يحفز إنترلوكين المشتق من الخلايا التائية -22 التعبير عن CD155 بواسطة الخلايا السرطانية لقمع وظيفة الخلايا القاتلة الطبيعية وتعزيز ورم خبيث
Oct 10, 2023
ملخص
على الرغم من أن الخلايا التائية يمكنها ممارسة مناعة قوية ضد الأورام، إلا أن مجموعة فرعية من الخلايا التائية المساعدة (Th) التي تنتج الإنترلوكين -22 (IL-22) في أورام الثدي والرئة ترتبط بنتائج مريضة سيئة. هنا، قمنا بفحص الآليات التي تساهم بها هذه الخلايا التائية في الإصابة بالمرض. في نماذج الفئران من سرطان الرئة والثدي، أدى الحذف البنيوي والخلوي التائي لـ Il22 إلى تقليل النقائل دون التأثير على نمو الورم الأولي. يؤدي حذف مستقبل IL-22 الموجود على الخلايا السرطانية إلى تقليل انتشار النقائل إلى درجة مشابهة لتلك التي تظهر في الفئران التي تعاني من نقص IL-22-. تسبب IL -22 في تعبير عالي عن CD155، والذي يرتبط بمستقبل التنشيط CD226 على خلايا NK. أدى التنشيط المفرط إلى انخفاض كميات CD226 والخلايا القاتلة الطبيعية ذات الاختلال الوظيفي، مما أدى إلى زيادة العبء النقيلي. ارتبطت إشارة IL-22 أيضًا بتعبير CD155 في مجموعات البيانات البشرية وبنتائج سيئة للمرضى. مجتمعة، تكشف النتائج التي توصلنا إليها عن دائرة مثبطة للمناعة يتم تنشيطها بواسطة IL -22 المشتق من الخلايا التائية والتي تعزز ورم خبيث في الرئة.
فوائد cistanche tubulosa-Antitumor
مقدمة
السمة المميزة الرئيسية لتطور الأورام والسبب الرئيسي للوفيات المرتبطة بالسرطان هي قدرة الخلايا السرطانية على الانتشار إلى المواقع الثانوية وتشكيل النقائل. 1،2 يمكن منع تشكيل ورم خبيث عن طريق المراقبة المناعية التي تنطوي على القاتل الطبيعي (NK)، السامة للخلايا ، والخلايا التائية المساعدة (Th) 1.3،4 في المقابل، تشكل الخلايا التائية التنظيمية (Treg)، والخلايا الوحيدة المنتشرة، وIL-17A المشتقة من الخلايا بيئة دقيقة مثبطة للمناعة، مما يتيح الهروب المناعي وتعزيز النقائل. 4–6 لذلك، من المهم تحديد شلالات الإشارة التي تحدد وظيفة الخلايا المناعية المؤيدة للورم مقابل الخلايا المناعية المضادة للأورام.7،8 إنترلوكين -22 (IL-22) هو سيتوكين ينتج بواسطة Th17 وفي البشر، أيضًا من خلال المجموعة الفرعية Th1، المعروفة بتعزيز نمو الخلايا السرطانية، وتعزيز الهجرة، والحماية من موت الخلايا المبرمج، والحث على الانتقال من الظهارة إلى الوسيطة، والحفاظ على تأصل الخلايا الخبيثة.9-13 كما أنها تعزز التسرطن المبكر، وتعمل على الآفات السليفة أو الخلايا الجذعية السرطانية غير الناضجة.14-18 IL-22-الخلايا المنتجة، بشكل رئيسي خلايا Th، ولكن أيضًا خلايا جاما دلتا (gd) T، وخلايا T القاتلة الطبيعية الثابتة (iNKT)، والخلايا اللمفاوية الفطرية (ILCs) )، تم اكتشافها في آفات السرطان الأولية.19-24 يتم التعبير عن IL-22 بمستويات ذات صلة بيولوجيًا في سرطان الثدي والقولون والرئة والمعدة وسرطان الكبد.9،11،12،25،26 في معظم الدراسات ، يرتبط تعبيره بسوء التشخيص، ومرحلة المرض الأعلى، وتطور الورم بشكل أسرع. 13،22–24،27–29 IL-22 يعمل حصريًا من خلال مستقبل IL-22 (IL{{40) }}R) يتكون من وحدتين فرعيتين، IL-22RA1 و IL-10RB.30,31 يتم تعديل عمل IL-22 المفرز بواسطة مثبط، IL{{47} } بروتين الربط (IL-22BP, IL-22RA2)، وهو متماثل لـ IL-22RA1، والذي يتم إنتاجه بشكل أساسي بواسطة الخلايا النخاعية.32،33 في ظل ظروف الحالة المستقرة، IL -22 هو سيتوكين متجانس أساسي في الحواجز الظهارية مثل الأمعاء والرئة والجلد.34،35 في هذه المواقع، يعزز IL-22 الحماية والتجديد والإصلاح للحفاظ على سلامة الحاجز،36، 37 وغيابه يؤدي إلى تفاقم التسرطن الناجم عن الالتهاب. 13،38 معًا، تسلط هذه البيانات الضوء على الوظائف الواسعة المعتمدة على السياق لـ IL -22 في كل من الحالات الفسيولوجية والمرضية. عند ربط المستقبل، يقوم IL-22 بتشغيل إنزيمات يانوس Jak1 وTyk2 لفوسفوريلات STAT3 أو STAT1 أو STAT5، لكن يمكن لـ IL-22 بدء مسارات أخرى في اتجاه مجرى النهر، بما في ذلك سلسلة كينازات البروتين المنشطة للميتوجين (MAPK) أو إشارات PI3K-AktmTOR، اعتمادًا على السياق الخلوي.13،36،39–44 ينعكس هذا التنوع في مسارات الإشارات من خلال العديد من التأثيرات الفسيولوجية التي ارتبطت بإشارات IL-22، بما في ذلك تلك الموصوفة أعلاه، وكذلك الحماية من الأضرار السامة للجينات وتحفيز الببتيدات المضادة للبكتيريا، والمخاط، والسيتوكينات المؤيدة والمضادة للالتهابات، والكيموكينات.36،38،39،45،46 تحفز الخلايا السرطانية إنتاج IL-22 من خلايا Th في مرضى سرطان الثدي والرئة.12،47،48 يؤدي إطلاق NLRP3 المدفوع بالجسيم الالتهابي لـ IL-1b إلى إنتاج IL-22 من الخلايا التائية في الورم، وكلاهما IL-22+ يمكن العثور على خلايا Th وتوقيع NLRP3-IL-1b في عينات الأورام لسرطان الثدي والرئة. 48،49 هنا، شرعنا في تحديد آلية يعمل من خلالها IL-22 على تعزيز تطور سرطان الثدي والرئة. لقد وجدنا أن IL-22 يعزز انتشار النقائل إلى الرئة، مما يكشف عن دائرة يتوسط فيها IL-22 كبت المناعة في مكان النقيلي من خلال تعزيز التعبير عن CD155 على الخلايا السرطانية، والذي ارتبط بانخفاض التعبير عن CD226. على الخلايا القاتلة الطبيعية وانخفاض إنتاج الإنترفيرون-g (IFNg). تشير البيانات السريرية إلى أن تفعيل مثل هذه المسارات يرتبط بنتائج المرضى.
