Sarmentosamide ، مركب مضاد للشيخوخة من مجموعة Streptomyces Sp. امين عبدالمجيد 0242
Apr 28, 2023
الكلمات الدالة:cistanche; ستربتوميسيسص. أبمارين 042 ؛مكافحة الشيخوخة؛ MMP -1 ؛ UVB. TNF-
انقر هنا للحصول على مزيد من المعلومات حول سيستانش للعناية بالبشرة للشيخوخة
1 المقدمة
شيخوخة الجلدناتج عن عمليتين رئيسيتين ناتجة عن عوامل داخلية وخارجية.الشيخوخة الخارجيةناتج بشكل أساسي عن التعرض للعوامل البيئية مثل تلوث الهواء [1] والأشعة فوق البنفسجية [2]. يتكون ضوء الأشعة فوق البنفسجية من UVA (315-400 نانومتر) ، UVB (280-315 نانومتر) ،و UVC (200-280 نانومتر) ، ومن المعروف أن أشعة UVB تخترق البشرة وتساهم في الجلدالتشيخ الضوئي [3]. يتسبب شيخوخة الجلد بفعل الأشعة فوق البنفسجية في تلف الحمض النووي [4] وأنواع الأكسجين التفاعلية(روس) جيل [5] ويعطل المصفوفة خارج الخلية [6]. الشيخوخة الجوهرية ناتجة عن الطبيعيعواقب التغيير الفسيولوجي ، مثل العوامل الوراثية والهرمونات وعمليات التمثيل الغذائي [7]. علاوة على ذلك ، فإن السيتوكينات الالتهابية ، مثل عامل نخر الورم ألفا (TNF ) ، انترلوكين 1 ألفا/بيتا(إلينوي -1 / ) ، والإنترلوكين 6 (IL -6) ، تزدادان بشكل مزمن مع تقدم العمر. على وجه الخصوص ، نخر الورمعامل- (تنف ) يُعرف بتسريع تدهور مكونات المصفوفة خارج الخلية (ECM) عبرتنظيم تعبير ونشاط البروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs) في الجلد المسن [8]. MMP -1 هويتم إطلاقه بشكل رئيسي بواسطة الخلايا الليفية في الأدمة ، ويكون MMP المفرز -1 مسؤولاً عن تدهورمن الكولاجين الجلدي الذي يدعم بنية البشرة ووظيفتها. لذلك ، تعديل MMP -1يمكن أن يكون التعبير في الخلايا الليفية الجلدية هدفًا واعدًا لتطوير مضادات الشيخوخةمكونات مستحضرات التجميل.
أفادت الدراسات السابقة أن إشعاع UVB يحفز ROS (إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية ويؤدي إلى تنشيط مسارات الإشارات داخل الخلايا وعوامل النسخ (على سبيل المثال ، AP -1 ، NF-kB) [9. يتم تنظيم عوامل النسخ هذه بواسطة ميتوجين -كينازات البروتين المنشط MAPK) ، والتي تحفز MMP -1 والسيتوكينات المسببة للالتهابات. هناك ثلاث عائلات MAPK مميزة تشارك في محفزات UVB / ROS: كينازات تنظيم الإشارات خارج الخلية (ERKs) ، c-Jun N-terminal
kinase (NK) ، و p38. حددت دراستنا Streptomyces sp. مستخلص APmarine042 الذي أظهر تأثيرًا مثبطًا قويًا على تعبير MMP -1. بعد ذلك ، تم التعرف على مركب مثبط MMP -1 في Streptomyces sp. تم التعرف على مستخلص APmarine042 وبنيته الكيميائية من خلال مساعدة تحليل الرنين المغناطيسي النووي (1) ، وهو مركب يحتوي على جزء hexadienamide 101. ثم نجري مزيدًا من التحقيق فيما إذا كان تعبير MMP -1 مثبطًا للمركب في الجلد البشري المشع بالأشعة فوق البنفسجية والمستحث بعامل TNFa الخلايا الليفية وكذلك دورها في تنظيم مسارات الإشارات الأساسية. بالإضافة إلى ذلك ، قمنا بفحص اله النشاط المضاد للأكسدة من cistanche(1) عبر 2 ، 2- ثنائي فينيل -1- بيكريلهيدرازيل (DPPHI)مقايسة الكسح الجذري.
2. النتائج والمناقشة
2.1. cistanche (1) العزلة وتحديد الهوية
تم عزل cistanche (1) من خلال مزيج من HPLC-UV والعزلة الموجهة بالنشاط الحيوي. بناءً على المقارنة بين بيانات الرنين المغناطيسي النووي (المواد التكميلية) للمركب المحدد في هذه الدراسة (المشار إليها فيما يلي بالمركب 1 ") مع تلك الخاصة بالمركبات التي تم الإبلاغ عنها سابقًا ، تم تحديد المركب 1 على أنه cistanche. كانت قيمة الدوران البصري للمركب 1 تتفق أيضًا مع التقارير السابقة ، والتي دعمت أيضًا تلك المساعدة المركبة 1 (الشكل 1).
