استقصاء تأثير فرط نشاط الغدة الدرقية على إجهاد الشبكة الإندوبلازمية والقناة الأولى المحتملة في الكلى

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

نوري إزجي بكتور أيكانات^1,*، إرهان شاهين²سيدات كار²، Rıdvan BAĞCI³، شيريف كراكايا²، Dilek BURUKOĞLU DÖNMEZ²، Varol ŞAHİNTÜRK²

¹قسم الأنسجة والأجنة ، كلية الطب ، جامعة أتليم ، أنقرة ، تركيا²قسم الأنسجة والأجنة ، كلية الطب ، جامعة عثمان غازي ، أنقرة ، تركيا ³قسم مختبر الذكورة في وحدة أطفال الأنابيب ، مستشفى مدينة أضنة للتعليم والبحوث ، أضنة ، تركيا

الخلفية / الهدف:فرط نشاط الغدة الدرقيةيرتبط بنتائج زيادة معدل الترشيح الكبيبي بالإضافة إلى زيادة تنشيط الرينين - أنجيوتنسين - الألدوستيرون. يرتبط اضطراب الكالسيوم بالإضافة إلى التوازن في الشبكة الإندوبلازمية (ER) بالعديد من الأمراض ، بما في ذلك اعتلال الكلية السكري وفرط نشاط الغدة الدرقية. القناة الكنسية 1 (TRPC1) المحتملة للمستقبلات العابرة هي أول بروتين من عائلة TRPC مستنسخ. على الرغم من أنه يتم التعبير عنه في العديد من الأماكن فيالكلى، وظيفتها غير مؤكدة. يشارك TRPC1 في تنظيم Ca2 بالإضافة إلى الاستتباب ، ويزيد تنظيمه من مستوى ER Ca2 plus ، وينشط استجابة البروتين غير المطوية ، مما يؤدي إلى تلف الخلايا فيالكلى. حققت هذه الدراسة في دور TRPC1 فيالكلىمن الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية من حيث علامات الإجهاد ER التي هي بروتين 78 منظم للجلوكوز (GRP78) ، عامل النسخ 6 (ATF6) ، (بروتين كيناز R (PKR) مثل الإندوبلازم الشبكي كيناز) (PERK) ، الإنزيم الذي يتطلب الإينوزيتول 1 (IRE1).

المواد والطرق: تم تخصيص عشرين من ذكور الجرذان في المجموعة الضابطة ومجموعات الغدة الدرقية المفرطة (ن=10).فرط نشاط الغدة الدرقيةعن طريق إضافة 12 ملجم / لتر من هرمون الغدة الدرقية إلى مياه شرب الجرذان لمدة 4 أسابيع. تم قياس مستويات T3 و T4 الخالية من المصل (fT3 ، fT4) ، TSH ، نيتروجين اليوريا في الدم (BUN) ، ومستويات الكرياتينين. التحليل الكيميائي للنسيجالكلىتم إجراء أقسام للتغيرات المورفولوجية وأيضًا تحليل المناعية وتحليل اللطخة الغربية لأقسام الكلى للأجسام المضادة GRP78 و ATF6 و PERK و IRE1 و TRPC1.

النتائج: انخفضت مستويات TSH و BUN والكرياتينين بينما زادت مستويات fT3 و fT4 في الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية. أدى التحليل المورفولوجي إلى زيادة سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبات وكذلك اللطخة الغربية ، وأظهرت نتائج الكيمياء الهيستوكيميائية المناعية زيادة في TRPC1 و GRP78 و ATF6 في الجرذ المصاب بفرط نشاط الغدة الدرقية (p <0.>

الخلاصة: في الختام ، في دراستنا ، أظهرنا لأول مرة أن العلاقة بين إجهاد ER و TRPC1 ، وتسبب زيادة تعبيرهما في تلف كلوي في الفئران المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية.

الكلمات الدالة:فرط نشاط الغدة الدرقية، إجهاد شبكية إندوبلازمية (ER) ، مستقبلات عابرة محتملة 1 (TRPC1) ،الكلى، فأر

1 المقدمة

ثلاثي يودوثيرونين (T3) وثيروكسين (T4) هما هرمونات الغدة الدرقية الضرورية لنمو الأعضاء الطبيعي ووظائف التمثيل الغذائي [1]. إلى جانب ذلك ، فهي تنظم معدل النمو ، ووظيفة مضخة الصوديوم / البوتاسيوم ، ومعدل ضربات القلب ، وضغط الدم ، والتنفس ، واستهلاك الأكسجين ، والهضم ، والدهون ، والتمثيل الغذائي للكربوهيدرات والبروتين ، ووظيفة الجهاز العصبي المركزي ، والحركات ، والوظائف الأيضية للغدد الصماء الأخرى [2] .

فرط نشاط الغدة الدرقيةله تأثيرات عديدة على الكوليسترول والدهون الثلاثية والدهون والأكسدة ومضادات الأكسدة و malondialdehyde (MDA) وإنزيم محفز الكاتلاز (CAT) وأنزيمات الكبد وحمض البوليك واليوريا والكرياتينين والتغيرات النسيجية المرضية في الكبد والكلى [3]. يؤثر ضعف الغدة الدرقية على فسيولوجيا الكلى وتطورها. في حالة قصور الغدة الدرقية حيث تعمل الغدة الدرقية بشكل أقل ، تنخفض الكتلة الكلوية (نسبة كتلة الكلية / الجسم) ، بينما في حالةفرط نشاط الغدة الدرقيةحيث تعمل الغدة بجد ، تزداد الكتلة الكلوية [4]. ومع ذلك ، يؤدي فرط نشاط الغدة الدرقية الشديد إلى تدهور البروتين وضمور كلوي في نهاية المطاف. يسبب فرط نشاط الغدة الدرقية زيادة في تدفق الدم الكلوي (RBF) ومعدل الترشيح الكبيبي (GFR) [5]. مع فرط نشاط الغدة الدرقية ، يتم زيادة إعادة امتصاص الصوديوم في النبيبات القريبة ، و basolateral Na plus / K plus ATPase [6] ، ومعدِّل Na plus / H plus apical [7] ، و Na plus / Pi cotransporter [8] يزداد التنشيط. أيضًا ، ينشط هرمون الغدة الدرقية معدِّل Na plus / Ca2 plus ، ربما عبر المسار المرتبط بـ cAMP ، وبالتالي يعزز امتصاص الكالسيوم فيالكلى[9].

