إنتاج الليباز بواسطة Yarrowia Lipolytica في تخمير الحالة الصلبة باستخدام المنتجات الثانوية لفاكهة الأمازون ووجبة فول الصويا كركيزة الجزء 2

2.5 زيت السمك التحلل المائي

تم استخدام الليباز في التحلل المائي للأحماض الدهنية لتركيز الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة (PUFAs) [44،45]. الميزة الرئيسية لتطبيق الليباز في إنتاج الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة هي خصوصية الإنزيم والتفاعلات التي تحدث في ظل ظروف درجات الحرارة المعتدلة ، والتي تفضل الحفاظ على بنية PUFAs [44]. يُفضل استخدام الليباز على الطرق الكيميائية نظرًا لأنها توفر جليسريدات ذات إنتاجية منخفضة ونقاء [46]. دور الليباز في التحلل المائي الانتقائي للأحماض الدهنية المشبعة (SFAs) والأحماض الدهنية الأحادية غير المشبعة (MUFAs) من ثلاثي الجلسرين (TAGs) هو إنتاج جليسريدات غنية بـ PUFAs. مبدأ هذه الطريقة هو العائق الفراغي الناجم عن التكوين الجزيئي للروابط المزدوجة للكربون رابطة الدول المستقلة في PUFAs التي تسبب طي سلاسل الأحماض الدهنية. وبالتالي ، فإن المواقع النشطة الأنزيمية لا تصل إلى روابط الإستر لهذه الأحماض الدهنية بهياكلها العظمية من الجلسرين [47 ، 48]. فوائد عديدة مرتبطة بإدخال الأحماض الدهنية في النظام الغذائي مثل نمو الطفل ، والوقاية من أمراض القلب والأوعية الدموية ، والسرطان ، والاضطرابات النفسية المختلفة (الاكتئاب ، واضطراب نقص الانتباه ، وفرط النشاط) ، بالإضافة إلى القدرة المضادة للالتهابات وارتفاع ضغط الدم المحتمل. السيطرة [49].

يمكن أن يزيد الجليكوزيد من cistanche أيضًا من نشاط SOD في أنسجة القلب والكبد ، ويقلل بشكل كبير من محتوى lipofuscin و MDA في كل نسيج ، ويزيل بشكل فعال العديد من جذور الأكسجين التفاعلية (OH- ، H₂O₂ ، إلخ) والحماية من تلف الحمض النووي الناتج عن ذلك. بواسطة OH- الجذور. جليكوسيدات Cistanche phenylethanoid لديها قدرة قوية على إزالة الجذور الحرة ، وقدرة تخفيض أعلى من فيتامين C ، وتحسن نشاط SOD في تعليق الحيوانات المنوية ، وتقليل محتوى MDA ، ولها تأثير وقائي معين على وظيفة غشاء الحيوانات المنوية. يمكن أن يعزز عديد السكاريد القارص نشاط SOD و GSH-Px في كريات الدم الحمراء وأنسجة الرئة للفئران المسنة تجريبياً الناتجة عن D-galactose ، وكذلك تقليل محتوى MDA والكولاجين في الرئة والبلازما ، وزيادة محتوى الإيلاستين ، تأثير الكسح الجيد على DPPH ، وإطالة وقت نقص الأكسجة في الفئران الشائخة ، وتحسين نشاط SOD في مصل الدم ، وتأخير التنكس الفسيولوجي للرئة في الفئران الشائخة تجريبياً مع التنكس المورفولوجي الخلوي ، أظهرت التجارب أن Cistanche لديه قدرة جيدة على مضادات الأكسدة وله القدرة على أن يكون دواءً لمنع وعلاج أمراض شيخوخة الجلد. في الوقت نفسه ، يتمتع إشنكوسايد في Cistanche بقدرة كبيرة على البحث عن الجذور الحرة لـ DPPH ولديه القدرة على البحث عن أنواع الأكسجين التفاعلية ومنع تدهور الكولاجين الناجم عن الجذور الحرة ، وله أيضًا تأثير إصلاح جيد على تلف أنيون الثايمين الجذور الحرة.

انقر فوق Cistanche Tubulosa

【لمزيد من المعلومات: george.deng@wecistanche.com / WhatApp: 86 13632399501】

يمكن أن يكون إنتاج مستخلصات الإنزيم التي سيتم تطبيقها في عمليات مثل التحلل المائي مهمة باهظة الثمن. وبالتالي ، فإن البحث عن المواد الخام التي تقلل من تكلفة الإنتاج يمكن أن يوفر بديلاً مثيرًا للاهتمام. من المرغوب فيه استخدام محفز حيوي صلب لأن هذا المحفز الحيوي الصلب يمكن إعادة استخدامه في التفاعلات الأنزيمية ، بالإضافة إلى ثبات تخزينه الممتاز في درجة حرارة الغرفة ، دون تكاليف التبريد ، وسهولة النقل [41]. لم تكن هناك تقارير عن استخدام محفز حيوي صلب من Yarrowia lipolytica لإنتاج PUFAS عن طريق التحلل الأنزيمي لزيت السمك. وهكذا ، تمت دراسة تطبيق المستخلص الأنزيمي الخام والمحفز الحيوي الصلب المنتج باستخدام كعكة زيت أندروبا وكسب فول الصويا (50:50) لتقييم التطبيق المحتمل للإنزيمات في التحلل المائي لزيت السمك لإنتاج المزيد من الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة في عملية مناسبة (الشكل 6). من الممكن ملاحظة درجة عالية من التحلل المائي (DH) في أوقات تفاعل أقصر باستخدام محفز حيوي صلب (63 ، 70.8 ، 72.5 ، 74.7 بالمائة) من المستخلص الإنزيمي (47.5 ، 61.5 ، 66.5 ، 74.8 بالمائة) بعد 24 ، 48 و 72 ساعة و 144 ساعة على التوالي.