نتائج
فوائد مكملات cistanche - زيادة المناعة
يؤثر IL-22 على الخلايا السرطانية المنتشرة في نماذج الفئران الجينية لسرطان الرئة والثدي
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >(225 ملم2 أو تقرح)، كانت الرئتان هي الموقع النقيلي الرئيسي في نموذجنا مع وجود نقائل عرضية في مكان آخر (غير موضحة). أظهرت Il22 / الفئران انخفاضًا في انتشار النقيلي لخلايا الخط -1 و4T1 إلى الرئة مقارنةً بالحيوانات البرية بشكل مستقل عن حجم الورم الأساسي باستخدام طرق مختلفة للكشف عن النقائل (الأشكال 1B و1C وS1A). لقد لاحظنا أيضًا نمطًا ظاهريًا نقيليًا مشابهًا في نموذج مثلي لسرطان الثدي، حيث تم زرع خلايا 4T1 في وسادة الدهون الثديية (الشكل S2B). أظهرت جميع الطرق المستخدمة للعد العياني الأعمى أو فحوصات الاستنساخ أو علم الأنسجة اتساقًا عاليًا في اكتشاف العبء النقيلي المنخفض في Il22 / الحيوانات (الأشكال 1B و1C وS1C). يشير هذا إلى الدور المحوري لـ IL-22 في العملية النقيلية. بعد ذلك، أجبرنا ورم خبيث من خلال حقن الخلايا السرطانية في الوريد، والذي يتجاوز الحاجة إلى انفصال الأنسجة والغزو (الشكل 1D). يعكس الحقن الوريدي (الرابع) لكلا خطي الخلايا النمط الظاهري في النموذج تحت الجلد. يمكننا بالفعل تأكيد انخفاض الحمل النقيلي في Il22 / الفئران (الشكلان 1E و1F). تشير هذه النتائج إلى دور محدد لـ IL-22 في الخلايا المنتشرة في الدورة الدموية. لتمييز التأثيرات الخاصة بالسلالة، استخدمنا نموذج سرطان الثدي E0771 (الشكل 1G).50،51 كشف الحقن في الوريد لخلايا E0771- GFP عن انخفاض العبء النقيلي في Il22 / الحيوانات التي تم التحقق من صحتها بواسطة قياس التدفق الخلوي (الأشكال 1H و S1D). وبالمثل، لاحظنا انخفاض العبء النقيلي في كبد الفئران عندما تم حقن خلايا E0771-GFP داخل الطحال (الشكل S1E). تم مسح الرئة اليسرى بأكملها للفئران المحقونة بـ E0771- GFP بصريًا بعد بروتوكول iDISCO لتحديد كمية النقائل باستخدام المجهر الضوئي في الموقع (الشكل 1I).52 هنا، أظهرت Il22 / الفئران ميلًا منخفضًا لتطوير النقائل ، في حين أن حجم النقائل المرئية لم يختلف ولم يكن له نمط محدد لتوطينها (الشكل 1J). باختصار، يعمل IL-22 على الخلايا السرطانية المنتشرة، مما يسمح بانتقال نقائل سرطان الثدي والرئة إلى الرئة.