الكالسيوم هو المرسل الثاني الذي ينظم معظم الوظائف الخلوية ، بما في ذلك التعبير الجيني والتوازن الخلوي [10] ، وإطلاق الناقل العصبي والوظيفة العصبية [11] ، والتمثيل الغذائي ، وتعديل حياة الخلية [12]. تعد عائلة قنوات مستقبلات المستقبلات العابرة (TRP) واحدة من أكبر عائلات قنوات الكاتيون. تنقسم عائلة TRP إلى مجموعات فرعية TRPC (canonical) و TRPM (melastatin) و TRPP (polycystin) و TRPV (الفانيليا) و TRPML (bucolic) و TRPA (ankyrin) و TRPN (تشبه NOMPC). من المعروف أن بروتينات TRPC تشكل Ca2 بالإضافة إلى قنوات كاتيون غير انتقائية قابلة للاختراق ، وبالتالي تلعب دورًا مهمًا في Ca2 بالإضافة إلى نقل الإشارة. تتكون عائلة TRPC من الثدييات من سبعة أعضاء يُطلق عليهم اسم TRPC 1- TRPC7 [13]. يتم التعبير عن أعضاء عائلة TRPC في أجزاء مختلفة منالكلى. يتم التعبير عن TRPC1 ، الذي يلعب دورًا خاصًا في اعتلال الكلية السكري ، في كل مكان تقريبًا ، في الخلايا المسراق الكلوية ، والكبيبات ، وخلايا النبيبات القريبة ، وفي الجزء النازل الرقيق من حلقة Henle ، ولكن وظيفتها الدقيقة لا تزال غير معروفة [14].

قد تؤدي اضطرابات Ca2 plus الشديدة إلى تلف الخلايا الناجم عن إجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ER) استجابةً لمختلف الحالات المرضية [5،15]. ترتبط الاضطرابات في Ca2 بالإضافة إلى الاستتباب في ER بالعديد من الأمراض [16]. ER هي عضية داخل الخلايا مهمة لتنظيم Ca2 بالإضافة إلى التوازن وتخليق البروتين والطي. يؤثر تعديل التعبير / وظيفة Ca2 بالإضافة إلى القنوات القابلة للنفاذ أيضًا على تركيزات Ca2 زائد داخل الخلايا وبالتالي Ca2 بالإضافة إلى العمليات ذات الصلة مثل تكاثر الخلايا وإجهاد ER وموت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي. إجهاد ER هو حالة تعطل توازن الأكسدة والاختزال والتوازن اللمعي Ca2 بالإضافة إلى التوازن ، مما يتسبب في تراكم البروتينات غير المطوية / غير المطوية. يؤدي تنشيط الاستجابة البروتينية غير المطوية (UPR) إلى زيادة البروتين المنظم للجلوكوز 78 (GRP78) ، والمرافق ER ، مما يزيد من قدرة طي البروتين في ER [17]. يؤدي تنشيط إجهاد ER إلى بدء الاستعراض الدوري الشامل المحفوظ تطوريًا بواسطة محولات الإشارة الرئيسية الثلاثة لغشاء ER: PERK و IRE1 و ATF6. يحدث الخلل الوظيفي الخلوي وموت الخلايا في ظل الظروف التي يطول فيها إجهاد ER بشكل مزمن ويتجاوز حمل البروتين على ER بشكل كبير. من المعروف أن أحد المسارات المسببة لموت الخلايا الذي لوحظ في الأمراض المزمنة مثل نقص الأكسجة ونقص التروية وإصابة إعادة التروية والتنكس العصبي وأمراض القلب والسكري يرجع إلى إجهاد ER [12].

في ضوء كل هذه المعلومات ، نهدف إلى التحقيق في العلاقة بين مسارات نقل إشارة TRPC1 وضغط ER فيالكلى، والتي تتأثر بشكل عام فيفرط نشاط الغدة الدرقية.

انقر ليستخدم Cistanche لأعراض أمراض الكلى

2. المواد والأساليب

2.1. الحيوانات

تمت الموافقة على دراستنا من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان المحلية بجامعة إسكي شهير عثمان غازي (القرار رقم 634 في الاجتماع رقم 117 في 30.11.2017) واتباع دليل رعاية واستخدام حيوانات المختبر الذي نشرته المعاهد الوطنية للصحة. تم الحفاظ على عشرين بالغًا (من 7 إلى 8 أسابيع) ذكور فئران ويستار البيضاء ، التي تم الحصول عليها من مركز الأبحاث الطبية والجراحية التجريبية (TICAM) ، عند درجة رطوبة 24 ± 2 درجة و 55 ± 5 بالمائة لمدة 12 ساعة في بيئة مظلمة / فاتحة أثناء التجربة. تم وضع الحيوانات في أقفاص من البولي كربونات لمدة أسبوعين قبل التجربة وسمح لها بالتكيف مع الظروف المحيطة ، ثم تم تخصيصها بشكل عشوائي لمجموعات الضبط وفرط نشاط الغدة الدرقية. تم تغذية المجموعة الضابطة (euthyroid) بتغذية الفئران القياسية وماء الصنبور أثناء التجربة. تم إنشاء مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مع تغذية الفئران القياسية لمدة 4 أسابيع وشرب ماء الصنبور الذي يحتوي على 12 مجم / لتر من هرمون الغدة الدرقية [18]. في نهاية الأسبوع الرابع ، تم قتل الفئران عن طريق الحقن العضلي للكيتامين (45 مجم / كجم) وزيلازين (5 مجم / كجم). على الفور ، تم أخذ عينات الدم داخل القلب من جميع الحيوانات. جميعالكلىتمت إزالته من خلال عملية استئصال الكلية. ثم اليمين واليسارالكلىتم تقطيع الفئران طوليًا إلى قطعتين. تم استخدام كل من قطع الكلى اليمنى واليسرى لتحليل كل من اللطخة الغربية والتحليل المجهري الضوئي

2.2. التحليلات البيوكيميائية

تم طرد عينات الدم عند 11 ، 000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق. تم وضع الأمصال في أنابيب وتخزينها في درجة -80 حتى يوم التحليل. تم بعد ذلك قياس مستويات T3 (fT3) الخالية من المصل و T4 (fT4) وهرمون تحفيز الغدة الدرقية (TSH) باستخدام تقنية ELISA وفقًا لبروتوكول الشركة المصنعة. تمت قراءة مستويات التعبير عن الكثافة الضوئية (OD) عند 450 نانومتر بواسطة قارئ الصفيحة الميكروسكوبية BioTek 800 (BioTek Instruments ، Inc. ، Winooski ، VT ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، ثم تم حساب النتائج. تم شراء المجموعات التجارية لـ fT3 (YLA0127RA) و fT4 (YLA0239RA) و TSH (YLA0047RA) من Shanghai YL Biotech ، الصين. أيضًا ، تم قياس مستويات نيتروجين اليوريا في الدم (BUN) ومستويات الكرياتينين باستخدام طريقة قياس الامتصاص الضوئي بواسطة Cobas Integra 400 Plus Roche (Roche Diagnostics Ltd. ، سويسرا).

