الجزء 2: Cistanoside من Cistanche Herba يخفف الضرر التناسلي الذكري الناجم عن نقص الأكسجة عن طريق قمع الإجهاد التأكسدي

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

Fengqi Yan1 * ، Xiaoliang Dou1 * ، Guangfeng Zhu1 * ، Mingyuan Xia1 ، Yahui Liu3 ، Xiaozi Liu3 ، Guojun Wu2 ، HeWang1 ، Bo Zhang1 ، Qiuju Shao4 ، Yong Wang1

انقر هنا للجزء 1

نتائج

تأثيرات نقص الأكسجة على خلايا GC {{0}

لتحديد تأثيرات نقص الأكسجة على الخلايا الجرثومية ، درسنا أولاً التغييرات في قابلية الخلية للحياة بعد علاج نقص الأكسجة بتركيزات أكسجين مختلفة (2 0 بالمائة ، 15 بالمائة ، 10 بالمائة ، 5 بالمائة) لـ 1،3 ، 5 ، و 7 أيام على التوالي. أظهرت نتائج فحص CCK -8 أنه ، مقارنة بمجموعة التحكم (تركيز الأكسجين بنسبة 20 بالمائة) ، أظهرت الخلايا المعرضة لنقص الأكسجة انخفاضًا كبيرًا في قابليتها للحياة (P <0.01 ؛="" الشكل="" 1="" أ).="" علاوة="" على="" ذلك="" ،="" كان="" معدل="" بقائهم="" متناسبًا="" عكسًا="" مع="" تركيز="" الأكسجين="" ،="" وانخفض="" أيضًا="" مع="" وقت="" الحث.="" لتجنب="" التأثير="" المفرط="" السام="" للخلايا="" ،="" تم="" اختيار="" تركيز="" أكسجين="" بنسبة="" 10="" في="" المائة="" ووقت="" تحريض="" لمدة="" 3-="" يومًا="" كمعيارين="" لنموذج="" ناقص="" الأكسجين="" للتجارب="" اللاحقة="" في="">

بعد ذلك ، تم إجراء FCM وتلطيخ التألق المناعي لإجراء مزيد من التقييم لتعديل انتشار علاج نقص الأكسجة في خلايا GC {{0}. أظهرت النتائج أن مرض الثايبوكسيا يمكن أن يؤدي إلى توقيف خلايا GC -1 في الطور G1 ، وبالتالي تقليل دخول الخلية إلى المرحلة S وتثبيط تكاثر الحمض النووي. وهكذا ، خفض نقص الأكسجة بشكل كبير مؤشر انتشارGC{0} خلايا (P <0.01 ؛="" الشكل="" 1="" ب).="" تلطيخ="" كي="" الإيجابي="" -67="" هو="" علامة="" بيولوجية="" محددة="" أخرى="" للخلايا="" المتكاثرة.="" لذلك="" ،="" قمنا="" أيضًا="" بفحص="" علاج="" الخلايا="" الإيجابية="" ki="" مع="" أو="" مع="" علاج="" نقص="" الأكسجة.="" بالمقارنة="" مع="" مجموعة="" التحكم="" ،="" قلل="" علاج="" نقص="" الأكسجة="" بشكل="" ملحوظ="" -67-="" من="" الخلايا="" الإيجابية="" ،="" كما="" هو="" موضح="" في="" الشكل="" 1="">

بعد ذلك ، نهدف إلى التحقيق في وضع تثبيط قابلية بقاء خلية GC {0} الناجم عن نقص الأكسجة. كما ورد في الأدبيات ، ارتفع مستوى ROS حيث تعرضت الفئران لبيئة ناقصة التأكسج [8 ، 20]. ومن ثم ، تم قياس مستويات ROS الذاتية في خلايا GC -1 باستخدام مقايسة FCM. أظهرت النتائج ارتفاع مستويات ROS تحت نقص الأكسجة بالمقارنة مع مجموعة الأكسجين العادية (P <0.01 ؛="" الشكل="" 1="" د).="" يسبب="" تراكم="" أنواع="" الأكسجين="" التفاعلية="" (ros)="" ضعفًا="" ملحوظًا="" في="" الحمض="" النووي="" ،="" والذي="" يؤدي="" بدوره="" إلى="" تنشيط="" مسار="" موت="" الخلايا="" المبرمج="" وقد="" يكون="" العامل="" المسبب="" الرئيسي="" لزيادة="" خطر="" العقم="" عند="" الذكور="" [21="" ،="" 22].="" بعد="" ذلك="" ،="" اكتشفنا="" تأثير="" تنشيط="" موت="" الخلايا="" المبرمج="" لنقص="" الأكسجة="" على="" خلايا="" gc="" -1="" بواسطة="" تلطيخ="" tunel.="" كما="" هو="" مبين="" في="" الشكل="" 1e="" ،="" أدى="" العلاج="" بنقص="" الأكسجة="" إلى="" زيادة="" مضان="" tunel="" مقارنة="" بمجموعة="" التحكم="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" زيادة="" في="" موت="" الخلايا="" المبرمج="" في="" المجموعة="">