يتم تطبيق عملية التحلل المائي الأنزيمي باستمرار للحصول على الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة المركزة. جاو وآخرون. [50] تم تحسين الليباز المستخدم في التحلل المائي لزيت سمك القد ومحتويات EPA و DHA 3. 24- أضعاف و 1. 98- أضعاف ، على التوالي. آرثي وآخرون. [20] استخدم الليباز المركز (1000 وحدة / مل) في التحلل المائي لزيوت السمك ، كما وجد معدل تحلل مائي أعلى من 60 في المائة بعد 72 ساعة. في هذا العمل ، تم تحقيق درجات تحلل مائي أفضل باستخدام مستخلص إنزيمي خام من الليباز (أي بدون تنقية) عند مقارنة نفس وقت التحلل المائي. درس مؤلفون آخرون التحلل المائي لزيت كبد Musteleus mustelus وزيت شحوم الفقمة بالإبلاغ عن 75 في المائة و 70 في المائة من التحلل المائي بعد 24 و 9 ساعات من التفاعل ، على التوالي [25،26].

Martins et al. [51] استخدم الليباز التجاري من Burkholderia cepacia (Amano) للتحلل المائي لزيت السمك وبعد 48 ساعة من التفاعل ، تم الحصول على 55.6٪ من DHA مقارنة بأقصى محتوى محسوب. في عملنا ، في دراسة أولية ، حصلنا على 70.8 في المائة من التحلل المائي بعد 48 ساعة من التفاعل باستخدام الحفاز الحيوي الصلب.

حتى الآن ، اقترحت هذه النتائج جدوى استخدام المنتجات الثانوية لإنتاج الليباز في تخمير الحالة الصلبة كطريقة لتخفيف الضرر البيئي ، وتقييم المنتجات الثانوية ، وفعالية التكلفة. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر النتائج التطبيق المحتمل لإنزيم الليباز في التحلل المائي لزيت السمك لزيادة إنتاج الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة في عملية مناسبة.

على الرغم من وفرة المنتجات الثانوية الصناعية الزراعية منخفضة التكلفة ، إلا أن تحديد وتوحيد التكوين ، بالإضافة إلى تقدير التكلفة للحصول على المستخلص الأنزيمي والمحفز الحيوي الصلب من المنتجات الثانوية الصناعية الزراعية منخفضة التكلفة ، لا يزال يمثل تحديًا ، ولكن يعتمد بشكل كبير على نوع المنتج الثانوي ، والموسمية ، والكمية الناتجة بالإضافة إلى العملية المستخدمة ، والموقع الجغرافي ، من بين عوامل أخرى. وبالتالي ، يجب التغلب على قضايا مثل تعقيد السلسلة وتكاليفها اللوجستية ، واستخدام العمليات المعقدة والمكلفة ، والاستهلاك العالي للطاقة ، والقضايا التنظيمية ، من بين أمور أخرى. بهذا المعنى ، يجب أن تتغلب معالجة المنتجات الثانوية على العديد من الحواجز قبل أن تصبح مجدية اقتصاديًا بما في ذلك الحاجة إلى معالجة كميات كبيرة من المواد الخام ، والقدرة على معالجة المواد الخام غير المتجانسة ، واللوجستيات المتكاملة مع صناعات المعالجة المختلفة ، وإمكانية التكامل عملية في وحدة المعالجة للسماح بتوليد مكونات عالية القيمة ، من بين أمور أخرى [52-55].

3. المواد والطرق

3.1. مادة

تم شراء وجبة فول الصويا من Caramuru Alimentos (Goiás ، البرازيل). تم توفير كعكة زيت أنديروبا المنتجة من استخراج الزيت بواسطة Beraca Ingredientes Naturais (بارا ، البرازيل). تم توحيد كلا الركيزتين حول قياس الحبيبات (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).

3.2 الكائنات الحية الدقيقة وظروف زراعة اللقاح

Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682 ، المعزول من مصب نهر في خليج جوانابارا ، ريو دي جانيرو ، البرازيل [56] تمت زراعته عند 28 درجة مئوية في YPD - وسط أجار (وزن / حجم: مستخلص الخميرة 1 في المائة ؛ الببتون ، 2 في المائة ؛ الجلوكوز ، 2 في المائة ؛ أجار ، 3 في المائة). نمت الخلايا في وسط سائل يحتوي على مستخلص الخميرة 1٪ (وزن / حجم) ، ببتون ، 2٪ (وزن / حجم) ، وجلوكوز 2٪ (وزن / حجم) لمدة 72 ساعة ، 160 دورة في الدقيقة عند 28 درجة مئوية.

3.3 توصيف المنتجات الثانوية الصناعية الزراعية

تم تحديد التركيب الفيزيائي والكيميائي لوجبة فول الصويا وكعكة زيت الأندروبا من حيث الرطوبة والبروتين والكربوهيدرات والرماد ومستخلص الأثير والألياف غير القابلة للذوبان ومحتوى الألياف القابلة للذوبان ، وفقًا للمنهجية التي أبلغت عنها جمعية الكيميائيين التحليليين الرسميين (AOAC). ) [57]. بالإضافة إلى ذلك ، نظرًا لأن إنتاج الليباز بواسطة Y. lipolytica يتأثر بالتهوية [58] ، تم تقييم مسامية الطبقة في SSF وفقًا للمعادلة (1) ، حيث ε هي المسامية (معبرًا عنها في m3 air · m − 3 bed) ؛ ρ الجاف الصلبة هي الكثافة الظاهرية للعينة الجافة (كجم · م · 3) ؛ و ρwetsolid هو كثافة العينة بعد إضافة الماء (kg · m 3) [58].