2.3 التقييم النسيجي

الكلىتم إصلاح القطع المأخوذة للفحص على مستوى المجهر الضوئي في 1 0 بالمائة من الفورمالديهايد لمدة 48 ساعة. بعد معالجة الأنسجة الروتينية ، تم الحصول على كتل البارافين. بعد ذلك ، تم أخذ مقاطع متسلسلة 5 ميكرومتر وصبغها بتقنية Periodic acid-Schiff (PAS). تم إجراء التقييم المجهري للكبيبات والأنابيب تحت مجهر Olympus BX -51 (Olympus America، Inc.، New York، USA). تم تسجيل الأقسام بطريقة أعمى وشبه كمي باستخدام مقياس تسجيل ثابت. لكل فأر في المجموعات ، تم فحص ما لا يقل عن 10 حقول عالية الطاقة (× 1000). تم تسجيل النسبة المئوية للكبيبات التي تظهر سماكة الغشاء القاعدي الكبيبي على النحو التالي: 0=لا شيء ، 1 أقل من أو يساوي 25 بالمائة ، 2=25 بالمائة إلى 50 بالمائة ، 3 =50 بالمائة إلى 75 بالمائة ، 4 أكبر من أو يساوي 75 بالمائة [19]. تم قياس سمك الغشاء القاعدي الكبيبي (ميكرومتر) بواسطة ZEISS ZEN 3.0 Microscope Software (Carl Zeiss Microscopy GmbH ZEISS Group ، München ، ألمانيا).

2.4 التقييم المناعي الكيميائي

أقسام كتلة البارافين من كل منهاالكلىتم أخذ الأنسجة على شرائح موجبة الشحنة. بعد إزالة الكافيين ، تم نقل الشرائح من خلال سلسلة الإيثانول المتحللة ثم الزيلول. تم تحضين المقاطع بنسبة 3 في المائة من بيروكسيد الهيدروجين لمنع نشاط بيروكسيداز الداخلي. بعد استرجاع المستضد باستخدام محلول السترات المؤقت ، تم تحديد المقاطع بقلم حبر ، وغسلها 3 × 5 دقائق بمحلول ملحي مخزّن بالفوسفات (PBS) ، ثم تم حظره باستخدام كتلة Ultra V لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. تم تحضين الأقسام بجسم مضاد ATF6 متعدد النسيلة للأرنب (ab203119 ، Abcam Inc. ، كامبريدج ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، جسم مضاد IRE1 متعدد النسيلة للأرنب (YID5384 ، Shanghai YL Biotech Co. . ، Heidelberg ، ألمانيا) والجسم المضاد TRPC1 أحادي النسيلة للفأر (sc133076 ، Santa Cruz Biotechnology Inc.) طوال الليل عند درجة 4 زائد في ظروف الرطوبة. بعد الغسيل 3 × 5 دقائق باستخدام PBS ، تم تحضين المقاطع بأجسام مضادة ثانوية مناسبة (sc2359 ، sc2781 ، Santa Cruz Biotechnology ، Inc.) لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، تم غسلها مرة أخرى لمدة 3 × 5 دقائق باستخدام برنامج تلفزيوني ومقاومة للهيماتوكسيلين. تم تطبيق الشرائح باستخدام ساترة باستخدام الوسائط المائية. تم إجراء الفحص المجهري باستخدام مجهر Olympus BX51 ونظام التصوير بمساعدة الكمبيوتر (Olympus America ، Inc. ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية).

تم تقييم جميع الأقسام المحصنة بالمناعة بطريقة مشفرة من قبل المؤلف الرئيسي ، الذي أعمى عن اسم المجموعة للتجارب. تم الكشف عن تعبيرات TRPC1 و ATF6 و IRE1 و PERK بشكل رئيسي في الأنابيب و / أو الكبيبات. تم تحديد التعبيرات بشكل جزئي وفقًا لنسبة الموجبالكلىأقسام. تم تصنيف شدة التلوين إلى أربع درجات: لا شيء ({0}) ، ضعيف (1) ، متوسط ​​(2) ، وقوي (3). تم تصنيف النسبة المئوية للمقاطع النسيجية للكلى الموجبة إلى 4 درجات: 0 (0 بالمائة) ، 1 (1 بالمائة - 10 بالمائة) ، 2 (11 بالمائة - 49 بالمائة) و ​​3 (50 بالمائة - 100 بالمائة). كانت النتيجة الإجمالية نتاج درجتين وكانت النتيجة النهائية لعينة واحدة هي متوسط ​​10 مجالات ميكروسكوبية. تم تقييم TRPC1 و ATF6 و IE1 و PERK وفقًا للطريقة المبلغ عنها [20].

وظائف الكلى

2.5 تحليلات لطخة ويسترن

لتحديد التغيرات في كمية بروتين معين فيالكلىمناديلفرط نشاط الغدة الدرقيةومجموعات التحكم ، تم تقطيع الكلى إلى قطع صغيرة ، وتم إجراء التجانس عن طريق إضافة محلول تحلل RIPA إلى أنابيب خرز سعة 2 مل. بعد التجانس ، تم تحضين الأنابيب عند 4 درجات لمدة 3 دقائق على الأقل 0 ، ثم تم طرد محلولات الأنسجة عند 4 درجات ، 15 ، 000 جم لمدة 20 دقيقة. تم نقل المادة الطافية التي تحتوي على البروتين الكلي إلى أنبوب جديد. تم إجراء تحديد البروتين من المادة الطافية باستخدام جهاز Qubit 2.0 (Invitrogen Inc. ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحميل خمسين ميكروغرامًا من البروتين في كل بئر ، وتم نقلها كهربائيًا باستخدام SDS-PAGE Bio-Rad MiniTrans Blot (Bio-Rad Laboratories ، Inc. ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، ثم تم نقلها إلى غشاء PVDF باستخدام جهاز Bio-Rad Trans Turbo. تم حظر الأغشية باستخدام 5 في المائة من ألبومين مصل الأبقار (BSA) لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة ، ثم تم تحضينها باستخدام جسم مضاد GRP78 أحادي النسيلة (sc166490 ، Santa Cruz Biotechnology Inc.) ، جسم مضاد ATF6 متعدد النسيلة (ab203119 ، Abcam Inc. ، Cam) جسر ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، جسم مضاد IRE1 متعدد النسيلة للأرنب (YID5384 ، Shanghai YL Biotech Co. Ltd. ، الصين) ، جسم مضاد PERK أحادي النسيلة (sc377400 ، شركة Santa Cruz Biotechnology Inc.) ، جسم مضاد TRPC1 أحادي النسيلة (sc133076 ، Santa Cruz Biotechnology ، Inc. ) والجسم المضاد وحيد النسيلة - الفأر (sc47778 ، Santa Cruz Biotechnology ، Inc.) (للتحكم في التحميل) طوال الليل عند 4 درجات. بعد ذلك ، تم غسل الأغشية لمدة 3 × 10 دقائق بمحلول غسيل (TBST) ، متبوعًا بحضانة بأجسام مضادة ثانوية مناسبة (sc2005 ، sc2030 ، Santa Cruz Biotechnology Inc.). بعد غسل الأغشية لمدة 3 × 10 دقائق باستخدام TBST ، تمت مراقبة مستويات التعبير عن البروتينات في العصابات المناعية بواسطة نظام التصوير (C-Digit ، Licor ، كامبريدج ، المملكة المتحدة). تم تحليل نتائج الصورة ببرنامج Image J 1.49v.

