جهة الاتصال: jerry.he@wecistanche.com

LP Arantes1 و ML Machado1 و DC Zamberlan1 و TL da Silveira1 و TC da Silva1 و IBM da Cruz1 و EE Ribeiro2 و M. Aschner3 و FAA Soares1

1Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular، Universidade Federal de Santa Maria، Santa Maria، RS، Brasil 2Universidade Aberta da Terceira Idade، Universidade do Estado do Amazonas، Manaus، AM، Brasil

3-قسم الصيدلة الجزيئية ، كلية ألبرت أينشتاين للطب ، برونكس ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية

Cistanche له تأثير مضاد للشيخوخة

الملخص

يتم تناول Guarana (Paullinia cupana) بشكل معتاد من قبل الناس في منطقة الأمازون وهو مكون رئيسي في العديد من مشروبات الطاقة المستهلكة في جميع أنحاء العالم. ارتبط تمديد طول العمر وانخفاض معدل انتشار الأمراض المزمنة المرتبطة بالعمر بالتناول المعتاد للغرنا.مكافحة الشيخوخةتم إظهار إمكانات غرنا أيضًا في Caenorhabditis elegans ؛ ومع ذلك ، فإن الآليات التي ينطوي عليها تأثيره ليست واضحة. هنا ، قمنا بالتحقيق في المسارات المفترضة التي تنظم تأثيرات مستخلص الغوارانا الإيثانولي (GEE) على العمر الافتراضي باستخدام C. elegans. تم تحليل مسارات طول العمر المعروفة من خلال الديدان الطافرة ومقايسة RT-qPCR (DAF -2 ، DAF -16 ، SKN -1 ، SIR -2. 1 ، HSF {{6 }}). تم التحقيق أيضًا في التورط المحتمل لإشارات البيورينجيك. أظهرت هذه الدراسة أن GEE يعمل من خلالمضادات الأكسدةالنشاط ومسارات DAF -16 و HSF -1 و SKN -1 وتقويم مستقبلات الأدينوزين البشرية (ADOR -1) لإطالة العمر الافتراضي. قام GEE أيضًا بإلغاء تنظيم skn -1 و daf -16 و sir -2. 1 و hsp -16. 2 في 9- يوم من C. elegans ، والذي قد يكون له تأثير أقل حاجة لتنشيط هذه الجينات الواقية بسبب المباشرمضادات الأكسدةتأثيرات. تساهم نتائجنا في فهم تأثيرات غرنا في الجسم الحي ، والتي قد تكون مفيدة للوقاية من الاضطرابات المرتبطة بالشيخوخة أو علاجها ، وتقترح أيضًا إشارات البيورينرجيك كهدف علاجي معقول لدراسات طول العمر.

الكلمات الرئيسية: شيخوخة؛ مضادات الأكسدة. غرنا. فترة الحياة؛ منتجات طبيعية؛ الزانثين

مقدمة

Paullinia cupana ، الذي يشار إليه أيضًا باسم Guarana ، هو نبات أصلي في حوض الأمازون وشائع بشكل خاص في البرازيل. يتم تناول مسحوق بذوره بشكل معتاد من قبل الناس من جميع الأعمار في منطقة الأمازون بشكل أساسي لخصائصه المنشطة والمنشطة (1). علاوة على ذلك ، تعتبر غرنا عنصرًا رئيسيًا في العديد من مشروبات الطاقة المستهلكة في العديد من البلدان (2). تشمل التأثيرات الدوائية الأخرى للغرنا التي تم الإبلاغ عنها فقدان الوزن ، وخفض تخليق الجلطات الدموية في الصفائح الدموية ، والحماية من الآفات المعدية ، والنشاط المضاد للأكسدة ، والتأثيرات المضادة للالتهابات [للمراجعة ، انظر: (1)]. ومع ذلك ، عند تناولها بكميات كبيرة ، قد تؤثر الجوارانا أيضًا سلبًا على صحة الإنسان ، مما يسبب القلق واضطراب النوم وعدم انتظام دقات القلب ، على سبيل المثال ، بسبب محتواها العالي من الكافيين (2،3).