الخلايا التائية هي المصدر ذو الصلة لـ IL-22 في مكان النقيلي في الرئة
لقد حددنا سابقًا الخلايا التائية CD4+ باعتبارها المصدر الرئيسي لـ IL-22 في أورام الرئة البشرية الأولية وعينات غسل القصبات الهوائية والأسناخ.12،47،48 لتحديد مصدر IL-22 في في رئتي نماذجنا، قمنا بحقن خلايا E0771 عن طريق الوريد في حيوانات مراسل Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP وخلايا IL-22+ الكمية باستخدام قياس التدفق الخلوي (الشكلان 2A وS2A).53 تم تعريف المجموعات السكانية على أنها CD4+، CD{{15 }} والسلبية المزدوجة (DN) (CD4 , CD8 ) خلايا ab T (CD3+ gdTCR NK1.1)، وخلايا gd T (CD3+ gdTCR+ NK1.1)، وCD{{ 26}} NK1.1+ وCD3 NK1.1+ الخلايا (الشكلان 2B وS2B). لاحظنا زيادة في نسبة الخلايا التائية CD4+ وCD8+ وخلايا NK1.1+ التي تنتج IL-22 في رئتي الحيوانات المحقونة بالورم ( الأرقام 2C، S2C، وS2D). هنا، تشكل الخلايا التائية CD 4+ وCD 8+ غالبية الخلايا المنتجة لـ IL -22- في الفئران الحاملة للورم (الشكل 2C). علاوة على ذلك، حددنا أن خلايا CD 4+ T هذه تنتج IL-22 ولكن ليس IL-17A (الشكل 2D). كان لهذه الخلايا تعبير CD44 منخفض، مما يؤكد النمط الظاهري لذاكرتها بما يتماشى مع ملاحظاتنا السابقة (الشكل S2E). لمزيد من استكشاف هذه النتائج عبر النماذج، استخدمنا تلطيخ داخل الخلايا لتقييم إنتاج IL -22 في الخط {{ {56}} نموذج sc، والذي أسفر عن نتائج مماثلة باستثناء جزء متناقص من منتجي CD 8+ T cell IL -22 (الأشكال S2F – S2I). يمكننا أيضًا تحديد أن خلايا IL-22+ لم تشارك في التعبير عن IFNg، الذي يميز منتجي الماوس IL-22 عن المجموعة الفرعية Th1 (الشكل 2G). علاوة على ذلك، استخدمنا الفحص المجهري متحد البؤر على القطع الدقيق شرائح الرئة من الحيوانات المراسلة لاستجواب توزيعها المكاني في رئتي الفئران المحقونة بالورم. هنا، يمكننا تحديد أن منتجي IL-22 و IL-17A يتم توطينهم بشكل حصري تقريبًا في البؤر النقيلية (الشكل 2E). كما هو موضح من خلال قياس التدفق الخلوي، لم نجد أي ارتباط بين IL-22 و IL-17إنتاج من الخلايا المراسلة في البؤر النقيلية، مما يشير إلى أن IL-22 و IL-17 يتم إنتاجها بالفعل بواسطة مجموعتين فرعيتين خلويتين مختلفتين. لقد أكدنا أيضًا أن جزءًا كبيرًا من الخلايا المنتجة IL-22- هي خلايا CD 4+ T (الشكل 2E). نظرًا لأن هذه البيانات أشارت إلى الدور السائد للخلايا التائية في إنتاج IL-22، فقد أنشأنا ماوس Il22floxCd4cre مع الحذف المشروط لـ Il22 في جميع الخلايا التائية الناضجة (الشكل 2F). عند تحديها بخلايا E0771- GFP، كان لدى الفئران Il22floxCd4cre ميل أقل لتطوير النقائل في الرئة، مما يذكرنا بالنمط الظاهري الذي لوحظ في Il22 / الحيوانات العالمية (الشكل 2F). ومع ذلك، يمكننا أيضًا أن نؤكد أن cre-recombinase تحت سيطرة مروج CD4 ألغى تمامًا إنتاج IL-22 ليس فقط في CD4+، ولكن أيضًا في CD8+ خلايا T المعزولة من الطحال من الفئران Il22floxCd4cre، وبالتالي لا يمكن استخدام هذا النموذج لتحديد مصدر محدد لـ IL-22 (الشكل S2J). لتأكيد دور خلايا Th باعتبارها المصدر الحاسم لـ IL-22 في نموذجنا، قمنا بنقل خلايا T من النوع البري وخلايا Il22 / CD4+ T إلى حيوانات Rag1 / II22/ التي تلقت فيما بعد E{{ 104}} خلايا GFP الرابع (الشكل 2G). هنا، يمكننا أن نؤكد أن إنتاج IL-22 من خلال الخلايا التائية CD4+ المنقولة بالتبني يكفي لتعزيز نقائل الرئة في نموذجنا ولكن يتم إلغاؤه عند استخدام الخلايا التائية CD4+ المعزولة من II22 / الحيوانات (الشكل 2ز). الأهم من ذلك أن الاختلافات في ورم خبيث تأثرت بتطعيم الخلايا التائية عند النقل (الشكل S2K). في الختام، حددنا خلايا Th كمصدر كافٍ لـ IL-22 الذي يحفز النقائل في رئة الفئران الحاملة للورم، وسعينا بعد ذلك إلى تحديد الخلية المستهدفة ذات الصلة.