2.6. تحليل احصائي

تم إجراء جميع التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج الحزمة الإحصائية IBM SPSS 21. 0 (IBM Corp. ، Armonk ، NY ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تكرار تجربة اللطخة الغربية ثلاث مرات لكل مجموعة. تم قبول مستوى الأهمية كـ p <0. 05.="" تم="" استخدام="" اختبار="" شابيرو="" ويلك="" لتحديد="" التوزيع="" الطبيعي="" للبيانات.="" تم="" استخدام="" اختبار="" تجانس="" التباين="" (اختبار="" ليفين)="" لتقييم="" ما="" إذا="" كانت="" المجموعات="" لديها="" تباينات="" متساوية.="" تم="" إجراء="" اختبار="" t="" للعينات="" المستقلة="" للبيانات="" التي="" تظهر="" التوزيع="" الطبيعي.="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="" u="" للبيانات="" التي="" تظهر="" التوزيع="" غير="">

3. النتائج

3.1. نتائج الكيمياء الحيوية

مستويات المصل fT3 و fT4 و TSH و BUN في المصل ومستويات الكرياتينين لمجموعات الفئران موضحة في الشكل 1. أشارت النتائج إلى أن مستويات fT3 و fT4 زادت بشكل ملحوظ في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بالمجموعة الضابطة (كلاهما p <{{5) }}.="" 0="" 5).="" إلى="" جانب="" ذلك="" ،="" تم="" العثور="" على="" انخفاض="" كبير="" في="" مستويات="" tsh="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" مقارنة="" بمجموعة="" التحكم="" (p=""><0. 05)="" (الشكل="" 1="" أ).="" انخفضت="" مستويات="" bun="" في="" المصل="" (الشكل="" 1="" ب)="" والكرياتينين="" (الشكل="" 1="" ج)="" بشكل="" ملحوظ="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" مقارنة="" بمجموعة="" التحكم="" (كلاهما="" p=""><>

3.2 نتائج الكيمياء النسيجية

التغييرات النسيجيةالكلىمجموعات الفئران مبينة في الشكل 2. كانت أنسجة الكلى (الكبيبات والأنابيب والأوعية الدموية) نموذجية في المجموعة الضابطة (الشكل 2A). لكن،فرط نشاط الغدة الدرقيةتسبب في سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبة (الشكل 2 ب). زاد سمك الغشاء القاعدي الكبيبي بشكل ملحوظ في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بالمجموعة الضابطة (الشكل 3-4) ، (p <0. 05).="" لم="" يكن="" هناك="" فرق="" واضح="" بين="" مجموعات="" التحكم="" ومجموعات="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" من="" حيث="" الأنسجة="">

الشكل 1. ثلاثي يودوثيرونين الحر (fT3) ، هرمون الغدة الدرقية الحر (fT4) ، ومستويات الهرمون المنبه للغدة الدرقية (TSH) لمجموعات الفئران (أ). * تختلف عن مجموعة التحكم (p <0. 0="" 5).="" مستويات="" مصل="" bun="" (ب)="" والكرياتينين="" (ج)="" لمجموعات="" الفئران.="" *="" يختلف="" عن="" المجموعة="" الضابطة="" (p=""><0.001) ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" t="" لعينات="">

الشكل 2. صورة مجهرية منالكلىأنسجة التحكم (أ) ومجموعات فرط نشاط الغدة الدرقية (ب). في المجموعة الضابطة ، شوهدت أنسجة الكلى النموذجية (أ). في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية ،فرط نشاط الغدة الدرقيةتسبب في سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبة. لوحظ سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبة (السهم) (ب). لا توجد فروق واضحة في لب الكلى في كلا المجموعتين الجرذان. (تلطيخ حمض شيف الدوري (PAS)). القضبان 20 ميكرومتر و 50 ميكرومتر.

3.3 النتائج المناعية

يتم تحديد التفاعلات الكيميائية الهيستوكيميائية المناعية لـ TRPC1 و GRP78 و ATF6 و IRE1 و PERK وتعبيراتها شبه كميًا وفقًا للنسبة المئوية الإيجابيةالكلىمن مجموعات الفئران (الشكل 5-9). أيضًا ، يظهر متوسط ​​تباينها في الجدول. بالمقارنة مع مجموعة التحكم TRPC1 و GRP78 و ATF6 و IRE1 و PERK ، زادت تعبيرات البروتين بشكل ملحوظ في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية في الكبيبات والأنابيب (الشكل 5-9) (p <0 ،="" 000).="" أظهرت="" النتائج="" أنه="" تم="" التعبير="" عن="" trpc1="" في="" كل="" من="" الهياكل="" الكبيبية="" والأنبوبية="" في="" المجموعة="" الضابطة="" (الشكل="" 5-1="" ab)="" وزاد="" تعبيره="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" (الشكل="" 5-2="" ab).="" لم="" يتم="" التعبير="" عن="" grp78="" في="" المجموعة="" الضابطة="" (الشكل="" 6-1="" ab)="" ولوحظ="" تفاعله="" الإيجابي="" في="" كل="" من="" الأنابيب="" والكبيبات="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" (الشكل="" 6-2="" ab)="" ؛="" بينما="" ،="" لم="" يتم="" التعبير="" عن="" atf6="" في="" المجموعة="" الضابطة="" (الشكل="" 7-1="" ab)="" ،="" فقد="" تفاعلت="" تعبيراته="" بشكل="" إيجابي="" في="" كل="" من="" الأنابيب="" والكبيبات="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" (الشكل="" 7-2="" ab).="" لم="" يتم="" التعبير="" عن="" ire1="" في="" المجموعة="" الضابطة="" (الشكل="" 8-1="" ab)="" ،="" ولوحظ="" تفاعله="" الإيجابي="" في="" كل="" من="" الأنابيب="" والكبيبات="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" (الشكل="" 8-2="" ab).="" بينما="" ،="" لم="" يتم="" التعبير="" عن="" perk="" في="" المجموعة="" الضابطة="" (الشكل="" 9-1="" ab)="" ،="" كان="" تعبير="" perk="" مقصورًا="" على="" الأنابيب="" في="" مجموعة="" فرط="" نشاط="" الغدة="" الدرقية="" (الشكل="" 9-2="">

الشكل 3. مقارنة سمك الغشاء القاعدي الكبيبي بين مجموعات التحكم وفرط نشاط الغدة الدرقية. * يختلف عن مجموعة التحكم (p <0. 05)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" t="" لعينات="">