ارتبط تمديد طول العمر لدى الأشخاص الذين يعيشون في Maués ، وهي منطقة من منطقة الأمازون في البرازيل ، بالنظام الغذائي الأمازوني ، بما في ذلك الاعتياد على تناول الغوارانا (4). علاوة على ذلك ، ربطت دراسة وبائية بين تناول الغوارانا وانخفاض معدل انتشار الأمراض المزمنة المرتبطة بالعمر في سكان الأمازون (5). في الآونة الأخيرة ، أظهرت دراسة أيضًامكافحة الشيخوخةإمكانات مستخلص بذور غرنا في Caenorhabditis elegans (6). ومع ذلك ، لم يتم تحديد الآليات الكامنة وراء تأثيرات غرنا على الشيخوخة.

كان C. elegans نموذجًا مناسبًا لفهم استجابات الكائنات الحية لمختلف المركبات الاصطناعية والطبيعية وتأثيرها على الشيخوخة والعمر. المسارات البيولوجية الحيوية والعديد من جوانب الشيخوخة متشابهة في الديدان الخيطية والثدييات ، بما في ذلك البشر (7).

نظرًا لأن النسبة المئوية لكبار السن تتزايد في جميع أنحاء العالم مصحوبة بزيادة تواتر الأمراض المرتبطة بالعمر ، فمن الضروري تحديد العلاجات الفعالة والأهداف العلاجية التي قد تحسن نوعية الحياة (8). هنا ، قمنا بالتحقيق في المسارات المفترضة التي تنظم تأثيرات غرنا على العمر باستخدام C. elegans.

المواد والطرق

مواد كيميائية

Agar ، الإيثانول (96 في المائة) ، الكلوروفورم ، الكوليسترول ، FUDR (5- تم شراؤها من سيجما (الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء الاشعال Taqmans المستخدمة في تحليل QRT-PCR و Trizol من النظم البيولوجية التطبيقية/شركة Thermo Fisher Scienti-c Corporation (الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء جميع الكواشف الأخرى من Synth (البرازيل).

السلالات والصيانة

كانت السلالات المستخدمة في هذه الدراسة هي Bristol N2 (من النوع البري) ؛ CB1370، daf -2 (e1370) III ؛ CF1038، daf -16 (mu 86) I؛ EU1، skn -1 (zu67) ؛ PS3551، hsf -1 (sy441) I؛ TK22، mev -1 (kn1) ؛ و VC199، sir -2. 1 (ok434)، تم الحصول عليها من Caenor- habditis Genetics Center (CGC)، University of Minnesota، USA، وكذلك Escherichia coli OP50. تم توفير سلالة EG6890 ، ador -1 (ox489) ، من معمل الدكتور إريك يورجنسن (جامعة يوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم حذف هذه السلالة من 1 كيلو بايت في المنبع وأول ثلاثة إكسونات من جين ador -1 ، وتم تهجينها 6 مرات ؛ ador -1 الجين المشفر لتقويم مستقبل الأدينوزين البشري (9).

تم الحفاظ على الديدان الخيطية ومعايرتها عند درجة 20 على لوحات أجار وسط نمو الديدان الخيطية (NGM) التي تحمل العشب من E. coli OP50 (10). تم تحقيق تزامن ثقافات الديدان الخيطية عن طريق معالجة التبييض من خنثى الحمل وسمح للبيض بالفقس طوال الليل في المخزن المؤقت M9 (42 ملي مولار Na2HPO4 ، 22 ملي مولار KH PO ، 8.5 ملي كلوريد الصوديوم ، و 1 ملي مولار MgSO4) (10).