2.2. التأثيرات السامة للخلايا من cistanche (1) على الخلايا الليفية الجلدية البشرية
للتحقيق في التأثيرات السامة للخلايا من cistanche ، تمت معالجة الأرومات الليفية الجلدية الطبيعية (NHD للخلايا الليفية القلفة البشرية (Hs68) مع cistanche بتركيزات مختلفة (6 ، 12 ، 25 ، 50 ، 100 ميكروغرام / مل) لمدة 24 ساعة ، وبعد ذلك الخلية تم إجراء اختبار مجموعة العد -8 (CCK -8) لتحديد صلاحية الخلية. تم تقليل ملح رباعي الزوليوم القابل للذوبان في الماء (WST -8) في محلول CCK -8 عن طريق أنشطة نزع الهيدروجين في لإعطاء صبغة فورمازان صفراء اللون ، تتناسب كميتها مع عدد الخلايا الحية. كما هو مبين في الشكل 2 ، لم يتسبب الكستانش في تأثيرات سامة للخلايا يمكن ملاحظتها في خلايا NHDF أو Hs68 بتركيزات تتراوح من {{15} } ميكروغرام / مل
الشكل 2. اختبار قابلية الخلية للبقاء على الخلايا الليفية. (أب) قابلية الخلية للحياةعلاج cistancheتم قياس الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية (NHDF) (أ) وخلايا الخلايا الليفية القلفة البشرية (Hs68) (ب) عند 24 ساعة بواسطة مقايسة CCK (مجموعة عد الخلايا). * p <0. 0 5 ، ** p <0.01vs. مجموعة غير معالجة).
2.3 cistanche (1) يمنع التعبير والإفراز MMP -1 في خلايا NHDF المشعّة بالأشعة فوق البنفسجية UVB
بعد ذلك ، تمت معالجة NHDFs في غياب ووجود إشعاع UVB (25 مللي جول / سم 2) باستخدام cistanche (2.5 ميكروغرام / مل) لفترات قصيرة ، وتم قياس مستويات التعبير MMP -1 النسبية عبر الوقت الحقيقي الكمي تحليل PCR. تم العثور على cistanche لخفض تنظيم مستويات MMP -1 mRNA بنسبة تصل إلى 16 بالمائة و 17 بالمائة في غياب (الشكل 3 أ) ووجود (الشكل 3 ب من الأشعة فوق البنفسجية باء ، على التوالي. يمكن أن يخترق البشرة ويصل إلى الأدمة العليا ، مما يؤدي إلى إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) MMP ، وتقليل تنظيم تخليق الكولاجين. لذلك ، سعت دراستنا إلى التحقق مما إذا كان إفراز MMP مثبطًا للتقيؤ -1 في إشعاع UVB خلايا NHDF. تم قياس مستويات إفراز MMP -1 في وسط زراعة الخلايا عبر ELISA ، وتم تطبيع الكميات النسبية من إفراز MMP -1 للبروتين الكلي في lysates الخلية الكاملة ، والتي تم قياسها عبر bicinchoninic مقايسة تقدير كمية البروتين الحمضي (BCA). أدى تشعيع الأشعة فوق البنفسجية (25 مللي جول / سم 2) إلى زيادة إفراز MMP -1 بشكل ملحوظ (8. 3- أضعاف) مقارنة بالمجموعة غير المشععة بالأشعة فوق البنفسجية (الشكل 3 ج) - يمنع إفراز MMP -1 في خلايا NHDF المشعّة بالأشعة فوق البنفسجية بطريقة تعتمد على الجرعة.
الشكل 3. تأثير cistanche على تعبير البروتين المعدني -1 (MMP -1) في الأشعة فوق البنفسجية المشعة NHDFs. (أ ، ب) مستويات mRNA النسبية لـ MMP -1 في خلايا NHDF التي تعرضت للإشعاع UVB (25 مللي جول / سم 2) أو تعامل مع cistanche (2.5 ميكروغرام / مل) لمدة 16 ساعة. تم استخدام جين RPLPO كعنصر تحكم داخلي. * p <{{1 0}}. 0 5. *** p <0. 0 01 (C) بعد تشعيع UVB (25 مللي جول / سم 2) ، تم علاج التماسك في الوسائط الخالية من المصل لمدة 48 ساعة ، ثم تم تحليل مستويات الإفراز النسبي لـ MMP -1 في وسط زراعة الخلايا بواسطة ELISA ### p <0.001 (مقابل مجموعة التحكم غير UVB) ؛ ** ف <0.01 ؛ *** p <0.001 (مجموعة التحكم المشعة للأشعة فوق البنفسجية).
يطلب المزيد:
البريد الإلكتروني: wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950