علاج مرض السكري مع مكمل cistanche

نظرًا لأن تلف الخلايا الذي يسببه ROS عادة ما ينتج عن نظام التشغيل ، فقد اختبرنا نظام تشغيل خلايا GC -1. كما هو معروض في الشكل 1F ، تم زيادة مستويات LPO لخلايا GC -1 في مجموعة النموذج بشكل ملحوظ مقارنة بمستويات LPO لخلايا GC -1 في المجموعة الضابطة. تشير هذه النتائج إلى أن إصابة خلايا GC -1 التي يسببها نقص الأكسجة مرتبطة بنظام التشغيل ، والذي يسببه تراكم ROS.

تأثيرات رابطة الدول المستقلة على قابلية بقاء خلايا GC {{1} التي يسببها نقص الأكسجة في المختبر.

للتحقيق في ما إذا كانرابطة الدول المستقلةيمكن أن يمنع التأثيرات المثبطة لنقص الأكسجة على صلاحية خلية GC {0} ، تم إجراء اختبار CCK -8. تمت معالجة خلايا GC -1 بأنواع فرعية مختلفة (Cis-A و B و C و H) ونطاقات التركيز (0. 0 2 ميكرومتر ، 0. 2 ميكرومتر ، 2 ميكرومتر ) من رابطة الدول المستقلة لمدة 72 ساعة. أظهرت مقارنة مجموعة النماذج مع مجموعة DMSO أن DMSO لم يروج مباشرة لصلاحية خلية GC {{1 0} (الشكل 2 أ). ومع ذلك ، تمت استعادة إمكانات الخلية بشكل ملحوظ (P <0. 0="" 5)="" باستخدام="" علاجات="" رابطة="" الدول="" المستقلة.="" مقارنة="" بمجموعة="" النماذج="" ،="" أظهر="" كل="" من="" cis-a="" و="" cis-b="" و="" cis-c="" و="" cis-h="" تأثيرات="" وقائية="" معينة="" على="" الضرر="" الناجم="" عن="" نقص="" الأكسجة="" الذي="" يلحق="" بقدرة="" الخلية="" على="" البقاء="" على="" قيد="" الحياة="" gc="" -1="" ،="" وأظهر="" cis-b="" التأثير="" الأكثر="" أهمية="" (الشكل="" 2="" أ).="" كانت="" التأثيرات="" الوقائية="" لـ="" cis="" عند="" 0.="" 2="" ميكرومتر="" أعلى="" بكثير="" من="" التأثيرات="" الوقائية="" لـ="" cis="" عند="" 0.="" 02="" ميكرومتر="" ،="" في="" حين="" أن="" الفرق="" بين="" 2="" ميكرومتر="" و="" 0.2="" ميكرومتر="" لم="" يكن="" واضحًا="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" gc="" المستعادة="" {="" {29}}="" قابلية="" بقاء="" الخلية="" الناتجة="" عن="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" موضحة="" زيادة="" تعتمد="" على="" الجرعة="" في="" نطاق="" التركيز="" من="" 0.="" 02-0.="" 2="" ميكرومتر="" (الشكل="" 2="" أ).="" لذلك="" ،="" وفقًا="" للاحتياجات="" التجريبية="" ،="" تم="" اختيار="" 0.2="" ميكرومتر="" cis="" كتركيز="" مثالي="" في="" التجارب="" التالية="" في="" المختبر.="" لتأكيد="" ما="" إذا="" كانت="" الخلايا="" الجرثومية="" محمية="" بالفعل="" بواسطة="" cis="" و="" fcm="" و="" ki="" -67="" تم="" إجراء="" تلطيخ="" لتقييم="" التغيير="" في="" تكاثر="" خلايا="" gc="" -1="" بعد="" العلاج="" باستخدام="" cis.="" تم="" تقليل="" -1="" خلية="" في="" المرحلة="" g1.="" في="" المقابل="" ،="" دخلت="" المزيد="" من="" الخلايا="" في="" المرحلة="" s="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" علاج="" cis="" يمكن="" أن="" يزيد="" من="" مؤشر="" تكاثر="" الخلايا="" الجرثومية="" (p=""><0.01 ؛="" الشكل="" 2b).="" يتم="" عرض="" إحصائيات="" دورة="" خلية="" gc="" -1="" في="" الشكل="" 2bb.="" أظهرت="" نتائج="" تلطيخ="" ki="" -67="" أيضًا="" أن="" معالجة="" cis-a="" و="" cis-b="" و="" cis-c="" و="" cis-h="" حسنت="" بشكل="" ملحوظ="" -67-="" نسبة="" الخلايا="" الإيجابية="" لل="" gc="" الناجم="" عن="" نقص="" الأكسجة="" -1="" الخلايا="" في="" المختبر="" (الشكل="" 2="">

الشكل 2. استعاد رابطة الدول المستقلة -1 صلاحية خلية GC الناجم عن نقص الأكسجة.

