جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

الملخص:يقود الاهتمام المتزايد بالصحة العامة سوقًا عالميًا للمكونات الطبيعية ليس فقط في صناعة الأغذية ولكن أيضًا في مجال مستحضرات التجميل. في هذه الدراسة ، تم فحص التطبيقات التجميلية المحتملة لمستخلصات مائية من ثلاثة آيسلنديينالأعشاب البحريةتم إنتاجها بواسطة المجالات الكهربائية النبضية (PEF). تمت مقارنة المستخلصات التي تم إنتاجها بواسطة PEF من Ulva lactuca و Alaria esculenta و Palmaria palmata مع استخراج الماء الساخن التقليدي من حيث محتوى البوليفينول والفلافونويد والكربوهيدرات. علاوة على ذلك،مضادات الأكسدةتم تقييم الخواص والنشاطات الانزيمية المثبطة باستخدام المقايسات المخبرية. أظهر PEF نتائج مماثلة للطريقة التقليدية ، حيث أظهر العديد من المزايا مثل طبيعته غير الحرارية وقصر وقت الاستخراج. من بين الأنواع الأيسلندية الثلاثة ، أظهرت Alaria esculenta أعلى محتوى من الفينول (متوسط ​​القيمة 8869.7 ميكروغرام / غرام وزن الجسم) والفلافونويد (متوسط) مركبات بقيمة 12،098.7 ميكروغرام من QE / g dw) ، وهي تعرض أيضًا أعلى نسبةمضادات الأكسدةالقدرات. علاوة على ذلك ، أظهرت مستخلصات Alaria esculenta أنشطة ممتازة مضادة للأنزيم (76.9 ، 72.8 ، 93. 0 و 100 في المائة للكولاجيناز ، الإيلاستاز ،التيروزينازandhyaluronidase ، على التوالي) لاستخدامها في منتجات تبييض البشرة ومكافحة الشيخوخة. وبالتالي ، تشير دراستنا الأولية إلى أن المستخلصات الأيسلندية القائمة على Alaria esculenta التي تنتجها PEF يمكن استخدامها كمكونات محتملة لمستحضرات التجميل الطبيعية ومستحضرات التجميل.

الكلمات الدالة:الطحالب الكبيرة. أولفا لاكتوكا ألاريا إسكولنتا بالماريا بالماتا الاستخلاص بمساعدة PEF ؛ المركبات النشطة بيولوجيا ؛ استخراج أخضر مكونات طبيعية؛ مستحضرات التجميل

cistanche هي تبييض المكونات الطبيعية

1 المقدمة

في السنوات الأخيرة ، شهد الطلب على المركبات النشطة بيولوجيًا الجديدة ذات الفوائد الصحية المحتملة زيادة كبيرة. ركزت العديد من المجموعات البحثية على الأبحاث المتعلقة بالكائنات البحرية ، مثل الطحالب الكبيرة ، لإيجاد مصادر جديدة ومستدامة للمركبات الطبيعية للتطبيقات في صناعة الأغذية الزراعية ، وعلم الأدوية ، والأغذية ، ومؤخراً في مجال مستحضرات التجميل [1 ، 2] . الطحالب الكبيرة هي مجموعة كبيرة وغير متجانسة من كائنات التمثيل الضوئي التي تتميز بتنوع بيولوجي ضخم وتكوين كيميائي حيوي معقد. وفقًا لتركيبها الكيميائي ومحتوى الصباغ ، يمكن تقسيم الطحالب الكبيرة إلى ثلاث سلالات تشمل الطحالب البنية (Phaeophyceae) والطحالب الحمراء (Rhodophyta) والطحالب الخضراء (Viridiplantae). يتم تخزين مركبات الطحالب داخل السيتوبلازم الخلوي أو مرتبطة بأغشية الخلية ؛ وبالتالي ، فإن تمزق الخلية أمر بالغ الأهمية لتقويم الكتلة الحيوية للطحالب. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تكوين جدار الخلية متغير بدرجة كبيرة بين أنواع الطحالب التي تتراوح من الأغشية الدقيقة إلى الهياكل المعقدة متعددة الطبقات ، مما يجعل استعادة منتجات الطحالب تحديًا [3]. بشكل عام ، تعد الأعشاب البحرية مصادر ممتازة للسكريات ، والبروتينات ، والدهون ، ومجموعة متنوعة من الأيضات الثانوية مثل المركبات الفينولية ، والتربينويدات ، والكاروتينات ، والأصباغ ومشتقات النيتروجين [4-6]. على الرغم من أن المستقلبات الأولية لها أهمية حاسمة ، فقد أظهرت البيانات الحديثة أن محتوى المستقلبات الثانوية يحدد الأنشطة البيولوجية لـالأعشاب البحريةمقتطفات [7].

يقود الاهتمام المتزايد بالصحة والعافية بشكل عام ، فضلاً عن الوعي بالمواد الكيميائية الضارة في المنتجات اليومية ، السوق العالمية للمكونات الطبيعية والعضوية [8]. على مدى السنوات الماضية ، امتد وعي المستهلك تجاه تفضيل المكونات الطبيعية والمنتجات الصديقة للبيئة من صناعة الأغذية إلى صناعة مستحضرات التجميل والعناية الشخصية [9]. علاوة على ذلك ، في السياق الحالي للاحتباس الحراري والقضايا البيئية ، كان هناك وعي عام متزايد بالقضايا البيئية ، وفي ضوء هذه المخاوف الحالية ، حول المستهلكون اهتماماتهم نحو المنتجات الخضراء والصحية والخالية من المواد الكيميائية. ونتيجة لذلك ، تقوم صناعة مستحضرات التجميل حاليًا باستبدال المواد الكيميائية السامة والمكونات الضارة بمركبات جديدة وطبيعية عالية القيمة لإنتاج منتجات تجميل "نظيفة كيميائيًا" [10].

تم تعريف مستحضرات التجميل تقليديًا على أنها منتجات يتم وضعها على جسم الإنسان للتنظيف أو التجميل أو تعزيز الجاذبية دون التأثير على بنية الجسم أو وظائفه. ومع ذلك ، فإن الاتجاهات الجديدة وطلبات المستهلكين الحديثة قد شجعت على تطوير منتجات جديدة توفر فوائد متعددة بأقل جهد ممكن. يستخدم مصطلح cosmeceutical الآن بشكل متكرر لوصف مستحضرات التجميل التي تحتوي على مكونات نشطة بيولوجيًا تدعي أن لها فوائد طبية أو شبيهة بالعقاقير [11]. عادة ما تحتوي مستحضرات التجميل على مكونات وظيفية مثل الفيتامينات والمواد الكيميائية النباتية والإنزيمات ،مضادات الأكسدةو / أو الزيوت الأساسية [12]. نظرًا لأن مجموعة واسعة من هذه المركبات النشطة بيولوجيًا تم العثور عليها في الطحالب الكبيرة ، فقد تم البحث عن جديدالأعشاب البحريةأثبتت المستخلصات المشتقة من الطحالب البحرية أنها مجال واعد لدراسات مستحضرات التجميل ومستحضرات التجميل [13 ، 14].

عدد من المستقلبات الثانوية مشتق منالأعشاب البحريةتشتهر بآثارها المفيدة الصحية القيمة على الجلد ، مثل الحماية من الضوء ، والترطيب ،مضادات الأكسدة، خصائص مضادة للالتهابات وتجديد [15]. بناءً على هذه الآثار المفيدة ، تم دمج الطحالب في منتجات مستحضرات التجميل مثل الواقي من الشمس ، ومنتجات مكافحة الشيخوخة ، وكذلك للوقاية من فرط التصبغ ، بينما تستخدم السكريات للحفاظ على ترطيب البشرة ومنع الجفاف [16]. أثناء الشيخوخة ، تكون بروتينات المصفوفة خارج الخلية عرضة للنشاط المفرط للأنزيمات المحللة للبروتين مثل الكولاجيناز والأيلاستاس ، مما يؤدي إلى تغيرات مرئية في الجلد ، مثل التجاعيد أو فقدان مرونة الجلد. نهج واعد لمنع شيخوخة الجلد الخارجية هو تثبيط أنشطة الكولاجين والإيلاستاز بواسطة المركبات الطبيعية. تم التحقيق في المستخلصات النباتية على نطاق واسع ووجدت أنها تمتلك أنشطة مضادة للكولاجيناز ومضادة للإيلاستاز [17]. ومع ذلك ، هناك القليل من المعلومات حول الأنشطة الأنزيمية المثبطة لمستخلصات الأعشاب البحرية.

تعتمد طرق الاستخراج الأكثر استخدامًا لعزل المواد الحيوية من الأعشاب البحرية على التقنيات التقليدية. ومع ذلك ، فإن استخدام الطرق التقليدية له عدة عيوب ، مثل استخدام كميات كبيرة من المذيبات العضوية ، وأوقات استخلاص أطول ، ودرجات حرارة عالية ، ومشاكل انتقائية ، ومتطلبات طاقة عالية ، والاستخراج المشترك لمركبات غير مستهدفة أو متداخلة [18]. ومن ثم ، فإن تقنيات الاستخراج الجديدة القائمة على مبادئ الكيمياء الخضراء لها فائدة محتملة [19].

المجال الكهربائي النبضي (PEF) هو تكنولوجيا معالجة أغذية ناشئة وغير حرارية وموفرة للطاقة [20]. تتضمن PEF تطبيق نبضات المجال الكهربائي عادةً على الفولتية العالية (مدى kV) وفترات قصيرة (دقيقة أو نانوية ثانية) لمنتج يوضع بين قطبين كهربائيين [21]. ينتج عن تطبيق النبضات الكهربائية تكوين مسام عكوسة أو غير قابلة للانعكاس في أغشية الخلايا ، والتي تُعرف باسم التثقيب الكهربائي أو النفاذية الكهربية ، مما يسهل بالتالي الانتشار السريع للمذيبات وتعزيز نقل الكتلة للمركبات داخل الخلايا [22]. ركزت التطبيقات الحديثة على استخدام الطاقة الكهربائية النبضية كتقنية استخراج (الاستخراج بمساعدة PEF) من المنتجات الحيوية والغذائية والزراعية [23]. مع معالجة PEF يكون من الممكن الحصول على مستخلصات ذات نقاوة أعلى ، وزيادة معدل استخلاص المركبات النشطة بيولوجيًا مثل البوليفينول ، والكاروتينات ، أو الأنثوسيانين ، والقضاء على استخدام المذيبات العضوية وتقصير وقت الاستخراج [24،25]. تم تطبيق علاج PEF بنجاح لاستخراج مركبات قيمة من مصادر بحرية مختلفة ، مثل البروتينات [26-28] والكربوهيدرات [29،30] والدهون [31،32] والأصباغ مثل الكاروتينات والكلوروفيل أو الفيكوسيانين [22،33] ، 34] من الطحالب الدقيقة والأعشاب البحرية.

وبالتالي ، كان الهدف الرئيسي من هذه الدراسة هو تقييم التطبيقات التجميلية المحتملة لمستخلصات PEF من ثلاثة أنواع من الطحالب الكبيرة تنمو في أيسلندا: U. . في إطار الجهود المبذولة لتطوير المكونات العضوية والطبيعية للتركيبات الخضراء ، تم اقتراح الاستخراج بمساعدة PEF كبديل صديق للبيئة لاستخراج المذيبات العضوية التقليدية. بعد عملية الاستخراج ، مائيالأعشاب البحريةتم تمييز المستخلصات من حيث محتوى البوليفينول والفلافونويد والكربوهيدرات. علاوة على ذلك،مضادات الأكسدةتم تقييم الخواص والأنشطة المثبطة للأنزيم باستخدام مقايسات النشاط في المختبر. ستوفر النتائج الواردة هنا الأساس لتحسين فهم الطحالب الكبيرة البنية والحمراء والخضراء لإنتاج مكونات نشطة لتركيبات مبتكرة في منتجات مستحضرات التجميل التي تحتوي على مركبات نشطة بيولوجيًا معزولة عن مصادر طبيعية ومستدامة.

2. النتائج والمناقشة

2.1. الاستخراج بمساعدة PEF لمعالجة الكتلة الحيوية للأعشاب البحرية الأيسلندية

أظهرت النتائج أن الموصلية الكهربائية كانت أعلى في التعليق المحضر من A. esculenta يليه P. palmata و U. lactuca (p <{0}. 05)="" (الجدول="" 1).="" ومع="" ذلك="" ،="" لم="" يتم="" تحديد="" تأثير="" نوع="" العلاج="" على="" أنه="" ذو="" دلالة="" (p=""> 0.05). تم استخدام قياس الموصلية الكهربائية بنجاح من قبل مؤلفين آخرين لتقييم فعالية علاج PEF في الأنسجة البيولوجية لإطلاق المواد الأيونية داخل الخلايا ، نتيجة لزيادة نفاذية غشاء الخلية [35-37].

في دراستنا ، لم تشير النتائج إلى إطلاق أقوى لهذه المواد بواسطة PEF ، لأن التغيرات في الموصلية التي تحدثها معالجات الاستخراج تميل إلى أن تكون أعلى في معلقات HW. خلصت الدراسات السابقة إلى أن الموصلية الأولية للوسط خارج الخلية تؤثر على كفاءة Electroporation ولكن هناك نقص في الاتفاق حول ما إذا كانت هناك علاقة إيجابية أو سلبية بين هذين العاملين [38]. الاختلافات في الموصلية وخصائص المادة قد تجعل المقارنة معقدة. في دراستنا ، كان هناك فرق كبير بين موصلية معلقات A. esculenta والنوعين الآخرين ، والذي لم ينعكس في درجة تغيرات الموصلية أثناء معالجة الاستخراج. تم توضيح أن محتوى الرماد في الأعشاب البحرية البنية يمكن أن يمثل أكثر من 50 بالمائة من وزنها الجاف [39] ، والذي يتكون بشكل كبير من الأيونات ، والتي قد تفسر جزئيًا الموصلية العالية في معلقات A. esculenta مقارنة بالنوعين الآخرين.

أظهرت النتائج أن الأس الهيدروجيني في تعليق U. lactuca كان أقل من النوعين الآخرين ، ولكن لم تظهر تأثيرات واضحة من نوع الاستخلاص. زادت درجة الحرارة من 22 ± 1 درجة مئوية قبل العلاج ، إلى 95 درجة مئوية عن طريق HW (لجميع الأنواع) ، إلى 36. 0 ± 1. 0 درجة مئوية ، 46.3 ± 0. 6 درجات مئوية و 51. 0 ± 1 درجة مئوية بواسطة PEF ، في A. esculenta و P. palmata و U. lactucasuspensions. لوحظ نفس الاتجاه بالنسبة للمجموعات المعالجة بـ PEF ، والتي تم تسخينها بشكل أكبر بواسطة HW. كان سبب الارتفاع في درجة الحرارة هو تحويل الطاقة الكهربائية إلى طاقة حرارية (التسخين الأومي) ، في المعلق أثناء معالجة PEF ، ومن المعروف أن مستوى الزيادة في درجة الحرارة يتناسب مع التيار المطبق ولكن يتناسب عكسيًا مع الموصلية. هذا يمكن أن يفسر سبب وجود P. palmata و U. وصلت lactuca إلى درجة حرارة أعلى أثناء معالجة PEF على الرغم من أن لديهم موصلية أقل من A. esculenta.