تحضير المواد النباتية والمستخلصات

مسحوق البذور المحمصة من Paullinia cupana Kunth var. sorbilis (Mart.) ، غرنا ، تم عزله وتزويده من قبل EMBRAPA Oriental (Agropecuary Research Brazil Enterprise) الموجود في غرب الأمازون في Maués ، Amazo- ناس ، البرازيل. تم الحصول على المستخلص الكحولي المائي كما هو موصوف في مكان آخر (11). بري ، تم إنتاج المستخلص باستخدام 70 بالمائة من الإيثانول. بعد 24 ساعة ، تمت ترشيح المحلول الناتج وإزالة الإيثانول وتجفيف المستخلص بالتجميد. تم تحليل مادة الزانثين والكاتيكين السائدة الموجودة في مستخلص الغوارانا عن طريق HPLC ، مع إظهار التركيزات التالية: الكافيين =12. 240 مجم / جم ، الثيوبرومين =6. 733 مجم / جم ومضادات الاكسدة الكلية {{ 9}}. 336 مجم / جم (11).

علاج او معاملة الديدان

تم تحضين لوحات NGM التي تحمل العشب من E. coli OP50 (كمصدر للغذاء) عند 37 درجة بين عشية وضحاها. تم إذابة مستخلص الغوارانا الإيثانولي المجفف بالتجميد (GEE) في الماء المقطر البارد المعقم (121 درجة ، 30 دقيقة) وانتشر فوق الأطباق بتركيزات نهائية تبلغ 100 و 500 و 1 ، 000 ملجم / مل من الآجار. تم نقل يرقات L1 المتزامنة (10) باستخدام ماصة إلى سطح ألواح المعالجة وتم تربيتها حتى سن البلوغ عند 20 درجة.

فترة الحياة

بدأت تحليلات عمر اليرقات L4 في أطباق NGM المصنفة بـ E. coli OP5 0 في غياب أو وجود GEE (اليوم 0). تم نقل الحيوانات إلى أطباق طازجة مع أو بدون GEE كل يوم لتجنب إرباك الأجيال ، وسجلت في نفس الوقت حتى الموت. تم تسجيل غياب الاستجابة للحافز الميكانيكي كموت. كانت الديدان تخضع للرقابة إذا زحفت من الصفيحة ، أو أظهرت أعضاءًا داخلية مقذوفة ، أو ماتت بسبب فقس نسلها داخل الرحم. تكررت مقايسات العمر ثلاث مرات مع 60-120 دودة لكل مقايسة. من خلال السلالات الطافرة ، تم تحليل طرق طول العمر الرئيسية المعروفة (12،13): 1) داف -2 و داف -16 ، عامل النمو الشبيه بالأنسولين (IGF) {{11} } الإشارة (IIS) ، والتي يرسلها مستقبل DAF -2 من خلال مسار PI المحفوظ 3- kinase / AKT وينظم الأسفل DAF -16 / FOXO ، وهو المسؤول عن تعزيز التعبير عن الجينات التي تضفي على طول العمر ومقاومة الإجهاد المعزز ؛ 2) skn -1 ، الذي يرتبط ببروتينات عائلة Nrf الفقارية ويعزز التعبير عن إنزيمات إزالة السموم استجابة للإجهاد التأكسدي ، مثل الجلوتاثيون- S- ترانسفيراز ؛ iii) سيدي -2 .1 ، الذي يشفر بروتينًا يشبه هيستون ديستيلاز يدمج الحالة الأيضية مع العمر ، ويرتبط بالحد من السعرات الحرارية ؛ و 4) hsf -1 ، والذي يشفر عامل نسخ الصدمة الحرارية -1 (HSF -1) ويحث على تنشيط جينات الصدمة الحرارية المختلفة أو المرافقين المشاركين في الحفاظ على التوازن التوافقي لـ البروتينات من بين وظائف مهمة أخرى. تم التحقيق أيضًا في العلاقة المحتملة بين طول العمر والإشارات البيورينقية من خلال سلالة متحولة -1.