الشكل 1. يؤدي خروج IL-22- إلى تقليل عدد النقائل الرئوية ولكنه لا يؤثر على نمو الورم في نماذج الفأر المنسجم لسرطان الرئة والثدي
الشكل 2. الخلايا التائية هي المصدر الرئيسي لـ IL-22 في رئة الفئران الحاملة للورم
يعد التعبير عن IL-22RA1 على الخلايا السرطانية أمرًا لا غنى عنه لتكوين ورم خبيث
يقتصر تعبير IL-22 RA1 على الخلايا غير المكونة للدم ويعمل كعامل مقيد لإشارة IL-22. لاستجواب تأثيره على النمط الظاهري النقيلي، قمنا بإنشاء حذف Il22ra1 مستقر في خلايا 4T1 وLine-1 (الشكل 3A). تمشيا مع النتائج السابقة التي توصلنا إليها، لم يتأثر نمو الورم في خلايا 4T1 Il22ra1 إلى حد كبير مقارنة بخلايا التحكم 4T1 (الشكل 3B). ومع ذلك، فإن الفئران التي تم حقنها بخلايا 4T1 Il22ra1 تحت الجلد أو الرابع كان لديها عدد أقل من النقائل العيانية والمستنسخة في الرئة مقارنة بخلايا التحكم 4T1 (الشكلان 3B و3C). للتأكد من أن هذا التأثير لا يعتمد على الاستنساخ، قمنا بإنشاء وتحليل ثلاث نسخ من الخط -1 Il22ra1 واختبرناها مقابل ثلاث نسخ تحكم، مما أدى إلى نتائج مماثلة (الشكلان 3D و3E). هذا يؤكد أن الخلايا السرطانية التي تعبر عن IL-22RA1- هي الهدف المناسب لـ IL-22 في تحفيز النقائل الرئوية. لاستبعاد التأثيرات غير المستهدفة للمنهجية، استخدمنا IL-22BP لمنع إشارة IL-22. أنشأنا خطوط الخلايا 4T1 وLine-1 التي تفرز بشكل أساسي IL-22BP (Il22ra2+) (الشكل S3A). عند حقنها، نمت خلايا الخط -1 Il22ra 2+ بشكل مماثل مع التحكم في موقع الزرع، كما رأينا سابقًا في نماذج Il22ra1 وIl22 / الفئران، على الرغم من نمو خلايا 4T1 Il22ra2+ أبطأ (الشكل S3B). هنا، تحتوي خلايا 4T1 Il22ra 2+ على عدد منخفض إلى حد كبير من النقائل عند حقنها تحت الجلد (الشكل S3B وS3C). على الرغم من التباين الأكبر، شكلت خلايا الخط -1 Il22ra 2+ أيضًا عددًا أقل من النقائل عند حقنها بالشقوق أو الرابع (الشكل S3D وS3E). وبالتالي، فإن تحييد IL-22 من خلال IL-22 BP يحاكي إلى حد كبير النمط الظاهري الذي لوحظ مع خلايا Il22ra1 وIl22 / الفئران، مما يؤكد أهمية السيتوكين في العملية النقيلية.
فوائد مكملات cistanche - زيادة المناعة
يتحكم IL-22 في نمو الخلايا السرطانية خلال المرحلة المبكرة من التطعيم النقيلي
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 ملم) والخلايا الفردية لكل ملم2 من أنسجة الرئة (الشكل S4B). لم نتمكن من اكتشاف الاختلافات عند 12 ساعة بعد الحقن، مما يشير إلى أن البذر قد لا يتأثر بشكل كبير بـ IL-22 (الأشكال S4C وS4D). ومع ذلك، عند النقطة الزمنية 48-h، انخفض عدد خلايا ومستعمرات GFP+ في رئة Il22 / الفئران (الأشكال S4C وS4D). يشير هذا إلى دور IL-22 في تحفيز النقائل المبكرة في الرئتين. لتقييم معدل التكاثر، قمنا بحقن الفئران بشكل مشترك باستخدام 5- إيثينيل -20 - ديوكسيوريدين (EdU) لمدة 4 ساعات قبل التحقيق عند 12،24، 48 ساعة، و7 أيام بعد حقن الورم (الشكل S4E). . على غرار العد المجهري، لم نكتشف الاختلافات في أعداد خلايا GFP + قبل 48 ساعة بعد الحقن (الأشكال S4F – S4G). في المقابل، يمكننا اكتشاف الاختلافات في دمج EdU، مما يشير إلى وجود نسبة أعلى من الخلايا المنقسمة فقط في اليوم السابع بعد الحقن (الشكل S4G). وبالتالي، فإننا نسبب أن الاختلافات في عبء ورم الرئة المتأثر بـ IL-22 التي تمت ملاحظتها منذ 48 ساعة تتم بوساطة آلية مستقلة عن الانتشار.
الشكل 3. لا غنى عن تعبير IL-22 RA1 على الخلايا السرطانية لتكوين ورم خبيث
ينظم IL-22 التعبير عن CD155 على الخلايا السرطانية وبالتالي يعزز النقائل
استنادًا إلى النتائج التي توصلنا إليها والتي تفيد بأن IL-22 يعمل على الخلايا السرطانية IL-22ra1+ لتعزيز انتشار الورم الخبيث، أجرينا تسلسلًا كبيرًا للحمض النووي الريبي (RNA) لخلايا 4T1 المعالجة بـ IL-22 لمزيد من التحديد الآلية الأساسية (GEO: GSE202314) (الشكل 4A). لقد اكتشفنا 147 جينًا تم تنظيمها بشكل تفاضلي. من بين هذه، تمت زيادة التعبير عن 133 جينًا، وانخفض 14 جينًا عند علاج IL-22 (الشكلان 4B وS5A). لقد قمنا بالتحقق من صحة Pvr (مستقبل فيروس شلل الأطفال، Pvr) كواحد من الأهداف الأكثر زيادة بشكل ملحوظ باستخدام qPCR (الشكل S5B). وهذا ملحوظ لأن CD155، منتج Pvr، يتم التعبير عنه بشكل مفرط في العديد من أنواع السرطان ويمتلك خصائص معززة للورم، بما في ذلك ورم خبيث.54-56 لتأكيد النتائج التي توصلنا إليها، قمنا بتقييم تعبير CD155 في IL-22-4T1 المحفز، الخط -1، والخلايا E0771 عن طريق قياس التدفق الخلوي (الشكل 4C). اكتشفنا زيادة في تعبير CD155 في جميع خطوط الخلايا على مدار 72 ساعة (الشكلان 4D و4E)، لكن هذا التأثير كان غائبًا في الخلايا التي تفتقر إلى IL-22 RA1 (الشكل S5C). بعد ذلك، قمنا بتقييم تأثير IL-22 على تعبير CD155 في خلايا E0771-GFP من رئتي الفئران الحاملة للورم (الشكل 4F). هنا، يمكننا أن نؤكد أن الخلايا المزروعة في Il22 / الفئران كان لها تعبير أقل عن CD155، والذي يرتبط بجزء أصغر من خلايا E 0771- GFP المكتشفة بواسطة قياس التدفق الخلوي (الأشكال 4G و4H). للتحقق من دور CD155 في ورم خبيث، أنشأنا خطوط الخلايا Pvr Line -1 و4T1 (الأشكال 4I وS5D وS5G). في حين أن هذا لم يكن له تأثير يذكر على قدرتها على النمو تحت الجلد (الشكلان S5E وS5F)، إلا أنه ألغى القدرة على تكوين النقائل في الرئة (الشكلان 4J وS5H). يمكننا عكس هذه العملية عن طريق تعبير CD155 التأسيسي في خلايا Pvr بشكل مستقل عن التنظيم الناجم عن IL-22- (Pvr+).