3.4. إنتاج الليباز بواسطة SSF

تم تحضير المصفوفة الصلبة المحتوية على مسحوق فول الصويا وكسب زيت الأندروبا قبل التلقيح في مفاعل من نوع صينية بنسب مختلفة من الركيزة وتعقيمها عند 121 درجة مئوية لمدة 2 0 دقيقة. كانت معاملات العملية الثابتة المستخدمة لإنتاج الليباز هي الرطوبة بنسبة 55 في المائة وتركيز اللقاح 0.71 مجم من الكتلة الحيوية الجافة / جرام من الركيزة [24]. تم تحضين المفاعلات في غرفة طلب الأكسجين الكيميائي الحيوي (BOD) عند 28 درجة مئوية وتم أخذ عينات الذبيحة (أي مفاعل من نوع صينية واحدة لوقت أخذ العينات) خلال عملية التخمير لتحليلها.

تم تقييم SSF باستخدام توليفات مختلفة من زيت أنديروبا وكسب فول الصويا ({0}}: 1 {{1 0}} 0 ؛ 25:75 ؛ 50:50 ؛ 75 : 25 و 100: 0) في أوقات مختلفة (0 ، 12 ، 24 ، 32 ، 48 ساعة). بعد ذلك ، تم تقييم إضافة المصفوفة الصلبة المحتوية على كعكة زيت أندروبا ووجبة فول الصويا (50:50) بإضافة 1.5 (بالمائة وزن / حجم) من زيت الصويا بمرور الوقت (0 ، 12 ، 14 ، 20 ، 24 ، 28 ، 48 ، و 72 ح) للحصول على زيادة في نشاط تحلل الدهون. بالإضافة إلى ذلك ، تم اختبار وجود توين 80 (0.001 بالمائة وزن / حجم) في وسط التخمير المحتوي على 1.5 (بالمائة وزن / حجم) زيت فول الصويا. تمت مراقبة التخمر عن طريق تحديد نشاط الليباز والبروتياز وكذلك الرطوبة ودرجة الحموضة (الموصوفة في القسم الفرعي "3.6. التحديدات التحليلية").

3.5 استخراج الإنزيم وإنتاج المحفز الحيوي الصلب

تم إجراء استخلاص الإنزيم بإضافة 5 0 مل من محلول فوسفات البوتاسيوم 50 ملي مولار درجة الحموضة 7.0 في المفاعلات الحيوية متبوعًا بالحضانة عند 37 درجة مئوية ، 200 دورة في الدقيقة ، لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك ، تم ضغط المادة المخمرة المعلقة في المخزن المؤقت باستخدام هراسة مع النظرة وطردها عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق. تم الحصول على المحفز الحيوي الصلب من التجميد والتجفيف للكتلة الكاملة التي تم الحصول عليها في نهاية عملية التخمير لمدة 72 ساعة وتخزينها في درجة حرارة الغرفة لمدة 7 أشهر للتحقق من الاستقرار الإنزيمي.

3.6 قرارات تحليلية

3.6.1. نشاط الليباز

تم إجراء نشاط الليباز باستخدام الطريقة التي اقترحها Freire et al. [59]. تم استحلاب وسط التفاعل في خالط Ultra Turrax (IKA) باستخدام 5 بالمائة (وزن / حجم) زيت زيتون و 5 بالمائة (وزن / حجم) صمغ عربي في 1 0 0 ملي مولار فوسفات عازلة (pH 7. 0). تمت إضافة المستخلص الإنزيمي (1 مل) أو 0.5 جم من المحفز الحيوي الصلب إلى 19 مل من خليط التفاعل وحضنت لمدة 20 دقيقة ، 200 دورة في الدقيقة عند 37 ْم. تمت مقاطعة التفاعل بإضافة 20 مل من محلول الأسيتون- الإيثانول وتمت معايرة الأحماض الدهنية الحرة في معايرة تلقائية (Metrohm 916 - Ti-Touch) باستخدام 0.04 مول / لتر من محلول NaOH. تم تعريف وحدة واحدة من نشاط الليباز (U) على أنها كمية الإنزيم التي تنتج 1 ميكرو مول من الأحماض الدهنية في الدقيقة ، في ظل ظروف الفحص.

3.6.2. نشاط البروتياز

تم قياس نشاط البروتياز وفقًا للمنهجية بواسطة تشارني وتوماريلي [6 0]. تمت إضافة المستخلص الإنزيمي (0. 5 مل) في 0. 5 مل من 0. 5 بالمائة (وزن / حجم) محلول أزوكاسين محضر بمخزن أسيتات 50 ملي مولار (pH) وحضنته عند 32 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة. تم إيقاف التفاعل بإضافة 0.5 مل من محلول ثلاثي حمض كلورو أسيتيك 15 بالمائة (وزن / حجم) وتم طرد العينات عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة. تمت إضافة المادة الطافية (100 ميكرولتر) في صفيحة ميكروترية 96- تحتوي على 100 ميكرولتر من 5 مولار من هيدروكسيد البوتاسيوم ، وتم قياس الامتصاصية عند 428 نانومتر في قارئ لوحة ميكروتيتر (SpectraMax ، Molecular Devices). تم تعريف وحدة نشاط واحدة على أنها كمية الإنزيم القادر على تعزيز زيادة وحدوية في الامتصاص في الدقيقة.

3.6.3. محتوى الرطوبة ودرجة الحموضة

تمت مراقبة محتوى الرطوبة باستخدام ميزان محلل الرطوبة (و MX -50). تم قياس الأس الهيدروجيني على مقياس الأس الهيدروجيني (TECNAL ، الطراز TR -107 PT100 ، البرازيل).