2.2. أطياف امتصاص UV-VIS لمستخلصات الأعشاب البحرية الأيسلندية

تختلف الأعشاب البحرية المدروسة في الملامح الطيفية (الشكل 1) ، مما يشير إلى أن التركيب وإمكانية امتصاص الأشعة فوق البنفسجية تختلف باختلاف الأنواع. ومع ذلك ، لم تظهر تقنية الاستخلاص نوعًا تأثيرًا ملحوظًا في أطياف امتصاص الأشعة فوق البنفسجية ؛ أظهرت مستخلصات الأعشاب البحرية ملامح امتصاص متشابهة بغض النظر عن طريقة الاستخراج.

أظهرت أطياف امتصاص الأشعة فوق البنفسجية للطحالب الخضراء U. lactuca ذروة بارزة في نطاق الأشعة فوق البنفسجية- B (280-320 نانومتر) (الشكل 1 أ) ، بينما لم تظهر المستخلصات من الطحالب البنية أ. ). ومع ذلك ، أشارت النتائج إلى امتصاص أقوى عند 220 نانومتر في مستخلصات A. esculenta مقارنة مع U. lactuca و P. palmataw الذي يُفترض أنه ناتج عن المحتوى العالي من المركبات الفينولية في A. esculenta (الجدول 2). تم ربط الحد الأقصى للامتصاص ضمن هذا النطاق بالارتباط بين مركبات الفينول والألجينات. يُفترض أن هذه العلاقة تحافظ على قدرة المركبات الفينولية على امتصاص الأشعة فوق البنفسجية بمرور الوقت [40].

كانت النتيجة الأكثر إثارة للاهتمام هي أن النتائج التي تم الحصول عليها لمستخلصات الطحالب الحمراء ، P. امتص بالماتا جزءًا من الأشعة فوق البنفسجية (320-400 نانومتر). من المعروف أن الطحالب الحمراء تتراكم في المركبات الواقية من الضوء مع قدرات امتصاص الأشعة فوق البنفسجية مثل الأحماض الأمينية الشبيهة بالميكوسبورين (MAAs) ، والتي تمتص في هذه المنطقة المحددة للأشعة فوق البنفسجية [41]. برع P. palmata في طيف امتصاص الأشعة فوق البنفسجية مع قمم بارزة بين 320 و 340 نانومتر وفقًا لوجود MAAs الممتصة في هذا النطاق [42] ، مثل باليثينول (ذروة الامتصاص عند 332 نانومتر) ، أسترينا -330 (ذروة الامتصاص عند ذروة الامتصاص) 330 نانومتر) ، البورفيرا -334 (ذروة الامتصاص عند 334 نانومتر) وغيرها [43]. نظرًا لأن ظروف الاستخراج ، مثل نوع المذيب ، معروفة بتأثيرها على كفاءة الاستخلاص ، فقد تمت مقارنة نتائج الدراسة الحالية بالدراسات السابقة على استخلاص ماء MAAswith من P. palmata. في هذه الدراسات ، تم الكشف عن ذروة الامتصاص القصوى عند 325 إلى 330 نانومتر [44] ، كما في الدراسة الحالية. لذلك ، من الممكن أن نفترض أن القمم التي لوحظت بين 320 و 340 نانومتر قد تكون بسبب وجود MAAs.

تم تفسير الاختلافات في أطياف الامتصاص بين 350 و 700 نانومتر من خلال وجود أصباغ ملحقة مختلفة في أنظمة ضوئية من الطحالب الكبيرة الخضراء والبنية والحمراء والكلوروفيل ب (450-500 نانومتر) والفوكوكسانثين (400-500 نانومتر) والفيكويريثرين (600-650 نانومتر) على التوالي [45]. كان لتركيز المركبات القابلة للذوبان في الماء في المستخلصات تأثيرات أقوى. وبالتالي ، فإن النمط الذي يعكس الاختلاف في الأصباغ بين أنواع الطحالب لم يكن واضحًا في هذه الدراسة.

2.3 إجمالي محتوى الفينول والفلافونويد والكربوهيدرات لمستخلصات الأعشاب البحرية الأيسلندية

إجمالي محتوى الفينول فيالأعشاب البحريةتراوحت s من 1592 إلى 9368 ميكروغرام GAE / g dw (الجدول 2). أظهرت الطحالب البنية A. esculenta أعلى كمية (p <0. 0="" 5)="" من="" المركبات="" الفينولية="" (متوسط="" ​​القيمة="" 8869.7="" ميكروغرام="" gae="" g="" dw)="" ،="" تليها="" p.="" palmata="" (متوسط="" ​​القيمة="" 1806.2="" ميكروغرام)="" gae="" g="" dw)="" و="" u.="" lactuca="" (متوسط="" ​​القيمة="" 1750.7="" ميكروغرام="" غرام="" وزن="" جاف)="" (كانت="" هناك="" اختلافات="" معنوية="" بين="" مستخلصات="" p.="" palmata="" و="" u.="" lactuca)).="" لكل="" نوع="" من="" أنواع="" الطحالب="" البحرية="" ،="" لم="" يختلف="" محتوى="" البوليفينول="" بين="" طرق="" الاستخلاص="" باستثناء="" u.="" lactuca="" ،="" حيث="" أظهرت="" النتائج="" أن="" hw="" كانت="" التقنية="" الأكثر="" كفاءة="" (p=""><0.05). ومع="" ذلك="" ،="" يجب="" تسليط="" الضوء="" على="" مزايا="" pef="" بما="" في="" ذلك="" طبيعتها="" غير="" الحرارية="" ،="" ووقت="" الاستخراج="" الأقصر="" (10="" دقائق="" مقابل="" 45="" دقيقة)="" والعملية="">

من بين مجموعات الطحالب الثلاث ، تحتوي الطحالب البنية على عدد من البوليفينول أعلى من الطحالب الحمراء والخضراء. كانت النتائج متوافقة مع الدراسات المبكرة [46،47] التي ذكرت أن أنواع الطحالب البنية (على سبيل المثال ، A. esculenta و Saccharina latissma) كانت تحتوي على محتوى فينولي أعلى من الأحمر (P. palmata) والأنواع الخضراء (على سبيل المثال ، U. lactuca). تم دعم ذلك من قبل مؤلفين آخرين [48] الذين خلصوا إلى أن متوسط ​​محتوى البوليفينول كان خاصًا بالأنواع (A. esculenta> S. latissma> P. palmata) وأن المحتوى الفينولي في A. esculenta كان أعلى بثلاث مرات منه في الأنواع الأخرى ( A. esculenta: 37 ملغ من الكلوروجلوسينول مكافئ (PGE) / غرام وزن الجسم ؛ S. لاتيسما: 8 ملغ PGE / غرام وزن الجسم ؛ P. palmata: 5 ملغ / غم وزن جاف). علاوة على ذلك ، في نفس الدراسة ، أفاد المؤلفون أن محتوى البوليفينول يختلف باختلاف الموسم ، بينما أظهرت الاختلافات المكانية (تم حصاد الطحالب في النرويج وفرنسا وأيسلندا) تأثيرًا هامشيًا. على سبيل المثال ، Gager et al. وجد (2020) أن هناك تأثيرًا معنويًا للتغيرات الموسمية في محتوى البوليفينول في A. esculenta ، مع أكثر من 300 مجم GAE / g DW في الخريف مقارنة بأقل من 20 مجم GAE / g DW في وقت الربيع. الفلوروتانينات من سبعة أعشاب بحرية بنية تم حصادها تجاريًا في بريت تاني (فرنسا) تم اكتشافها بواسطة H NMR والمقايسات في المختبر: التباين الزمني والتقدير المحتمل في تطبيقات التجميل. تم جمع عيناتنا في يوليو (U. lactuca و A. esculenta) وفي نوفمبر (P. palmata). في دراسة Roleda [48] ، كان متوسط ​​المحتوى في A. esculenta من تروندهايم ، النرويج (لم يتم جمعها في آيسلندا) في الصيف 40 ملليجرام PGE / جرام وزن جاف و P. palmata من أيسلندا ولكنه كان 4 مللي جرام GAE / جرام وزن جاف في الخريف. يمكن تفسير القيم الأعلى التي تم الإبلاغ عنها بالمقارنة مع دراستنا من خلال وسائط الاستخراج المستخدمة (80:20 أسيتون: ماء) ، والتي من المحتمل أن تؤدي إلى إنتاجية أعلى من الاستخراج. تم العثور أيضًا على محتوى بوليفينول أعلى لمستخلصات A. esculenta باستخدام خليط من الإيثانول والماء (50:50) مع الموجات فوق الصوتية [49]. ومع ذلك ، باستخدام نفس وسط الاستخلاص واستخلاص المذيب الكلاسيكي ، تم الإبلاغ عن احتواء A. esculenta على 44.1 مجم GAE / 100 جم وزن جاف من المستخلصات المائية [50] ، وهي مشابهة نسبيًا لتلك التي لوحظت في هذه الدراسة.

كان متوسط ​​محتوى الفلافونويد خاصًا بالأنواع (A. esculenta> U. lactuca> P. palmata ؛ (p <0. {{1 0}} 5) (الجدول 2). أعلى كمية من لوحظ وجود مركبات الفلافونويد في مستخلصات A. esculenta (متوسط ​​القيمة 12098.7 ميكروغرام / جرام وزن جاف) ، بينما وجد محتوى أقل في مستخلصات U. متوسط ​​القيمة 905.8 ميكروغرام QE / g dw) على غرار السلوك الموجود للمحتوى الفينولي الكلي ، لم يكن لنوع تقنية الاستخلاص تأثيرات معنوية على محتوى الفلافونويد (p> 0.05) ، باستثناء U. lactuca. وأظهرت النتائج أن كانت HW والجمع بين كلتا الطريقتين (PEF plus HW) أكثر التقنيات فعالية لاستخراج الفلافونويد في U. lactuca (p <0.05).

هناك العديد من الدراسات حول محتوى الفلافونويد في النباتات الأرضية ، لكن دراسات محتوى الفلافونويد في الطحالب نادرة [51] وخاصة في الأنواع التي تمت دراستها في العمل الحالي. وهي دراسة أمات وآخرون. [49] ذكرت أن الاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية عزز من استعادة مركبات الفلافونويد في كل 11الأعشاب البحريةs (بما في ذلك A. esculenta) مقارنة باستخلاص المذيبات التقليدية باستخدام خليط 50٪ من الإيثانول. في دراسة أخرى ، تم قياس كمية مركبات الفلافونويد في المستخلصات الميثانولية لأربعة أنواع من أولفا (Ulva clathrata و Ulva linza و Ulva flexuosa و Ulva intestinalis) المزروعة في أجزاء مختلفة من السواحل الشمالية للخليج العربي في جنوب إيران ؛ يتراوح محتوى الفلافونويد في مستخلصات الطحالب من 8 إلى 33 ملجم من RE / جم وزن جاف [52]. ومع ذلك ، وجدت الدراسات السابقة من قبل نفس المجموعة البحثية تغيرات ملحوظة في المكونات الكيميائية مع تغيرات في المواسم والظروف البيئية [53]. وبالتالي ، من الصعب قليلاً الحصول على نظرة عامة كاملة على ببليوغرافيا هذه المركبات النشطة بيولوجيًا فيالأعشاب البحريةs ، بسبب نقص الأبحاث المنشورة المتاحة ، ولكن أيضًا بسبب التغييرات في محتوى الفلافونويد المتأثر بظروف النمو والموقع الجغرافي.

Mean carbohydrate content of produced extracts was also species-specific (P. palmata >U. lactuca> A. esculenta ؛ ف <0. 05)="" (الجدول="" 2).="" تراوحت="" المحتويات="" من="" 44.8="" إلى="" 510="" مجم="" glue="" gdw="" اعتمادًا="" على="" أنواع="" الطحالب.="" تحتوي="" الأعشاب="" البحرية="" على="" كمية="" كبيرة="" من="" السكريات="" ذات="" وظائف="" مهمة="" لخلايا="" الطحالب="" الكبيرة="" بما="" في="" ذلك="" الدعم="" الهيكلي="" والتخزين="" للطاقة.="" على="" سبيل="" المثال="" ،="" يتم="" تمثيل="" الجزء="" الرئيسي="" من="" جدران="" خلايا="" الأعشاب="" البحرية="" باللونين="" الأحمر="" والبني="" بواسطة="" الجالاكتان="" المكبريت="" ،="" والتي="" تُعرف="" باسم="" أجار="" ،="" وألجينات="" ،="" وكاراجينان="" [54].="" أظهرت="" الطحالب="" الحمراء="" p.="" palmata="" أعلى="" كمية="" من="" محتوى="" الكربوهيدرات="" (متوسط="" ​​القيمة="" 441="" مجم="" غلوثر="" ماء="" جرام="" وزن="" جاف).="" كانت="" النتائج="" متوافقة="" مع="" الدراسات="" السابقة="" التي="" سجلت="" أعلى="" تركيز="" عديد="" السكاريد="" في="" أنواع="" بالماريا="" [55].="" علاوة="" على="" ذلك="" ،="" مطربة="" وآخرون.="" [56]="" وصف="" إجمالي="" محتوى="" الكربوهيدرات="" في="" p.="" palmata="" البالغ="" 469="" مجم="" جم="" من="" الأعشاب="" البحرية="" الجافة="" ،="" وهو="" مشابه="" نسبيًا="" لما="" لوحظ="" في="" هذه="">

أظهرت الطحالب الكلية الخضراء U. lactuca محتويات تصل إلى 249.5 مجم GluE / g dw اعتمادًا على تقنية الاستخراج المستخدمة (الجدول 2). استنادًا إلى الأدبيات ، السليلوز يو لاكتوكا U القابل للذوبان في الماء وغير القابل للذوبان المتوافق مع السكريات الهيكلية مع مكون رئيسي يسمى أولفان ، والذي يساهم بنسبة 9 إلى 36 في المائة من الوزن الجاف للكتلة الحيوية [57]. يتكون Ulvan بشكل أساسي من رامنوز مكبّر ، وأحماض يورونيك (حمض الغلوكورونيك وحمض الأيدورونيك) وزيلوز. بسبب طبيعتها القطبية ، يتم تعزيز قابلية ذوبان المحاليل غير المائية من خلال الاستخراج في درجات حرارة عالية (8 0 - 90 درجة مئوية) [58]. يمكن أن تكون درجة حرارة الاستخراج هي السبب في أن المحتوى الكلي للكربوهيدرات في مستخلصات U.Lactuca الناتجة عن الاستخراج التقليدي بالماء الساخن والجمع بين الطريقتين (PEF plus HW) كان أعلى (p <0.05) من="" المحتوى="" الذي="" تم="" تحقيقه="" باستخدام="" pef="">

من ناحية أخرى ، يسلط مؤلفون آخرون الضوء على أهمية الاختلاف الموسمي في محتوى السكاريد. على سبيل المثال ، يدعي Schiener et al. تحديد التغيرات الموسمية والتنبؤ بأفضل أوقات الحصاد لعشب البحر. أظهر تحليل التركيب الموسمي لـ A. esculenta أن القيم القصوى للكربوهيدرات تزامنت مع انخفاض تركيزات البروتين والرماد والبوليفينول والرطوبة [39]. وفقًا للمؤلفين ، يمكن استخدام هذه العلاقات ، التي تختلف بين المواسم والأنواع ، من قبل الصناعات لزيادة غلة المحاصيل المستهدفة.الأعشاب البحريةعناصر.