الشكل 4. تعمل إشارة IL-22 على زيادة التعبير عن CD155 على سطح الخلايا السرطانية وتمنح مقاومة للتحكم في النقائل
في هذا الإعداد، يمكننا تحفيز النقائل في رئتي Il22 / الفئران، مع تسليط الضوء على العلاقة بين هذين الجزيئين ودورهما كوسيط في العملية النقيلية (الشكلان 4K وS5I).
يرتبط CD155 الموجود على الخلايا السرطانية بانخفاض التعبير عن CD226 على الخلايا القاتلة الطبيعية وانخفاض إنتاج IFNg
يلعب CD155 دورًا جوهريًا في تكاثر الخلايا السرطانية والتصاقها، 54-57 وغيرها. لم نكتشف أوجه القصور في تكاثر خلايا Line -1 Pvr في المختبر (البيانات غير معروضة). الأهم من ذلك، أن CD155 له دور خارجي مؤيد للانتشار الخلوي عن طريق الارتباط بمستقبلات التعديل المناعي CD96، أو CD226، أو TIGIT على سطح الخلايا NK وT.54-56،58،59 لتحديد الشركاء الملزمين لـ CD155، قمنا بتحليل الاستجابات المضادة للورم في رئتي الفئران التي تحتوي على 4T1- خلايا لوسيفيراز + (4T1-Luc) (الشكل 5A). لقد أكدنا باستخدام نظام التصوير في الجسم الحي (IVIS) الذي كان لدى الفئران من النوع البري وIl22 / الفئران بذر مماثل للخلايا السرطانية بحلول اليوم الخامس بعد الحقن، وزادت الاختلافات في عبء الورم على مدار أسبوعين (الشكلان 5 ب و5 ج) . في الواقع، أظهر خلل إنتاج IFNg بواسطة خلايا NK، ولكن ليس أنواع الخلايا الأخرى، فقدان آليات المستجيب الخلطي (الأشكال 5D و5E وS6A) ويرتبط بارتفاع عبء الورم (الشكل S6B). تم العثور على هذا التأثير باستمرار في نموذج Line -1 sc (الأشكال S6C – S6E). تم فحصها بواسطة قياس الخلايا الخلوية، وأظهرت 60 عينة من الفئران الحاملة لورم خبيث في الرئة 4T 1- زيادة في التعبير عن CD155 في البؤر النقيلية في WT ولكن ليس في Il22 / الحيوانات (الشكلان 5F وS6F). لقد وجدنا تسللًا أعلى لخلايا NK إلى البؤر النقيلية لـ Il22 / ولكن ليس حيوانات WT، مما يشير إلى تنشيط أعلى وتأكيد الاعتماد على خلايا NK كخلايا مؤثرة مضادة للورم (الشكل 5F). تم التعبير بشكل تفاضلي عن CD226، ولكن ليس TIGIT أو CD96، بواسطة خلايا NK، وبدرجة أقل، بواسطة خلايا CD 8+ T في رئتي النوع البري وIl22 / الحيوانات (الأشكال 5G وS6G – S6H). يعد CD226 مستقبلًا مشاركًا ضروريًا لتنشيط وظائف المستجيب لخلايا NK وCD8 T. لذلك، شرعنا في استكشاف أهميتها الفيزيولوجية المرضية في نموذجنا.61-64
cistanche tubulosa-تحسين الجهاز المناعي
يؤدي الحصار المفروض على CD226 إلى إلغاء النمط الظاهري المضاد للانتشار لدى الحيوانات التي تعاني من نقص IL-22-
يمكن للإشارات المفرطة التي تتوسط القرص المضغوط155- الموجودة في البيئة الدقيقة للورم أن تحفز استيعاب وتدهور CD226 في الخلايا المستجيبة.61،63 لتحديد دور تعبير CD155 المفرط على CD226 والاستجابة اللاحقة المضادة للورم، قمنا بحقن التحكم 4T1 و خلايا Pvr+ IV في Il22/ الفئران، وتلقت مجموعتان أيضًا جسمًا مضادًا مانعًا لـ CD226 (480.1) (الشكل 6A). يمكن لكل من خلايا Pvr+ وحصار CD226 أن يعززا بالمثل ورم خبيث في الرئة في Il22 / الفئران، ولم تتآزر هذه التأثيرات (الشكل 6B). على غرار ملاحظاتنا السابقة في الحيوانات البرية، كان هذا كافياً لمنع إنتاج IFNg بواسطة الخلايا القاتلة الطبيعية (الشكل 6C). أخيرًا، اكتشفنا انخفاضًا في تعبير CD226 على خلايا NK في الفئران المحقونة Pvr+- مقارنة بخلايا التحكم. يرتبط هذا بانخفاض قدرة هذه الخلايا NK على إنتاج IFNg (الشكل 6D). علاوة على ذلك، قمنا باستجواب إمكانات الجسم المضاد TIGIT (IG9) لمنع تنشيط خلايا NK في Il22 / الحيوانات وحصار CD96 (3.3) لمنع تثبيط وظيفة الخلايا NK (الشكل 6E). لم يغير ناهض TIGIT أو خصم CD96 عدد النقائل بالمقارنة مع Il22 / الحيوانات التي تلقت التحكم أو خلايا Pvr + 4 T1، على التوالي (الشكل 6F). عند تنشيطه، يمكن أن يمنع TIGIT إنتاج IFNg من CD8+ T ولكن ليس خلايا NK (الشكل 6G). وبالتالي، يؤدي محور IL-22- CD155 إلى انخفاض التعبير عن CD226 في خلايا NK ويجعلها خاملة في البيئة الدقيقة للورم.