آلية رابطة الدول المستقلة تحمي الخلايا الجرثومية من نقص الأكسجة في المختبر.

للتحقق مما إذا كانت التأثيرات الوقائية لـ CIS على خلايا GC {0}} مرتبطة بإزالة ROS الزائدة ، تم استخدام الصبغة الفلورية DCFH-DA لاكتشاف مستويات ROS في كل مجموعة. كما هو موضح في الشكل 3 أ ، 3 ب ، العلاج باستخدام DMSO لم يغير مستوى ROScontent أو LPO داخل الخلايا مقارنة بمجموعة النموذج. ومع ذلك ، تم تخفيض مستويات ROS في خلايا GC -1 بشكل ملحوظ في المجموعات المعالجة برابطة الدول المستقلة (الشكل 3 أ). علاوة على ذلك ، لوحظ أيضًا انخفاض في LPO في خلايا GC -1 المعرضة لـ Cis (الشكل 3 ب).

لمزيد من استكشاف الآلية التي يحمي بها Cis ​​الخلايا الجرثومية من الإصابة بنقص التأكسج ، تم إجراء تحليلات التلوين TUNEL وتحليلات اللطخة الغربية لتقييم موت الخلايا المبرمج. أظهر تلطيخ TUNEL (الشكل 3C) موت الخلايا المبرمج بشكل كبير في النموذج ومجموعات DMSO. ومع ذلك ، لوحظ عدد أقل من الخلايا المبرمج باستخدام علاج رابطة الدول المستقلة ، مما يشير إلى أن علاج رابطة الدول المستقلة قلل من موت الخلايا المبرمج للخلايا -1. بالإضافة إلى ذلك ، تم قياس تعبير PARP و Caspase -3 و Bax و Bcl -2 لتأكيد الآلية الجزيئية. كما هو معروض في الشكل ثلاثي الأبعاد ، تم تنشيط Caspase -3 و PARP في خلايا GC -1 تحت نقص الأكسجة ، وتم منع هذا التنشيط بواسطة Cistreatment. بالإضافة إلى ذلك ، كانت نسبة Bax / Bcl -2 أعلى في مجموعة النموذج عنها في المجموعة الضابطة ، وقللت معالجة Cis من نسبة Bax / Bcl -2 (الشكل ثلاثي الأبعاد). أشارت هذه البيانات إلى أن رابطة الدول المستقلة لديها قدرة محتملة على تخفيف ضرر الأكسدة الناجم عن نقص الأكسجة ، ويمكن تحقيق هذا التأثير الوقائي عن طريق تقليل تراكم ROS وتثبيط تنشيط مسار موت الخلايا المبرمج المرتبط بـ Caspase.

تتضمن الآلية الأنزيمية التي تثبط OSin كاسحات الجذور الحرة مثل اختزال الجلوتاثيون (GR) والجلوتاثيون بيروكسيديز (GPx) وديسموتاز الفائق (SOD) [23]. تلعب الآلية الأنزيمية التي تمنع OS دورًا أساسيًا في منع الضرر التأكسدي في الخلايا والأنسجة [23] ]. لمزيد من التحقق من الآلية المحتملة لتثبيط رابطة الدول المستقلة لنظام التشغيل الناجم عن نقص الأكسجة في خلايا GC -1 ، تم قياس أنشطة GR و GPx و SOD. كشفت النتائج أن أنشطة GR و GPx و SOD جميعها بشكل ملحوظ (P <0. 0="" 1="" ،="" الشكل="" 3e)="" انخفضت="" تحت="" نقص="" الأكسجة="" مقارنة="" بمجموعات="" التحكم="" ،="" واستعاد="" علاج="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" أنشطتها="" بشكل="" ملحوظ="" في="" gc="" -1="" من="" الخلايا="" التي="" تعرضت="" لنقص="" الأكسجة="" (p=""><0.05 ،="" الشكل="" 3e)="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" هذه="" المركبات="" يمكن="" أن="" تنشط="" القوي="">مضادات الأكسدةالنظام.

الشكل 3. الآلية التي بواسطتها تحمي رابطة الدول المستقلة خلايا GC -1 من التلف الناجم عن نقص الأكسجة.

آثار رابطة الدول المستقلة على التكاثر في الفئران التي يسببها نقص الأكسجين.