الشكل 4. مقارنة سجل سمك الغشاء القاعدي الكبيبي بين مجموعات التحكم وفرط نشاط الغدة الدرقية. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 05)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="">

3.4. نتائج لطخة غربية

أظهرت نتائج اللطخة الغربية (الشكل 1 {4}}) زيادة ذات دلالة إحصائية في تعبيرات TRPC1 و PERK و ATF6 و GRP78 في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بمجموعة التحكم (p <0. 05).="" كانت="" زيادة="" ire1="" ذات="" دلالة="" إحصائية="" ،="" على="" الرغم="" من="" أنها="" ليست="" بنفس="" مستوى="" مستويات="" البروتين="" الأخرى="" (p=""><>فرط نشاط الغدة الدرقيةتسبب في زيادة التعبير عن GRP78 (2.16 ضعفًا) ، ATF6 (2.82 ضعفًا) ، PERK (1.95 ضعفًا) ، IRE1 (1.60 ضعفًا) ، TRPC1 (1.53 ضعفًا) عند مقارنته بمجموعة التحكم.

4. مناقشة

في هذه الدراسة ، اقترحنا لأول مرة كيف يتأثر النسيج الكلويفرط نشاط الغدة الدرقيةمن حيث أدوار ضغط ER وقناة TRPC1 في هذه العملية. في دراستنا ، تسبب تعبير TRPC1 المتزايد في زيادة تركيز Ca2 زائد في الخلية ، على وجه الخصوص ، سماكة الغشاء القاعدي الشعري وزيادة تعبير GRP78 في الأنابيب ، خاصة في الكبيبات. نعتقد أن إجهاد ER يلعب دورًا نشطًا في عملية التلف الخلوي هذه ، خاصة من خلال محول إشارة ATF6 و PERK في مسار UPR (استجابة البروتين غير المطوية).

كما لوحظ في العديد من الدراسات كما في دراستنا [18] ، تزداد قيم fT3 و fT4 في حالة فرط نشاط الغدة الدرقية ، بينما ينخفض ​​مستوى TSH. يمكن أن يؤثر أي خلل وظيفي في الغدة الدرقية على إنتاج fT3 و fT4 والتي يمكن أن تكون مرتبطة بأمراض مختلفة في جميع أنحاء الجسم [21]. الالكلىتلعب دورًا حيويًا في إخراج الفضلات والسموم مثل اليوريا والكرياتينين وحمض البوليك. تقييم وظائف الكلى مهم في إدارة المرضى الذين يعانون من أمراض الكلى أو الأمراض التي تؤثر على وظائف الكلى. اختبارات وظائف الكلى لها فائدة في تحديد وجود أمراض الكلى ، ومراقبة استجابة الكلى للعلاج ، وتحديد تطور مرض الكلى. تنخفض مستويات الكرياتينين في الدم في فرط نشاط الغدة الدرقية ، ليس فقط بسبب زيادة معدل الترشيح الكبيبي ولكن أيضًا بسبب زيادة تدمير العضلات. أيضا ، الانخفاض في تركيز BUN فيفرط نشاط الغدة الدرقيةيُعتقد أنه يرجع إلى انخفاض التعبير عن الأكوابورين 1 و 2. لذلك ، انخفضت مستويات BUN والكرياتينين في العديد من الدراسات [22] كما في دراستنا. في ظل الظروف المرضية ، قد تفقد الخلايا بروتينًا مما يؤدي إلى تراكم البروتينات غير المطوية وغير المطوية في ER ، مما يؤدي إلى إجهاد UPR أو ER [23].

الشكل 5. تلطيخ كيميائي مناعي لـ TRPC1 في مجموعات التحكم (1A-B) وفرط نشاط الغدة الدرقية (2A-B) فيالكلىالانسجة. زاد التعبير عن TRPC في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بمجموعة التحكم (الأسهم). يبلغ حجم القضبان 5 0 ميكرومتر. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 000)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="">

الشكل 6. تلطيخ كيميائي مناعي لـ GRP78 في مجموعات التحكم (1A-B) وفرط نشاط الغدة الدرقية (2A-B) فيالكلىالانسجة. يزداد التعبير عن GRP78 في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية (الأسهم). يبلغ حجم القضبان 5 0 ميكرومتر. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 000)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="">

الشكل 7. تلطيخ كيميائي مناعي لـ ATF6 في مجموعات التحكم (1A-B) وفرط نشاط الغدة الدرقية (2A-B) فيالكلىالانسجة. يزداد التعبير عن ATF6 في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية (الأسهم). يبلغ حجم القضبان 5 0 ميكرومتر. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 000)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whit="" ney="">

الشكل 8. تلطيخ كيميائي مناعي لـ IRE1 في مجموعات التحكم (1A-B) وفرط نشاط الغدة الدرقية (2A-B) فيالكلىالانسجة. يزداد التعبير عن IRE1 في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية (الأسهم). يبلغ حجم القضبان 5 0 ميكرومتر. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 000)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="">

الشكل 9. تلطيخ كيميائي مناعي لمجموعات PERK في مجموعة التحكم (1A-B) وفرط نشاط الغدة الدرقية (2A-B) فيالكلىالانسجة. يزداد التعبير عن PERK في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية (الأسهم). يبلغ حجم القضبان 5 0 ميكرومتر. * يختلف عن المجموعة الضابطة (p <0. 000)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" mann="" –="" whitney="">

ترتبط الاضطرابات في ER و Ca2 بالإضافة إلى الاستتباب الخلوي بالعديد من الأمراض ، بما في ذلكالكلى. يؤدي تعطيل ER Ca2 بالإضافة إلى الاستتباب إلى تشغيل UPR ، مما يمنع المزيد من التراكم للبروتينات المركبة حديثًا في ER. وبالتالي ، فإنه يظهر آلية دفاع prourvival من خلال تخفيف العبء على ER [24].