نظرًا لأن البكتيريا تلعب دورًا في معدل وفيات C. elegans ، فقد تم تقييم نمو E.coli OP50 في وجود أو عدم وجود GEE للتحقق مما إذا كانت التأثيرات المفيدة يمكن أن تكون استجابة لخاصية مضادة للميكروبات. تم قياس امتصاص البكتيريا خلال فترة 12- ساعة في وسط سائل (14).

تمتد الصحة

تم تقييم معلمات السلوك المتعلقة بالصحة المدى (15). تم تقييم ضخ البلعوم باستخدام مجهر Nikon E200 من خلال ملاحظة عدد الانقباضات البلعومية خلال 60- فترة في البالغين الصغار من النوع البري.

تم اختيار تردد Thrash لتحليل الحركة. تم انتقاء صغار البالغين من النوع البري من علاجات السيطرة أو علاجات GEE بشكل فردي ووضعهم في قطرة M9. تم السماح للديدان بالتكيف لمدة دقيقة واحدة ثم تم قياس عدد الضربات باستخدام مجهر Nikon E200 خلال فترة 20- ثانية. تم تعريف الضرب على أنه تغيير في اتجاه الانحناء في منتصف الجسم.

أجريت التحليلات في ثلاث فحوصات مستقلة. تم فحص ثلاثين نيماتودا لكل مجموعة.

عزل الحمض النووي الريبي وتفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الحقيقي (RT-qPCR)

تم تحليل الديدان البرية في 9- ديدان بالغة عمرها يوم واحد من أجل التعبير الجيني المتعلق بطول العمر واستجابات الإجهاد التأكسدي. بعد مرحلة البلوغ ، تم نقل الديدان كل يوم إلى لوحات تحتوي على 150 مم من FUDR (5- uoro -20- deoxyuridine) لتثبيط التكاثر ، في وجود أو عدم وجود GEE. تم عزل الحمض النووي الريبي من 20 ، 000 من الديدان لكل حالة باستخدام Trizol متبوعًا باستخراج الكلوروفورم ، كما هو موضح سابقًا (16) وتم عكس 1 مجم من RNA المدخلات إلى cDNA بواسطة مجموعة النسخ العكسي لـ cDNA عالية السعة من Applied Biosystems (النظم البيولوجية التطبيقية) ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إجراء تحليل التعبير عن طريق تحليل مصفوفة TaqMans المخصصة باستخدام مقايسات TaqMans Gene Expression المقابلة من أجل أحماض ديسموتاز فوق أكسيد الميتوكوندريا -3 (Ce 02404515_ g1) ، glutathione-S-transferase gst -4 (Ce -3 {16}} g1) ، غاما غلوتاميل سيستئين synthetase gcs -1 (Ce 02436726_ g1) ، داف -16 (Ce 02422835_ g1) ، سيدي -2. 1 (Ce 02 459018_ g1) و hsf -1 (Ce 02423758_ m1) وبروتين الصدمة الحرارية hsp -16. 2 (Ce 02506738_ s1) و skn { {35}} (Ce 02407445_ g1) (النظم البيولوجية التطبيقية). تم تطبيع التعبير الجيني المستهدف لقيم تعبير الأكتين afd -1 (Ce 02414 573_ m1). تم تحديد التعبير النسبي لكل جين بواسطة طريقة 2 DDCt (17) وتم الإبلاغ عن البيانات كتغير أضعاف في مستويات mRNA بالنسبة لـ afd -1. أجريت هذه التجربة في ثلاثة تحضيرات مستقلة للديدان ، كل منها بثلاث نسخ.

تحليل احصائي

تم إجراء التحليلات الإحصائية باستخدام GraphPad Prism الإصدار 5 لنظام التشغيل Windows (برنامج GraphPad ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم الإبلاغ عن النتائج كوسيلة ± SD لثلاث تجارب فردية على الأقل. تم استخدام اختبار t للطالب لمقارنة أزواج من المجموعات ، في حين تم استخدام ANOVA أحادي الاتجاه أو ثنائي الاتجاه متبوعًا باختبار Bonferroni اللاحق لمقارنة ثلاث مجموعات أو أكثر. تم تحليل جميع منحنيات البقاء على قيد الحياة من خلال اختبار رتبة السجل (Mantel-Cox). تم تحديد الدلالة الإحصائية كـ Po 0. 05.