لتحديد آثار ضغط الدمنقص الأكسجةعلى ذكور الجرذان ، قمنا أولاً باختبار التغيرات المورفولوجية للخصيتين في الفئران التي يسببها نقص الأكسجة. أظهرت نتائج تلطيخ HE أنه في المجموعة الضابطة ، تم ترتيب الخلايا المولدة للحيوانات المنوية الطبيعية في مراحل مختلفة بطريقة منتظمة من الغشاء القاعدي إلى التجويف ، وكانت الحيوانات المنوية الناضجة مرئية لومن الأنبوب (الشكل 4 أ). بالمقارنة مع الضوابط ، لوحظت تغيرات مرضية لأنسجة الخصية في المجموعة النموذجية ، وتم ترتيب الغشاء الأساسي للخلايا الظهارية للخصية بشكل فضفاض ، وكانت الظهارة المولدة للحيوانات المنوية رقيقة للغاية ، وانخفض مستوى الخلايا الجرثومية وعددها بشكل ملحوظ (الشكل 4 أ). ومع ذلك ، أدى العلاج باستخدام رابطة الدول المستقلة إلى تحسن ملحوظ في أنسجة تلف الخصية الناجم عن نقص الأكسجة الناجم عن نقص ضغط الدم في الجسم الحي (الشكل 4 أ). قمنا أيضًا بقياس وزن الجسم ووزن الخصيتين ووزن البربخ ووزن الغدة المنوية ، مما أدى إلى حساب مؤشر الأعضاء التناسلية (نسبة الأعضاء التناسلية / وزن الجسم). كما هو مبين في الشكل 4B-D ، كان مؤشر الجهاز التناسلي (الخصيتين ، البربخ ، والغدة الحويصلة المنوية) أقل بشكل ملحوظ في المجموعة النموذجية (P <0. 01)="" مما="" كان="" عليه="" في="" المجموعة="" الضابطة.="" ومع="" ذلك="" ،="" تم="" عكس="" تأثير="" نقص="" الأكسجين="" على="" مؤشر="" العضوي="" الإنجابي="" للفئران="" مع="" علاج="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" (الشكل="" 4="">

بعد ذلك ، تم أيضًا قياس نشاط إنزيم الأكروسوم ومعدل الحيوانات المنوية الحية للحيوانات المنوية من ذكور الجرذ لتوضيح تلف وظيفة الخصية. كما هو مبين في الشكل 4E ، 4F ، كان نشاط acrosomeenzyme وحركة الحيوانات المنوية أقل في فئران المجموعة النموذجية من تلك الموجودة في مجموعة التحكم (P <0. 0="" 1).="" ومع="" ذلك="" ،="" مقارنة="" بالفئران="" في="" المجموعة="" النموذجية="" ،="" تمت="" استعادة="" نشاط="" إنزيم="" أكروسوم="" في="" الفئران="" المعالجة="" بـ="" 8="" مجم="" كجم="" يوم="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" (p=""><0. 0="" 5)="" (الشكل="" 4="" د).="" علاوة="" على="" ذلك="" ،="" كما="" هو="" موضح="" في="" الشكل="" 4f="" ،="" عزز="" العلاج="" باستخدام="" cis="" أيضًا="" معدل="" الحيوانات="" المنوية="" الحية="" ؛="" أظهرت="" الفئران="" التي="" عولجت="" بـ="" 8="" مجم="" كجم="" يوم="" من="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" زيادة="" ملحوظة="" في="" معدل="" الحيوانات="" المنوية="" الحية="" (55.83="" ±="" 6.03="" بالمائة="" ،="" p=""><0.05 ؛="" 69.="" 00="" ±="" 2.29="" بالمائة="" ،="" p=""><0.01 ؛="" 52.33="" ±="" 3.40="" بالمائة="" ،="">< 0.05;="" and="" 53.67="" ±="" 2.25%,="" p="" <="" 0.05="" respectively)="" when="" compared="" with="" the="" model="" rats="" (43.83="" ±="">

مجتمعة ، تشير هذه النتائج إلى أن بيئة نقص الأكسجين الناقص أدت إلى تغيرات مورفولوجية في الخصية ، وفقدان وزن العضو التناسلي ، وتلف وظيفة الخصية في ذكور الجرذان ، ويمكن لرابطة الدول المستقلة حماية الأعضاء التناسلية بشكل فعال من التلف الناجم عن نقص الأكسجة.

الشكل 4. تأثيرات رابطة الدول المستقلة على الجهاز التناسلي للفئران المعرضة لنقص الأكسجة الناقص الضغط.

آثار رابطة الدول المستقلة على نظام التشغيل في خصيتين الجرذان التي يسببها نقص الأكسجين.

