ATI) ، وفقدان وظائف الكلى (AKI) ، وشدة نتائج المرضى.

سيستانش لمكافحة كوفيد-19 وحماية وظائف الكلى

مقدمة

فقدان حاد في وظائف الكلى، يقاس بالارتفاع في SCr ، شائع في إعداد عدوى SARSCoV-2 الحادة.1-4 يوجد مستوى SCr مرتفع في ثلث المرضى الذين تم إدخالهم إلى المستشفى يعانون منمرض كوفيد 19.5-11 ومع ذلك، فإن قياس SCr لا يعكس العبء الكامل لمرض كوفيد 19 كليةالإصابة. على سبيل المثال SCr يمكن فقط الكشف عن اختلال وظائف الكلى في وقت لاحق ، بعد مرور وقت كاف لتراكم SCr إلى عتبة التشخيص. بالإضافة إلى ذلك ، قد لا تحدث تغييرات مهمة سريريا في SCr في المجموع الفرعي أو تلف الكلى البؤري نتيجة للتعويض التغيرات في النيفرون غير المصاب والتي يمكن أن تخفف الارتفاع في مستوى SCr. حتى عندما تكون الارتفاعات في مستوى SCr واضحة ، قد يكون هناك نقص في الأدلة على الإصابة الأنبوبية ، على سبيل المثال في وجود استنفاد الحجم ،12،13 هو عرض شائع في المرضى الذين يعانون منمرض كوفيد 19-الإسهال المرتبط.10,14 ارتفاع في مستوى SCr قد يكون مرتبكا أيضا بسبب حدوث انحلال الربيدات فيمرض كوفيد 19الذي يعزز الكرياتينين إنتاج.15,16 عبءكليةالإصابةخلال طفرات من أدى كوفيد-19 إلى إجهاد موارد المستشفيات، بما في ذلك طب الطوارئ والرعاية الحرجة وأمراض الكلى ، خلق حاجة ملحة للحد من التأخير في تحديد الأفراد المعرضين لخطر الإصابةكليةالإصابة، وفقدان وظائف الكلى، والعلاج ببدائل الكلى. كمنظمة النتيجة ، قرارات الفرز للمرضى والموارد وستستفيد المخصصات من استخدام نظام سريع علامة غير جراحية سريعة الاستجابة وحساسة ومحددة منكليةالإصابةوالنتائج المصاحبة لها المشتركة فيمرض كوفيد 19عدوى.

الأبحاث السابقة في النماذج البشرية والفأر كشفت أن 2 علامات جزيئية للإصابة الأنبوبية ، تم اشتقاق uNGAL و uKIM-1 من مختلف قطاعات منكليةوالسماح بالكشف عن الحساسية والتمييز في الوقت الحقيقي بين حجم الحساسة وحجم الأشكال الجوهرية غير الحساسة من أنبوبي الضرر.12،17-19 الأدلة السابقة على فائدة هذه علامات في الكشف عن AKI عند العرض على ED12,20–22 يثير السؤال عما إذا كانت قد تكون ذات قيمة في المرضى الذين يعانون منمرض كوفيد 19. الحاجة إلى الجديد الاختبارات التشخيصية واضحة بشكل خاص لأن العديد منها المرضى الذين يعانون منمرض كوفيد 19يقدمون إلى المستشفى لأول مرة وليس لديهم سجلات سابقة من س.

هنا ، ندرس أداء uNGAL و uKIM-1 في مجموعة كبيرة من المرضى الذين يعانون من الحالات الحادةمرض كوفيد 19تقديم إلى جامعة كولومبيا ED في ذروة الوباء في مدينة نيويورك (مارس 2020- أبريل 2020). اختبرنا ارتباط uNGAL و uKIM-1 مع التشخيص اللاحق والمدة و شدة AKI كما هو محدد من قبل الحادكليةالإصابةمعايير الشبكة (AKIN) ومع الوفاة في المستشفى ، غسيل الكلى والصدمة وفشل الجهاز التنفسي وطول مدة الإقامة في المستشفى. استخدمنا كلا من طرق ELISA القياسية و عصا قياس جديدة يمكنها قياس uNGAL في السرير. أخيرا ، قمنا بالتحقيق فيما إذا كانت NGAL و KIM-1 ارتبط الحمض النووي الريبي بالمقاييس النسيجية المرضية ل ATI فيكليةنتائج الخزعة من المرضى الذين يعانون منمرض كوفيد 19.