يكمل تعبير CD155 التوقيع الجيني IL-22 في مرضى سرطان الثدي والرئة
أخيرًا، قمنا بتقييم الأهمية السريرية لـ CD155 في سياق محور IL-22-IL-22RA1. يرتبط تعبير CD155 وحده بالتشخيص غير المواتي في مجموعة متنوعة من كيانات السرطان. عينات إيجابية من المرضى من مجموعات بيانات سرطان الثدي الغازي (TCGA: BRCA، n=110). لقد ركزنا على الجينات الرئيسية المرتبطة بـ IL-22-: IL22RA1، وIL22RA2، وIL10RB، وPVR. لتقسيم مجموعات المرضى إلى طبقات، استخدمنا المجموعات التكتلية، وهي طريقة تجميع غير خاضعة للرقابة، مما أدى إلى ثلاث مجموعات رئيسية (الشكلان 7A و7B). كشف هذا عن أنماط التعبير الجيني المميزة: المجموعة 0 (IL22RA1hi، IL22RA2lo، IL1 0 RBmed، PVRhi)، المجموعة 1 (IL22RA1lo، IL22RA2hi، IL1 0 RBhi، PVRlo)، والمجموعة 2 (IL22RA1lo، IL22RA2lo، IL1 0RBlo، PVRmed) (الشكل 7C). تم توزيع هذه المجموعات بالتساوي في هذين الأفواج (الشكل 7D). كان المرضى في المجموعة 0 ومجموعة بيانات LUAD 2 على قيد الحياة أسوأ من المرضى في المجموعة 1 (الشكل 7E). لم البقاء على قيد الحياة من المجموعات 1 و 2 لا تختلف في كلا الأفواج (الشكل 7E). علاوة على ذلك، قمنا بحساب متوسط أوقات البقاء المقيدة (RMST) للمجموعتين 0 و1 لتحديد الفرق في وقت البقاء المتوقع حتى خمس سنوات من المتابعة، مما أدى إلى 361.18 يومًا لـ LUAD و93.23 يومًا لـ BRCA (الشكل 7F). كان للمجموعتين 0 و1 اختلافات في تواتر مراحل المرض المرضية داخلهما في LUAD ولكن ليس في مجموعة BRCA (الشكل 7G). الأهم من ذلك، أن اختلافات البقاء على قيد الحياة بين المجموعات (IL22RA1hiPVRhi) و1 (IL22RA1loPVRlo) تنبع بشكل أساسي من المرضى الذين تم تشخيصهم في المراحل المبكرة (الأولى والثانية)، ولكن ليس في المراحل المتقدمة من المرض (الثالث والرابع) (الشكل S7A). لتقييم تأثير كل جين على البقاء، استخدمنا نموذج المخاطر النسبية لكوكس. يؤثر كل من IL22RA1 (نسبة الخطر [HR]=1.23) وPVR (HR=1.28) على البقاء، في حين أن IL22RA2 وIL10RB لم يغيرا الخطر في مجموعة LUAD (الشكل S7B). علاوة على ذلك، فقط CD226 (p=0.06)، ولكن ليس TIGIT أو CD96، يتجه للتأثير على البقاء، وذلك تمشيا مع النتائج التي توصلنا إليها في النماذج قبل السريرية (الشكل S7B). استخدمنا خوارزمية فك الالتفاف CIBERSORTx على مجموعة LUAD لتقييم ما إذا كانت أنماط التعبير الجيني لمجموعاتنا لها تأثير على تسلل الخلايا المناعية لدى المرضى.65 ومن المثير للاهتمام أن هناك زيادة في وحدات CIBERSORTx لخلايا NK المنشطة في المجموعة 1 عند مقارنتها بالمجموعات. 0 و 2 في مرضى LUAD، في حين لم تكن هناك فروق في استراحة خلايا NK أو خلايا الذاكرة التائية المضغوطة 4+ المنشطة (الشكل S7C) مع اتجاه مماثل في مجموعة BRCA (الشكل S7D). توضح هذه النتائج من الأفواج السريرية معًا أهمية الارتباط التنظيمي بين IL-22 المشتق من الخلايا التائية وCD155.