2.4 السعات المضادة للأكسدة من مستخلصات الأعشاب البحرية الأيسلندية

كان لدى A. esculenta أقوى نشاط لكسح DPPH بين المستخلصات الخام لأنواع الطحالب الثلاثة (p <{0}. 05)="" ،="" مع="" تأثير="" الكسح="" أعلى="" من="" 90="" بالمائة="" (الجدول="" 3).="" أظهرت="" المحاليل="" المعيارية="" ،="" a.="" esculenta="" نشاط="" كسح="" مشابه="" مثل="" 100="" ميكروغرام="" مل="" من="" حمض="" الأسكوربيك="" (87.9="" بالمائة)="" ،="" وحمض="" الغاليك="" (91.0="" بالمائة)="" و-="" توكوفيرول="" (87.9="" بالمائة).="" كانت="" نتائجنا="" متوافقة="" مع="" الدراسات="" الحديثة="" [50]="" ،="" والتي="" ذكرت="" أيضًا="" أنها="">مضادات الأكسدةنشاط مستخلصات A. esculenta. بشكل مفاجئ ، لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية فيمضادات الأكسدةتمت ملاحظة النشاط بين طرق الاستخراج المختلفة المختبرة (p> 0. 05). كان من المتوقع أن تُظهر مستخلصات PEF قيمًا أفضل لمضادات الأكسدة من المستخلصات الناتجة عن الاستخراج التقليدي الساخن حيث أظهرت دراسات أخرى أن التقنيات الخضراء (مثل الاستخراج بمساعدة الميكروويف أو الاستخراج الأنزيمي) يمكن أن تتجنب بشكل فعال تحلل المركبات النشطة بيولوجيًا ، مما يدل على زيادة فعالية مضادات الأكسدة [59) ، 60].

قدرةالأعشاب البحريةتمت دراسة مقتطفات اختزال الحديديك (Fe3 plus) إلى أيونات حديدية (Fe2 plus) والقدرة على تنظيف ABTS الجذري ، بطريقة FRAP و ABTS ، على التوالي. أظهرت نتائج FRAP اتجاهات مماثلة لـ DPPH ، حيث أظهرت أن A. esculenta لديها أقوى قدرة على تقليل أيون الحديد (Fe3 plus) إلى الحديدوز (Fe2 plus) بين المستخلصات الخام لثلاثة أنواع من الطحالب (p <0. {{6}="" }="" 5).="" ومع="" ذلك="" ،="" تم="" العثور="" على="" سلوك="" مختلف="" لـ="" abts.="" أظهرت="" جميع="" مستخلصات="" الأعشاب="" البحرية="" قدرة="" مماثلة="" على="" نقب="" abts="" الجذري="" (p=""> 0.05) ، مما يشير إلى أن هذه الأنواع تحتوي على الأرجح على بعض المركبات الفعالة المسؤولة عن نشاط الكسح.

بشكل عام ، من المعروف أن الطحالب البنية تظهر بشكل أعلىمضادات الأكسدةالمحتملة بالمقارنة مع العائلات الحمراء والخضراء [61]. أظهرت نتائجنا أيضًا أن المستخلصات المائية من A. أظهرت esculenta أنشطة فعالة مضادة للأكسدة فيما يتعلق بقمع المواد العشوائية الحرة وتقليل الطاقة ، مما يشير إلى أن A. esculenta يمكن أن تكون مصدرًا لمضادات الأكسدة الطبيعية. يمكن ربط النشاط المضاد للأكسدة المرتفع الذي لوحظ في مستخلص A. esculenta بالمحتوى العالي في المركبات الفينولية المحددة في مستخلصات الطحالب البنية. في العديد من الدراسات ، كانمضادات الأكسدةتم إرجاع نشاط مستخلصات الطحالب إلى المركبات الفينولية ، مما يدل على وجود ارتباطات إيجابية بين المحتوى الفينولي وقدرة الكسح في الغالب مع DPPH [62،63]. تم العثور على نتائج ارتباط مماثلة في الدراسة الحالية لمستخلصات A. esculenta (انظر مناقشة أفضل في القسم 2.6. الارتباطات بين المركبات الكيميائية والخواص النشطة بيولوجيا).

2.5 الأنشطة الأنزيمية المثبطة لمستخلص الأعشاب البحرية الأيسلندية

ايسلنديالأعشاب البحريةأظهرت مقتطفات s آثار مثبطة إيجابية تجاه جميع الإنزيمات (الجدول 4) ، وفتح طرق جديدة لاستغلال مثبطات الأنزيمية الطبيعية من موارد الطحالب. على حد علمنا ، هذه هي المرة الأولى التي تقوم فيها الأنشطة الأنزيمية التثبيطية للأيسلنديينالأعشاب البحريةتم اختبار المستخلصات التي تنتجها PEF.

2.5.1. نشاط تثبيط الكولاجين

أظهرت مستخلصات A. esculenta تثبيطًا إيجابيًا للكولاجيناز تتراوح من 68 إلى 91 بالمائة ، بينما أظهرت مستخلصات P. Palmaria و U. lactuca نشاطًا ضئيلًا في التثبيط ضد الكولاجيناز (الجدول 4). أظهر مستخلص الماء الساخن A. esculenta نشاط تثبيط كولاجيناز بنسبة 71.1٪ ، وهو أعلى من محلول epigallocatechin القياسي -3- gallate (EGCG) (63.2٪) وقابل للمقارنة بالمعيار الإيجابي الذي توفره المجموعة الأنزيمية التجارية (74.9٪). كانت النتيجة أن مستخلصات A. esculenta التي أنتجها PEF أظهرت تثبيط أكولاجيناز بنسبة 91 في المائة ، وأظهرت نشاطًا أعلى من المثبط الذي توفره المجموعة التجارية. يجب التأكيد على أن هذا النشاط لوحظ فقط في مستخلصات المياه التي تنتجها PEF وليس عن طريق الجمع بين PEF بالإضافة إلى HW. يمكن تفسير هذا السلوك من خلال احتمال أن يكون لعملية الماء الساخن تأثير سلبي على المركبات المسؤولة عن تثبيط نشاط الكولاجيناز. ومع ذلك ، هناك حاجة لدراسات إضافية لشرح هذه النتائج بسبب تعقيد مستخلصات الطحالب الخام. تعمل مجموعة البحث المذكورة أعلاه حاليًا على تحديد جزيئات المثبط في مستخلصات A. esculenta لفهم هذه التأثيرات الإيجابية التي تنتجها PEF بشكل أفضل.

تتفق النتائج المتعلقة بتثبيط كولاجيناز بواسطة مستخلصات A. esculenta مع البيانات السابقة ، حيث يتم استخدام A. esculenta في المستخلصات التجارية نظرًا لتأثيرها المضاد. يحدث تدهور الكولاجين مع التقدم في السن بسبب نشاط الكولاجين مما يؤدي إلى ظهور التجاعيد على الجلد. يعتبر تثبيط الكولاجيناز عن طريق المركبات التي تحدث بشكل طبيعي فرصة مثيرة للاهتمام لمنتجات مكافحة الشيخوخة. على سبيل المثال ، تقدم SEPPIC ، وهي مورد لمكونات صناعة مستحضرات التجميل ، مستخلصًا محبًا للدهون من A. esculenta (Kalpariane® AD) [64].

2.5.2. نشاط تثبيط الإيلاستاز

فقط المستخلصات الخام من A. esculenta تثبط الإيلاستاز ، وتظهر أنشطة أعلى من 7 0 بالمائة من التثبيط (الجدول 4). ومع ذلك ، فإن الأنشطة المضادة للإيلاستاز لمستخلصات A. esculenta لم تختلف إحصائيًا بين طرق الاستخراج (p> 0. 05). بالمقارنة مع quercetinsolutions ، وهو مثبط معروف للإيلاستاز أظهر تثبيطًا بنسبة 100٪ عند 1 مم و 58.7٪ عند 0.5 ملي مولار ، كان أداء مستخلصات A. esculenta مرتفعًا.

Elastase هو إنزيم بروتيناز يمكنه تقليل الإيلاستين عن طريق كسر أحواض ببتيد معينة. وبالتالي ، يمكن استخدام تثبيط نشاط الإيلاستاز في طبقة الأدمة للحفاظ على مرونة الجلد [65]. تم تحديد العديد من المستخلصات النباتية على أنها مثبطات الإيلاستازين [17] ؛ ومع ذلك ، فقد تم إجراء عدد قليل من التحقيقات حول تثبيط الإيلاستاز من موارد الطحالب. وفقًا لبيانات الأدبيات ، من المعروف أن البوليفينول المستخرج من النباتات هو الإيلاستاز القوي ومثبطات الهيالورونيداز [66]. أفادت دراسة حديثة أن الفلوروتانين ، نوع التانين الموجود في الطحالب البنية ، ومستخلصات عشب البحر Eisenia bicyclis والطحالب البنية Ecklonia cava ، تفيد الجلد عن طريق تقليل نشاط الإيلاستاز بشكل كبير [67]. وأظهرت مستخلصات A. esculenta المنتجة في هذه الدراسة أن أعلى قيم TPC و TFC بالمقارنة مع الأنواع الأخرى المدروسة (الجدول 4) ، لذلك قد يكون هذا هو السبب في عدم إظهار المستخلصات المائية من P. palmaria و U. lactuca أنشطة مضادة للإيلاستاز. لتأكيد هذه الفرضية ، تم إجراء تحليل ارتباط بيرسون ، مما يشير إلى أن الأنشطة المضادة للأنزيم ترتبط ارتباطًا إيجابيًا بمحتوى المواد الفينولية (انظر المزيد من المناقشة في القسم 2.6. الارتباطات بين المركبات الكيميائية والخصائص الحيوية النشطة).

2.5.3. نشاط تثبيط التيروزيناز

أظهرت مستخلصات A. esculenta إيجابيةالتيروزينازأعلى من 9 0 في المائة لجميع طرق الاستخراج المستخدمة ، بينما لم تظهر P. Palmaria و U. lactuca تأثيرات مثبطة لإنزيم التيروزيناز (الجدول 4). ومع ذلك ، لم تختلف أنشطة مضادات التيروزيناز لمستخلص A. esculenta (p <0. 05)="" مع="" طرق="" الاستخراج.="" بمقارنة="" تأثير="" خلاصات="" a.="" esculenta="" مع="" محاليل="" الكيرسيتين="" المختبرة="" ،="" أظهرت="" المستخلصات="" الخام="" للطحالب="" البنية="" نشاطًا="" مثبطًا="" أفضل="" من="" هذه="" المحاليل="" (88="" و="" 75="" بالمائة="" لحلول="" الكيرسيتين="" 0.5="" و="" 1="" ملي="" مولار="" ،="" على="" التوالي).="" استنادًا="" إلى="" الأدبيات="" ،="" تم="" الإبلاغ="" عن="" الأنشطة="" المضادة="" للتيروزيناز="" للنباتات="" والبكتيريا="" والفطريات="" من="" قبل="" العديد="" من="" الباحثين="" [68].="" ومع="" ذلك="" ،="" على="" الرغم="" من="" أن="" الدراسات="" المختلفة="" تشير="" إلى="" أن="" المركبات="" النشطة="" بيولوجيًا="" المشتقة="" من="" الطحالب="" البحرية="" لديها="" إمكانية="" جيدة="" لاستخدامها="" كعوامل="" لتبييض="" البشرة="" [13]="" ،="" إلا="" أن="" هذا="" المجال="" لا="" يزال="" غير="" مستكشف="" ولم="" يتم="" إجراء="" سوى="" عدد="" قليل="" من="" الدراسات.="" ركزت="" معظم="" الدراسات="" التي="" أجريت="" في="" هذا="" المجال="" على="" الطحالب="" البنية="" ،="" متفقة="" مع="" نتائج="" الدراسة="" الحالية="" التي="" أظهرت="" فيها="" خلاصات="" a.="" esculenta="" أفضل="" الأنشطة="" المضادة="" للتيروزيناز.="" على="" سبيل="" المثال="" ،="" مشتقات="" الفلوروجلوسينول="" والفلوروتانينات="" ،="" المستقلبات="" الثانوية="" الشائعة="" الموجودة="" في="" الطحالب="" البنية="" ،="" أظهرت="" نشاطًا="" مثبطًا="" ضد="" التيروزيناز="" نظرًا="" لقدرتها="" على="" تخلب="" النحاس="" [69].="" في="" دراسة="" حديثة="" ،="" أدى="" مستخلص="" الطحالب="" البنية="" ترابيق="" ليسونيا="" الذي="" ينتج="" عن="" الاستخراج="" بمساعدة="" الميكروويف="" إلى="" تثبيط="" نشاط="" إنزيم="" التيروزيناز="" بنسبة="" 33.73="" في="" المائة="" [60].="" في="" دراسة="" أخرى="" ،="" أظهر="" مستخلص="" الطحالب="" البنية="" turbinaria="" conoides="" نشاطًا="" كمضاد="">مضادات الأكسدةوالتيروزينازمثبط ، ومع ذلك ، في هذه الحالة ، تم استخدام الإيثانول كمذيب [70]. علاقة ارتباط معنوية بين الفاعلية التثبيطية للبوليفينول المستخرج من النباتات على الفطر.التيروزينازذكرت في دراسات سابقة [68]. وبالمثل ، تشير نتائج هذه الدراسة إلى أن النشاط التثبيطي تجاه التيروزيناز كان مرتبطًا بشكل إيجابي بمحتوى الفلافونويد والفينول (انظر القسم 2.6. الارتباطات بين المركبات الكيميائية والخصائص الحيوية النشطة).