تم قياس مستويات ROS و LPO في خصي الفئران لتحليل تأثيرات رابطة الدول المستقلة على نظام التشغيل الناجم عن نقص الأكسجة. كشف تحليل ROS أنه بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، زادت مستويات ROS في الخصيتين في مجموعة النموذج بشكل كبير (P <0. 0="" 1="" figure5a).="" على="" العكس="" من="" ذلك="" ،="" تم="" رفع="" lpo="" بشكل="" كبير="" في="" الخصيتين="" (p=""><0. 01)="" في="" ظل="" نقص="" الأكسجة="" الناقص="" الضغط="" مع="" الظروف="" السمية="" (الشكل="" 5="" ب).="" ومع="" ذلك="" ،="" غيرت="" معالجة="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" التغييرات="" المذكورة="" أعلاه="" (p=""><0.05) ،="" حيث="" مارس="" cis-b="" تأثيرات="" أفضل="" من="" غيرها="" من="" بلدان="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" (الشكل="" 5="" أ="" ،="" 5="" ب).="" يُنصح="" بحماية="" الخصيتين="" عن="" طريق="" تقليل="" os="" تحت="" ظروف="" نقص="" الأكسجين="" في="" الجسم="">

بالإضافة إلى ذلك،موت الخلايا المبرمجتم إجراء التحليلات لمزيد من التقييم للآلية التي تحميها رابطة الدول المستقلة من إصابة وظيفة الخصية التي يسببها نقص الأكسجة. أظهرت نتائج تلطيخ TUNEL (الشكل 5C) أن موت الخلايا المبرمج كبير موجود في المجموعة النموذجية مقارنة بمجموعة التحكم. ومع ذلك ، بعد علاج رابطة الدول المستقلة (8 مجم / كجم / يوم) ، حدث عدد أقل من الخلايا المبرمج (P <0. 05)="" (الشكل="" 5c).="" أظهرت="" بيانات="" westernblot="" أيضًا="" أن="" نقص="" الأكسجة="" وعلاج="" نقص="" الأكسجين="" أدى="" إلى="" تنشيط="" caspase="" -3="" و="" parp="" وزيادة="" نسبة="" bax="" bcl="" -2="" في="" أنسجة="" الخصية="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" زيادة="" موت="" الخلايا="" المبرمج="" (الشكل="" 5="" د).="" بالإضافة="" إلى="" ذلك="" ،="" خفضت="" أنواع="" مختلفة="" من="" علاجات="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" بشكل="" كبير="" موت="" الخلايا="" المبرمج="" في="" أنسجة="" الخصية="" (الشكل="" 5="" د)="" ،="" وبالمثل="" ،="" أظهر="" تحليل="" المدينة="" العالمية="" للهيدروكربون="" لأنسجة="" الخصية="" نتائج="" مماثلة="" (الشكل="" التكميلي="">

للتحقق من آلية نظام التشغيل المخفض لـ Cis الناجم عن نقص الأكسجة الناقص الضغط ، قمنا باختبار إضافي لأنشطة GR و GPx و SOD في الأنسجة الخصية. كما هو مبين في الشكل 5E ، بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، خفضت معالجة نقص الأكسجة الناقص الضغط بشكل كبير أنشطة GR و GPx و SOD (P <0. 0="" 1).="" ومع="" ذلك="" ،="" استعاد="" علاج="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" أنشطة="" الإنزيم="" (gr="" ،="" و="" gpx="" ،="" و="" sod)="" لأنسجة="" الخصيتين="" في="" الفئران="" المعالجة="" بنقص="" الأكسجة="" الناقص="" الضغط="" (p=""><0.05). في="" الختام="" ،="" يبدو="" أن="" رابطة="" الدول="" المستقلة="" تحمي="" الخصيتين="" من="" خلال="" تنشيط="" آلية="" دفاع="" إنزيم="" مضاد="" للأكسدة="" قوي="" داخلي="" في="" ظل="" ظروف="" نقص="" الأكسجة="" الناقص="">

الشكل 5. تأثير رابطة الدول المستقلة على نظام التشغيل في الخصيتين للفئران التي يسببها نقص الأكسجة.

مناقشة

في المناطق المرتفعة ، من المعروف أن نقص الأكسجة الناقص الضغط يؤثر على أنظمة متعددة في البشر ، بما في ذلكالتكاثر الذكري[4 ، 20] التحقيقات التجريبية الأخيرة موجهة نحو فهم آليات كيف يؤثر نقص الأكسجة الناقص الضغط على الجهاز التناسلي الذكري. في هذه الدراسة ، تم التحقيق في التأثير العلاجي لمستخلص رابطة الدول المستقلة من Cistanches Herba على الضرر الإنجابي الناجم عن نقص الأكسجة. أظهرت النتائج أن رابطة الدول المستقلة قد تحمي الجهاز التناسلي الذكري من التلف الناجم عن نقص الأكسجة عن طريق الحد من تراكم ROS الناجم عن نقص الأكسجة من خلال تعزيز نشاط إنزيمات مضادات الأكسدة الذاتية.