3.7 SDS-PAGE

تم إجراء الرحلان الكهربائي وفقًا للطريقة التي تم الإبلاغ عنها بواسطة Laemmli [61] في هلام بولي أكريلاميد (5 بالمائة تكديس ، فصل 15 بالمائة ، 0. سمك 75 مم). تم خلط العينات بنسبة (1: 4) من مزيج من كعكة زيت أنديروبا وفول الصويا (50:50) مع عينة عازلة تحتوي على -mercaptoethanol ، وتم تسخينها عند 95 درجة مئوية لمدة 5 دقائق ، وتم وضعها على الجل. تم إجراء الرحلان الكهربائي عند 150 فولت لمدة 30 دقيقة (Bio-Rad ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وتم الكشف عن الجل باستخدام Coomassie Blue R -250. تم استخدام محدد البروتين القياسي (Bio-rad ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) بوزن جزيئي يتراوح من 10 إلى 250 كيلو دالتون.

3.8 التحلل المائي لزيت السمك: تطبيق محتمل

تم قياس درجة التحلل المائي (DH) لزيت السمك بوزن 1 جرام من زيت السمك وإضافة 25 مل من محلول الفوسفات pH 7. 0 للتحقق من التطبيق المحتمل للإنزيم في التحلل المائي لزيت السمك. بعد ذلك ، تم تقليب 5 مل من المستخلص الأنزيمي (37 وحدة) في قوارير الكهرمان لمدة 168 ساعة. تم إيقاف التفاعل بـ 2 0 مل من الأسيتون وتمت معايرة الأحماض الدهنية الحرة في جهاز معايرة آلي باستخدام 0.1 مولار ميثانولي KOH. تم الحصول على فراغ التفاعل بإضافة الإنزيم فقط في نهاية التفاعل.

تم حساب درجة التحلل المائي (DH) وفقًا للمعادلة (2):

أين كما هي حموضة العينة ؛ أأ هي الحموضة من التحلل الذاتي ؛ Si هو مؤشر التصبن.

3.9 تحليل احصائي

تم تكرار جميع التجارب ثلاث مرات. في كل تكرار ، أجريت التحليلات في ثلاث نسخ. تتوافق النتائج مع متوسط ​​± الانحراف المعياري. تم تحليل البيانات من خلال تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) بينما تم استخدام اختبار Tukey (p <0. 05) لاختبار الاختلافات بين الوسائل باستخدام Sisvar 5.6.

4 - نتائج

كان وسط التخمير الذي تم الحصول عليه بعد خلط كعكة زيت أنديروبا وكسب فول الصويا فعالاً للغاية في إنتاج الليباز. كانت مصفوفة التخمير المختارة عبارة عن خليط من عجينة زيت الأندروبا وكسب فول الصويا بنسبة 5 0: 50 ، مما أدى إلى إنتاج 63.70 وحدة دولية · جم -1 من نشاط التحلل الدهني. تم الحصول على أقصى فعالية لتحلل الدهون (82.52 U · g 1) بعد استخدام نسبة 50:50 من عجينة زيت أندروبا وكسب فول الصويا بنسبة 50:50 بعد إضافة Tween 80 (0.001٪) وزيت فول الصويا (1.5٪). في التحليل الكهربي ، تم اكتشاف نطاقات من البروتينات التي تم الإبلاغ عنها بالفعل في الأدبيات مثل YL Lip2 (37 و 40 كيلو دالتون). قدم التطبيق السابق للليباز في التحلل المائي للزيت ما يصل إلى 63 في المائة من التحلل المائي بعد 24 ساعة. أظهرت هذه الدراسة أنه من الممكن إنتاج الليباز باستخدام منتجات ثانوية من منطقة الأمازون جنبًا إلى جنب مع مسحوق فول الصويا وتطبيقه على التحلل المائي لزيت السمك لزيادة إنتاج الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة في عملية مناسبة.

الكاتب الاشتراكات:وضع المفاهيم ، BDR ، ACL و MAZC ؛ المنهجية ، ASSC ، JCSS ، FVdN ، CECdS ، BDR ، ACL و MAZC ؛ التحليل الرسمي ، ASSC ، JCSS و FVdN ؛ التحقيق و ASSC و JCSS و FVdN ؛ الموارد ، ASSC ، JCSS و FVdN ؛ معالجة البيانات و ASSC و JCSS و FVdN ؛ الكتابة - إعداد المسودة الأصلية ، ASSC ، JCSS ، FVdN و CECdS ؛ الكتابة - المراجعة والتحرير ، BDR ، CECdS ، ACL و MAZC ؛ الإشراف ، BDR ، CECdSACL و MAZC ؛ إدارة المشروع ، BDR ، ACL و MAZC ؛ الحصول على التمويل ، BDR ، ACL و MAZC لقد قرأ جميع المؤلفين النسخة المنشورة من المخطوطة ووافقوا عليها.

شكر وتقدير: يعترف المؤلفون بـ Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES - Finance Code 001) ؛ Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq) ؛ و Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).

