سرطان الدم المحبب العفوي في NOD/Shi-scid IL-2R null Mouse

خلاصة:هنا، قمنا بالإبلاغ عن حالة سرطان الدم المحبب العفوي لدى 51-ذكر عمره أسبوع NOD/Shi-سكيدإيل-2ر ماوس فارغ (NOG). أظهر الفأرفقر الدم التدريجيوحركة الجهاز التنفسي الخشنة. من الناحية المجهرية، تم تغيير لون الطحال وتوسيعه. تشريحيا، نخاع العظامعظم القفص الصدريوكان عظم الفخذ عالي الخلايا وممتلئًا بشكل حصري تقريبًاالخلايا الورمية. كانت نوى الخلايا الورمية كبيرة، وبيضاوية إلى غير منتظمة الشكل قليلاً، وكان بها عدد قليل من الخلاياكلية- أو نوى على شكل حلقة.الخلايا الورميةتسلل إلى الأعضاء على نطاق واسع، وكان الطحال والكبد متورطين بشكل بارز. من الناحية المناعية الكيميائية، كان عدد كبير من الخلايا الورمية في اللب الأحمر للطحال والجيوب الأنفية للكبد إيجابيا.الميلوبيروكسيديز. وبناء على المظاهر النسيجية تم تشخيص هذه الحالةسرطان الدم المحبب. هذه معلومات جديدة عنأورام عفويةقد يكون مفيدًا للاستخدام المناسب لسلالة الماوس هذه في إجراء مزيد من الأبحاث. (DOI: 10.1293/tox.2020-0092; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

الكلمات الدالة: سرطان الدم المحبب، NOG الماوس، ورم عفوي

انقر هنا للحصول على مستخلص سيستانش عضوي طبيعي يحتوي على 25% من الإكيناكوسيد و9% أكتيوسايد لوظيفة الكلى.

الخدمة الداعمة لشركة Wecistanche - أكبر مصدر للسيستانش في الصين:

البريد الإلكتروني:wallence.suen@wecistanche.com

واتس اب/هاتف:+86 15292862950

تسوق لمزيد من تفاصيل المواصفات:

https://www.xjcistanche.com٪2FCISTANCHE-shop

سرطان الدم المحبب العفوينادرًا ما يتم الإبلاغ عنه في عدة سلالات من الفئران، على الرغم من أن العوامل الكيميائية والإشعاعات المؤينة قد تزيد من حدوثه في بعض سلالات الفئران 1، 2. الفئران NOD/Shi-scid IL-2R null (NOG) شديدةالحيوانات التي تعاني من نقص المناعة، والعيوب الحالية في الخلايا T- و B- والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا الضامة والخلايا الجذعية التي تعمل بشكل سيء عن طريق خروج سلسلة مستقبلات IL -2 (IL2R c) في سلالة NOD-scid3. تُستخدم سلالة الفأر هذه في الاختبارات غير السريرية، مثل اختبار الأورام، لتقييم جودة وسلامة المنتجات البيولوجية للطب التجديدي باستخدام الخلايا/الأنسجة المشتقة من الإنسان، بسبب التطعيم الأفضل بشكل ملحوظ للخلايا الغريبة المنشأ. على الرغم من أن حالة نقص المناعة وآثارها على الطعوم الأجنبية تمت دراستها جيدًا، إلا أن المعلومات المتوفرة قليلة عن الأورام العفوية التي تحدث في هذه السلالة من الفئران، مثل سرطان الغدد الليمفاوية الغدة الصعترية،الثدييةغدة ورم غدي / غدي, سرطان القصبات الهوائية, ساركومة عضلية مخططةو ورم مسخي7. تم الإبلاغ هنا عن حالة سرطان الدم المحبب في فأر NOG عمره 51-أسبوع.

تم الحصول على الحيوان من شركة In-Vivo Science Inc. (كاناغاوا، اليابان) في عمر 6 أسابيع وتم إبقاؤه دون علاج. تم وضع الحيوان بشكل فردي في قفص بلاستيكي مع نظام قفص ذو تهوية فردية (Maxi Miser Caging System؛ Oriental Giken Inc.، Tokyo، Japan) داخل غرفة نظام حاجز يتم التحكم فيه بيئيًا، والتي تم الحفاظ عليها عند درجة حرارة 22 ± 2 درجة مع رطوبة 50 ± 20% ودورة ضوء/ظلام 12- ساعة. تمت تغذية الفأر بنظام غذائي معقم (CRF -1؛ Charles River Japan، Inc.، طوكيو، اليابان) مع ماء الصنبور المعقم والشراب. تمت معالجة الحيوان وفقًا للبروتوكول الذي وافقت عليه لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية التابعة لشركة CMIC Pharma Science Co., Ltd.، المعتمدة من قبل AAALAC International.