من المعروف أن العديد من العوامل تؤدي إلى إجهاد ER ومحفزاتهالكلىتلف. قد يتسبب إجهاد ER في الكلى في تمايز الخلايا الظهارية الأنبوبية عن طريق الانتقال اللحمية المتوسطة من الظهارة ، وفقدان الخلايا الظهارية الأنبوبية الكلوية عن طريق موت الخلايا المبرمج ، وفي النهاية أمراض الكلى بما في ذلك فقدان الكلية ، مما يقلل من قدرة الترشيح في الكلى. في دراسة ديكهاوت وزملائه ، تم عرض عملية الانتقال اللحمية المتوسطة الناتجة عن الإجهاد في ER في خط خلية الأنابيب الكلوية القريبة HK -2 لمرض الكلى المزمن [25]. بالإضافة إلى العديد من الدراسات [9] كما رأينا في دراستنا ،فرط نشاط الغدة الدرقيةتسبب في سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبة. تم اقتراح أن زيادة سماكة الغشاء القاعدي الشعري في الكبيبات تشكلت نتيجة لعملية الانتقال الظهارية - اللحمية المتوسطة بسبب زيادة التعبير عن محولات GRP78 وإشارات الإجهاد ER. تم توضيح أهمية إجهاد ER بشكل مزمنالكلىالمرض في العديد من الحالات المرضية. في نموذج السكري المستحث بالستربتوزوتوسين في الفئران C57BL / 6 ، نشأ إجهاد ER ، وارتبط اعتلال الكلية الحاد الذي حدث في الشهر الثاني والعشرين بتنظيم CHOP / GADD153 ، وهو أحد مكونات مسار موت الخلايا المبرمج الناتج عن الإجهاد ER [26 ]. في المرضى الذين يعانون من المتلازمة الكلوية ، تم زيادة اعتلال الكلية بالجلوبيولين المناعي (IgA) ، والتهاب كبيبات الكلى التكاثري المسراق الأولي ، واعتلال الكلية الغشائي ، بما في ذلك المرضى الذين يعانون من أعراض طفيفة ، GRP78 وشبكة إندوبلازمية محرضة (ER) جزيء مساعد منظم الأكسجين البروتين 150 (ORP150) مقارنة بالتعبيرات المناعية. تم أيضًا زيادة تعبير CHOP / GADD153 ولوحظ التوطين النووي في ظهارة النبيبات القريبة من مرضى الكلى. في خلايا الكلى البشرية المعرضة لمستويات عالية من الألبومين في الدم ، لوحظ تحريض إجهاد ER وتبين أنه يسبب موت الخلايا المبرمج عبر مسار CHOP / GADD153 [25]. تم العثور على استجابة الإجهاد الأنبوبي الخلالي ER في أمراض الكبيبات مع موت الخلايا المبرمج للخلايا الأنبوبية المرتبط بالكلاء الأميني النوكليوزيد البيروميسين ، والحمل الزائد للبروتين ، والبيلة البروتينية المرتبطة باعتلال الكلية السكري التجريبي أو البشري [27]. لورز وآخرون. ذكرت أن الباراسيتامول ، وهو عامل مسكن وخافض للحرارة ، يسبب تلف أنبوبي كلوي وموت الخلايا المبرمج بسبب إجهاد ER [28]. يستحث الباراسيتامول استجابة إجهاد ER بما في ذلك تحريض CHOP وانقسام الكاسبيز -12. يؤدي التراكم المفرط للبروتينات الإفرازية إلى إجهاد ER ، مما يتسبب في تلف خلية البودوسيت [29]. يتسبب الهجوم التكميلي أيضًا في إجهاد ER وينشط مسار PERK المؤدي إلى تلف الخلايا الظهارية الكبيبية. تظهر كل هذه النتائج أن إجهاد ER هو أحد الأسباب الرئيسية لتلف الكلى وأن استجابة ER هي آلية دفاعية ضدهاالكلىالضرر [30]. في دراستنا ، نعتقد أن فرط نشاط الغدة الدرقية الناجم عن هرمون الغدة الدرقية 12 مجم / لتر يسبب إجهاد ER في أنسجة الكلى ، والضرر الناجم عنفرط نشاط الغدة الدرقيةفي أنسجة الكلى يرتبط بتنظيم ATF6 و PERK بشكل خاص.

تم العثور على أول قناة TRP مستنسخة للثدييات ، وهي قناة TRPC1 الأيونية ، في الخلية داخل ER ، وغشاء البلازما ، والحويصلات داخل الخلايا ، والأهداب الأولية. يظهر في كل مكان تقريبًا في أنسجة الإنسان والقوارض. يتفاعل TRPC1 مع مجموعات البروتين المختلفة ، بما في ذلك الوحدات الفرعية للقنوات الأيونية ، والمستقبلات ، وبروتينات العصارة الخلوية للتوسط في تأثيرها على إشارة Ca2 plus. إنها تعمل كقناة كاتيون غير انتقائية في المسارات التي تتحكم في تدفق Ca2 بالإضافة إلى استجابة لتنشيط مستقبلات سطح الخلية. من خلال هذه الوظيفة ، يتوفر أيضًا الانتشار ، والبقاء ، والتمايز ، والإفراز ، وهجرة الخلايا ، بالإضافة إلى ميزات مثل مخاريط نمو الخلايا العصبية ودمج الخلايا العضلية للوظائف الخاصة بالخلية الكيميائية [12].

هناك العديد من الدراسات حول تغيير تعبير TRPC1 في العديد من الحالات المرضية التي تسبب إجهاد ER. سوكوماران وآخرون. أظهر أن هناك علاقة بين إجهاد ER وتعبير TRPC1 التي يمكن أن تغير بقاء الخلية في الغدة اللعابية. أعربوا عن أن تعبير TRPC1 انخفض في ظل ظروف الإجهاد ER وأيضًا موت الخلية بسبب إجهاد ER كان يعتمد على تعبير CHOP. زيادة إجهاد ER والتسلل في خلايا الغدد اللعابية لـ TRPC 1- / - لوحظت الفئران المنكوبة [16].

الشكل 10. إنالكلىمستويات التعبير عن البروتين GRP78 و ATF6 و TRPC1 و IRE1 و PERK ورسم بياني لتغيير الطية. كانت الزيادة في جميع البروتينات ذات دلالة إحصائية (* p <0. 05)="" ،="" تم="" إجراء="" اختبار="" t="" للعينات="">

متيالكلىتم فحص نماذج الفئران المصابة بداء السكري ، وتم الإبلاغ عن انخفاض تعبير TRPC1 mRNA [31]. في المرضى الذين يعانون من اعتلال الكلية السكري أو جرذان زوكر المصابة بداء السكري مقارنةً بالضوابط ، يشير انخفاض تعبير TRPC1 إلى أن TRPC1 أثر على تطور اعتلال الكلية السكري [32]. يلعب TRPC1 دورًا حيويًا في الحفاظ على توازن ER Ca2 بالإضافة إلى التوازن ، ويؤدي انخفاض الوظيفة إلى التنشيط المطول لمسار UPR وتعطيل تنشيط AKT ، مما يؤدي بعد ذلك إلى التنكس العصبي. لوحظ انخفاض في تعبير TRPC1 في نموذج مرض باركنسون للفأر الناجم عن السموم العصبية. زيادة التعبير عن TRPC1 يزيد من بقاء الخلايا العصبية من خلال تنظيم مسار AKT / mTOR ، على الرغم من إجهاد ER و UPR الناجم عن السم العصبي [33]. لي وآخرون. ذكرت أن تعبير TRPC1 قد زاد أيضًا في تضخم عضلة القلب الناجم عن نامبتين اعتمادًا على الوقت. عندما تم إسكات الجين TRPC1 ، أدى ذلك إلى تثبيط تضخم القلب الناجم عن نيكوتيناميد فوسفوريبوزيل ترانسفيراز. ومع ذلك ، من خلال الإفراط في التعبير عن TRPC1 ، كان يُعتقد أن نيكوتيناميد فسفوريبوزيل ترانسفيراز يحفز تضخم عضلة القلب عن طريق مسار يسبب الإجهاد ER. من وجهة النظر هذه ، قد يلعب إسكات الجين TRPC1 دورًا وقائيًا في الوقاية من تضخم القلب [34]. في دراستنا ، زاد إجهاد ER و TRPC1 بشكل ملحوظ. هذا يشير إلى أن سماكة الغشاء القاعدي الشعري ناتجة عن زيادة إجهاد ER في الأنسجة الكلوية بسببفرط نشاط الغدة الدرقيةيرجع إلى زيادة التعبير عن TRPC1.