الشكل 5. تعبير CD226 أعلى في خلايا NK في الفئران Il22–/–
مناقشة
اكتشفنا في هذه الدراسة آلية تنتج من خلالها الخلايا التائية IL-22 لتعزيز انتشار ورم خبيث في الرئة في نماذج الفئران المصابة بسرطان الرئة والثدي. ميكانيكيًا، تنتج الخلايا التائية في البؤر النقيلية في الرئة، والتي غالبًا ما تكون CD4+، IL-22 التي ترسل إشارات مباشرة من خلال مستقبلها المعبر عنه في الخلايا السرطانية، مما يعزز التعبير عن الجزيء المؤيد للنقيلة CD155.{{ 5}}،58،59 على الرغم من تعبير CD155 السرطاني المدروس جيدًا وأدواره الجوهرية والخارجية في تطور السرطان،54 فإن المسار المسؤول عن تنظيم CD155 في الخلايا الخبيثة لا يزال بعيد المنال.66-68 لقد أثبتنا أن IL{{ 15}} زيادة في تعبير CD155 في خطوط خلايا سرطان الرئة والثدي في المختبر وفي الجسم الحي، في حين أن تعبيره التأسيسي مكّن من انتشار النقائل في Il22 / الفئران، مقارنةً بالخلايا الضابطة والخلايا الناقصة. أدت زيادة التعبير عن CD155 في البيئة المكروية للرئة الورمية إلى انخفاض جزيء التحفيز المشترك CD226 على الخلايا القاتلة الطبيعية، مما يقلل من توطينها في النقائل وإنتاج IFNg، الذي يرتبط بارتفاع عبء الورم. في دراساتنا السابقة، اكتشفنا تراكم الخلايا التائية المنتجة لـ IL-22- في عينات ورم مريض سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة (NSCLC).12،48 لقد أثبتنا أن الخلايا السرطانية تحفز NLRP3- الإفراز المعتمد لـ IL-1b الذي يحفز إنتاج IL-22 بشكل رئيسي من خلايا Th. 18 الجدير بالملاحظة هو أنه، عند البشر، نظرًا للاختلافات في ملفات تعريف السيتوكينات في الخلية Th، IL{{ 31}} يتم إحداثه أيضًا في خلايا Th1. من المتصور أن هذا قد يضعف الاستجابة المناعية المضادة للورم. الأهم من ذلك، أن متغيرات Th1 هذه قد تفسر جزئيًا فرط تقدم السرطان عند تنشيط الخلايا التائية بعد حصار نقطة التفتيش. } الخلايا التائية، ولكن أيضًا خلايا NK1.1+، الموجودة في مكان النقيلي في رئة الحيوانات المحقونة بالورم. من المهم أن نلاحظ أننا لاحظنا اختلافات خاصة بالسلالة في تراكم خلايا IL -22- المنتجة للقرص المضغوط 8+ عبر نماذجنا. ومع ذلك، فإن إلغاء إنتاج IL-22 في إجمالي الخلايا التائية الناضجة كان كافيًا لتلخيص التأثير الذي لاحظناه في الحيوانات التي تعاني من نقص IL-22-.70 أيضًا، النقل بالتبني للخلايا التائية CD4+ إلى كانت Rag / II22 / الفئران كافية لتحفيز نقائل الرئة، مما يشير إلى الدور الأهم لخلايا Th كمصدر لـ IL-22. على العكس من ذلك، تشير النتائج السابقة التي توصلنا إليها إلى أنه على الرغم من تراكم الخلايا التائية CD8+ في عينات الورم، فإن مساهمتها في تجمع IL-22 تكون بسيطة.48 على أية حال، فإن توصيف مثل هذه الخلايا التائية {{53 }} يعد إنتاج الخلايا التائية IL-22- أمرًا ضروريًا لتقييم خصائصها المؤيدة أو المضادة للورم بعناية مع ظهور بيانات جديدة عن هذه الفئة الفرعية. 71،72 أيضًا، الدور الأساسي للخلايا NK وNKT في السيطرة على الورم يفوق دورها. مساهمة محتملة في تكوين ورم خبيث من خلال IL-22، والذي تم تمييزه في تجربة النقل بالتبني Rag / II22 / باستخدام حيوانات خالية من الخلايا التائية الناضجة ولكن تحتوي على خلايا NK وظيفية.37 يتم دعم هذه الفرضية أيضًا من خلال النتائج التي توصلنا إليها في النقيلي البؤر حيث تم العثور على الخلايا القاتلة الطبيعية بكثرة أكثر من الخلايا التائية السامة للخلايا، مما يسلط الضوء على الخلايا القاتلة الطبيعية كلاعبين أساسيين في السيطرة على الورم في غياب IL-22. من المهم أن نلاحظ أننا ركزنا على منتجي IL-22 في البؤر النقيلية في الرئة ولكننا لم نأخذ في الاعتبار أصلهم أو استنساخهم أو توزيعهم في الدم أو الأعضاء اللمفاوية. علاوة على ذلك، تعمل مصادر مختلفة لـ IL-22 على تعزيز تطور الورم بطريقة تعتمد على السياق من خلال الفعل متعدد المظاهر لهذا السيتوكين. على هذا المنوال، يمكن للخلايا المنتجة لـ IL-22- المماثلة في أجزاء مختلفة (الرئة مقابل الطحال مقابل العقدة الليمفاوية) أن تؤثر بشكل تفاضلي على الأنماط الظاهرية المؤيدة للورم أو ليس لها وظيفة اعتمادًا على السياق، الأمر الذي سيحتاج إلى مزيد من البحث. تشير دراسات السرطان مرارًا وتكرارًا إلى أن IL-22 يؤثر على تطور ونمو الأورام الأولية، وفي النهاية، تطور الأورام.26،73–76 يتم تبرير هذه الفكرة بشكل أساسي من خلال القدرة على تعزيز هجرة الخلايا السرطانية وغزوها وجذعها. في المختبر وبالتالي تعزيز تكوين ورم خبيث. 76،77 الأهم من ذلك، أن استئصال IL-22 يمكن أن يخفف من البيئة الدقيقة المثبطة للمناعة في نموذج Kras-mutant لسرطان الرئة. 