مراجع

1 - سيرا ، جيه إل ؛ رودريغز ، AMdC ؛ فريتاس ، را. ميريليس ، AJdA ؛ دارنت ، SH ؛ Silva، LHMd مصادر بديلة للزيوت والدهون من نباتات الأمازون: الأحماض الدهنية وأدوات الميثيل والكاروتينات الكلية والتركيب الكيميائي. الدقة الغذائية. كثافة العمليات 2019 ، 116 ، 12–19. [CrossRef] [PubMed]

2 - بينيدو ، سي. كونتي ، FP ؛ شاغاس ، مرض التصلب العصبي المتعدد ؛ رودريغز ، كاليفورنيا ؛ بيريرا ، جي إف ؛ Henriques ، MG التأثيرات المضادة للالتهابات من tetranortriterpenoids الطبيعية المعزولة من Carapa guianensis Aublet على التهاب المفاصل الناجم عن zymosan في الفئران. التهاب. الدقة. 2006 ، 55 ، 457-464. [CrossRef] [PubMed]

3 - بنيدو ، سي. كوستا ، كا ؛ بينافورتي ، RJ ؛ كوستا ، إم إف ؛ بيريرا ، جي إف ؛ سياني ، أس ؛ Henriques، MG التأثيرات المضادة للحساسية من tetranortriterpenoids الطبيعية المعزولة من Carapa guianensis Aublet على نفاذية الأوعية الدموية التي يسببها الحساسية وفرط التألم. التهاب. الدقة. 2005 ، 54 ، 295-303. [CrossRef]

4 - سانتوس ، KIP ؛ بني جميم ، JKF ؛ كوستا ، KAD ؛ ريس ، أ. سوزا بينيرو ، WB ؛ Santos، AS تقنيات الأيض المطبقة في التحقيق في الأحماض الفينولية من المنتجات الثانوية الصناعية الزراعية من Carapa guianensis Aubl. عرب. J. كيم. 2021 ، 14 ، 103421. [CrossRef]

5. Lourenço، JNP؛ فيريرا ، LMM ؛ مارتينز ، جي سي ؛ Nascimento، DG Produção، Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet؛ Sob Manejo Comunitário em Parintins، AM: Brasília، Brazil، 2017؛ p.36.

6. عضوي ، S. Óleo de Andiroba.

7. كوناب. Boletim da Sociobiodiversidade ؛ كوناب: برازيليا ، البرازيل ، 2017 ؛ المجلد 1 ، ص. 67.

8. سوزا ، CR ؛ ليما ، يوان ؛ أزيفيدو ، CP ؛ روسي ، إل إم بي أنديروبا (كارابا جويانينسيس أوبل) ؛ Embrapa Amazônia Ocidental: برازيليا ، البرازيل ، 2006 ؛ 21 ص.

9 - أوليفيرا ، ف. سوزا ، م ؛ Peclat ، VROL ؛ سالغادو ، جم ؛ ريبيرو ، دينار بحريني ؛ كويلو ، ماز ؛ فينانسيو ، أ. Belo، I. تحسين إنتاج الليباز بواسطة Aspergillus ibericus من كعك الزيت وتطبيقه في تفاعلات الأسترة. الغذاء Bioprod. عملية. 2017 ، 102 ، 268-277. [CrossRef]

10. باندي ، أ. تخمر الحالة الصلبة. بيوتشيم. م. ياء 2003 ، 13 ، 81-84. [CrossRef]

11. Martínez، O .؛ سانشيز ، أ. الخط ، X. ؛ Barrena، R. تعزيز الإنتاج الحيوي لمركبات عطرية ذات قيمة مضافة عن طريق تخمير الحالة الصلبة لتفل قصب السكر ودبس بنجر السكر: استراتيجيات تشغيلية وتوسيع نطاق العملية. بيوريسور. تكنول. 2018، 263، 136–144. [CrossRef] [PubMed]

12. Ano، T .؛ جين ، جي. ميزوموتو ، إس. الرحمن ، MS ؛ أوكونو ، ك. Shoda، M. تخمير الحالة الصلبة للمضاد الحيوي الببتيد الدهني iturin A باستخدام نظام مفاعل تخمير الحالة الصلبة الجديد. J. البيئة. علوم. 2009، 21 (ملحق S1) ، S162 – S165. [CrossRef]

13. Vandenberghe، LPS؛ كارب ، إس جي ؛ أوليفيرا ، بي زد ؛ كارفالو ، جي سي ؛ رودريغز ، سي ؛ Soccol ، CR الفصل 18 - تخمير الحالة الصلبة لإنتاج الأحماض العضوية. في التطورات الحالية في التكنولوجيا الحيوية والهندسة الحيوية ؛ Pandey، A.، Larroche، C.، Soccol، CR، Eds.؛ إلسفير: أمستردام ، هولندا ، 2018 ؛ ص 415 - 434.

14. سالا أ. فيتون ، إس. بارينا ، ر. سانشيز ، أ. أرتولا ، أ. مسح النفايات الصناعية الزراعية كركائز لإنتاج المبيدات الحيوية الفطرية: استخدام Beauveria bassiana و Trichoderma harzianum في تخمير الحالة الصلبة. J. البيئة. ماناج. 2021، 295، 113113. [CrossRef] [PubMed]

15. بنات ، إم ؛ كاربوي ، س. Saucedo-Castañeda، G.؛ de Jesús Cázares-Marinero، J. Biosurfactants: التوليد الأخضر للمواد الكيميائية المتخصصة والإنتاج المحتمل باستخدام تقنية تخمير الحالة الصلبة (SSF). بيوريسور. تكنول. 2021، 320، 124222. [CrossRef] [PubMed]

16. بيريرا ، أ. سانتانا ، GCF ؛ Amaral ، PFF Mango نفايات صناعية زراعية لإنتاج الليباز من Yarrowia lipolytica وإمكانات المادة الصلبة المخمرة كمحفز حيوي. الغذاء Bioprod. عملية. 2019 ، 115 ، 68-77. [CrossRef]

17. Brígida، AIS؛ أمارال ، PFF ؛ كويلو ، ماز ؛ Gonçalves ، LRB Lipase من Yarrowia lipolytica: الإنتاج والتوصيف والتطبيق كمحفز حيوي صناعي. J. مول. كاتال. إنزيم ب. 2014 ، 101 ، 148-158. [CrossRef]

18. Treichel، H. أوليفيرا ، د. مازوتي ، ماساتشوستس ؛ دي لوسيو ، م. أوليفيرا ، جيه في مراجعة عن إنتاج الليباز الميكروبي. الغذاء Bioprocess Technol. 2010 ، 3 ، 182-196. [CrossRef]

19. ميهتا ، أ. جوليريا ، إس. شارما ، ر. Gupta، R. 6 - الليباز وتطبيقاتها مع التركيز على صناعة المواد الغذائية. في التكنولوجيا الحيوية الميكروبية في الغذاء والصحة ؛ راي ، أرسي ، إد. المطبعة الأكاديمية: كامبريدج ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 2021 ؛ ص 143 - 164.