أظهر هذا الفأر علامات ضعف سريرية، مثل فقر الدم، وحركة التنفس الخشنة، وانخفاض وزن الجسم بين 49 و51 أسبوعًا من العمر. تم الموت الرحيم للحيوان عند عمر 51 أسبوعًا. عند التشريح، تغير لون الطحال وتضخم. لم يتم ملاحظة أي نتائج إجمالية غير طبيعية واضحة في الأعضاء الأخرى. كانت الغدة الصعترية والعقدة الليمفاوية ضامرة، مماثلة لتلك الموجودة في الفئران NOG الطبيعية.

تم جمع جميع عينات الأعضاء والأنسجة بشكل روتيني، وتم تثبيتها في 10٪ من الفورمالين المحايد المخزن، ومضمنة في البارافين، ومقطعة عند حوالي 3 ميكرومتر. لإجراء الفحص المرضي، تم صبغ المقاطع بالهيماتوكسيلين والأيوسين (HE). تم تلطيخ أقسام من الطحال والكبد مناعيًا كيميائيًا للأجسام المضادة متعددة النسيلة النخاعية المضادة للإنسان (MPO) للأرنب (داكو اليابان ، طوكيو ، اليابان) كعلامة للخلية النخاعية ، الجسم المضاد أحادي النسيلة CD3 المضاد للإنسان (Nichirei Biosciences Inc. ، طوكيو ، اليابان). ) كعلامة للخلية التائية، والجسم المضاد أحادي النسيلة Pax -5 المضاد للإنسان (Abcam Inc.، كامبريدج، المملكة المتحدة) كعلامة للخلية B8. تم تحضين الأقسام بالأجسام المضادة في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة، وتم إجراء الكشف المناعي باستخدام Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) مع 3،3′-diaminobenzidine / H2O2 باعتباره كروموجين. وكانت المقاطع المناعية بعد ذلكملطخ بالهيماتوكسيلين.

من الناحية التشريحية المرضية، كان النخاع العظمي للقص وعظم الفخذ عالي الخلايا ومليئًا بشكل حصري تقريبًا بالخلايا الورمية (الشكل 1A). تم تهجير الأنسجة الدهنية بالكامل. كانت هناك بؤر خلوية عرضية تتكون من عناصر كريات الدم الحمراء وخلايا نواة كبيرة في النخاع، والتي اعتبرت بقاياتكون الدم الطبيعي. أظهرت معظم الخلايا الورمية مظهرًا أروميًا، يتميز بنواة كبيرة بيضاوية إلى غير منتظمة الشكل قليلًا، ومع وجود كروماتين شبكي يحتوي على نواة بارزة واحدة أو أكثر. كان هناك عدد صغير من الخلايا ذات النوى الكلوية أو الحلقية، وكان هناك أيضًا عدد قليل من الخلايا ذات النوى المفصصة (الشكل 1 ب). لم تكن الحبيبات الموجودة في سيتوبلازم الخلايا الورمية واضحة في الأقسام الملطخة بـ HE. تم العثور على العديد من الأشكال الانقسامية في النخاع، ولوحظت أيضًا أجسام موت الخلايا المبرمج في بعض الأحيان. غزت الخلايا الورمية بشكل ملحوظ السمحاق والعضلات الهيكلية المحيطة بها. كان هناك تسلل واسع النطاق للخلايا الورمية إلى الأعضاء والأنسجة الأخرى، وكان الطحال والكبد متورطين بشكل بارز. في الطحال، لوحظت الخلايا الورمية في جميع أنحاء اللب الأحمر (الشكل 2). وكان تسلل المحفظة للخلايا الورمية واضحا. وقد لوحظ وجود عدد قليل من سلسلة كرات الدم الحمراء النامية والخلايا المكروية. وقد لوحظت في بعض الأحيان وجود خلايا نواة ضخمة تحتوي على واحدة أو بعض الخلايا النقوية في السيتوبلازم، مما يشير إلى حدوث امبريبول. في الكبد، تسللت الخلايا الورمية إلى كبسولة جليسون والجيوب الكبدية بشكل منتشر (الشكل 3). وكانت الخلايا الورمية ذات النوى الكلوية أو الحلقية واضحة أيضًا في بعض الأوعية الدموية. أظهرت بعض خلايا الكبد في المنطقة المحيطة بالباب، مع تسلل الخلايا الورمية البارزة، انحطاطًا أو نخرًا، في حين بقي الهيكل الطبيعي للفصيص الكبدي سليمًا. تم العثور أيضًا على تسلل الخلايا الورمية في الأعضاء الأخرى، بما في ذلك الجدار السنخي والمنطقة المحيطة بالأوعية الدموية في الرئة، والملعب الداخلي في الكلى، والجيوب الأنفية في الغدد الكظرية، والغشاء المخاطي وتحت المخاطي في الجهاز الهضمي (المعدة والأمعاء). من الناحية الكيميائية المناعية، كان عدد كبير من الخلايا الورمية في اللب الأحمر للطحال (الشكل 4) والجيوب الأنفية للكبد إيجابيًا لـ MPO. لم يتم اكتشاف خلايا CD3 وPax-5 الإيجابية. كانت نتائج الصبغ المناعي لـ CD3 وPax-5 مماثلة لتلك الخاصة بالطحال لدى فئران NOG الطبيعية، والتي كانت ناقصة التنسج نسيجيًا ولم تظهر أي خلايا إيجابية لـ CD3 أو Pax-5.