يلعب التيروزيناز دورًا مهمًا في التخليق الحيوي لصبغة الميلانين في الجلد ، والميلانين مسؤول عن الحماية من الأشعة فوق البنفسجية الضارة ، والتي يمكن أن تسبب العديد من الحالات المرضية [71]. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يسبب مشاكل جمالية عندما يتراكم الميلانين كبقع مفرطة التصبغ [72]. وبالتالي ، قد يكون دمج مثبطات التيروزيناز في مستحضرات التجميل أمرًا جذابًا بسبب تأثيرات التبييض و / أو التفتيح.

يمكن أن يمنع cistanche التيروزيناز

2.5.4. نشاط تثبيط الهيالورونيداز

كل الالأعشاب البحريةأظهرت المستخلصات نشاطًا مرتفعًا بشكل ملحوظ ضد الهيالورونيداز (الجدول 4) ، مما أظهر نتائج مماثلة لمحلول حمض التانيك (مثبط معروف جيدًا للهيالورونيداز). على وجه التحديد ، أظهرت مستخلصات A. esculenta 1 0 0 بالمائة من التثبيط لجميع الطرق المختبرة. علاوة على ذلك ، أظهرت مستخلصات يو لاكتوكا نشاطًا أعلى من 90 بالمائة من التثبيط ، حيث كان تثبيط المستخلصات المنتجة بواسطة PEF (96.8 بالمائة) ومزيج PEF بالإضافة إلى HW (97.3 بالمائة) أعلى من التثبيط الناتج عن طريقة المياه الساخنة التقليدية 93.4 في المئة) (ف <0.05). أظهرت="" جميع="" مستخلصات="" p.="" palmaria="" أنشطة="" مماثلة="" (p=""><0.05) ،="" وكان="" تثبيط="" المستخلصات="" المنتجة="" بواسطة="" pef="" (91.9٪)="" ومزيج="" pef="" زائد="" hw="" (89.5٪)="" وطريقة="" الماء="" الساخن="" التقليدية="">

وصف مؤلفون آخرون أيضًا نشاط مضاد هيالورونيداز مختلفالأعشاب البحريةمقتطفات s ، وخاصة بالنسبة للمستخلصات الغنية بالفلوروتانين من الطحالب البنية [73،74]. ومع ذلك ، على حد علمنا ، هذه هي المرة الأولى التي يتم فيها الإبلاغ عن الأنشطة المثبطة للهيالورونيداز لمستخلصات P. palmata و U. lactuca التي تنتجها PEF.

حمض الهيالورونيك هو مكون رئيسي في الأدمة ، حيث يشارك في إصلاح الأنسجة ، ويتحلل مع تقدم العمر ، مما يسبب التجاعيد وفقدان تماسك الجلد. بهذا المعنى ، تعمل مثبطات الهيالورونيداز على زيادة مستوى حمض الهيالورونيك في الطبقة الخارجية للخلايا الجلدية لتحسين مظهر بشرة الوجه التي تقدم في السن [13]. لذلك ، قد تفتح نتائج هذه الدراسة طرقًا جديدة لاستغلال مثبطات الهيالورونيداز الطبيعية من موارد الطحالب مع إمكانية استخدامها في مستحضرات التجميل.

باختصار ، سمحت لنا البيانات التي تم جمعها باستنتاج أن مستخلصات A. esculenta أظهرت نشاطًا مثبطًا أفضل بشكل عام من P. palmaria و U. lactuca تجاه الإنزيم المختبر. وبالتالي ، كونها أكثر أنواع الأعشاب البحرية الواعدة ذات الأنشطة الممتازة المضادة للإنزيم ، وبالتالي تم اختيارها لمزيد من الدراسات في مختبرنا. على الرغم من أن المستخلصات الخام من A. esculenta تبدو مرشحة جيدة في التجارب المختبرية ، إلا أنه يلزم إجراء المزيد من الدراسات لتوضيح هوية المستقلبات المسؤولة عن هذه التأثيرات البيولوجية.

مستخلص cistanche: مضاد للأكسدة

2.6. الارتباطات بين المركبات الكيميائية والخواص النشطة بيولوجيا

أظهرت نتائج تحليل المكون الرئيسي (PCA) أن الفصل الرئيسي للمجموعات تم تحديده بواسطة PC1 و PC2 ، والذي يمثل 71.9 بالمائة و 14.5 بالمائة من التباين في البيانات ، على التوالي (الشكل 2). تميزت مستخلصات A. esculenta بمحتويات أعلى من مركبات الفلافونويد والفينول ، وتأثيرها المثبط على الإنزيمات (كولاجيناز ، وتيروزيناز ، وإيلاستاز) ، وقيم DPPH و FRAP ، مقارنة بالأنواع الأخرى ، P. بالماتا و يو لاكتوكا. من ناحية أخرى ، كان لدى A. esculenta محتوى منخفض من الكربوهيدرات ، خاصة بالمقارنة مع P. palmata (الذي يقع في الجانب المقابل من PC1). كان الاختلاف في البيانات على طول PC2 مرتبطًا بشكل أساسي بتثبيط ABTS و hyaluronidase. كما يتضح من الموقع على قطعة الأرض ، كان لدى P. palmata ارتباط أقوى مع ABTS بينما كان U. lactuca أكثر ارتباطًا بتأثيرات تثبيط الهيالورونيداز ، مقارنة بهذين النوعين.

علاقة إيجابية عالية وهامة بين TPC و TFC و DPPH و FRAP والتأثيرات المثبطة على كولاجيناز وإيلاستاز والتيروزينازتم توضيحه من خلال تحليل ارتباط بيرسون (الجدول 5).

كان هذا بالاتفاق مع الدراسات السابقة ، التي تشير إلى أن المركبات الفينولية (بما في ذلك مركبات الفلافونويد) هي المساهم الرئيسي في نشاط مضادات الأكسدة لمختلفالأعشاب البحرية[75-77]. تم ربط النشاط المضاد للأكسدة المرتفع لمستخلصات الطحالب البنية بمجموعة محددة من البوليفينول والفلوروتانين وتركيبها الجزيئي الفريد. ذُكر أن فلوروتانيس من الطحالب البنية يحتوي على ما يصل إلى ثمانية فينولات مترابطة تعمل كمصائد إلكترونية [78،79]. كان من المتوقع أن ترتبط ABTs مع TPC ، أخرىمضادات الأكسدةالمعلمات. قد تكون الأسباب المحتملة هي أن الطرق تعتمد على ظروف تفاعل مختلفة وأن التفاعلية تختلف فيما يتعلق بالوقت ونطاق المكونات. على سبيل المثال ، يتفاعل كاشف ABTS مع نطاق أوسع منمضادات الأكسدةsthan جذور DPPH [80]. من ناحية أخرى ، فإن أحد القيود المذكورة في ABTS هو رد فعل طويل وقد لا يسمح وقت رد الفعل العام بالوصول إلى نقطة نهاية.

تشير النتائج إلى وجود علاقة إيجابية عالية بين TPC و TFC للنشاط التثبيطي للكولاجيناز والإيلاستاز والتيروزيناز ({0}. 93 - 0. 99) ، بينما العلاقة بالتثبيط من الهيالورونيداز لم يكن قويًا (ص=0. 42 و 0.54 ، على التوالي). وهذا يشير إلى أن المكونات الأخرى ربما تكون قد ساهمت في التأثير المثبط للمستخلصات. أفادت دراسات أخرى أن السكريات لها نشاط مثبط للهيالورونيداز ، على سبيل المثال ، حمض الألجنيك في الطحالب البنية [81،82]. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات حول التركيب الكيميائي لأنواع الطحالب الكبيرة لتأثيرات المركبات المعزولة على الإنزيم لتقييم مساهمة كل مكون كيميائي حيث كان التركيز في هذه الدراسة على المستخلصات الخام.

كانت النتائج منسجمة مع الدراسات السابقة ، حيث أشارت إلى أن التركيب الكيميائي ومستويات النشاط الحيوي للمستخلصات تختلف اختلافًا كبيرًا بين السلالات الثلاثة (الطحالب الحمراء والخضراء والبنية) وبين الأنواع المختلفة التي تنتمي إلى نفس الشعبة تتأثر بالعمر والأنسجة يكتب. علاوة على ذلك ، يعتمد التكوين والخصائص على العديد من العوامل البيئية التي تؤثر على توزيع ونمو الطحالب الكبيرة. على سبيل المثال ، الضوء (الأشعة فوق البنفسجية) ، ودرجة الحرارة ، وتوافر المغذيات ، والتعرض للهواء ، وحركة الماء ، والتعرض للأمواج ، والملوحة. تم وصف درجة الحرارة بأنها العامل الذي له أقوى التأثيرات على تكوين الصباغ وتركيز المغذيات والملوحة والإشعاع فوق البنفسجي كعوامل تؤثر على تركيز TPC [83].

يختلف توزيع أنواع الطحالب الكبيرة باختلاف عمق المياه. المواقع أعلى الشاطئ في منطقة المد والجزر تكون أكثر إرهاقًا لأن الأنواع التي تنمو هناك ، يجب أن تتحمل التغيرات المتعددة في العوامل اللاأحيائية بسبب تغيرات المد والجزر. على سبيل المثال ، تأثير التجفيف للهواء ، والإشعاعات الشمسية العالية (عند المد المنخفض) ، والتغيرات في الملوحة ودرجة الحرارة ، وفي ظل ظروف درجات حرارة الهواء المنخفضة ، بما في ذلك التجميد. تحت علامة الماء المنخفضة ، ينتج عن زيادة العمق انخفاض سريع جدًا في شدة الضوء وعدم التعرض للإشعاع.

الطحالب التي تنمو في نطاق المد والجزر لديها حساسية أقل للإشعاع فوق البنفسجي وتتعافى بسرعة أكبر من الإجهاد الشمسي. في حين أن الطحالب التي تنمو في المنطقة الساحلية تكون أكثر حساسية للأشعة فوق البنفسجية ولديها قدرة أقل على التعافي من الإجهاد الشمسي [84]. في نفس الوقت ، يوفر عمود الماء الحماية. في هذه الدراسة ، كان التعرض لأشعة الشمس أقوى من النوع P. palmata ، مقارنة بالأنواع الأخرى. أظهرت دراسات أخرى أن تكوين MAAs يرتبط ارتباطًا مباشرًا بأشعة الشمس [85] ، مما يحمي الكائنات الحية من الأشعة فوق البنفسجية - أ و الأشعة فوق البنفسجية - ب. علاوة على ذلك ، فقد تبين أن الكمية المحددة من الألغام المضادة للأفراد انخفضت مع زيادة عمق التجميع. من المعروف أن أعشاب البحر مثل A. esculenta ، تنمو في المنطقة الساحلية العليا ولكنها تمتد أيضًا إلى أدنى منطقة بين المد والجزر فوق العلامة المائية أدناه. بمعنى أن عمود الماء يوفر حماية أقوى من النوع P. palmata. بالإضافة إلى ذلك ، تختلف الخصائص المورفولوجية ، حيث تختلف شفرات A. esculenta arethicker عن النوعين الآخرين. يو لاكتوكا ، الذي ينمو بشكل رئيسي في منطقة المد والجزر وتحت السواحل ، قادر على التمثيل الضوئي والنمو تحت إشعاعات منخفضة للغاية. تم تحديد التعرض لضوء UVB لتسريع استعادة معاملات التمثيل الضوئي لـ U. lactuca من الآثار السلبية لضوء UVA. إنه أصغر وأبسط في التركيب وأقصر عمرا (3 أشهر) من كل من A. esculenta (5-7 سنوات) و P. palmata الذي ينمو كل عام.

باختصار ، يمكن استخلاص الافتراضات التي مفادها أن الاختلافات الرئيسية في خصائص المستخلصات تكمن في التباين في مدى الحياة والخصائص المورفولوجية وظروف نمو أنواع الطحالب.

3. المواد والطرق

3.1. المواد

ايسلنديالأعشاب البحريةتم توفير s U. lactuca (طحالب خضراء) و A. esculenta (طحالب بنية) و P. palmata (طحالب حمراء) بواسطة بلح البحر الأزرق الأيسلندي والأعشاب البحرية، التي حصدت الأعشاب البحرية في بريدافجوردور (غرب أيسلندا). بعد الحصاد تم تجفيف الأعشاب البحرية (حوالي 90٪ مادة جافة) وطحنها وتعبئتها بتفريغ الهواء. تم حفظ العينات في مكان جاف ومظلم في درجة حرارة الغرفة لحين استخدامها.

تيروزينازمن الفطر ، L -3 ، 4- dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) ، الإيلاستاز من البنكرياس البورسيني ، حمض الأسكوربيك ، N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) ، الهيالورونيداز من خصى الأبقار ، كيرسيتين ، -توكوفيرول ، حمض التانيك ، 2 ، 2- ثنائي فينيل -1- بيكريل هيدرازيل (DPPH) ، 2،4 ، 6- تريريديل-إس-تريازين (TPTZ) ، ترولوكس ، فولين-سيوكالتو تم شراء الكاشف وحمض الغال ومجموعة مقايسة اللونية لنشاط الكولاجيناز (MAK293) من شركة سيجما الدريتش (سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء ملح حمض الهيالورونيك الصوديوم من شركة MakingCosmetics (ريدموند ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية). جميع المواد الكيميائية والكواشف المستخدمة كانت من الدرجة التحليلية وتم الحصول عليها من VWR International، LLC. تم استخدام الماء منزوع الأيونات (Elix® Essential ، Merck ، Darmstadt ، ألمانيا) لاستخراج وإعداد المحاليل المائية.

3.2 تصميم تجريبي

تم استخدام التصميم العاملي لتقييم آثار أنواع الأعشاب البحرية الأيسلندية (U. تقنيات (PEF plus HW) ، على التركيب الاستخراجي والنشاط الحيوي (الجدول 6). تم إجراء الاستخراج في ثلاث نسخ لكل مجموعة وتم تحليل كل نسخة مكررة في ثلاث نسخ.