أساليب

المواد البشرية

ذا كولومبيامرض كوفيد 19البنك الحيوي يوظف على التواليكوفيد-19الحالات (نتيجة إيجابية من البلعوم الأنفي اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل SARS-CoV-2) ، بغض النظر عن من العمر أو الجنس أو العرق / العرق الذين تلقوا الرعاية في مركز إيرفينغ الطبي بجامعة كولومبيا. قام البنك الحيوي بتخزين عينات الدم والبول المتبقية بعد الاختبارات السريرية من كل مريض مصابكوفيد-19بما في ذلك عينة البول الأولية والمصل الذي تم الحصول عليه في دخول المستشفى ، والذي كان يستخدم للعلامات الحيوية القياسات. لتحليلنا ، حددنا 444 المرضى المتعاقبون الذين تم إدخالهم بين 24 مارس 2020 و 27 أبريل 2020 ، معمرض كوفيد 19. وشمل ذلك 371 مريضا لم يكن لديهم بول فقط. عينة من العرض التقديمي ولكن أيضا معلومات حول خط الأساس SCr وقياسات SCr الكاملة في المستشفى مطلوب لتحديد المرحلة والمدة من AKI (الشكل 1). بالإضافة إلى ذلك ، 4 مرضى يعانون من المرحلة النهائية تم استبعاد أمراض الكلى.كليةتم الانضمام إلى الخزعات من قبل كولومبيا جامعة ايرفينغ المركز الطبي أمراض الكلى المختبر، بما في ذلك 13 خزعة كلى من حالات كوفيد-1923 و4 غيرمرض كوفيد 19العينات التي تم تحليلها بواسطة التهجين في الموقع ل NGAL و KIM-1 RNA. تمت مقارنة مجموعة COVID (+) مع COVID (-) الفوج الذي تم توظيفه بطريقة متطابقة في مركز إيرفينغ الطبي بجامعة كولومبيا ED بين حزيران/يونيو 2017 وكانون الثاني/يناير 2019.20 على غرار مجموعة COVID (+) ، 426 مريضا متتاليا ب COVID (-) تم تسجيلهم في العرض التقديمي ، بغض النظر عن العمر أو الجنس أو العرق / العرق. وشمل ذلك 318 مريضا لديهم قياسات SCr كاملة في المستشفى مطلوبة ل تحديد مرحلة ومدة AKI. عينات البول تم جمعها في غضون 24 ساعة من الوصول إلى الضعف الجنسي. تم استبعاد المرضى الذين يعانون من مرض كلوي في المرحلة النهائية.

الشكل 1. جمع عينات البول: كانت عينات البول المتبقية تم جمعها من 444 مريضا متتاليا مصابا ب COVID-19 بواسطة بنك البول الحيوي COVID-19 بجامعة كولومبيا بين 24 مارس ، 2020، و27 أبريل 2020. ما مجموعه 4 مرضى يعانون من المرحلة النهائيةكليةمرضعلى غسيل الكلى تم استبعادها من المجموعة النهائية (N 1/4 440). تم تنظيم المرضى الذين لديهم سجلات كاملة لقياسات SCr بواسطة معايير AKIN (n 1/4 371). ما مجموعه 69 مريضا مفقودا بما فيه الكفايةكليةدالةتم تصنيف البيانات على أنها "غير معروفة". أكين، حادكليةالإصابةالشبكة; SCr ، الكرياتينين في الدم.

تعريف النتائج الأولية وشملت النتائج الأولية ACI القائم على SCr ، AKIN المرحلة ، ومدة ارتفاع مستوى SCr باستمرار في كل من COVID (+) ومجموعات COVID (-). في كلتا الحالتين ، تم تعريف مستوى SCr الأساسي باستخدام خوارزمية موحدة ، كما كان في السابق وصفه ستيفنز وآخرون، 20 بالترتيب التالي:

متوسط SCr من 365 إلى 31 يوما قبل جمع البول. إذا لم تكن متوفرة، فإنها:

الحد الأدنى من SCr من 30 يوما قبل جمع البول إلى يوم الجمع. إذا لم تكن متوفرة، فإنها:

الحد الأدنى من SCr من جمع البول إلى 7 أيام في مستشفى

تم تصنيف المرضى على أنهم "مجهولون" إذا لم يكن أي من المرضى وقد استوفيت المعايير المذكورة أعلاه. تم تصنيف مراحل AKIN23 على النحو التالي:

AKIN المرحلة 1: زيادة $ 0.3 mg / dl في SCr خلال 48- نافذة ساعة أو زيادة 1.5 إلى 2 أضعاف في SCr مقارنة مع خط الأساس.