20. آرثي ، م. سارافانان ، ص. أيادوراي ، إن. جووثامان ، عضو الكنيست ؛ Kamini، NR عملية من خطوتين لإنتاج أوميغا {2}} مركزات الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة من زيت السردين باستخدام Cryptococcus sp. MTCC 5455 ليباز. J. مول. كاتال. إنزيم ب. 2016 ، 125 ، 25–33. [CrossRef]

21. ناسيمنتو ، FV ؛ كاسترو ، صباحا ؛ Secchi ، AR ؛ Coelho، MAZ نظرة ثاقبة على مكملات الوسائط في حالة التخمير الصلبة لجسم فول الصويا بواسطة Yarrowia lipolytica: التأثير على إنتاج الليباز في الدرج والمفاعلات الحيوية ذات القاعدة المعبأة المعزولة. بيوتشيم. م. J. 2021، 166، 107866. [CrossRef]

22. المبيعات JCS. كاسترو ، صباحا ؛ ريبيرو ، دينار بحريني ؛ مكملات كويلو وماز لقشور البطيخ كمحسّن لإنتاج الليباز والإستريز بواسطة Yarrowia lipolytica في التخمير في الحالة الصلبة واستخدامهما المحتمل كمحفزات حيوية في تفاعلات إزالة البلمرة من البولي (إيثيلين تيريفثاليت) (PET). بيوكتال. التحويل الحيوي. 2020 ، 38 ، 457-468. [CrossRef]

23. Aguieiras، ECG؛ دي باروس ، DSN ؛ فرنانديز لافوينتي ، ر. Freire، DMG إنتاج الليباز في مسحوق بذور القطن واستخدام المادة الصلبة المخمرة كمحفز حيوي في تفاعلات الأسترة والأسترة التبادلية. تجديد. الطاقة 2019 ، 130 ، 574-581. [CrossRef]

24. سوزا، CEC؛ فارياس ، ماجستير ؛ ريبيرو ، دينار بحريني ؛ Coelho ، MAZ تضيف قيمة إلى المنتجات الصناعية الزراعية المشتركة من الكانولا واستخراج زيت فول الصويا من خلال إنتاج الليباز باستخدام Yarrowia lipolytica في تخمير الحالة الصلبة. تثمين الكتلة الحيوية للنفايات 2017 ، 8 ، 1163-1176. [CrossRef]

25. هو ، ح. ؛ لي ، واي. تشانغ ، إل. دينغ ، زي. شي ، جي.فهم وتطبيق تنظيم النيتروجين العصوي: منظور البيولوجيا التركيبية. جيه أدف. الدقة. 2022 ؛ في الصحافة. [CrossRef]

26. ألميدا، AF؛ Taulk-Tornisielo ، SM ؛ كارمونا ، EC تأثير مصادر الكربون والنيتروجين على إنتاج الليباز بواسطة سلالة المبيضات فيسواناثان المعزولة حديثًا. آن. ميكروبيول. 2013 ، 63 ، 1225-1234. [CrossRef]

27. صالحو أ. علم ، MZ ؛ عبد الكريم ، ميشيغان ؛ صالح ، إنتاج HM Lipase: نظرة ثاقبة في استخدام المخلفات الزراعية المتجددة. ريسور. كونسيرف. إعادة التدوير. 2012، 58، 36-44. [CrossRef]

28. Liu، X .؛ يو ، العاشر ؛ هو ، أ. شيا ، ياء ؛ هو ، ياء ؛ دينغ ، واي. شو ، ن. كيو ، زي. وانغ ، X. ؛ Zhao، P. التخمير في وعاء واحد لإنتاج الإريثريتول من حبيبات المقطرات عن طريق الزراعة المشتركة لـ Yarrowia lipolytica و Trichoderma reesei. بيوريسور. تكنول. 2022، 351، 127053. [CrossRef] [PubMed]

29. Wang، W. وي ، ح. Alahuhta ، م. تشين ، العاشر ؛ هيمان ، د. جونسون ، DK ؛ تشانغ ، م. هيميل ، ME تعبير غير متجانس من إنزيمات الزيلاناز في الخميرة الشحمية Yarrowia lipolytica. بلوس وان 2014 ، 9 ، e111443. [CrossRef] [PubMed]

30. ناسيمنتو. ليميس ، AC ؛ كاسترو ، أيه إم دي ؛ Secchi ، AR ؛ زارور كويلو ، ماجستير منظور التطور الزمني لإنتاج الليباز بواسطة Yarrowia lipolytica في تخمير الحالة الصلبة. العمليات 2022 ، 10 ، 381. [CrossRef]

31. Mandari، V.؛ نعمة ، أ. Devarai، SK التحسين المتسلسل والإنتاج على نطاق واسع للليباز باستخدام خليط ثلاثي الركيزة من Aspergillus niger MTCC 872 عن طريق التخمير في الحالة الصلبة. عملية Biochem. 2020 ، 89 ، 46-54. [CrossRef]

32. Mala، JG؛ إدوينوليفر ، إن جي ؛ كاميني ، NR ؛ Puvanakrishnan، R. تخمر الحالة الصلبة للركيزة المختلطة لإنتاج واستخراج الليباز من Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. ميكروبيول. 2007 ، 53 ، 247-253. [CrossRef]

33. بارث ، جي. جيلاردين ، C. Yarrowia lipolytica. في الخمائر غير التقليدية في التكنولوجيا الحيوية ؛ وولف ، ك ، إد ؛ سبرينغر: نيويورك ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 1996 ؛ ص 313 - 388.