3.3 استخراج المواد الحيوية من الأعشاب البحرية الأيسلندية

حفز استغلال الكتلة الحيوية للطحالب الكبيرة على مستويات مختلفة العلماء على استكشاف المزيد من تقنيات الاستخراج الصديقة للبيئة والفعالة والفعالة من حيث التكلفة ، بناءً على مناهج الاستخراج الخضراء. في هذا العمل ، تم تقييم الاستخراج بمساعدة PEF كطريقة خضراء جديدة لإنتاج المستخلصات الوظيفية ، بينما تم استخدام الاستخراج التقليدي بالماء الساخن للمقارنة. علاوة على ذلك ، تمت دراسة تأثير الجمع بين كلتا الطريقتين ، معالجة PEF للطحالب الكبيرة متبوعة بالاستخراج التقليدي بالماء الساخن ، على الاسترداد النشط بيولوجيًا. نظرًا للتثقيب الكهربائي المتوقع الذي يتم إنتاجه في أغشية الخلايا بعد المعالجة الفيزيائية ، فإن الاستخراج التالي بالماء الساخن يمكن أن يزيد من تسهيل إطلاق المادة داخل الخلايا [86] ، مما يزيد من إنتاجية الاستخراج. وهناك حاجة إلى وقت بعد المعالجة للمواد لتنتشر خارج الخلايا [87،88] ، وفي هذه التجربة انتظرت المعلقات طوال الليل حتى فصل السائل (المستخلص) عن اللب.

فيما يتعلق بوسط الاستخراج ، تم استخدام الماء المقطر لإنتاجالأعشاب البحريةمقتطفات للتغلب على القيود المتعلقة باستخدام المواد السامة والمذيبات العضوية. ثبت أن الماء مذيب جيد لاستخراج العديد من المركبات النشطة بيولوجيًاالأعشاب البحريةق [46،89-91] وهي صديقة للبيئة. بالإضافة إلى ذلك ، يشيع استخدام الماء في الاستخراج بمساعدة PEF لأنه موصل جيد للكهرباء.

3.3.1. إجراءات الاستخراج

لكل تكرار في كل مجموعة ،الأعشاب البحريةتم نقع s (15 جم) طوال الليل في درجة حرارة الغرفة (22 درجة مئوية) في ماء منزوع الأيونات (300 مل). بعد ذلك ، تمت معالجة المعلق باستخدام PEF (PEF) ، أو تسخينه (HW) أو كليهما معالج PEF وتسخينه (PEF plus HW). تم حفظ المعلقات طوال الليل في الثلاجة تليها الترشيح باستخدام ورق ترشيح خشن (20 ميكرومتر) ، ثم تم تخزين الرواسب (المستخلصات) عند 4 درجات مئوية حتى يتم تحليلها.

تم إجراء الاستخراج بمساعدة المجال الكهربائي النبضي باستخدام مولد نبضي داخلي. كان بها مكثف FuGHCK -200-2000 (FuG Elektronik GmbH ، Rosenheim ، ألمانيا) وفجوة شرارة (18.5 كيلو فولت OG75 ، Perkin-Elmer Optoelectronics ، GMBH ، Wiese baden ، ألمانيا). أنتجت معدات PEF نبضات تسوس أسية بعرض 0 .96 s وسعة 18 kV. تم استخدام غرفة معالجة زجاج شبكي بأبعاد (L × H × W) 20 × 8 × 2.5 سم ، مع أقصر مسافة بين أقطاب اللوحة ، لمعالجة المعلقات بمجال كهربائي 8 كيلو فولت / سم عند 1.2 هرتز لمدة 10 دقائق.

تم تحضير مستخلصات HW عن طريق تسخين المعلق في دورق في حمام مائي ثرموستاتي وحفظه عند 95 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة. بالنسبة للحقل الكهربائي النبضي المشترك ومعالجة التسخين ، تمت معالجة المعلقات بـ PEF ثم وضعها في دورق ، وتسخينها في حمام مائي ، وحفظها عند 95 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة.

3.3.2. قياسات الموصلية ودرجة الحموضة ودرجة الحرارة

تم قياس الموصلية الكهربائية ودرجة الحموضة لمعلقات الأعشاب البحرية بعد النقع وبعد معاملات الاستخراج ، في درجة حرارة الغرفة ، باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني (OrionStar ™ A215 pH / جهاز قياس الموصلية ، Thermo Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) مجهزًا بجهاز استشعار التوصيل و مجموعة الصمام الثلاثي الأس الهيدروجيني / ARC. علاوة على ذلك ، تم تسجيل التغيرات في درجات الحرارة بسبب المعاملات.

3.4. الملامح الطيفية لمستخلصات الأعشاب البحرية

تم قياس أطياف امتصاص UV-VIS لمستخلصات الأعشاب البحرية المختلفة لمدى يتراوح من 200 إلى 450 نانومتر باستخدام شعاع مزدوج Thermo Scientific Evolution 350 UV Vis Spectrophotometer (Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، USA) مع 1 سم كوارتزكوفيتيس. تم إجراء ثلاث عمليات مسح لكل مستخلص من الأعشاب البحرية.

3.5 تحديد إجمالي محتوى البوليفينوليك

محتوى الفينول الكلي (TPC) فيالأعشاب البحريةتم تحديد المستخلصات باستخدام كاشف Folin – Ciocalteu باتباع طريقة معدلة قليلاً وصفها Zhang [92] باستخدام مقياس الطيف الضوئي متعدد الصفيحة سكاي مولتيسكان (Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). حجم 20 ميكرولترالأعشاب البحريةتم خلط المستخلص أو المحلول القياسي التسلسلي مع 100 ميكرولتر من كاشف Folin-Ciocalteu (10 بالمائة في الماء المقطر). بعد 5 دقائق ، تمت إضافة 80 ميكرولتر من 7.5 بالمائة (حجم / وزن) محلول كربونات الصوديوم. تم تحضين خليط التفاعل عند درجة حرارة الغرفة والظلام لمدة 30 دقيقة. تم قياس الامتصاصية عند الطول الموجي 760 نانومتر. تم استخدام الماء المقطر فارغًا. تم استخدام منحنى معياري لحمض الغال لتحديد المحتوى الفينولي الكلي وتم التعبير عنه بالميكروجرام من مكافئات حمض الجاليك (GAE) لكل جرام من المادة الجافة (ميكروغرام GAE / جرام وزن جاف).

3.6 تحديد إجمالي محتوى الفلافونويد

محتوى الفلافونويد الكلي (TFC) فيالأعشاب البحريةتم تحديد المقتطفات من خلال الطريقة التي وصفها Kamtekar [93] وتكييفها مع 96- صفيحة دقيقة. باختصار ، تم خلط حجم 25 ميكرولتر من مستخلص الأعشاب البحرية أو المحلول القياسي التسلسلي مع 1 0 0 ميكرولتر من نتريت الصوديوم (0.375 بالمائة وزن / حجم). بعد 5 دقائق ، تمت إضافة 25 ميكرولتر من كلوريد الألومنيوم (3 بالمائة وزن / حجم) إلى الخليط وحضنت لمدة 6 دقائق عند درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، تمت إضافة 100 ميكرولتر من هيدروكسيد الصوديوم (2 بالمائة وزن / حجم) إلى الخليط وخلطها. على الفور ، تم قياس الامتصاصية بطول موجة يبلغ 510 نانومتر. تم استخدام الماء المقطر والإيثانول كفراغات. تم استخدام منحنى معياري من كيرسيتين (مذاب في الإيثانول) لتحديد المحتوى الفينولي الكلي وتم التعبير عنه كميكروجرام من مكافئات كيرسيتين (QE) لكل جرام من المادة الجافة (ميكروغرام QE / جرام وزن الجسم).

3.7 تحديد محتوى الكربوهيدرات

تم قياس محتوى السكريات الحرة وفقًا للطريقة الموصوفة بواسطة [94] ، مع تعديلات طفيفة. تمت إضافة 50 ميكرولتر من محلول الفينول (4 بالمائة) و ​​250 ميكرولتر من حمض الكبريتيك (96 بالمائة) إلى 100 ميكرولتر من العينة أو المحلول القياسي. بعد 10 دقائق من الحضانة عند درجة حرارة الغرفة ، تمت قراءة امتصاص الخليط عند 490 نانومتر. تم استخدام منحنى معياري للجلوكوز لتحديد محتوى الكربوهيدرات الكلي وتم التعبير عنه بالملغم من معادلات الجلوكوز (GluE) لكل جرام من المادة الجافة (مجم GluE / g dw).

3.8 الخصائص المضادة للأكسدة لمستخلصات الأعشاب البحرية

3.8.1. 2،2 ثنائي فينيل -1- بيكريل هيدرازيل (DPPH) مقايسة الكسح الجذري الحر

المضادات الأكسدةنشاط (DPPH) منالأعشاب البحريةتم تحديد المقتطفات باتباع المنهجية الموصوفة سابقًا [94] مع بعض التعديلات. باختصار ، تمت إضافة 200 ميكرولتر لوف 10.825 × 10−5 مولار من محلول DPPH إلى 100 ميكرولتر من العينة (1: 1 في ميثانول) في 96- صفيحة بئر. تم خلط نفس الحجم من DPPH مع معيار 50 ميكرولتر بالإضافة إلى 50 ميكرولتر ميثانول ثم تم تحضين العينات والمعيار في مكان مظلم عند درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. تم قياس الامتصاصية عند الطول الموجي 517 نانومتر. تم استخدام الماء المقطر كفراغ. تم حساب القدرة على تنظيف جذور DPPH باستخدام المعادلة التالية:

تأثير الكسح (نسبة مئوية)=(1 - (عينة - عينة فارغة) / (عنصر تحكم - أميثانول فارغ)) × 100 (1)

حيث يكون Acontrol هو امتصاص عنصر التحكم (محلول DPPH بدون عينة) ، والعينة A هي امتصاص عينة الاختبار (محلول DPPH بالإضافة إلى عينة الاختبار) ، والعينة الفارغة هي امتصاص العينة فقط (العينة بدون محلول DPPH) والميثانول فارغ هو امتصاص الميثانول فقط. تجاريمضادات الأكسدةتم استخدام s (حمض الأسكوربيك وحمض الغال و-توكوفيرول) كعناصر تحكم إيجابية.

cistanche هي مضادات الأكسدة

3.8.2. مقايسة أيون الحديديك لتقليل الطاقة المضادة للأكسدة (FRAP)

تم قياس نشاط FRAP وفقًا لطريقة Benzie and Strain [95]. باختصار ، تم خلط محلول الأسيتات (300 ملي مولار ، درجة الحموضة 3.6) ، 2.4 ، 6- tripyridyl-s-triazine (TPTZ) 10 ملي مولار في 40 ملي مولار من حمض الهيدروكلوريك ، و FeCl3 · 6H2O (20 ملي مولار) في نسبة 10: 1: 1 للحصول على وكيل FRAP العامل. تم تحضين خليط التفاعل عند 37 ْم لمدة 10 دقائق. تم خلط عينة 50 ميكرولتر من كل مستخلص مع 150 ميكرولتر من محلول FRAP العامل لمدة 8 دقائق عند درجة حرارة الغرفة. تم قياس امتصاص المنتج الملون Ferrous-TPTZ بطول موجة 593 نانومتر. قيم FRAP لـالأعشاب البحريةتم التعبير عن مقتطفات s كـ µM من مكافئات trolox (TE) لكل جرام من المادة الجافة.

3.8.3. 2،2 Azino-bis (3- ethylbenzothiazoline -6- sulfonic Acid) (ABTS) Assay

تم إجراء التحليل باستخدام بروتوكول إزالة اللون ABTS [76] مع بعض التعديلات. تم إنتاج جذر ABTS (ABTS. plus) عن طريق تفاعل ABTS (66 مجم) مع 1 0 مل من محلول بيرسلفات البوتاسيوم (2.45 ملي مولار). يُترك الخليط في درجة حرارة الغرفة المظلمة لمدة 12-16 ساعة قبل الاستخدام. ABTS. تم تخفيف محلول زائد بالماء حتى يكون الامتصاص 0.700 عند 734 نانومتر. ينقل خليط التفاعل (200 ميكرولتر) إلى صفيحة أميكروبلات ، ويضاف 50 ميكرولتر من العينة ثم 150 ميكرولتر من محلول الكاشف. تم اهتزاز الصفائح لمدة 10 ثوانٍ بسرعة متوسطة ، وتم قياس الامتصاصية عند 734 نانومتر بعد 5 دقائق من الحضانة عند درجة حرارة الغرفة. تم تحضير منحنى قياسي عن طريق رسم تثبيط A734nm لمعايير Trolox كدالة لتركيزاتها. مكافئ ترولوكسمضادات الأكسدةتم حساب قيمة السعة (TEAC) للعينات باستخدام المعادلة التي تم الحصول عليها من الانحدار الخطي للمنحنى القياسي الذي تم استبداله بقيم A734nm لكل عينة:

TEAC (M)=(عينة تثبيط A734nm - تقاطع) / ميل (2)

المضادات الأكسدةتم التعبير عن النشاط من حيث تركيز TEAC ، ميكرو مول / جم من الطحالب الجافة.

3.9 الأنشطة المضادة للأنزيمات لمستخلصات الأعشاب البحرية

3.9.1. فحص تثبيط الكولاجين

تم استخدام مجموعة مقايسة لونية لنشاط الكولاجين (MAK293) ، تم شراؤها من Sigma Aldrich ، لتحديد تثبيط كولاجينازالأعشاب البحريةمقتطفات. قامت المجموعة بقياس نشاط كولاجيناز باستخدام الببتيد الاصطناعي (FALGPA) الذي يحاكي بنية الكولاجين. تم تنفيذ الإجراء وفقًا لتعليمات المجموعة.

3.9.2. مقايسة تثبيط Elastase

تثبيط الإيلاستازالأعشاب البحريةتم فحص مقتطفات s في محلول TRIS المنظم بالطريقة المعدلة كما هو موضح سابقًا [96]. باختصار ، تم خلط 1 0 0 ميكرولتر من محلول عازلة 0.1 M TRIS (درجة الحموضة 8.0) ، و 25 ميكرولتر من الإيلاستاز (1 وحدة / مل في محلول TRIS المؤقت) و 25 ميكرولتر من مستخلصات العينة واحتضانها لمدة 15 دقيقة في 30 ج قبل إضافة الركيزة لبدء التفاعل. بعد وقت الحضانة ، تمت إضافة 50 ميكرولتر من محلول AAAPVN 2 ملي مولار. بعد ذلك ، تمت مراقبة الامتصاصية عند 420 نانومتر لمدة 20 دقيقة باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية تحت درجة حرارة ثابتة تبلغ 30 درجة مئوية. أخيرًا ، تم حساب تثبيط الإيلاستاز بالنسبة المئوية باستخدام المعادلة:

نسبة التثبيط=[(∆Abs / min control - ∆Abs / min sample) / ∆Abs / mincontrol] × 100 (3)

حيث Abscontrol هو امتصاص المقايسة باستخدام المخزن المؤقت بدلاً من المثبط (العينة) وعينة Abs هي امتصاص مستخلصات العينة. تم استخدام كيرسيتين كعنصر تحكم إيجابي. تم استخدام عازلة TRIS على أنها فارغة.

