الجزء Ⅱ: تحفز جليكوسيدات Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الخلايا الكبدية عن طريق مسارات تعتمد على الميتوكوندريا و MAPK وتعزز تأثير مضاد الأورام من خلال الدمج مع سيسبلاتين

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

قمنا أيضًا بتقييم تأثير التحفيز المناعي لـ CTPG (Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) على الفئران. بعد حقن IP ، حقن sc وإعطاء ig لـ CTPG (200 و 400 مجم / كجم) ، لم يكن هناك تغيير معنوي في حالة الفئران مقارنة بالمجموعة غير المعالجة. لم يكن لوزن جسم الفئران أيضًا فرق كبير بين المجموعات المعالجة بـ CTPG والمجموعات غير المعالجة (الشكل 7 أ). كانت مؤشرات القلب والكبد والطحال والرئة والكلى والغدة الصعترية للفئران متشابهة بين جميع المجموعات باستثناء فهارس الطحال للفئران في مجموعة حقن 400 مجم / كجم CTPG ip (الجدول 1). أشارت النتائج إلى أن الجرعات المختارة من CTPG لم يكن لها أي آثار جانبية في الفئران. الطحال هو عضو مهم في الدفاع المناعي في الثدييات ، ويؤثر تطوره بشكل مباشر على الوظيفة المناعية للفرد والقدرة على مقاومة الأمراض. يعكس مؤشر الجهاز المناعي تطور أجهزة المناعة ووظائفها المناعية. يحتوي الطحال على مجموعة متنوعة من الخلايا المناعية ، بما في ذلك الخلايا التائية والخلايا البائية والخلايا القاتلة الطبيعية (الخلايا القاتلة) والبلاعم والخلايا التغصنية وغيرها ، والتي تلعب دورًا مهمًا في الجهاز المناعي. أن السكريات يمكن أن تزيد من عدد الخلايا المناعية لتعزيز الجسمحصانة.31 نظرًا لأن الحقن IP لـ CTPG أدى إلى زيادة كبيرة في مؤشر الطحال (زاد 0. 55 مرة) ، قمنا بتحليل أعداد الخلايا المناعية المختلفة في الطحال. أظهرت النتائج أن حقن IP لـ CTPG أدى إلى زيادة كبيرة في عدد الخلايا التائية (CD3 بالإضافة إلى خلايا CD19−) (زيادة 0. 49 مرة) ، الخلايا البائية (خلايا CD3 - CD19 plus) (زيادة 0 .49 مرة) ، وخلايا NK (خلايا CD3 - CD19 - CD49b plus) (زادت 1.63 مرة) مقارنة بالمجموعة غير المعالجة. تلعب خلايا CD4 plus و CD8 plus T ، باعتبارها الأنواع الفرعية الرئيسية للخلايا التائية ، دورًا مهمًا في الاستجابة المناعية الخلوية الخاصة بالمستضد .32 لذلك ، قمنا بتحليل عدد وحالة تنشيط خلايا CD4 plus و CD8 plus T في طحال. أشارت النتائج إلى أن حقن IP لـ CTPG لم يؤدي فقط إلى زيادة كبيرة في عدد خلايا CD4 plus و CD8 plus T (زادت 0. 55 و 0. 34 مرة ، على التوالي) ولكن أيضًا عززت حالة تنشيط خلايا CD4 بالإضافة إلى T (CD4 بالإضافة إلى خلايا CD44 plus) (زادت 0. 84 مرة) (الشكل 7B) ، تشير هذه النتائج إلى أن CTPG لها وظيفة تعزيز المناعة.

مزيج من CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) و Cisplatin أظهر تأثيرًا قويًا مضادًا للورم على نموذج الفأر الورم H22

من المقبول عمومًا أن العلاج الكيميائي أو العلاج الإشعاعي يمكن أن يؤدي إلى سوء التشخيص ويؤدي إلى العديد من الأحداث الضائرة ، والتي قد تكون بسبب قمع جهاز المناعة وتلف الأنسجة والأعضاء الطبيعية. السكريات المتعددة من الطب الصيني التقليدي لها تأثيرات تعزيز المناعة وتخفف من تلف الأعضاء المناعية والخلايا المناعية الناجمة عن العلاج الكيميائي ، على سبيل المثال ، عديد السكاريد الشيتوزان والليسيوم بارباروم .34 وأظهرت النتيجة أعلاه أن CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) يمكن أن يخفف الآثار الجانبية للسيسبلاتين على جهاز المناعة. لذلك ، تم تقييم التأثير المضاد للورم لـ CTPG جنبًا إلى جنب مع سيسبلاتين في نموذج فأر الورم H22. كما هو مبين في الشكل 8 أ ، فإن CTPG وحده ، وسيسبلاتين وحده ، ومزيج CTPG و cisplatin (CTPG plus cisplatin) قد كبح نمو الورم H22 بشكل كبير مقارنة بمجموعة التحكم. أظهر CTPG plus cisplatin تأثيرًا مثبطًا أقوى من تأثير CTPG و cisplatin وحده. في اليوم العشرين ، كانت أحجام الورم في مجموعة التحكم ، سيسبلاتين وحده ، CTPG وحده ، ومجموعات CTPG plus cis platin حوالي 1707.8 و 722.5 و 1033.8 و 367.5 ملم 3 على التوالي. في نفس اليوم ، تم جمع الأورام للمراقبة البصرية (الشكل 8 ب) ومقارنة الوزن (الشكل 8 ج). أظهر CTPG plus cisplatin تأثيرات علاجية أفضل على نموذج فأر الورم H22 مقارنة بـ CTPG أو سيسبلاتين وحده. كان وزن الورم في مجموعة CTPG plus cisplatin أقل من وزنه في المجموعات الأخرى. تشير هذه النتائج إلى أن النشاط المضاد للورم لـ CTPG و cisplatin يؤدي إلى تأثيرات تآزرية.