هذه الدراسة لها بعض القيود. ربما تم استخدام الفئران المعدلة وراثيًا بدلاً من نموذج الفئران الناجم عن فرط نشاط الغدة الدرقية الناجم عن هرمون الغدة الدرقية. مع جمع البول باستخدام أقفاص التمثيل الغذائي ، البعضالكلىقد يتم قياس اختبارات الوظائف أيضًا في البول. يمكن التحقيق في التغيير في مستوى الإجهاد ER باستخدام مثبط TRPC1.

نتيجة لمراجعة الأدبيات التي أجريناها ، تم توضيح تأثير فرط نشاط الغدة الدرقية على العلاقة بين إجهاد ER وقناة TRPC1 في الأنسجة الكلوية لأول مرة في هذه الدراسة. تقرر أنفرط نشاط الغدة الدرقيةتسبب في زيادة تعبير TRPC1 الذي يؤدي إلى إجهاد ER. نقترح أن الحد من تعبير TRPC1 قد يكون استراتيجية علاجية محتملة للناتج عن فرط نشاط الغدة الدرقيةالكلىوربما تلف الأعضاء الأخرى.

مراجع

1. Kim D و Kim W و Joo SK و Bae JM و Kim JH وآخرون. يرتبط قصور الغدة الدرقية تحت الإكلينيكي ووظيفة الغدة الدرقية المنخفضة الطبيعية بالتهاب الكبد الدهني والتليف غير الكحولي. أمراض الجهاز الهضمي والكبد السريري 2018 ؛ 16 (1): 123-131. دوى: 10.1016 / j.cgh.2017.08.014

2. Bolkiny Y ، Toulson E ، El-Atrsh A ، Akela M ، Farg E.فرط نشاط الغدة الدرقيةفي الفئران. البحث السنوي والمراجعة في علم الأحياء 2019 ؛ 31 (5): 1-10. DOI: 10.9734 / arb / 2019 / v31i530063

3. صقر س ، عبد الغفار فر ، ابو اليزيد ص. يخفف السيلينيوم من السمية الكبدية التي يسببها كاربيمازول والإجهاد التأكسدي في الجرذان البيضاء. مجلة Coastal Life Medicine 2015 ؛ 3 (2): 930-936. DOI: 10.1016 / j.jtemb.2010.07.002

4. Vargas F ، Moreno JM ، Rodríguez-Gómez I ، Wangensteen R ، Osuna A ، et al. وظائف الأوعية الدموية والكلى في اضطرابات الغدة الدرقية التجريبية. المجلة الأوروبية لأمراض الغدد الصماء 2006 ؛ 154 (2): 197-212. DOI: 10.1530 / نقطة الإنطلاق .1.02093

5. ري سم. التفاعل بين الغدة الدرقية والكلىالمرض: نظرة عامة على الأدلة. الرأي الحالي في طب الغدد الصماء 2016 ؛ 23 (5): 407-415. DOI: 10.1097 / Med.0000000000000275

6. Wijkhuisen A، Djouadi F، Vilar J، Merlet-Benichou C، Bastin J. تنظم هرمونات الغدة الدرقية تطوير إنزيمات استقلاب الطاقة في الأنابيب الملتوية القريبة من الفئران. المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء - فسيولوجيا الكلى 1995 ؛ 268 (4): 634-642. DOI: 10.1152 / ajprenal.1995.268.4.F634

7. Baum M، Dwarakanath V، Alpern RJ، Moe OW. آثار هرمون الغدة الدرقية على القشرة الكلوية الوليدية Na plus / H plus antiporter. الكلى الدولية 1998 ؛ 53 (5): 1254-1258. DOI: 10.1046 / j. 1523-1755. 1998.00879.x

8. Alcalde AI ، Sarasa M ، Raldúa D ، Aramayona J ، Morales R et al. دور هرمون الغدة الدرقية في تنظيم نقل الفوسفات الكلوي في الجرذان الصغيرة وكبار السن. طب الغدد الصماء 1999 ؛ 140 (4): 1544-1551. DOI: 10.1210 / endo.140.4.6658

9. Iglesias P ، Bajo MA ، Selgas R ، Díez JJ. ضعف الغدة الدرقية وأمراض الكلى: تحديث. مراجعات في اضطرابات الغدد الصماء والتمثيل الغذائي 2017 ؛ 18 (1): 131-144. DOI:

10.1007 / ثانية 11154-016-9395-710. Selvaraj S، Watt JA، Singh BB. يمنع TRPC1 تنكس الخلايا المبرمج الناجم عن السم العصبي الدوباميني MPTP / MPP plus. خلية الكالسيوم 2009 ؛ 46 (3): 209-218. DOI: 10.1016 / j.ceca.2009.07.008

11. Goda Y، Südhof TC. تنظيم الكالسيوم لإطلاق الناقل العصبي: هل يمكن الاعتماد عليه بشكل موثوق؟ الرأي الحالي في بيولوجيا الخلية 1997 ؛ 9 (4): 513-518. DOI: 10.1016 / s 0955-0674 (97) 80027-0

12. Sukumaran P ، Schaar A ، Sun Y ، Singh BB. الدور الوظيفي لقنوات TRP في تعديل إجهاد ER والالتهام الذاتي. كالسيوم الخلية 2016 ؛ 60 (2): 123-132. DOI: 10.1016 / j.ceca.2016.02.012

13. Goel M، Sinkins WG، Zuo CD، Estacion M، Schilling WP. تحديد وتوطين قنوات TRPC في الفئرانالكلى. المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء - فسيولوجيا الكلى 2006 ؛ 290 (5): 1241-1252. DOI: 10.1152 / ajprenal.00376.2005

14. Chubanov V ، Kubanek S ، Fiedler S ، Mittermeier L ، Gudermann T et al. وظائف الكلى لقنوات TRP في الصحة والمرض. في: أمير TLR (محرر). البيولوجيا العصبية لقنوات TRP. الطبعة الأولى. بوكا راتون ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية: CRC Press / Taylor & Francis؛ 2017. ص. 187-212.