Cistanche يعززنشاط انزيم مضادات الأكسدة.

ROS هي جذور حرة مشتقة من الأكسجين تلعب دورًا حيويًا في فسيولوجيا الإنسان وعلم الأمراض. الجرعات المنخفضة من ROS ضرورية لتكاثر الحيوانات المنوية ، والتفاعل الجسيمي ، واندماج الحيوانات المنوية والبويضة [24 ، 25]. ومع ذلك ، فإن التراكم المفرط لـ ROS غالبًا ما يؤدي إلى إتلاف الخلايا الجرثومية والخلايا اللحمية ، مما يؤدي إلى عقم الذكور [26]. يمكن أن تتسبب أنواع الأكسجين التفاعلية بسهولة في إتلاف أغشية الخلايا والأحماض النووية والبروتينات والإنزيمات والجزيئات البيولوجية الضخمة الأخرى.

من خلال الأكسدة. علاوة على ذلك ، فإنها تؤدي أيضًا إلى تلف خلوي و DNA محتمل عندما تتجاوز القدرة الاستيعابية لمضادات الأكسدة. تدعم الأدلة المتراكمة الدور المحوري لـ ROS في التسبب في خصوبة الذكور [27 ، 28]. يتم تنظيم إنتاج ROS بواسطة توتر الأكسجين. في ظل ظروف نقص الأكسجين ، ينخفض ​​الأكسجين المتوفر في البيئة ، وتزداد لزوجة الدم ، مما يؤثر على العديد من عمليات التمثيل الغذائي المعتمدة على الأكسجين في الكائن الحي [29 ، 30]. ومع ذلك ، يؤدي انخفاض الضغط الجوي على ارتفاعات عالية إلى ضعف العائد الوريدي وانخفاض كمية الأكسجين المنقولة عن طريق مجرى الدم إلى جميع خلايا الكائن الحي ، مما يزيد من نقص الأكسجة في الأعضاء والخلايا [29 ، 30]. وبالتالي ، فإن التعرض لموقف عالٍ يؤدي إلى سلسلة من الاستجابات الفسيولوجية لنقص التأكسج ، بما في ذلك إنتاج ROS وتراكمه ، عندما يتجاوز الطلب على الأكسجين المعروض من الأوعية الدموية. كما ذكرنا سابقًا ، يؤدي تراكم ROS إلى مجموعة متنوعة من التأثيرات داخل الخلايا ، وأهمها التسبب في حدوث OS في الخلايا.

يشير OS إلى عدم التوازن بين تفاعلات الأكسدة والاختزال ، مما يؤدي إلى توليد مواد مؤكسدة زائدة أو جزيئات تقبل إلكترونًا من مادة متفاعلة أخرى ، والتي بدورها تنتج ROS [31 ، 32]. يُفهم نظام التشغيل جيدًا أنه يمكن تشغيله بواسطة سلسلة من العوامل الداخلية والخارجية ، بما في ذلك التعرض للارتفاعات العالية. الحيوانات المنوية هي خلايا معرضة بشكل خاص لنظام التشغيل بسبب عدم كفاية أنظمة إصلاح الخلايا ومحتوى غشاء البلازما من الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة [33]. أنسجة الخصية والبربخ ليست استثناء ، حيث لوحظ وجود OS الشديدة في الحيوانات المنوية في الفئران المعرضة لنقص الأكسجة [4]. يؤثر نظام التشغيل على استقرار الحمض النووي ، مما يهدد سلامة المادة الوراثية المشيمية [34-36]. ومع ذلك ، فقد تم التأكد من أن ارتفاع مستوى تلف الحمض النووي في الأمشاج الذكرية يؤدي إلى تنشيط إشارات موت الخلايا المبرمج ، مما يؤدي إلى تقليل عدد الحيوانات المنوية في البربخ وزيادة نسبة الخلايا المعيبة [28 ، 37]. في هذه الدراسة ، قلل نقص الأكسجة بشكل كبير من قابلية خلايا GC -1 للحياة من خلال تحريض موت الخلايا المبرمج وتوقف دورة الخلية. والأهم من ذلك ، أنه تم إظهار زيادة كبيرة في مستويات ROS من خلال تحليل FCM بعد تحفيز نقص الأكسجة ، مع زيادة معدل موت الخلايا المبرمج وتنشيط أعلى لنسبة Caspase -3 و PARP و Bax / Bcl -2 ، مما يشير إلى أن ROS يمكن أن ينشط موت الخلايا المبرمج عن طريق تنشيط مسار إشارات Caspase أثناء تلف الخصوبة الناجم عن نقص الأكسجة. أظهرت النتائج الحالية أن نقص الأكسجة أدى إلى تراكم ROS المفرط ، مما تسبب في تلف مؤكسد للخلايا الإنجابية. وبالتالي ، من المفيد تحديد مضادات الأكسدة الجديدة التي يمكن أن تكون وسيلة فعالة للتخفيف من إصابات الخصوبة التي يسببها نقص الأكسجة.