34- مفتاح ، ولاية أ. Grbavˇci´c، S.؛ زوا ، م. Lukovi´c، N. ؛ Bezbradica ، د. Kneževi´c-Jugovi´c، Z. إضافة قيمة إلى كعكة الزيت كنفايات من صناعة معالجة النفط: يستخدم إنتاج الليباز والبروتياز بواسطة الكانديدا في تخمير الحالة الصلبة. تطبيق بيوتشيم. التكنولوجيا الحيوية. 2012، 166، 348–364. [CrossRef]

35. كونتيسيني ، FJ ؛ دا سيلفا ، VC ؛ ماسيل ، رف ؛ دي ليما ، RJ ؛ باروس ، FF ؛ de Oliveira Carvalho، P. تحليل سطحي الاستجابة لإنتاج الليباز الانتقائي من Aspergillus niger عن طريق التخمير في الحالة الصلبة. J. ميكروبيول. 2009 ، 47 ، 563-571. [CrossRef]

36. ريغو ، إي. Ninow ، JL ؛ دي لوسيو ، م. أوليفيرا ، ج. بولوني ، الإمارات العربية المتحدة ؛ ريموناتو ، د. أربتر ، ف. فاردانيجا ، ر. أوليفيرا ، د. إنتاج Treichel ، H. Lipase عن طريق التخمير الصلب لوجبة فول الصويا بمكملات مختلفة. LWT Food Sci. تكنول. 2010 ، 43 ، 1132-1137. [CrossRef]

37. Sun، SY؛ Xu ، Y. تخمير الحالة الصلبة لإنتاج "الليباز الاصطناعي كامل الخلية" من Rhizopus chinensis وتحديد الإنزيم الوظيفي. عملية Biochem. 2008 ، 43 ، 219-224. [CrossRef]

38. فارياس، MA؛ Valoni ، EA ؛ كاسترو ، صباحا ؛ Coelho ، MAZ Lipase إنتاج Yarrowia Lipolytica في تخمير الحالة الصلبة باستخدام مخلفات الصناعات الزراعية المختلفة. تشيم. م. عبر. 2014 ، 38 ، 301-306.

39. Sidhu، P.؛ شارما ، ر. سوني ، SK ؛ Gupta، JK إنتاج الليباز القلوي خارج الخلية بواسطة عصيات جديدة محبة للحرارة. فوليا ميكروبيول. 1998 ، 43 ، 51-54. [CrossRef]

40. Corzo، G.؛ Revah ، S. إنتاج وخصائص الليباز من Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. تكنول. 1999 ، 70 ، 173-180. [CrossRef]

41. سوزا، CEC؛ ريبيرو ، دينار بحريني ؛ Coelho ، MAZ توصيف وتطبيق Yarrowia lipolytica Lipase التي تم الحصول عليها عن طريق تخمير الحالة الصلبة في تخليق الإسترات المختلفة المستخدمة في صناعة الأغذية. تطبيق بيوتشيم. التكنولوجيا الحيوية. 2019 ، 189 ، 933-959. [CrossRef]

42. فيكرز ، ب. فداليج ، ف. دال ، MTL ؛ كازاريجولا ، إس. جيلاردين ، سي ؛ ثونارت ، ب. Nicaud ، JM تحديد وتوصيف جينات LIP7 و LIP8 التي تشفر اثنين من الليباز ثلاثي الجلسرين خارج الخلية في الخميرة Yarrowia lipolytica. الجينات الفطرية. بيول. 2005 ، 42 ، 264-274. [CrossRef]

43. Cheng، Y.-H .؛ هسياو ، FS-H. ؛ ون ، سي إم. وو ، سي واي. ديبوس ، أ. Yu ، Y.-H. التخمير المختلط لوجبة فول الصويا بالبروتياز والبروبيوتيك وتأثيره على أداء النمو والاستجابة المناعية في دجاج التسمين. J. أبل. الرسوم المتحركة. الدقة. 2019 ، 47 ، 339-348. [CrossRef]

44- تشاكرابورتي ، ك. Paul Raj، R. التخصيب الانتقائي للأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة n 3 مع طول سلسلة أسيل C18 - C20 من زيت السردين باستخدام Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipase. الغذاء تشيم. 2009 ، 114 ، 142-150. [CrossRef]

45. زاراي ، ز. إدهيش ، أ. ريجانو ، ف. أوتيري ، م. ميكاليزي ، ج. دوجو ، ص. مونديللو ، إل. Cacciola، F. توصيف الجلسرين الأحادي و diacylglycerols الغني بالأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة الناتجة عن التحلل المائي لزيت كبد Musteleus mustelus المحفز بواسطة الليباز البكتيري الثابت. تشروماتوجر. 2020، 1613، 460692. [CrossRef]

46. ​​Yang، J.؛ سونغ ، العاشر ؛ وانغ ، إل. Cui ، Q. تحليل شامل للتغييرات الأيضية في Schizochytrium sp. سلالات ذات محتوى مختلف من DHA. تشروماتوجر. ب 2020، 1160، 122193. [CrossRef]