المرحلة 2 من AKIN: زيادة بنسبة >2 إلى 3 أضعاف في SCr مقارنة مع خط الأساس.

AKIN المرحلة 3: زيادة 0.5 ملغ / ديسيلتر $ في SCr خلال 48- نافذة ساعة عندما SCr $ 4.0 ملغ / ديسيلتر أو >3 أضعاف الزيادة في SCr مقارنة مع خط الأساس.

تم قياس مستوى SCr الذروة في غضون 48 ساعة بعد تم استخدام جمع البول لتشخيص مرحلة AKIN. في حالات محددة ، تم احتساب درجة AKIN في اليوم 1 عندما كانت درجات AKIN السابقة واللاحقة متطابقه.

واستند مزيد من التصنيف إلى مدة ارتفاع SCr فوق خط الأساس:

لا يوجد AKI (AKIN 0) - لا يفي بمعايير AKIN داخل 2 أيام من العرض التقديمي (يجب أن يكون لها قيم SCr لكل من أيام).

AKI عابرة - استوفت معايير AKIN في اليوم 0 أو 1 من عرض تقديمي ولكن تم تطبيعه أسفل اكتشاف AKIN العتبات في غضون 2 أيام بعد الكشف الأول (المجموع مدة AKI<72>

AKI المستدام (sAKI) - استوفى معايير AKIN في غضون 2 أيام من العرض ولكن تطبيع تحت AKIN عتبات الكشف فقط بعد 2 أيام من الأول الكشف (إجمالي مدة AKI >72 ساعة).

غير معروف—SCr الأساسي المفقود، أو SCr غير كاف قياسات لتحديد حركيات SCr، أو مفقودة القياسات في اليوم 0 أو 1 التي لا يمكن أن تكون بسبب تباين درجات AKIN (الشكل 1).

واستند مزيد من التصنيف لمستوى SCr المرتفع على مدة ارتفاع SCr فوق خط الأساس ، بما في ذلك AKI عابرة تطبيع سريع مستوى SCr (<72 hours)="" and="" sustained="" (saki)="" delayed="" normalization="" of="" scr="" level="" (="">72 ساعة).

لم يتم استخدام إخراج البول لتعريف AKI بسبب الاستخدام المتغير لقسطرة فولي و تسجيل غير مكتمل لإخراج البول في الضعف الجنسي.

تعريف النتائج الثانوية

وشملت النتائج الثانوية غسيل الكلى، والصدمة، وفشل الجهاز التنفسي، وطول مدة الإقامة في المستشفى، وفي المستشفى موت. تم تعريف الصدمة من خلال الحاجة إلى ضواغط الأوعية الدموية ، وتم تعريف فشل الجهاز التنفسي من خلال الحاجة للضغط الإيجابي الغازي أو غير الغازي التهوية. التدريج المزمنكلية مرضكان يتم تحديده باستخدام المزمنكلية مرضالتعاون في علم الأوبئة يقدر الترشيح الكبيبي صيغة المعدل والكرياتينين الأساسي كما هو موضح سابقا.24

التحاليل المخبرية

تم تعمية جميع القياسات البولية عن البيانات السريرية. تم قياس NGAL و uKIM-1 بواسطة ELISA (KIM-1: إنزو ، ADI-900-226-0001 ؛ NGAL: بيوبورتو ، KIT036). تم الكشف عن البيلة البروتينية باستخدام Chemstrip 10 SG (روش) التشخيص). تم طرد البول مركزيا (12000 دورة في الدقيقة؛ 10 دقائق) وتطبيقها على عصي القياس NGAL gRAD (BioPorto) ، وتمت مقارنة تطوير اللون مع مقياس اللون الذي يميز تركيز NGAL (نانوغرام / مل) بمقدار 2 القراء المستقلون. تم تحليل كريات الخلايا البولية ل LRP2 و UMOD بواسطة لطخة مناعية مع SDS-PAGE (مختبرات Bio-Rad) ، أرنب مضاد LRP2 (1:1000 ، Abcam, ab76969), الأغنام المضادة UMOD (1:2000, ميريديان علوم الحياة ، K90071C) ، والأجسام المضادة الثانوية متعددة النسيلة المترافقة مع HRP (1:10000 ، جاكسون البحوث المناعية).