آثارمستخلص cistanche:مكافحة الشيخوخة

3.9.3. مقايسة تثبيط التيروزيناز

تيروزينازتم إجراء المقايسة المثبطة وفقًا للطريقة الموصوفة سابقًا بواسطة [66] باستخدام L-DOPA كركيزة. 20 ميكرولتر من العينة ، 10 ميكرولتر من الفطرالتيروزينازتم خلط المحلول (50 وحدة / مل في محلول الفوسفات) و 80 ميكرولتر من المخزن المؤقت للفوسفات (الرقم الهيدروجيني=6 .8) في صفيحة ميكروسكوبية وحضنت مسبقًا عند 37 درجة مئوية لمدة 5 دقائق. بعد ذلك ، تمت إضافة 90 ميكرولتر من L-DOPA (2 مجم / مل). تمت مراقبة تكوين الدوباكروم على الفور لمدة 20 دقيقة عند 475 نانومتر في قارئ صفيحة ميكروسكوبية تحت درجة حرارة ثابتة تبلغ 37 درجة مئوية. النسبة المئوية لتثبيطالتيروزينازتم حساب الإنزيم باستخدام المعادلة:

نسبة التثبيط=[(∆Abs / mincontrol - ∆Abs / min sample) / ∆Abs / mincontrol] × 100 (4)

حيث التحكم في القيمة المطلقة هو امتصاص المقايسة باستخدام المخزن المؤقت بدلاً من المثبط (العينة) وعينة Abs هي امتصاص مستخلصات العينة. تم استخدام كيرسيتين كعنصر تحكم إيجابي. تم استخدام المخزن المؤقت للفوسفات فارغًا.

3.9.4. مقايسة تثبيط الهيالورونيداز

تم قياس النشاط المثبط للهيالورونيداز كما هو موضح سابقًا بواسطة [66] مع بعض التعديلات. حجم 1 0 0 ميكرولتر من النوع -1- S bovine testes hyaluronidase (21 0 0 U / mL) مذاب في 0. تم خلط محلول أسيتات 1 مولار (درجة الحموضة 3.5) مع 100 ميكرولتر من المستخلص واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. تمت إضافة حجم 200 ميكرولتر من 6 ملي مولار من كلوريد الكالسيوم إلى خليط التفاعل ، ثم تم تحضين الخليط عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. تمت معالجة Ca2 بالإضافة إلى هيالورونيداز المنشط بـ 250 ميكرولتر من هيالورونات الصوديوم (1.2 مجم / مل) مذابة في محلول أسيتات 0.1 مولار (درجة الحموضة 3.5) ، ثم تم تحضينها في حمام مائي عند 37 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة. تمت إضافة 50 ميكرولتر من 0.9 ميكرولتر من هيدروكسيد الصوديوم و 100 ميكرولتر من 0.2 ميكرولتر من بورات الصوديوم إلى خليط التفاعل ثم تحضينها في حمام مائي مغلي لمدة 5 دقائق. التبريد اللاحق لدرجة حرارة الغرفة ، تمت إضافة 250 ميكرولتر من محلول بيتا-ثنائي ميثيل أمينوبنزالديهيد (DAMB) إلى خليط التفاعل. تم تحضير محلول DAMB بإذابة 0.25 جم من DAMB في 21.88 مل من حمض الأسيتيك بنسبة 100٪ و 3.12 مل من حمض الهيدروكلوريك 10N. تمت معالجة مجموعة التحكم بـ 100 ميكرولتر من 5 في المائة من الماء بدلاً من المستخلص. تم قياس الامتصاص عند الطول الموجي 585 نانومتر بعد 45 دقيقة. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط الإنزيم باستخدام المعادلة التالية:

تثبيط النسبة المئوية=[(Abscontrol - Abssample) / Abscontrol] × 100 (5)

حيث التحكم في القيمة المطلقة هو امتصاص المقايسة باستخدام المخزن المؤقت بدلاً من المثبط (العينة) وعينة Abs هي امتصاص مستخلصات العينة. يستخدم حمض التانيك كمرجعمعيار.

3.10. تحليل احصائي

تم حساب متوسط ​​التحليل الثلاثي لكل مستخرج واستخدامه للعثور على القيم المتوسطة والانحرافات المعيارية لكل مجموعة (ن {{0}}). تم تطبيق النماذج الخطية العامة (GLM) للعوامل الثابتة لتقييم التأثيرات الرئيسية والتفاعلات ثنائية الاتجاه للعوامل التجريبية (الأنواع وطرق الاستخراج) على المتغيرات المقاسة. علاوة على ذلك ، تم استخدام اختبار ANOVA واختبار Tukey-Kramer لتحديد الفروق المعنوية (p <0.05) بين="" المجموعتين.="" تم="" استخدام="" ارتباط="" بيرسون="" لتقييم="" العلاقة="" الخطية="" بين="" المتغيرات.="" تم="" استخدام="" تحليل="" المكون="" الرئيسي="" (pca)="" لاكتشاف="" البنية="" في="" العلاقة="" بين="" المتغيرات="" المقاسة="" والعوامل="" التجريبية.="" يقلل="" thepca="" البيانات="" الضخمة="" إلى="" مجموعة="" صغيرة="" من="" التوليفات="" الخطية="" من="" المتغيرات="" ذات="" الصلة="" (أي="" العوامل)="" بناءً="" على="" أنماط="" الارتباط="" بين="" المتغيرات="" الأصلية.="" يمكن="" استخدام="" مجموعات="" الخواص="" الخطية="" الناتجة="" لتحديد="" خصائص="" منتج="" معينة="" بناءً="" على="" المتغيرات="" التي="" تمت="" دراستها.="" تم="" إجراء="" جميع="" التحليلات="" الإحصائية="" باستخدام="" ncss="" 2020="" statisticalsoftware="" (2020)="" (ncss،="" llc.،="" kaysville،="" ut،="">

مستخلص cistanche لمكافحة الشيخوخة

4 - نتائج

أظهرت نتائج تجربة الفحص الأولى هذه إمكانات ثلاثة آيسلنديينالأعشاب البحريةمن خلال توفير تأثيرات مفيدة فعالة عبر عدة مسارات. النهج الأخضر الذي تم تطويره باستخدام المجالات الكهربائية النبضية المائية أظهر نتائج مماثلة لاستخراج الماء الساخن التقليدي ، حيث أظهر العديد من المزايا مثل الطبيعة غير الحرارية ووقت الاستخراج الأقصر (10 دقائق مقابل 45 دقيقة). من بين الأنواع الثلاثة من الطحالب ، أظهرت الطحالب البنية A. esculenta أعلى محتوى من TPC و TFC كما أظهرت أكبر نسبةمضادات الأكسدةالقدرات علاوة على ذلك ، أظهرت المستخلصات المائية A. esculenta أنشطة تثبيط أفضل من P. palmaria و U. lactuca تجاه الكولاجيناز والإيلاستاز والتيروزيناس والهيالورونيداز باعتبارها أكثر العناصر الواعدة.الأعشاب البحريةالأنواع ذات الفعالية الممتازة المضادة للأنزيمات لاستخدامها في تبييض البشرة ،مكافحة الشيخوخةوصحة الجلد. ومن المثير للاهتمام أن أ. أظهرت مستخلصات esculenta التي تم إنتاجها بطريقة PEF تثبيط كولاجيناز بنسبة 91 في المائة ، أعلى من نشاط التثبيط الموضح في الاستخراج التقليدي بالماء الساخن وحتى أعلى من المثبط الذي توفره المجموعة التجارية. في الختام ، تشير دراستنا الأولية إلى أن الآيسلنديةالأعشاب البحرية- المستخلصات ذات الأساس ، وخاصة المستخلصات من الطحالب البنية A. esculenta ، التي يتم إنتاجها بواسطة الاستخلاص بمساعدة الحقول الكهربائية النبضية المائية ، هي مكونات وظيفية محتملة يمكن استخدامها كمركبات فعالة في مستحضرات التجميل والتركيبات التجميلية في المستقبل القريب.

مراجع

1. Ariede ، MB ؛ كانديدو ، TM ؛ جاكومي ، ALM ؛ فيلاسكو ، MVR ؛ دي كارفالو ، JCM ؛ الطفل ، صفات التجميل AR للطحالب - Areview. الطحالب ريس. 2017 ، 25 ، 483-487. [CrossRef]

2. مكّار ، إتش بي إس ؛ تران ، جي ؛ هيوز ، ف. جيجر ريفيردين ، إس. ليسير ، م. ليباس ، ف. أنكرز ، ب.الأعشاب البحرية للوجبات الغذائية للماشية: مراجعة. تغذية العلوم. تكنول. 2016 ، 212 ، 1–17. [CrossRef]

3. O'Connor، J .؛ ميني ، إس. وليامز ، جورجيا ؛ Hayes، M. استخراج البروتين من أربعة أعشاب بحرية مختلفة باستخدام ثلاث استراتيجيات فيزيائية قبل المعالجة. جزيئات 2020 ، 25 ، 2005. [CrossRef]

4. ماكسيمو ، ب. فيريرا ، إل إم ؛ برانكو ، ب. ليما ، ص. Lourenço ، A. المستقلبات الثانوية والنشاط البيولوجي للطحالب الكبيرة الغازية في جنوب أوروبا. المخدرات 2018 ، 16 ، 265. [CrossRef]

5. باركيا أنا. ساري ، ن. مانينغ ، ريال الطحالب الدقيقة للمنتجات عالية القيمة من أجل صحة الإنسان والتغذية. مارس المخدرات 2019،17 ، 304. [CrossRef]

6. جوميز زافاجليا ، أ. برييتو لاج ، ماساتشوستس ؛ خيمينيز لوبيز ، سي. ميجوتو ، جي سي ؛ Simal-Gandara، J. إمكانات الأعشاب البحرية كمصدر للمكونات الوظيفية لقيمة بريبيوتيك ومضادات الأكسدة. مضادات الأكسدة 2019، 8، 406. [CrossRef] [PubMed]

7. صالحي ب. شريفي راد ، ج. سيكا ، AML ؛ بينتو ، DCGA ؛ ميشالاك ، أنا. ترينكون ، أ. ميشرا ، ا ف ب ؛ نيجام ، م. زم ، دبليو. Martins، N. الاتجاهات الحالية للأعشاب البحرية: النظر في التركيب الكيميائي ، وعلم الأدوية النباتية ، والتطبيقات التجميلية. جزيئات 2019 ، 24 ، 4182. [CrossRef]

8. الغزالي ، ع. قريبا ، الكمبيوتر الشخصي ؛ موتوم ، د. Nguyen، B. الصحة ومستحضرات التجميل: التحقيق في قيم المستهلكين لشراء منتجات العناية الشخصية العضوية. J. البيع بالتجزئة. تستهلك. سيرف. 2017 ، 39 ، 154–163. [CrossRef]

9. Amberg، N .؛ Fogarassy، C. سلوك المستهلك الأخضر في سوق مستحضرات التجميل. Resources 2019، 8، 137. [CrossRef]

10. Pereira، L. الأعشاب البحرية كمصدر للمواد النشطة بيولوجيا وعلاج العناية بالبشرة - مستحضرات التجميل ، العلاج بالعلاج بمياه البحر ، والعلاج بمياه البحر. مستحضرات التجميل 2018 ، 5 ، 68. [CrossRef]

11. مارتينز ، أ. فييرا ، هـ. جاسبار ، هـ. Santos، S. تسويق المنتجات البحرية الطبيعية في الصناعات الدوائية والصناعات التجميلية: نصائح للنجاح. المخدرات 2014 ، 12 ، 1066-1101. [CrossRef] [PubMed]

12- أغاتونوفيتش - كوسترين ، إس. Morton، D. Cosmeceuticals المشتقة من المواد النشطة بيولوجيًا الموجودة في الطحالب البحرية. علم المحيطات 2013 ، 1 ، 106.

13. Wang، H.-MD؛ تشين ، سي-سي ؛ هوينه ، ب. تشانغ ، ج. استكشاف إمكانية استخدام الطحالب في مستحضرات التجميل. بيوريسور. تكنول. 2015،184 ، 355–362. [CrossRef]

14. جهان أ. أحمد ، ع. فاطمة ، ن. أنصاري ، فيرجينيا ؛ أختار ، ياء ، مركبات الطحالب النشطة بيولوجيًا في صناعة مستحضرات التجميل: مراجعة ، Phycologia 2017 ، 56 ، 410-422. [CrossRef]

15. مورون ، ج. ألفيوس ، أ. فاسكونسيلوس ، ف. Martins، R. يكشف عن إمكانات البكتيريا الزرقاء في مستحضرات التجميل ومستحضرات التجميل - نهج جديد نشط بيولوجيًا. الطحالب ريس. 2019، 41، 101541. [CrossRef]

16- سيكوش ، أ. م. Jerkovi´c، I .؛ مولنار ، م. ubari´c ، د. Joki´c، S. الاتجاهات الجديدة لتطبيقات منتجات الطحالب الطبيعية الكبيرة. نات. همز ريس. 2019 ، 37 ، 1-12. [CrossRef]

17. Thring، TS؛ هيلي ، ب. Naughton، DP أنتي كولاجيناز ومضاد للإيلاستاز ومضاد للأكسدة من المستخلصات من 21 نباتًا. BMC مكمل. بديل. ميد. 2009 ، 9 ، 27. [CrossRef]

18. جاكوبسن ، سي. Sørensen، AM؛ هولدت ، سي. أكوه ، سي سي ؛ Hermund ، مصدر DB واستخلاص وتوصيف وتطبيقات مضادات الأكسدة الحديثة من الأعشاب البحرية. Annu. القس علوم الغذاء. تكنول. 2019 ، 10 ، 541-568. [CrossRef]

19. كاستيجون ، ن. Señoráns، FJ الاستخراج المتزامن وتجزئة أوميغا -3 أسيل جلسرين وجليكوليبيدات من الكتلة الحيوية الطحلبية الرطبة من Nannochloropsis gaditana باستخدام سوائل مضغوطة. الطحالب ريس. 2019 ، 37 ، 74-82. [CrossRef]

20- محمد ، MEA ؛ عيسى ، AHA المجالات الكهربائية النبضية لتكنولوجيا تجهيز الأغذية. هيكل. Funct. اغذية المهندس. 2012 ، 11 ، 275-306.