47. Yang، Z .؛ جين ، دبليو. تشنغ ، العاشر ؛ دونغ ، زي. تشانغ ، م. Wang، X. التخصيب الأنزيمي لـ n -3 جلسريدات الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة عن طريق التحلل المائي الانتقائي. الغذاء تشيم. 2021 ، 346 ، 128743. [CrossRef]

48. أوكادا ، ت. Morrissey، MT إنتاج ن -3 مركز الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة من زيت السردين بواسطة الليباز المبيضات الروجوزا المعطلة. J. Food Sci. 2008، 73، C146-C150. [CrossRef]

49. Riediger، ND؛ عثمان رضي الله عنه ؛ سوه ، م. Moghadasian، MH مراجعة منهجية لأدوار n -3 الأحماض الدهنية في الصحة والمرض. جيه. نظام عذائي. مساعد. 2009 ، 109 ، 668-679. [CrossRef] [PubMed]

50. Gao، K. تشو ، دبليو. الشمس ، ياء ؛ Mao، X. تحديد الليباز القلوي القادر على إثراء EPA بشكل أفضل من DHA بسبب انتقائية الأحماض الدهنية والانتقائية النسبية. الغذاء تشيم. 2020، 330، 127225. [CrossRef]

51. Martins، PA؛ تروبو ماسيدا ، إل. ليما، FA؛ دي مورايس جونيور ، دبليو جي ؛ دي ماركو ، جيه إل ؛ سالوم ، تي إف سي ؛ Guisán، JM Omega -3 عن طريق التحلل المائي لزيت السمك باستخدام الليباز من Burkholderia gladioli BRM58833 المثبت والمثبت بواسطة تقنيات ما بعد التثبيت. بيوتشيم. بيوفيز. 2022، 29، 101193. [CrossRef] [PubMed]

52. Lemes، AC؛ Egea ، ميغابايت ؛ أوليفيرا فيلهو ، JGd ؛ Gautério، GV؛ ريبيرو ، دينار بحريني ؛ Coelho ، طرق MAZ البيولوجية لاستخراج المركبات النشطة بيولوجيًا من المنتجات الثانوية الصناعية الزراعية: مراجعة. أمام. بيونج. التكنولوجيا الحيوية. 2022 ، 9 ، 1-18. [CrossRef] [PubMed]

53. Lemes، AC؛ سالا ، إل. خامات ، JDC ؛ براغا ، مركز البحوث الزراعية ؛ Egea ، ميغابايت ؛ فرنانديز ، KF مراجعة لأحدث التطورات في الببتيدات النشطة بيولوجيًا المشفرة من النفايات الغنية بالبروتين. كثافة العمليات J. مول. علوم. 2016 ، 17 ، 950. [CrossRef]

54. Lemes، AC؛ كويلو ، ماز ؛ Gautério، GV؛ بولا ، ل. Filho ، JGdO ؛ Egea، MB الفصل 11 - النفايات الصناعية والمنتجات الثانوية: مصدر للأغذية الوظيفية ، المغذيات ، والبوليمرات الحيوية. في البوليمرات الحيوية في المغذيات والأغذية الوظيفية ؛ الجمعية الملكية للكيمياء: لندن ، المملكة المتحدة ، 2023 ؛ ص 329 - 360.

55. Pintado، ME؛ Teixeira، JA Valorização de subprodutos da indústria alimentar: Obtenção de elementientes de valor acrescentado. بول. Biotecnol. 2015 ، 1 ، 10-12.

56. Hagler، AN؛ Mendonça-Hagler، LC خمائر من المياه البحرية ومصبات الأنهار بمستويات مختلفة من التلوث في ولاية ريو دي جانيرو ، البرازيل. تطبيق بيئة. ميكروبيول. 1981 ، 41 ، 173 - 178. [CrossRef]

57 - AOAC. الطرق الرسمية لتحليل AOAC International ؛ رابطة الكيميائيين التحليليين الرسميين: واشنطن العاصمة ، الولايات المتحدة الأمريكية ، 1995.

58. كاسترو ، ايه ام دي ؛ كاستيلو ، LdR ؛ Freire، DMG توصيف الباباسو والكانولا وبذور الخروع وكعك عباد الشمس المتبقي لاستخدامها كمواد خام لعمليات التخمير. إنتاج المحاصيل الصناعية. 2016 ، 83 ، 140-148. [CrossRef]

59. Freire، DM؛ تيليس ، إم ؛ بون ، إب ؛ تم تقييد إنتاج Sant 'Anna ، GL ، Jr. Lipase بواسطة Penicillium في جهاز تخمير على نطاق واسع: تأثير تغذية الكربون والنيتروجين ، والإثارة ، والتهوية. تطبيق بيوتشيم. التكنولوجيا الحيوية. 1997، 63-65، 409-421. [CrossRef]

60. Charney، J.؛ Tomarelli، RM طريقة قياس الألوان لتحديد النشاط التحلل للبروتين لعصير الاثني عشر. J. بيول. تشيم. 1947 ، 171 ، 501-505. [CrossRef] [PubMed]

61. Laemmli ، المملكة المتحدة انقسام البروتينات الإنشائية أثناء تجميع رئيس Bacteriophage T4. Nature 1970، 227، 680–685. [CrossRef] [PubMed]

إخلاء المسؤولية / ملاحظة الناشر:البيانات والآراء والبيانات الواردة في جميع المنشورات هي فقط للمؤلف (المؤلفين) والمساهم (المساهمين) الفرديين وليس MDPI و / أو المحرر (المحررون). MDPI و / أو المحرر (المحررون) يتنصلون من المسؤولية عن أي إصابة للأشخاص أو الممتلكات ناتجة عن أي أفكار أو طرق أو تعليمات أو منتجات مشار إليها في المحتوى.

【لمزيد من المعلومات: george.deng@wecistanche.com / WhatApp: 86 13632399501】