15. Jeschke MG ، Gauglitz GG ، Song J ، Kulp GA ، Finnerty CC et al. يتوسط إجهاد الكالسيوم و ER يتوسط موت الخلايا المبرمج الكبدي بعد إصابة الحروق. مجلة الطب الخلوي والجزيئي 2009 ؛ 13 (8 ب): 1857-1865. DOI: 10.1111 / j. 1582-4934. 2009.00644.x

16. Sukumaran P ، Sun Y ، Zangbede FQ ، Nascimento da Conceicao V ، Mishra B et al. يعمل تعبير ووظيفة TRPC1 على تثبيط إجهاد ER وموت الخلايا في خلايا الغدد اللعابية. FASEB BioAdvanc es 2019 ؛ 1 (1): 40-50. DOI: 10.1096 / fab.1021

17. Zhao Y و Yan Y و Zhao Z و Li S و Yin J. التغيرات الديناميكية في علامات مسار إجهاد الشبكة الإندوبلازمية GRP78 و CHOP في حصين الفئران المصابة بداء السكري. نشرة أبحاث الدماغ 2015 ؛ 111: 27-35. DOI: 10.1016 / j.brainresbull.2014.12.00618. Araujo A و Schenkel P و Enzveiler A و Fernandes T و Partita W et al. دور إشارات الأكسدة والاختزال في تضخم القلب الناجم عن التجاربفرط نشاط الغدة الدرقية. مجلة علم الغدد الصماء الجزيئي 2008 ؛ 41 (6): 423-430. DOI: 10.1677 / JME -08-002419. وانج زد ، دو كارمو جم ، أبردين إن ، زو إكس ، ويليامز جم وآخرون. التفاعل التآزري بين ارتفاع ضغط الدم والسكري في تعزيز إصابة الكلى ودور إجهاد الشبكة الإندوبلازمية. ارتفاع ضغط الدم 2017 ؛ 69 (5): 879-891. DOI: 10.1161 / فرط التوتر .116.08560

20. Zhang LY و Zhang YQ و Zeng YZ و Zhu JL و Chen H et al. يمنع TRPC1 انتشار وهجرة سرطان الثدي الإيجابي لمستقبلات هرمون الاستروجين ويعطي تشخيصًا أفضل عن طريق تثبيط مسار PI3K / AKT. أبحاث وعلاج سرطان الثدي 2020 ؛ 182 (1): 21-33. DOI: 10.1007 / ثانية 10549-020-05673-8

21. الدبيان م. بروانثوسيانيدين بذور العنب يخفف من الإجهاد التأكسدي وموت الخلايا المبرمج في كبد الفئران المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية. البحث السنوي والمراجعة في علم الأحياء 2019: 1-11. DOI: 10.9734 / arb / 2019 / v33i630138

22. Sonmez E ، Bulur O ، Ertugrul DT ، Sahin K ، Beyan E et al.فرط نشاط الغدة الدرقيةيؤثر على وظائف الكلى. الغدد الصماء 2019 ؛ 65 (1): 144-148. DOI: 10.1007 / ثانية 12020-019-01903-2

23. Yan M ، Shu S ، Guo C ، Tang C ، Dong Z.الكلىإصابة. حوليات الطب 2018 ؛ 50 (5): 381-390. DOI: 10.1080 / 07853890.2018.1489142

24. Bezprozvanny I، Mattson MP. سوء التعامل مع الكالسيوم العصبي والتسبب في مرض الزهايمر. الاتجاهات في علوم الأعصاب 2008 ؛ 31 (9): 454-463. DOI: 10.1016 / j.tins.2008.06.005

25. ديكهوت جي جي ، كارلايل ري ، أوستن آر سي. العلاقة المتبادلة بين تضخم القلب وفشل القلب وأمراض الكلى المزمنة: إجهاد الشبكة الإندوبلازمية كوسيط للإمراض. بحوث الدورة الدموية 2011 ؛ 108 (5): 629-642. DOI: 10.1161 / circresaha.110.226803

26. Wu J، Zhang R، Torreggiani M، Ting A، Xiong H et al. يؤدي تحفيز مرض السكري في الفئران التي تتراوح أعمارها بين C57B6 إلى اعتلال الكلية الحاد: ارتباط بالإجهاد التأكسدي وإجهاد الشبكة الإندوبلازمية والالتهاب. المجلة الأمريكية لعلم الأمراض 2010 ؛ 176 (5): 2163-2176. DOI: 10.2353 / ajpath.2010.090386

27. Cybulsky AV. إجهاد الشبكة الإندوبلازمية في مرض الكلى البروتيني.الكلى2010 الدولية ؛ 77 (3): 187-193. دوى: 10.1038 / كي .2009.389

28. Lorz C ، Justo P ، Sanz A ، Subirá D ، Egido J et al. الإصابة الأنبوبية الكلوية التي يسببها الباراسيتامول: دور في إجهاد ER. مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى 2 0 04 ؛ 15 (2): 380-389. DOI: 10.1097 / 01.asn.0000111289.91206.b0

29. Inagi R ، Nangaku M ، Onogi H ، Ueyama H ، Kitao Y et al. تورط إجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ER) في إصابة خلية القدم الناجم عن التراكم المفرط للبروتين.الكلىالدولية 2005 ؛ 68 (6): 2639-2650. DOI: 10.1111 / j. 1523-1755. 2005.00736.x

30. يوشيدا H. ER الإجهاد والأمراض. مجلة FEBS 2007 ؛ 274 (3): 630-658. DOI: 10.1111 / j. 1742-4658. 2007.05639.x

31. Nesin V، Tsiokas L. TRPC1. في: Nilius B، Flockerzi V (محررون). قنوات الكاتيون المحتملة للمستقبلات العابرة للثدييات (TRP). الطبعة 24. برلين ، هايدلبرغ ، ألمانيا: Springer ؛ 2014. ص. 15-51.

32. He F ، و Peng F ، و Xia X ، و Zhao C ، و Luo Q et al. يعزز MiR -135 التليف الكلوي في اعتلال الكلية السكري عن طريق تنظيم TRPC1. السكري 2014 ؛ 57 (8): 1726-1736. DOI: 10.1007 / ثانية 00125-014-3282-0

33. Selvaraj S ، Sun Y ، Watt JA ، Wang S ، Lei S et al. يتضمن إجهاد ER الناجم عن السموم العصبية في الخلايا العصبية الدوبامينية للفأر تقليل تنظيم TRPC1 وتثبيط إشارات AKT / mTOR. مجلة التحقيقات السريرية 2012 ؛ 122 (4): 1354-1367. دوى: 10.1172 / JCI61332

34. Li J ، Wu W ، Zhao M ، Liu X. مشاركة TRPC1 في تضخم عضلة القلب الناجم عن Nampt من خلال تنشيط إجهاد ER. علم الأحياء الخلوي والجزيئي 2017 ؛ 63 (4): 33-37. DOI: 10.14715 / CMB / 2017.63.4.6