تم قياس أوزان جسم الفئران لتعكس الحالة الصحية للفئران. انخفض وزن الجسم بشكل ملحوظ بعد العلاج بالسيسبلاتين ، مما يشير إلى حدوث سمية جهازية شديدة يسببها سيسبلاتين.(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) وحده لم يكن له تأثير كبير على وزن جسم الفئران (الشكل 8 د). تم عزل الأعضاء بما في ذلك الطحال والقلب والكبد والرئة والكلى والغدة الصعترية لحساب فهارس الأعضاء. مقارنة بالمجموعة غير المعالجة ، انخفضت مؤشرات الطحال بشكل كبير وزادت بواسطة سيسبلاتين و CTPG ، على التوالي. CTPG plus cisplatin تعافى فهارس الطحال مقارنة مع سيسبلاتين وحده. أظهرت فهارس الأعضاء الأخرى عدم وجود فرق معنوي بين جميع المجموعات (الجدول 2).Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) جنبا إلى جنب مع سيسبلاتين المحسنحصانةمن ورم الفئران.

أظهرت النتائج أعلاه أن CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) عزز المناعةمن الفئران وتثبيط موت الخلايا المبرمج للخلايا الطحالية التي يسببها سيسبلاتين. لقد بحثنا أيضًا فيما إذا كان التأثير المضاد للورم لـ CTPG بالإضافة إلى سيسبلاتين مرتبطًا بالمناعة المحسنة. في عملية حدوث الورم وتطوره ، يلعب جهاز المناعة في الجسم وظيفة مراقبة مناعية مهمة ، وتلعب المناعة الخلوية عبر الخلايا التائية دورًا رئيسيًا. تتمتع خلايا CD4 plus T بوظيفة مساعدة المناعة الخلوية والاستجابة المناعية الخلطية ، وخلايا CD8 بالإضافة إلى T هي الخلايا المؤثرة الرئيسية للاستجابة المناعية ، والتي يمكن أن تقتل الخلايا المستهدفة على وجه التحديد وتلعب دورًا مهمًا في مناعة الورم والمناعة المضادة للفيروسات .32 تم جمع طحال الفئران الحاملة للورم للكشف عن عدد الخلايا التائية والخلايا البائية عن طريق قياس التدفق الخلوي. كانت ترددات وأعداد الخلايا التائية بما في ذلك خلايا CD4 plus و CD8 plus T في مجموعة CTPG بالإضافة إلى cisplatin أعلى بكثير من تلك الموجودة في مجموعة التحكم (زادت 0. 55 و 0. 7 مرات ، على التوالي) ومجموعات سيسبلاتين (زادت 0. 92 و 1.16 مرة على التوالي) (الشكل 9 أ و ب). مقارنة بمجموعة التحكم ، زاد CTPG وحده جزئيًا من عدد خلايا CD4 plus و CD8 plus T على الرغم من عدم وجود فرق كبير. لم يكن لتكرارات وأعداد الخلايا البائية فرق كبير بين جميع المجموعات.

تتوسع الخلايا الكابتة المشتقة من النخاع الشوكي (MDSCs) والخلايا التائية التنظيمية (Tregs) في الأورام وتمنع الاستجابات المناعية المضادة للورم ؛ أنها تمنع تنشيط وتوسيع خلايا CD4 plus T ، ووظيفة الخلايا التائية المستجيبة ، والتنشيط و / أو التكاثر ، وتكوين السيتوكين لخلايا CD4 plus و CD8 plus T ، وتكاثر الخلايا B وإنتاج الغلوبولين المناعي والتبديل الطبقي ، الوظائف السامة للخلايا لـ NK والخلايا التائية القاتلة الطبيعية (NKT) ، ووظيفة ونضوج DC. 36-38 ترددات وأعداد MDSCs (CD11b plus Gr -1 plus) ، الضامة (CD11b زائد Gr -1 -) ، وتم تحليل Tregs (Tregs الطبيعي: CD4 بالإضافة إلى CD25 بالإضافة إلى Foxp3 plus ؛ المستحثة Tregs: CD4 بالإضافة إلى CD25 − Foxp3 plus) في طحال فئران الورم عن طريق قياس التدفق الخلوي. بالمقارنة مع مجموعة التحكم ، انخفضت ترددات وأعداد MDSCs بشكل ملحوظ بعد الحقن بالسيسبلاتين وحده (انخفض 1.56 مرة) أو بالاشتراك مع CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) (انخفض 0. 62 مرة). انخفضت أعداد CD11b زائد Gr -1 - الضامة أيضًا بشكل ملحوظ على الرغم من عدم وجود تغيير كبير في تردداتها (الشكل 9C). بالإضافة إلى ذلك ، CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) وحده و CTPG بالإضافة إلى العلاج سيسبلاتين أدى إلى انخفاض كبير في تواتر تريجس المستحث (انخفض {0}. 33 و 0.37 مرة ، على التوالي) (الشكل 9 د). تشير هذه النتائج إلى أن التأثير المضاد للورم لـ CTPG plus cisplatin قد يكون مرتبطًا بالمناعة المحسنة التي تتميز بزيادة أعداد الخلايا التائية وانخفاض أعداد MDSCs و Tregs.