نتائج

في دراستنا ، كان للسيطرة على النوع البري من النوع C. elegans متوسط ​​عمر يبلغ 11 يومًا وأقصى عمر يبلغ 14 يومًا. في الوسائط التي تحتوي على GEE ، تم تمديد متوسط ​​عمر الديدان البرية إلى 13 يومًا عند 100 مجم / مل (18 بالمائة) وإلى 15 يومًا عند 500 و 1 ، 000 مجم / مل (36 بالمائة). تم تمديد الحد الأقصى للعمر بمتوسط ​​28 في المائة في التركيزات الثلاثة المختبرة (الجدول 1). لم يكن هناك اختلاف في نمو الإشريكية القولونية في وجود أو عدم وجود 1 ، 000 مجم / مل من GEE (البيانات غير معروضة).

كما تم إطالة الفترة الصحية للديدان بعد علاج GEE. أخر المستخلص التدهور المرتبط بالعمر في ضخ البلعوم (100 ، 500 ، 1 ، 000 ملجم / مل) والضرب (1 ، 000 ملجم / مل) بدءًا من اليوم التاسع من مرحلة البلوغ ( الشكل 1 أ و ب). وفقًا لذلك ، تم اختيار تركيز 1 ، 000 مجم / مل من GEE وعينات من الديدان البالغة 9- يومًا لمزيد من التحليل.

أدى مستخلص GEE (1 ، 000 مجم / مل) إلى إطالة متوسط ​​عمر طفرات mev -1 بنسبة 44 بالمائة وأقصى عمر بنسبة 77.8 بالمائة (الجدول 1) ، مما يوضح وجود صلة بينمضادات الأكسدة

تم إجراء فحوصات عمر على 2 0 درجة. يتم تمثيل الحد الأقصى للعمر على أنه متوسط ​​عمر أطول 10 بالمائة من سكان الدودة. تم تكرار كل تجربة ثلاث مرات بدءًا من 60 نيماتودا على الأقل لكل مجموعة. تم الإبلاغ عن البيانات على أنها تعني ± SD. * P <0.05 مقارنة="" بالمجموعة="" غير="" المعالجة="" (اختبار="" رتبة="" سجل="">

الشكل 1. آثار استخراج غرنا الإيثانولي (GEE) على المعلمات السلوكية المتعلقة هيلثسبان. معدل الضخ البلعومي (أ) و

تواتر الضرب (ب) أثناء الشيخوخة في الديدان البرية. تم الإبلاغ عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD (n =30 ديدان لكل مجموعة). * P o 0. 05 مقارنة بالتحكم (ANOVA أحادي الاتجاه متبوعًا باختبار Bonferroni للمقارنة المتعددة.

ومكافحة الشيخوخةأنشطة. كما أدى المقتطف إلى إطالة متوسط ​​العمر الافتراضي للطفرات daf -2 ، و sir 2.1 ، مما يثبت أن المستخلص لم يعمل من خلال هذه المسارات لتعزيز إطالة العمر. في المقابل ، لم يطيل العلاج عمر طفرات داف -16 و skn -1 و hsf -1 و ador -1 (الجدول 1).

تحليلات PCR تقييم تعديل الجينات بواسطة GEE (الجدول 2). GEE at 1 و 000 mg / mL down regulated skn -1، daf -16، sir -2. 1، hsp -16. 2 in {{9 }} بالغين بعمر يوم واحد. لم يلاحظ أي تأثير على تعبير hsf -1 و gst -4 و gcs -1 و sod -3.