وكشف التحقيق المناعي الكيميائي أن الخلايا الورمية نشأت من سلالات الخلايا النخاعية. في بعض المناطق المعنية، وخاصة الطحال والكبد، كان لعدد صغير من الخلايا أشكال كلوية أو حلقية أو مفصصة تشير إلى تمايز سلسلة النخاع الشوكي. تشير هذه النتائج إلى أن الخلايا الورمية مشتقة من الخلايا المحببة غير الناضجة. قد تكون حالة تكون النخاع الشوكي الشديدة واضحة من خلال وجود جميع أنواع السلسلة النقوية النامية، على النقيض من هيمنة الخلايا غير الناضجة في سرطان الدم. بالإضافة إلى ذلك، فقر الدم التقدمي هو علامة سريرية شائعة لسرطان الدم المحبب، والزيادات في خلايا الدم الحمراء والخلايا كبيرة النواة ضعيفة. تشير المجموعة الصغيرة من الخلايا المحببة ذات النوى المفصصة في المنطقة المصابة دون التهاب واضح إلى أن نتائج الحالة الحالية هي ورم وليس تكوين نقوي تفاعلي.

في سرطان الدم المحبب، يمكن استبدال النخاع العظمي بخلايا نقوية غير ناضجة وناضجة. في تقرير سابق عن سلالات أخرى من الفئران، تسللت هذه الخلايا الورمية بالكامل إلى الكبد والطحال والغدد الليمفاوية، وما إلى ذلك، وكانت هذه الخلايا الموجودة في الطحال والكبد موجودة بشكل رئيسي في اللب الأحمر وحول محفظة جليسون. وهكذا، فإن توزيع خلايا سرطان الدم في الحالة الحالية كان مماثلاً لذلك في الحالة السابقة. استناداً إلى شكل الخلايا، يتم تصنيف سرطان الدم المحبب في الفئران إلى نوعين: نوع الأحداث، والذي يشبه سرطان الدم النقوي الحاد البشري، والنوع الناضج لسرطان الدم النقوي المزمن البشري. في حالة الأحداث، كانت الخلايا الورمية في النخاع العظمي والطحال والكبد تهيمن عليها خلايا ضعيفة التمايز، في حين يمكن رؤية العناصر النخاعية التي تمثل درجات مختلفة من النضج وكانت النسبة المئوية للخلايا النقوية منخفضة في بعض الحالات الناضجة 2،9. في الحالة الحالية، سيطر على خلايا سرطان الدم شكل غير ناضج ذو نوى كبيرة بيضاوية إلى غير منتظمة الشكل قليلاً. بالإضافة إلى ذلك، وبالنظر إلى النتائج السريرية التي تشير إلى أن تدهور الصحة العامة، بما في ذلك فقر الدم التدريجي وحركة التنفس الخشنة، قد تطور بشكل حاد؛ ومن ثم يفترض أن القضية الحالية من نوع الحدث.

الشكل 1. الصور النسيجية لنخاع عظم عظم الفخذ. ج: تتكاثر الخلايا الورمية بشكل منتشر، وبالتالي تحل محل النخاع العظمي. ب: النوى كبيرة الحجم، بيضاوية الشكل وغير منتظمة بعض الشيء. يحتوي عدد قليل من الخلايا على نواة على شكل الكلية (رأس السهم الأصفر)، أو الحلقة (رأس السهم الأخضر)، أو الفص (رأس السهم الأبيض). تتم الإشارة إلى الشكل الانقسامي بالسهم الأبيض. انه البقع. الشريط الأسود =50 ميكرومتر (A)، 10 ميكرومتر (B).

في منشور سابق عن الفئران NOG، كانت الآفات الورمية غير شائعة بشكل عام؛ ومع ذلك، تم الإبلاغ عن سرطان الغدد الليمفاوية الغدة الصعترية عند 0.82% في الفئة العمرية التي تتراوح من 16 إلى 40 أسبوعًا 7، 10. على حد علمنا، لم يتم الإبلاغ سابقًا عن سرطان الدم المحبب العفوي في الفئران NOG. في العديد من سلالات الفئران، بما في ذلك B6C3F1 وBALB/c، نادرًا ما يحدث سرطان الدم المحبب 2، 11، ولم يتم الإبلاغ عنه في حالة هذه الفئران عند عمر 12 شهرًا أو أقل. أصيبت الحالة الحالية بسرطان الدم المحبب عند عمر 51 أسبوعًا، وهو عمر صغير نسبيًا. قد تكون هذه المعلومات الجديدة عن الأورام العفوية مفيدة للاستخدام المناسب لسلالة الفأر هذه في إجراء مزيد من الأبحاث.