سيستانشتخفيف إصابة الخصوبة.

للحماية من OS ، يوجد نظام مضاد للأكسدة معقد في الجسم ، يتكون أساسًا من عوامل أنزيمية. في ظل الظروف الفسيولوجية ، تحافظ محتويات ROS ونظام مضادات الأكسدة على توازن معين. ومع ذلك ، فإن الإفراط في إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية يؤدي إلى استنفاد نظام مضادات الأكسدة في الحيوانات المنوية ، مما يؤدي إلى ظهور OS ، الذي يتسبب في حدوث DNAdamage للحيوانات المنوية ويؤدي إلى انخفاض معدلات الخصوبة والحمل [23]. وبالتالي ، لمعالجة الإفراط في إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية والآثار الضارة ذات الصلة على المستوى الخلوي في الجهاز التناسلي الذكري ، تم اختبار استراتيجيات مختلفة لمضادات الأكسدة [23]. حاليا ، الأدبيات المتعلقة باستخدام المركبات ذات النشاط المضاد للأكسدة وتحسين وظيفة الحيوانات المنوية واسعة النطاق. الأهم من ذلك ، أن معظم التقارير تصف التحسن الحركي في معاملات الحيوانات المنوية بعد تناول مضادات الأكسدة عن طريق الفم ، بما في ذلك التحسينات في تركيز الحيوانات المنوية وحركتها أو تقليل تلف الحمض النووي [38]. وبالتالي ، فإن عددًا متزايدًا من أطباء الجراحة يصفون مضادات الأكسدة الفموية للعقم بسبب مشاكل مرتبطة بسرطان الجسم [39]. تشمل هذه مضادات الأكسدة بشكل أساسي الكارنيتين والفيتامينات والزنك والميلاتونين والمركبات الطبيعية [23 ، 40]. في الوقت الحاضر ، مع تطور تقنية استخلاص الأدوية ، يتم أيضًا النظر في عدد متزايد من مستخلصات الطب الصيني التقليدي للتخفيف من عقم الذكور لأن مضادات الأكسدة هذه يمكن أن تقلل من الآثار المدمرة لنظام التشغيل [41]. Yüce A. et al. ذكرت في عام 2013 أن للقرفة آثار مفيدة على التوازن المؤكسد ومضادات الأكسدة في الخصيتين ونوعية الحيوانات المنوية [42]. تشانغ إل وآخرون. أظهر أن الكركمين يحسن بشكل ملحوظ حركة الحيوانات المنوية في المرضى ويقلل H2O2 [43]. بالإضافة إلى ذلك ، فقد ثبت أيضًا أن مجموعة متنوعة من المستخلصات النباتية الأخرى مثل التوت الأزرق والزعفران وبذور الرمان والشاي الأخضر تحمي الجهاز التناسلي عن طريق آليات مضادات الأكسدة [27 ، 44-47]. Cistanches Herba هو الطب الصيني التقليدي المهم الذي يتمتع بملف تعريف أمان مناسب ووظائف طبية واسعة لعلاج العقم ، من بين حالات أخرى [13]. أظهرت الدراسات الدوائية الحديثة أن Cistanches Herba تمتلك أنشطة مختلفة ، مثل مضادات الأكسدة ، ومضادات الالتهاب ، وأنشطة حماية الكبد ، ومضادة للأمراض التنكسية العصبية [13 ، 48] ، لذلك ، قد تحتوي المقتطفات أو الكسور أو المركبات من Cistanches Herba على خصائص مضادات الأكسدة المحتملة لـ علاج العقم.