مناقشة

كما تم توضيحه سابقًا (1) ، في دراستنا ، يعمل مستخلص الغوارانا أيضًا على إطالة العمر الافتراضي والمدة الصحية للنوع البري من النوع C. elegans. وبالتالي ، فإن المسارات المفترضة التي قد تكون متورطة فيمكافحة الشيخوخةتم التحقيق في الآثار. هنا،مكافحة الشيخوخةتم عرض التأثيرات بتركيز أعلى من المستخلص (1 ، 000 مقابل 300 مجم / مل كما تم إثباته سابقًا). قد يكون هذا التناقض بسبب الاختلافات في تحضير المستخلص (المستخلص المائي الكحولي مقابل المستخلص المائي)

الجدول 2. ثني تعبير mRNA المتغير للجينات المتعلقة بطول العمر والإجهاد التأكسدي في الديدان البالغة من النوع البري البالغة من العمر يوم 9- والمعالجة بمستخلص الغوارانا الإيثانولي (GEE)

تم تقييم هذه التجربة بواسطة RT-qPCR ونُفذت في ثلاثة تحضيرات مستقلة للديدان ، كل منها في ثلاث نسخ. تم الإبلاغ عن البيانات كوسيلة لتغيير أضعاف في مستويات mRNA بالنسبة إلى afd -1 (أكتين) ± SD. * Po 0. 05 مقارنةً بالمعاملة غير المعالجة (ANOVA ثنائي الاتجاه متبوعًا باختبار Bonferroni للمقارنة المتعددة).

وطريقة التوصيل (أجار مقابل الوسط السائل) وقد يكون نتيجة للانحراف الطبيعي في الاختلاف الجيني في مجتمع الديدان (18 ، 19).

يبدو أن الإجهاد التأكسدي هو عامل رئيسي يحد من العمر في كل من C. elegans والبشر ويرتبط بالعديد من الأمراض المرتبطة بالعمر (20 ، 21) ، مما يوجه الانتباه نحومضادات الأكسدةالمركبات التي لها تأثيرات في الجسم الحي. لمزيد من التحقيق فيما إذا كان GEE يمكن أن يطيل العمر من خلالمضادات الأكسدةالنشاط ، تم تقييم تأثيره على الديدان mev -1. تتميز هذه السلالة بالإفراط في إنتاج الأكسيد الفائق ولها عمر أقصر مقارنة بالسلالة البرية (22). بما يتفق مع وصفه سابقامضادات الأكسدةتأثير مستخلص الغوارانا (6) ، فإن علاج GEE يطيل بشكل ملحوظ المتوسط ​​والعمر الأقصى للديدان -1.

إلى جانب ذلك ، بدت مسارات DAF -16 و HSF -1 و SKN -1 ، المتضمنة في إشارات الأنسولين / IGF (IIS) ، ضرورية لإطالة عمر بوساطة GEE. يرتبط انخفاض IIS بطول العمر والتكيف مع الظروف البيئية المعاكسة في C. elegans و Drosophila والثدييات وربما البشر (13). يعمل HSF -1 بالتعاون مع DAF -16 لتنشيط التعبير عن الجينات المستهدفة الشائعة ، بما في ذلك عائلة sHsp (جينات بروتينات الصدمة الحرارية الصغيرة) (23). تدمج SKN -1 / Nrf IIS وتنظم الاستجابة للإجهاد التأكسدي والتعبير عن جينات إزالة السموم (24).

قد تتوسط كل من DAF -16 و HSF -1 و SKN -1 أيضًا في تمديد healthspan واستتباب البروتين (25). تشارك DAF -16 في تكوين مجاميع بروتينية ذات وزن جزيئي مرتفع أقل سمية (26) ، وعلى الرغم من أن HSF -1 ينظم نشاط تصنيف البروتين الذي يطلق مجاميع سامة صغيرة ، إلا أنه قد يكون له تأثير مفيد يساهم في تصفية البروتين من خلال التمثيل الغذائي الأنزيمي (27،28). تشتهر SKN -1 بأنها الجهة المنظمة لـمضادات الأكسدةوالدفاع عن الكائنات الحية الغريبة ، ولكن تم أيضًا تورطه في وظائف إضافية تشمل البروتيستات وتنظيم التمثيل الغذائي (24).