21. Geada، P.؛ رودريغز ، ر. لوريرو ، إل. بيريرا ، ر. فرنانديز ، ب. تيكسيرا ، جا ؛ فاسكونسيلوس ، ف. Vicente، AA Electrotechnologies مطبقة على التكنولوجيا الحيوية للطحالب الدقيقة - التطبيقات والتقنيات والاتجاهات المستقبلية. تجديد. حَافَظ على. القس الطاقة. 2018، 94، 656–668. [CrossRef]

22 ـ رحمه الله. باربا ، ف. Aliakbarian ، ب. ؛ دونسو ، ف. باتارو ، جي ؛ دياس ، د. Juliano، P. تقنيات بديلة مبتكرة لاستخراج الكاروتينات من الطحالب الدقيقة والأعشاب البحرية. المخدرات 2016، 14، 214. [CrossRef] [PubMed]

23. فوروبييف ، إي. Lebovka، N. 2 - استخلاص من الأطعمة والمواد الحيوية المعززة بالطاقة الكهربائية النبضية. في تقنيات معالجة الأغذية المبتكرة ؛ Knoerzer ، K. ، Juliano ، P. ، Smithers ، G. ، Eds. ؛ Woodhead للنشر: Sawston ، المملكة المتحدة ، 2016 ؛ ص 31-56.

24. كافربوك أ. سميتانا ، إس. دي فوس ، ر. شوارتز ، سي. Toepfl، S. بارنياكوف ، أو. الاستخراج المستدام للمكونات القيمة من سبيرولينا بمساعدة تكنولوجيا المجالات الكهربائية النبضية. الطحالب ريس. 2020، 48، 101914. [CrossRef]

25. بارنياكوف ، أو. ؛ باربا ، ف. غريمي ، ن. مارشال ، إل. جوبو ، إس. Lebovka ، N. ؛ Vorobiev، E. ساعد المجال الكهربائي النبضي على استخلاص مركبات ذات قيمة غذائية من الطحالب الدقيقة Nannochloropsis spp. باستخدام خليط ثنائي من المذيبات العضوية والماء. علوم الغذاء. إميرج. تكنول. 2015 ، 27 ، 79-85. [CrossRef]

26. شيرير د. كرست ، د. فراي ، دبليو. مولر ، ج. نيك ، ب. Gusbeth، C. يتم استخلاص البروتين بمساعدة المجال الكهربائي النبضي (PEF) من ChlorellaVulgaris بواسطة عملية إنزيمية بعد موت الخلية. الطحالب ريس. 2019، 41، 101536. [CrossRef]

27. ناصري ، أ. مارينيو ، جي إس ؛ هولدت ، سي. Bartela ، JM ؛ Jacobsen ، C. الاستخراج بمساعدة الإنزيم وتوصيف بروتين من الأعشاب البحرية الحمراء بالماريا بالميتات. الطحالب ريس. 2020، 47، 101849. [CrossRef]

الاعتراض

28. روبن أ. كازير ، م. كيس ، م. إسرائيل ، أ. فراي ، دبليو. مولر ، ج. ليفني ، YD ؛ Golberg، A. مركزات البروتين الوظيفية المستخرجة من Green Marine Macroalga Ulva sp. ، بواسطة الحقول الكهربائية النبضية ذات الجهد العالي والضغط الميكانيكي. ACS استدامة. تشيم. المهندس 2018، 6، 13696–13705. [CrossRef]

29. Einarsdóttir، R .؛ Þórarinsdóttir ، KA ؛ Aðalbjörnsson ، BV ؛ غوموندسون ، م. Marteinsdóttir، G.؛ Kristbergsson، K. تأثير معاملات المعالجة بمساعدة المجال الكهربائي النبضي على الاستخلاص المائي الخام من Laminaria digitata. J. أبل. فيكول. 2021 ، 333287 - 3296. [CrossRef]

30. Postma، PR؛ Cerezo-Chinarro ، O. ؛ أكرمان ، RJ ؛ أوليفيري ، جي ؛ Wijffels ، RH ؛ براندنبورغ ، واشنطن ؛ Eppink ، MHM Biorefinery من الطحالب الكبيرة Ulva Lactuca: استخراج البروتينات والكربوهيدرات عن طريق التفكك الخفيف. J. أبل. فيكول. 2018 ، 30 ، 1281–1293. [CrossRef]

31 - Zbinden، MDA؛ شتورم ، BSM ؛ نورد ، RD ؛ كاري ، و. مور ، د. شينوجل ، هـ. Stagg-Williams ، المجال الكهربائي النبضي SM (PEF) كمعالجة تكثيفية لاستخراج دهون المذيبات الأكثر اخضرارًا من الطحالب الدقيقة. التكنولوجيا الحيوية. بيونج. 2013 ، 110 ، 1605–1615. [CrossRef]

32. سيلفي ، أ. باباكريستو ، أنا. فوستنر ، ر. ستراسنر ، ر. شيرمر ، م. ليبر ، ك. قوه ، ب. إنترانت ، إل. بوستن ، سي ؛ استخلاص الدهون من الطحالب الدقيقة الرطبة Auxenochlorella protothecoides باستخدام معالجة المجال الكهربائي النبضي وخلائط الإيثانول والهكسان. AlgalRes. 2018، 29، 212–222. [CrossRef]

33. Chittapun، S. Jonjaroen ، V. ؛ خمرانجسي ، ك. Charoenrat، T.C-phycocyanin استخراج من اثنين من البكتيريا الزرقاء في المياه العذبة عن طريق الذوبان والتجميد وتقنيات المجال الكهربائي النبضي لتحسين كفاءة الاستخراج والنقاء. الطحالب ريس. 2020، 46، 101789. [CrossRef]

34. Aryee، ANA؛ أجيي ، د. Akanbi، TO استعادة واستخدام أصباغ الأعشاب البحرية في معالجة الأغذية. بالعملة. رأي. علوم الغذاء 2018، 19، 113-119. [CrossRef]

35. Nowacka، M.؛ تابي ، إس. Wiktor ، أ. ريباك ، ك. Miszczykowska، A.؛ Czyzewski ، J. ؛ دروزدزال ، ك. Witrowa-Rajchert ، د. Tylewicz ، يو. تأثير المجال الكهربائي النبضي على استخلاص المركبات النشطة بيولوجيا من جذر الشمندر. الأطعمة 2019 ، 8 ، 244. [CrossRef]

36. Martínez، JM؛ ديلسو ، سي. ألفاريز ، أنا ؛ Raso ، J. الاستخراج بمساعدة المجال الكهربائي النبضي لمركبات قيمة من الكائنات الحية الدقيقة. القس علوم الغذاء. الغذاء ساف. 2020 ، 19 ، 530-552. [CrossRef]

37. باتارو ، ج. Goettel ، M. ؛ سترايسنر ، ر. جوسبث ، سي. فيراري ، جي. Frey، W. تأثير علاج PEF على استخلاص المركبات القيّمة من الطحالب الدقيقة C. vulgaris. تشيم. م. عبر. 2017 ، 57 ، 67-72.

38. Brunton، NP؛ المجالات الكهربائية النبضية Luengo ، لاستخراج المستقلبات الثانوية من النباتات. في المجالات الكهربائية النبضية لاستخراج المستقلبات الثانوية من النباتات ؛ Miklavcic، D.، Ed.؛ Springer International Publishing: Cham، Switzerland، 2017، pp. 1-15.

39. Schiener، P.؛ أسود ، دينار كويتي ؛ ستانلي ، ماجستير ؛ Green، DH الاختلاف الموسمي في التركيب الكيميائي لأنواع عشب البحر Laminaria digitata ، Laminaria hyperborea ، Saccharina latissima و Alaria esculenta. J. أبل. فيكول. 2015 ، 27 ، 363–373. [CrossRef]

40. Salgado، LT؛ تومازيتو ، ر. سينيلي ، ليرة لبنانية ؛ فارينا ، م. Filho، GMA تأثير ألجينات الطحالب البنية على قدرة المركبات الفينولية على امتصاص الأشعة فوق البنفسجية في المختبر. براز. J. Oceanogr. 2007 ، 55 ، 145-154. [CrossRef]

41. Orfanoudaki، M.؛ هارتمان ، أ. كارستن ، يو ؛ Ganzera ، M. التنميط الكيميائي للأحماض الأمينية الشبيهة بالميكوسبورين في ثلاثة وعشرين نوعًا من الطحالب. ياء فيكول. 2019 ، 55 ، 393-403. [CrossRef]

42. Pangestuti، R .؛ Siahaan ، EA ؛ كيم ، S.-K. المواد الواقية من الضوء المشتقة من الطحالب البحرية. الأدوية 2018، 16، 399. [CrossRef] [PubMed]

43. Schneider، G .؛ فيغيروا ، فلوريدا ؛ فيجا ، ياء ؛ تشافيس ، ب. ألفاريز غوميز ، ف. كوربي ، ن. Bonomi-Barufi، J. خصائص الحماية الضوئية لكائنات التمثيل الضوئي البحرية التي تنمو في مناطق عالية التعرض للأشعة فوق البنفسجية: تطبيقات مستحضرات التجميل. الطحالب ريس. 2020،49 ، 101956. [CrossRef]

44. نيشيدا ي. كوماغاي ، واي. ميتشيبا ، إس. ياسوي ، ح. Kishimura، H. كفاءة الاستخراج والقدرة المضادة للأكسدة للأحماض الأمينية الشبيهة بالميكوسبورين من Red Alga Dulse Palmaria palmitate في اليابان. 2020، 18، 502. [CrossRef] [PubMed]

45. Rehm، E.؛ دالغليش ، ف. هووت ، م. ماتيولي ، إس. Archambault ، ص. لامبرت جيرارد ، إس. بيشي ، م. Lagunas-Morales، J. مقارنة تقنيات الامتصاص الفلورية والتفاضلية LiDAR للكشف عن الكتلة الحيوية للطحالب مع التطبيقات على ركائز القطب الشمالي. الاستشعار داخل المحيطات والمراقبة X ؛ الجمعية الدولية للبصريات والضوئيات: بيلينجهام ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 2018 ؛ المجلد 10631 ، ص. 106310 / ض.

46. ​​Wang، T .؛ Jonsdottir ، R. ؛ Ólafsdóttir، G. المركبات الفينولية الكلية ، الكسح الجذري واستخلاب المعادن من مستخلصات الأعشاب البحرية الأيسلندية. الغذاء تشيم. 2009 ، 116 ، 240 - 248. [CrossRef]

47. Bedoux، G.؛ هاردوين ، ك. بيرلوت ، أ. Bourgougnon، N. الفصل الثاني عشر - المكونات النشطة بيولوجيًا من الأعشاب البحرية: التطبيقات التجميلية والتنمية المستقبلية. في التقدم في البحوث النباتية ؛ Bourgougnon، N.، Ed.؛ المطبعة الأكاديمية: كامبريدج ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 2014 ؛ المجلد 71 ، الصفحات من 345 إلى 378.

48. Roleda، MY؛ Marfaing ، H. ديسنيكا ، ن. Jónsdóttir، R .؛ Skjermo ، J. ؛ ريبورس ، سي ؛ Nitschke، U. الاختلافات في محتويات البوليفينول والمعادن الثقيلة من الكتلة الحيوية السائبة للأعشاب البحرية التي يتم حصادها من البرية والمزروعة: تقييم المخاطر الصحية والتأثيرات على تطبيقات الغذاء. مراقبة الأغذية 2019 ، 95 ، 121-134. [CrossRef]

49- أمة ف. Tiwari ، BK ؛ جايسوال ، أ. كوندون ، ك. جارسيا فاكيرو ، م. O'Doherty ، J. ؛ أودونيل ، سي ؛ راجوريا ، ج. تحسين تردد الموجات فوق الصوتية ووقت الاستخراج والمذيب لاستعادة البوليفينول والفلوروتانينات ونشاط مضادات الأكسدة المصاحبة من الأعشاب البحرية البنية. مارس المخدرات 2020 ، 18 ، 250. [CrossRef]

50. أفونسو ، سي. ماتوس ، ياء ؛ غواردا ، أنا ؛ جوميز بيسبو ، أ. جوميز ، ر. كاردوسو ، سي ؛ Gueifão، S. ديلجادو ، أنا. كويلو ، أنا. كاستانهيرا ، أنا. وآخرون: الإمكانات النشطة والتغذوية في Alaria esculenta و Saccharina latissima. J. أبل. فيكول. 2021 ، 33 ، 501-513. [CrossRef]

51. Cotas، J.؛ لياندرو ، أ. مونتيرو ، ب. باتشيكو ، د. فيغيرينها ، أ. Gonçalves، AMM؛ دا سيلفا ، جي جي ؛ Pereira، L. Seaweed Phenolics: من الاستخراج إلى التطبيقات. مارس المخدرات 2020 ، 18 ، 384. [CrossRef]

52. Farasat، M.؛ خافاري نجاد ، ر. Nabavi ، SM ؛ نامجويان ، ف. نشاط مضاد للأكسدة ، إجمالي الفينولات ومحتويات الفلافونويد لبعض الأعشاب البحرية الخضراء الصالحة للأكل من السواحل الشمالية للخليج العربي. IJPR 2014، 13، 163-170. [PubMed]

53. Manivannan، K.؛ ثيروماران ، ج. ديفي ، جي كي ؛ أنانثارامان ، ص. Balasubramanian، T. التركيب التقريبي لمجموعة مختلفة من الأعشاب البحرية من مياه فيدالاي الساحلية (خليج مانار): الساحل الجنوبي الشرقي للهند. الشرق الأوسط J. Sci. الدقة. 2009 ، 4 ، 72-77.

54. Mišurcová، L .؛ شكروفانكوفا ، إس. ساميك ، د. أمبروتشوفا ، ياء ؛ Mach ˚u، L. الفصل 3 - الفوائد الصحية للسكريات الطحلبية في التغذية البشرية. في التقدم في بحوث الغذاء والتغذية ؛ هنري ، ج. ، إد. المطبعة الأكاديمية: كامبريدج ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 2012 ؛ المجلد 66 ، ص 75 - 145.