تشتمل المواد الفعالة في النباتات التي تحسن الخصوبة على مجموعات كيميائية مختلفة مثل PhGs ، والصابونين ، والمركبات المتطايرة المؤكسجة ، والقلويدات [41]. أظهرت دراسات النشاط الدوائي لـ PhGs أن PhGs تظهر مجموعة واسعة من الأنشطة الحيوية ، مثل مضادات الأكسدة ، والحماية العصبية المضادة للإشعاع ، وتحسين الوظيفة الجنسية [49،50]. من بين هذه الأنشطة ، تجذب مضادات الأكسدة الانتباه تدريجيًا. تم الإبلاغ عن بعض المكونات المفردة أو أجزاء من PhGs لتثبيط موت الخلايا المبرمج للخلايا الجرثومية الناجم عن مواد كيميائية مختلفة ، وقد تم إثبات قدرتها المضادة للأكسدة في المختبر أيضًا في الجسم الحي في العديد من النماذج الحيوانية [51 ، 52]. تشير هذه النتائج إلى أن PhGs يمكن أن تكون مرشحًا جذابًا للعلاج من العقم عند الذكور. Cis هو PhG نشط يمكن عزله من Cistanches Herba. في الدراسة الحالية ، استكشفنا تأثيرات رابطة الدول المستقلة على الخلايا المعالجة بنقص الأكسجة أو نموذج الفئران وبحثنا في الآليات الجزيئية الأساسية. الأنشطة الوقائية المثبَّتة على النقصان الناجم عن نقص الأكسجة وتزيد من عدم وجود الخلايا المبرمج في خلايا GC -1 ، وأظهرت أيضًا تأثيرًا وقائيًا على الضرر الناجم عن نقص الأكسجة في الجهاز التناسلي للفئران في الجسم الحي. لوحظ انخفاض كبير في أنشطة GR و GPx و SOD تحت نقص الأكسجة مقارنة بالمجموعات المعيارية ، بينما زادت الأنشطة المحددة لـ GR و GPx و SOD بشكل كبير في الخصيتين أو خلايا GC -1 المعالجة بـ Cis. يُستهدف حماية الخصيتين وخلايا GC -1 في ظل ظروف نقص الأكسجة عن طريق تعزيز نشاط إنزيمات مضادات الأكسدة.

تعمل مضادات الأكسدة الإنزيمية بشكل أساسي عن طريق تنظيف الأنيونات الفائقة ، وبالتالي منع أكسدة الدهون وتلف الحمض النووي لمنع العقم. تلعب آليات مضادات الأكسدة الأنزيمية دورًا حاسمًا في منع الأكسدة [23]. تشتمل الآلية الأنزيمية ضد OS على كاسحات الجذور الحرة والإنزيمات المعتمدة على الجلوتاثيون بما في ذلك GR و GPx و SOD [12]. من المفهوم جيدًا أن الإنزيمات المضادة للأكسدة ضرورية لنظام التكاثر الذكري. في الدراسة الحالية ، ترافق تأثير انخفاض أنشطة إنزيم مضادات الأكسدة تحت نقص الأكسجين مع زيادة ROS و LPO في المجموعة النموذجية ، وهو ما يتوافق مع التقارير السابقة [12]. ومع ذلك ، أدت إدارة رابطة الدول المستقلة إلى استعادة أنشطة إنزيم مضادات الأكسدة في GC { {4}} الخلايا وخصيات الجرذان ، مما يجعل من الممكن وضع استراتيجيات لإدارة CistanchesHerba لمنع تلف نقص الأكسجة الناجم عن نقص الأكسجين ، كما اقترح سابقًا. على الرغم من أن النتائج الحالية أظهرت أن العلاج بـ Cispartly يقلل من تلف الجراثيم الناجم عن نقص الأكسجة في الجرذان ، إلا أنه يلزم إجراء مزيد من التحقيقات لكشف الصورة الكاملة لتأثيراته الوقائية الإنجابية. على سبيل المثال ، تؤثر الآلية المحددة لـ Cis على نشاط إنزيمات مضادات الأكسدة. بالإضافة إلى ذلك ، هناك سؤال حول ما إذا كانت أي آليات أخرى يمكن أن تكون ذات صلة أيضًا لأن رابطة الدول المستقلة تعافت جزئيًا فقط من الضرر الإنجابي الناجم عن نقص الأكسجة. أخيرًا ، يجب أيضًا مراعاة ما إذا كان Cis له تأثير مباشر في تعزيز النمو على الخلايا الجرثومية.

يحتوي Cistanche على ملفتأثير مباشر يعزز النموعلى الخلايا الجرثومية.

لمزيد من المعلومات، يرجى الضغط هنا.

الاستنتاجات

بشكل عام ، تؤكد نتائج هذه الدراسة على إمكانات رابطة الدول المستقلة كمضاد للأكسدة لعلاج الضرر التناسلي الذكري الناجم عن نقص الأكسجة. يمكن أن يحمي رابطة الدول المستقلة من التلف التناسلي الذكري الناجم عن نقص الأكسجة عن طريق استعادة نشاط إنزيم مضادات الأكسدة ، وتقليل OS الناجم عن ROS ، وزيادة حيوية الخلية في الوقت نفسه ، وتقليل موت الخلايا المبرمج. الأهم من ذلك ، أن الأنواع الفرعية Cis (Cis-A و Cis-B و Cis-C و Cis-H) التي تمت دراستها في هذه الدراسة أظهرت جميعها تأثيرًا وقائيًا معينًا على الجهاز التناسلي ، وأظهر Cis-B التأثير الأكثر أهمية. لذلك ، فإننا نتوقع أن رابطة الدول المستقلة قد تكون مضادًا للأكسدة مرشحًا جيدًا لعلاج الضرر التناسلي الذكري الناجم عن نقص الأكسجة ، على الرغم من أن الآلية الأساسية الدقيقة تتطلب مزيدًا من التحقيق.