الميثيل زانتين ، مثل الكافيين ، هي المكونات الرئيسية لغرنا ومن المعروف أن هذه المركبات يمكن أن تعمل من خلال مستقبلات الأدينوزين في الثدييات (29). ارتبط الكافيين بالتأثيرات المفيدة ، بما في ذلك التأثيرات المرتبطة بالشيخوخة (30 ، 31) وتحسين الأنماط الظاهرية للضعف الإدراكي عن طريق معاداة مستقبلات الأدينوزين A1 و A2A في القوارض (32). وبالتالي ، اختبرنا ما إذا كان تمديد العمر الناجم عن GEE قد يعتمد أيضًا على ADOR -1 ، وهو متماثل لمستقبل الأدينوزين (33). أشارت نتائجنا إلى أن ديدان ador -1 (ox489) فشلت في إظهار عمر ممتد ، مما يدل ، للمرة الأولى ، على الدور المحتمل لنظام Purinergic في إطالة العمر. وفقًا لذلك ، يمكن دراسة الإشارات البيورينجية في المستقبل كهدف محتمل لتعديل طول العمر.

على الرغم من احتواء GEE على مستويات عالية من الكافيين ، ووصفت الدراسات السابقة تأثيرات الكافيين في الديدان (34-36) ،مكافحة الشيخوخةقد تكون تأثيرات GEE مرتبطة بالتأثيرات التآزرية للمركبات المختلفة. تركيز الكافيين في المستخلص أقل بكثير من التركيز الفعال الذي تم إثباته سابقًا وقد تبين أن مستخلص قلويد من غرنا لم يكن له نفس التأثيرات المفيدة (6). إلى جانب ذلك ، تُظهر البيانات من الأدبيات أن المستخلصات يمكن أن يكون لها أنشطة دوائية أكبر من المركبات المعزولة (37 ، 38).

Downregulation of skn -1، daf -16، sir -2. 1، and hsp -16. 2 في 9- يوم من C. elegans تعامل مع GEE might تظهر الحاجة الأقل إلى تنشيط هذه الجينات لإصلاح تلف الخلايا أثناء الشيخوخة مقارنة بالديدان غير المعالجة ، وهو أمر ممكن بسببمضادات الأكسدةآثار المستخلص (39،40).

وهكذا ، أظهرت هذه الدراسة أنمكافحة الشيخوخةآثار غرنا بوساطةمضادات الأكسدةالنشاط ومسارات DAF -16 و HSF -1 و SKN -1. بالإضافة إلى ذلك ، كان ADOR -1 ضروريًا أيضًا لتأثيرات GEE على العمر الافتراضي ، مما يشير إلى احتمال تورط نظام البيورينجيك في طول العمر. تساهم نتائجنا في فهم تأثيرات غرنا في الجسم الحي ، والتي قد تكون مفيدة للوقاية من الاضطرابات المرتبطة بالشيخوخة أو علاجها ، وتقترح الإشارة البيورينالية كهدف علاجي معقول لدراسات طول العمر.

شكر وتقدير

المؤلفون ممتنون لعلم الوراثة Caenorhabditis

مركز (CGC) في جامعة مينيسوتا بالولايات المتحدة الأمريكية لتوفير سلالات الديدان ومختبر الدكتور إريك جورجينسن (جامعة يوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية) لتزويدهم بسلالة EG6890. تم دعم هذه الدراسة من قبل Conselho nacional de desenvolvimento cientí co tecnológico ، البرازيل (cnpq) ، coordenac¸o de aperfeic¸oamento de pessoal a nível ، البرازيل (capes) ، propergs/cnpq و mcti/cnp # 3}} و # 475896 / 2012-2. تم دعم مايكل آشنر جزئيًا من خلال منحة المعاهد الوطنية للصحة R01 ES10563. لم يتم إشراك مصادر التمويل

في تصميم الدراسة أو تفسير البيانات.