55. Lafarga، T .؛ Acién-Fernández، FG؛ Garcia-Vaquero، M. الببتيدات والكربوهيدرات النشطة بيولوجيًا من الأعشاب البحرية للتطبيقات الغذائية: التواجد الطبيعي ، والعزل ، والتنقية ، والتعرف. الطحالب ريس. 2020، 48، 101909. [CrossRef]

56- مطربة س. مينيتا ، MDN ؛ كانغ ، جي واي. جيونج ، جي تي ؛ سوسانتو ، أب ؛ برابوو ، ري ؛ هونغ ، Y.-K. إنتاج الإيثانول الحيوي من التحلل المائي لبالماريا بالمياتا باستخدام حمض الكبريتيك والتخمير بخميرة البيرة. J. أبل. فيكول. 2014، 26، 687–693. [CrossRef]

57. دومينغيز ، هـ. Loret ، EP Ulva lactuca ، مصدر المشاكل والثروات المحتملة. Mar. Drugs 2019، 17، 357. [CrossRef]

58. Kidgell، JT؛ ماجنوسون ، م. دي نيس ، ر. Glasson ، CRK Ulvan: مراجعة منهجية للاستخراج والتكوين والوظيفة. 2019، 39، 101422. [CrossRef]

59. Habeebullah، SFK؛ Alagarsamy، S. عرنوس أ. جاكوبسن ، ج.استخراج المكونات الأنزيمية من مضادات الأكسدة من الأعشاب البحرية الدنماركية وتوصيف المكونات النشطة. الطحالب ريس. 2021 ، 56 ، 102292. [CrossRef]

60. يوان، واي. تشانغ ، ياء ؛ مروحة ، ياء ؛ كلارك ، ياء ؛ شين ، ص. لي ، واي. Zhang، C. استخلاص المركبات الفينولية بمساعدة الميكروويف من أربعة أنواع اقتصادية من الطحالب الكبيرة البني وتقييم أنشطتها المضادة للأكسدة وتأثيراتها المثبطة على الأميليز ، والجلوكوزيداز ، والليباز البنكرياس والتيروزيناز. كثافة العمليات الدقة الغذائية. ياء 2018، 113، 288–297. [CrossRef]

61. Balboa، EM؛ كوندي ، إي. موري ، أ. فالكي ، إي. Domínguez، H. في خصائص مضادات الأكسدة في المختبر من المستخلصات الخام ومركبات من الطحالب البنية. الغذاء تشيم. 2013 ، 138 ، 1764-1785. [CrossRef]

62. Kainama، H.؛ فاطماواتي ، س. سانتوسو ، م. بابيلايا ، بي إم ؛ ت. إرسام ، علاقة جمع الجذور الحرة ومحتويات الفينول والفلافونويد الكلية لغارسينيا لاسوار بام. فارم. تشيم. ياء 2020، 53، 1151–1157. [CrossRef]

63. Dang، TT؛ فان فونج ، س. شريدر ، إم جي ؛ بوير ، مولودية ؛ فان ألتينا ، أ. Scarlett ، CJ تحسين ظروف الاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية للمحتوى الفينولي والأنشطة المضادة للأكسدة في طحلب Hormosira bankii باستخدام منهجية الاستجابة السطحية. J. أبل. فيكول. 2017 ، 29 ، 3161-3173. [CrossRef]

64. Couteau، C.؛ Coiffard، L. الفصل 14 - تطبيق الأعشاب البحرية في مستحضرات التجميل. في الأعشاب البحرية في الصحة والوقاية من الأمراض ؛ فلورنس ، ج. ، ليفين ، آي ، محرران ؛ المطبعة الأكاديمية: سان دييغو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 2016 ؛ ص 423 - 441.

65- تسوكاهارا ك. تاكيما ، واي. موريواكي ، إس. تسوجي ، ن. سوزوكي ، واي. فوجيمورا ، تي. Imokawa، G. التثبيط الانتقائي للأرومة الليفية الجلدية يؤدي الإيلاستاز إلى منع يعتمد على التركيز لتكوين التجاعيد المستحثة بالأشعة فوق البنفسجية ب. J. التحقيق. ديرماتول. 2001117 ، 671-677. [CrossRef]

66. Liyanaarachchi، GD؛ Samarasekera ، JKRR ؛ Mahanama ، KRR ؛ Hemalal ، KDP Tyrosinase ، الإيلاستاز ، الهيالورونيداز ، النشاط المثبط والمضاد للأكسدة للنباتات الطبية السريلانكية لمستحضرات التجميل الجديدة. إنتاج المحاصيل الصناعية. 2018 ، 111 ، 597-605. [CrossRef]

67. Gupta، PL؛ راجبوت ، م. أوزا ، ت. تريفيدي ، يو ؛ سانغفي ، ج. سمعة المنتجات الميكروبية في صناعة مستحضرات التجميل. نات. المنتج. 2019 ، 9 ، 267-278. [CrossRef] [PubMed]

68. Zolghadri، S.؛ بهرامي ، أ. حسن خان ، MT ؛ مونوز مونوز ، ياء ؛ جارسيا مولينا ، ف. جارسيا كانوفاس ، ف. Saboury، AA A مراجعة شاملة لمثبطات التيروزيناز. J. مثبط الإنزيم. ميد. 2019 ، 34 ، 279-309. [CrossRef]

69. Couteau، C.؛ كوافارد ، L. Phycocosmetics ، مستحضرات التجميل البحرية الأخرى ، مستحضرات تجميل معينة تم تصنيعها باستخدام الموارد البحرية. Mar. أدوية 2020 ، 18 ، 322. [CrossRef]

70. Sari، DM ؛ أنور ، إي. Arifianti ، AE مضادات الأكسدة ومثبطات التيروزيناز من مستخلصات الإيثانول من الأعشاب البحرية البنية (Turbinaria conoides) كمكون تفتيح. فارم. ياء 2019 ، 11 ، 379-382. [CrossRef]

71. Brenner، M.؛ السمع ، VJ الدور الوقائي للميلانين ضد أضرار الأشعة فوق البنفسجية في جلد الإنسان. فوتوتشيم. فوتوبيول. 2008 ، 84.539-549. [CrossRef] [PubMed]

72. Lee، SY ؛ بايك ، ن. نام ، ت. مثبطات التيروزيناز الطبيعية وشبه الاصطناعية والاصطناعية. J. مثبط الإنزيم. ميد. تشيم. 2016 ، 31،1-13. [CrossRef] [PubMed]

73. Ferreres، F.؛ لوبيز ، جي ؛ جيل إزكويردو ، أ. أندرادي ، بي بي ؛ سوزا ، سي ؛ موجا ، تي. Valentão ، P. Phlorotannin مقتطفات من Fucales تم تمييزها بواسطة HPLC-DAD-ESI-MSn: مقاربات للقدرة التثبيطية للهيالورونيداز وخصائص مضادات الأكسدة. مارس الأدوية 2012 ، 10 ، 2766-2781. [CrossRef] [PubMed]

74. فياض س. نعمة ، ر. تنوري ، م. ليسلييه ، إي. بيشون ، سي ؛ Morin ، P. Macroalga Padina Pavonica ، المستخلصات المائية التي تم الحصول عليها عن طريق استخراج السائل المضغوط والاستخراج بمساعدة الميكروويف تمنع نشاط الهيالورونيداز كما هو موضح بواسطة الرحلان الكهربائي. كروماتوجر. أ 2017 ، 1497 ، 19-27. [CrossRef] [PubMed]

75- أثوكورالا ي. كيم ، ك. جيون ، Y.-J. خصائص مضادات التكاثر ومضادات الأكسدة من التحلل الأنزيمي من الطحالب البنية ، Ecklonia cava. الغذاء تشيم. توكسيكول. 2006 ، 44 ، 1065-1074. [CrossRef]

76. Jiménez-Escrig، A.؛ Gómez-Ordóñez، E .؛ Rupérez، P. الأعشاب البحرية البنية والحمراء كمصادر محتملة للمغذيات المضادة للأكسدة. تطبيق فيكول. 2012 ، 24 ، 1123-1132. [CrossRef]

77. Karawita، R .؛ Siriwardhana ، N. ؛ لي ، ك.و. هيو ، إم-إس ؛ يو ، آي-ك. لي ، Y.-D. ؛ جيون ، Y.-J. تقوم أنواع الأكسجين التفاعلية من الكسح ، والتخشب المعدني ، وتقليل الطاقة وخصائص تثبيط بيروكسيد الدهون لكسور المذيبات المختلفة من Hizikia fusiformis. الدقة الغذائية. تكنول. 2005 ، 220 ، 363-371. [CrossRef]

78- Jormalainen، V .؛ Honkanen، T. الاختلاف في الانتقاء الطبيعي للنمو والفلوروتانين في الطحالب البنية Fucus vesiculosus.J. تطور. بيول. 2004 ، 17 ، 807-820. [CrossRef] [PubMed]

79. Koivikko، R .؛ لوبونين ، ياء ؛ Pihlaja ، K. Jormalainen ، V. تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء للفلوروتانينات من الطحالب البنية Fucus vesiculosus. فيتوشيم. شرجي. 2007 ، 18 ، 326-332. [CrossRef] [PubMed]

80. ماريتشيك ، ف. Mikyška، A.؛ هامبل ، د. Cejka ، P. ؛ Neuwirthov ˇ á، J .؛ مالاتشوفا ، أ. طرق Cerkal و R. ABTS و DPPH كأداة لدراسة القدرة المضادة للأكسدة لشعير الربيع والشعير. J. الحبوب علوم. 2017 ، 73 ، 40-45. [CrossRef]

81- Asada، M.؛ سوجي ، م. إينو ، م. ناكاجومي ، ك. هونغو ، إس. موراتا ، ك. إيري ، إس. تاكيوتشي ، تي. توميزوكا ، ن. Oka ، S. التأثير المثبط للأحماض الألجينية على Hyaluronidase وعلى إطلاق الهيستامين من الخلايا البدينة. بيوسكي. التكنولوجيا الحيوية. بيوتشيم. 1997 ، 61 ، 1030-1032. [CrossRef] [PubMed]

82. Mase، T .؛ ياموتشي ، م. كاتو ، واي. Esaki، H. Isshiki، S. Hyaluronidase- عديد السكاريد الحمضي المعزول من البورفيريديوم. مجموعة المقالات البحثية في جامعة Suishan Women's Gakuen. نات. علوم. 2013 ، 44 ، 105-113.83. تولبيزنيكايت ، إي. بارتكيفيكس ، ف. Ruzauskas ، M. ؛ Pilkaityte ، R. ؛ فيسكيليس ، ص. Urbonaviciene ، د. Zavistanaviciute، P.؛ Zokaityte ، E. ؛ Ruibys ، R. ؛ Bartkiene ، E. توصيف مستخلصات الطحالب الدقيقة والميكروية للمركبات النشطة بيولوجيا والعناصر الدقيقة والكبيرة الانتقال من الطحالب إلى الاستخراج. الأطعمة 2021 ، 10 ، 2226. [CrossRef]

84. جوميز I. ؛ Huovinen، P. أنماط مورفو وظيفية وتقسيم الأعشاب البحرية في جنوب تشيلي: أهمية التمثيل الضوئي والسمات الحيوية البصرية. مارس Ecol. بروغ. سر. 2011 ، 422 ، 77-91. [CrossRef]

85. Karsten، U.؛ Wiencke ، C. العوامل التي تتحكم في تكوين الأحماض الأمينية الشبيهة بالميكوسبورين الممتصة للأشعة فوق البنفسجية في بالميتات الأحمر البحري ألغا بالماريا من سبيتسبيرجين (النرويج). J. بلانت. فيسيول. 1999 ، 155 ، 407-415. [CrossRef]

86. أمة ، ف. سيفاجنانام ، سب ؛ راجوريا ، جي ؛ أودونيل ، سي ؛ Tiwari، BK تقدم في تقنيات المعالجة المسبقة وتقنيات الاستخراج الخضراء للنشاط الحيوي من الأعشاب البحرية. اتجاهات علوم الغذاء. تكنول 2021 ، 110 ، 90-106. [CrossRef]

87. Boussetta، N.؛ Lanoisellé ، J.-L. ؛ Bedel-Cloutour، C.؛ Vorobiev، E. استخراج المواد القابلة للذوبان من ثفل العنب بواسطة التفريغ الكهربائي عالي الجهد لاستعادة البوليفينول: تأثير ثاني أكسيد الكبريت والمعالجات الحرارية. J. Food Eng. 2009 ، 95 ، 192–198. [CrossRef]

88. Goettel، M.؛ إينغ ، سي ؛ جوسبث ، سي. سترايسنر ، ر. ساعد المجال الكهربائي النبضي Frey، W. على استخراج الأشياء الثمينة داخل الخلايا من الطحالب الدقيقة. الطحالب ريس. 2013 ، 2 ، 401-408. [CrossRef]

89. Hwang، P.-A .؛ وو ، سي إتش. جاو ، S.-Y. ؛ شين ، S.-Y. ؛ هوانج ، د. مضادات الأكسدة والأنشطة المناعية لاستخراج الماء الساخن من الأعشاب البحرية Sargassum epiphyllum. جى مار سسي. تكنول. 2010 ، 18 ، 41-46. [CrossRef]

90 - Sabeena Farvin، KH؛ Jacobsen، C. المركبات الفينولية وأنشطة مضادات الأكسدة لأنواع مختارة من الأعشاب البحرية من الساحل الدنماركي. الغذاء تشيم. 2013 ، 138 ، 1670-1681. [CrossRef] [PubMed]

91. Godlewska، K .؛ ميشالاك ، أنا. Tuhy ، L. ؛ Chojnacka، K. المحفزات الحيوية لنمو النبات على أساس طرق مختلفة لاستخراج الأعشاب البحرية بالماء. بيوميد الدقة. كثافة العمليات 2016 ، 2016 ، 1-11. [CrossRef] [PubMed]

92. Zhang، Q.؛ تشانغ ، ياء ؛ شين ، ياء ؛ سيلفا ، أ. دينيس ، د. Barrow، CJ طريقة بسيطة 96- لصفيحة الرقائق الدقيقة لتقدير محتوى TotalPolyphenol في الأعشاب البحرية. J. أبل. فيكول. 2006 ، 18 ، 445-450. [CrossRef]

93. Kamtekar، S. كير ، ف. باتيل ، V. تقدير المحتوى الفينولي ومحتوى الفلافونويد ومضادات الأكسدة ونشاط مثبطات ألفا أميليز للتركيبة متعددة الأعشاب المسوقة. J. أبل. فارم. علوم. 2014 ، 4 ، 61.

94- نيتو ر. مارسال ، سي. كويروس ، أ. أبرو ، م. سيلفا ، أ. كاردوسو ، س. فحص Ulva rigida و Gracilaria sp. و Fucus vesiculosus و Saccharina latissima كمكونات وظيفية. كثافة العمليات J. مول. علوم. 2018 ، 19 ، 2987. [CrossRef]

95. بنزي ، أ. سلالة ، JJ قدرة الحد من الحديد للبلازما (FRAP) كمقياس "القوة المضادة للأكسدة": مقايسة FRAP. الشرج. 1996 ، 239 ، 70-76. [CrossRef]

96. Eun Lee، K. Bharadwaj، S.؛ يادافا ، يو. Gu Kang، S. تقييم الكافيين كمثبط ضد الكولاجيناز والإيلاستاز والتيروزيناز في السيليكو وفي نهج المختبر. J. مثبط الإنزيم. ميد. تشيم. 2019 ، 34 ، 927-936. [CrossRef] [PubMed]