التعرف النسيجي ل ATI

وشملت الميزات النسيجية ل ATI فقدان الفرشاة الحدود ، التبسيط الظهاري ، داخل السيتوبلازم الفجوات ، النخر العلني ، موت الخلايا المبرمج ، والخلية ذرف. تم استخدام مقياس شبه كمي لقياس مدى ATI ، والذي كان على النحو التالي: لا شيء (<5% of="" tubules="" involved),="" mild=""><25%), moderate="" (25%–50%),="" and="" severe="" (="">50%).

التحليل المرضي

التهجين في الموقع على الإنسان الثابت بالفورمالين والبارافينكلىتستخدم الكروموجينيك RNAscope 2.5 HD Duplex Reagent Kit (خلية متقدمة) التشخيص ، 322430). وشملت التحقيقات NGAL: Hs-LCN2 (559441) و Hs-LCN2-C2 (559441-C2 الساعة 1:600)؛ كيم-1: Hs-HAVCR1-O1 (538081 و 538081-C2 في الساعة 1:100) ؛ و أكوابورين 2: Hs-AQP2 (434861) و Hs-LRP2 (532391).

نقص التروية الكلوية التأكيدي تحليل الإصابات

ذكور وإناث من النوع البري C57Bl/6 من الفئران، تتراوح أعمارهم بين 8 و10 سنوات أسابيع (جاكسون مختبرات) تم تخديرها مع الايزوفلوران وتوضع على طاولة الاحترار (درجة حرارة المستقيم: 37 درجة مئوية). كانت المشابك الوعائية الدقيقة (أدوات العلوم الدقيقة) تطبق على عنيق الكلى الأيسر لمدة 10 أو 20 أو 30 أو 40 محضر. الكلىتم حصادها في 24 ساعة. التهجين في الموقع على الفورمالين الثابت ، البارافين جزءا لا يتجزأكلىاستخدم مسبار NGAL: Mm-Lcn2-C2 (313971-C2) ومسبار KIM-1: Mm-Havcr1 (472551).

التحليل الإحصائي

تم اختبار طبيعية المتغيرات المستمرة باستخدام اختبار شابيرو-ويلك. موزعة بشكل طبيعي مستمرة تمت مقارنة المتغيرات باستخدام اختبار t-sample 2 و ملخصة على أنها متوسط SD. غير موزعة بشكل طبيعي تم تلخيص المتغيرات المستمرة على أنها متوسطات و النطاقات ومقارنتها باستخدام Mann- غير البارامترية اختبار ويتني يو. تحسين قابلية تفسير التأثير تقديرات من نماذج الانحدار متعددة المتغيرات ، وجميع المتنبئات غير الموزعة بشكل طبيعي (بما في ذلك uNGAL و مستويات uKIM-1) تم تحويلها إلى سجل وقياسها قبل الاختبار الإحصائي. أحجام التأثير بالنسبة للمؤشرات الحيوية تم التعبير عنها لكل وحدة SD من المتنبئين العاديين. تمت مقارنة المتغيرات الفئوية باستخدام اختبار c2 أو فيشر الدقيق. لاختبار النتائج الثنائية ، استخدمنا الانحدار اللوجستي. النتائج الترتيبية, مثل مرحلة AKIN ، تم اختبارها باستخدام الخدمات اللوجستية الترتيبية الانحدار. المتنبئات الترتيبية، مثل عصا قياس البول فئة أو درجة البيلة البروتينية ، تم اختبارها تحت افتراض التأثيرات الخطية باستخدام اختبار الميل داخل إطار نموذج خطي معمم مصمم خصيصا ل نتيجة الاهتمام (على سبيل المثال ، اللوجستية أو اللوجستية الترتيبية للنتائج الثنائية أو الترتيبية ، على التوالي). استخدمنا نموذج كوكس للمخاطر النسبية للوقت المستغرق في الحدث تحليل نتائج الوفاة. استخدمنا المخاطر المتنافسة نموذج الانحدار لتحليل طول المستشفى من البقاء، مع الوفاة كخطر منافس.25،26 تم التحقق من افتراض المخاطر النسبية عن طريق الاختبار بقايا شونفيلد المقاسة لكل متنبئ ضد وقت المراقبة. جمعيات المؤشرات الحيوية البولية مع تعديل النتائج السريرية لما يلي المتغيرات المشتركة: العمر والجنس والعرق والعرق (تعديل الحد الأدنى نموذج) ، SCr الأساسي ، والسمنة الموجودة مسبقا ، ومرض السكري ، ارتفاع ضغط الدم ، زرع (أي عضو) ، السرطانات ، أمراض القلب والأوعية الدموية (مرض الشريان التاجي ، قصور القلب ، احتشاء دماغي) ، مرض رئوي (الربو ، مرض الانسداد الرئوي المزمن، الخلالي مرض رئوي ، ارتفاع ضغط الدم الرئوي الأولي ، التليف الرئوي مجهول السبب) (نموذج 1 معدل بالكامل) ، والبيلة البروتينية (نموذج 2 معدل بالكامل). في التحليل من النتائج الأولية ، نظرنا في P من جانب 2< 0.05="" as="" statistically="" significant.="" in="" the="" analysis="" of="" secondary="" outcomes,="" we="" considered="" p="">< 0.01="" as="" statistically="" significant="" (bonferroni-corrected="" for="" 5="" independent="" outcomes="" tested).="" we="" additionally="" stratified="" patients="" by="" both="" ungal="" ($150="" ng/ml)="" and="" scr-based="" aki="" into="" the="" following="" 4="" groups:="" ngal-ak-i,="" ngal+aki,="" ngal-aki+,="" and="" ngal+akiþ.="" we="" used="" the="" c2="" test="" for="" pairwise="" comparisons="" of="" proportions="" with="" a="" clinical="" outcome="" between="" the="" groups="" and="" the="" cochran="" armitage="" test="" for="" trend="" in="" proportions="" between="" low-risk="" (ngal-aki-),="" intermediate-risk="" (ngal+aki-="" or="" ngal-aki+),="" and="" high-risk="" (ngal+aki+)="" groups.="" furthermore,="" each="" group="" was="" tested="" as="" a="" categorical="" predictor="" of="" outcome="" using="" logistic="" regression="" with="" the="" low-risk="" (ngal-ak-)="" group="" as="" the="" reference.="" all="" statistical="" analyses="" were="" performed="" using="" r="" (cran="" version="" 4.0.4),="" including="" r="" add-on="" packages="" mass="" (version="" 7.3-53.1),="" odds="" ratio="" (version="" 2.0.1),="" survival="" (version="" 3.2-7),="" cmprsk="" (version="" 2.2-10),="" and="" proc="" (version="" 1.17.="" 0.1).="" our="" study="" was="" reported="" according="" to="" strengthening="" the="" reporting="" of="" observational="" studies="" in="" epidemiology="" guidelines="" for="" cohort="">

الإشراف على الدراسات

البنك الحيوي بجامعة كولومبيامرض كوفيد 19الدراسات تمت الموافقة عليها من قبل جامعة كولومبيا الطبية مجلس المراجعة المؤسسية للمركز (AAAS7370 و AAAS7948). تم تضمين مجموعة فرعية من المرضى تحت إعفاء مجلس المراجعة المؤسسية لأزمة الصحة العامة من الموافقة على وجه التحديد لمرض كوفيد 19دراسات إذا كان المرضى متوفى ، غير قادر على الموافقة ، أو لفقدان الاتصال. تم استخدام الفئران وفقا للجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (AC-AAAY7464) و الالتزام بدليل المعاهد الوطنية للصحة رعاية واستخدام المختبر.

انقر هنا للحصول على الجزء الثاني من هذه المقالة.

من: "يرتبط ليبوكالين المرتبط بالجيلاتيناز العدلي المرتفع بشدة إصابة الكلى وسوء تشخيص المرضى الذين يعانون من COVID-19" - بواسطةكاثرين Xu1 وآخرون

---تقارير الكلى الدولية (2021) 6 ، 2979-2992 البحوث السريرية