14 في الدراسة الحالية، أثبتنا أن العبء النقيلي المتزايد كان تأثير مباشر لـ IL-22 على الخلايا السرطانية IL-22RA1+ المنتشرة، مما أدى إلى زيادة نمو المستعمرة. والأهم من ذلك، أن بياناتنا لا تستبعد رسميًا وجود تأثير على الخلايا غير السرطانية. على هذا النحو، فإن تأثير IL-22 على انتشار الخلايا السرطانية من خلال العمل الجوهري لـ IL-22R المعبر عنه داخليًا تم تسليط الضوء عليه على نطاق واسع بواسطة Giannou et al.78
الشكل 6. لا غنى عن إشارات CD226 لإنتاج IFNg من الخلايا القاتلة الطبيعية
لقد أثبتنا أن Pvr هو أحد الجينات ذات التعبير المتزايد على الخلايا السرطانية عند علاج IL-22. في هذا السياق، شكلت الخلايا الناقصة لـ CD155- عددًا قليلًا من النقائل، سواء في النوع البري أو Il22 / الفئران، والأهم من ذلك، أن إعادة تقديم CD155 سمحت لنا بإعادة تكوين النمط الظاهري النقيلي. تمت دراسة الدور الجوهري لـ CD155 في الخلايا السرطانية جيدًا ومن المعروف أنه يؤثر على البذر وتكاثر الخلايا السرطانية والهجرة.56،57 ومع ذلك، لم تظهر خلايا Pvr تكاثرًا أو هجرة مثبطة في أيدينا، وبذر الخلايا السرطانية. لم يتأثر في Il22 / الفئران. تم تحديد CD155 في البداية على الخلايا التي تقدم المستضد، وهو بمثابة محفز خارجي لتطور الورم الذي يثبط وظيفة الخلايا NK وT عن طريق الارتباط بـ CD96 وTIGIT على سطحها ويحث على الاستيعاب الداخلي وتقليص تنظيم CD226.56،61–64،79–85Due نظرًا لوظيفته المثبطة للمناعة، فإن CD155 في السرطان والخلايا المضيفة يمارس خصائص مؤيدة للانتشار ويقترح كهدف لحصار تثبيط نقطة التفتيش.61،86 تتلقى الخلايا NK إشارة تحفيزية مشتركة من الخلايا المقدمة للمستضد عبر CD226. 87 ومع ذلك، فإن التحفيز المفرط لـ CD226 في البيئة الدقيقة للورم يؤدي إلى الاستيعاب والتدهور. 63 يتم التصدي لهذا عادةً بواسطة CD96 وTIGIT، اللذين يربطان CD155 بألفة أعلى. 58 ومن المثير للاهتمام، من المعروف أن خلايا 4T1 تحفز تقليل تنظيم CD226 في ارتشاح الورم. الخلايا الليمفاوية وقمع إنتاج IFNg.88 هنا، أثبتنا أن نقص IL-22 يحافظ على تعبير CD226 على خلايا NK وCD8+ T. ومع ذلك، كانت الخلايا القاتلة الطبيعية فقط هي التي تتمتع بقدرات إنتاج IFNg أعلى بشكل كبير وترتبط عكسيًا بالعبء النقيلي. ومن المثير للاهتمام أن تنشيط إشارات TIGIT في دراستنا أدى إلى منع إنتاج IFNg من خلايا CD8+ T، ولكن ليس خلايا NK، ولم يكن كافيًا لزيادة العبء النقيلي. وبالمثل، لم يتم تنظيم مستقبل آخر لـ CD155، CD96، بشكل تفاضلي في Il22 / الفئران ولم يمنع تثبيطه حدوث ورم خبيث، مما يشير إلى أن CD155 لا يثبط خلايا NK عبر CD96 في نموذجنا. يسلط هذا الضوء على التنظيم الخاص بنوع الخلية للاستجابات المضادة للورم بواسطة CD155 وشركائها الملزمين المختلفين.
فوائد ملحق cistanche-كيفية تقوية جهاز المناعة
انقر هنا لعرض منتجات Cistanche Enhance Immunity
【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
تم إثبات تأثير CD155 على التشخيص ودوره في التسبب في سرطان الرئة والثدي والقولون وأنواع أخرى من السرطان.79-85 هناك أدلة واسعة على أهمية النذير لـ IL-22 والجينات المرتبطة به في كيانات السرطان المختلفة.10،21،27،75،89–91 ومع ذلك، تشير بعض الدراسات إلى عدم وجود تأثير لتعبير IL-22 على البقاء.12 في حين أن هذه التناقضات قد تكون بسبب عدم التجانس في السكان المرضى، وأخذ العينات، ومشكلات الإبلاغ، تركز العديد من هذه الدراسات على جين واحد يتعلق بإشارات IL-22. هنا، استخدمنا المجموعات التكتلية لتمييز أنماط التعبير عن IL22RA1، وIL22RA2، وIL10RB، وPVR في مجموعات LUAD وBRCA في TCGA وربطها بالبيانات السريرية. هنا، حددنا ثلاثة أنماط للتعبير عن هذه الجينات: النمط 0 (IL22RA1hi، IL22RA2lo، PVRhi)، النمط 1 (IL22RA1lo، IL22RA2hi، PVRlo)، والنمط 2 (IL22RA1lo، IL22RA2lo، PVRmed). لقد حددنا أن التعبير العالي عن IL22RA1 تزامن مع تعبير عالٍ عن PVR، والذي تُرجم أيضًا إلى نتائج سيئة للبقاء على قيد الحياة بشكل عام، لا سيما في المرضى الذين تم تشخيصهم بمراحل مرضية مبكرة (I و II)، ولكن غير متقدمة (III و IV)، وتسليط الضوء على الدور المحدد لهذه الآلية. على العكس من ذلك، ارتبط التعبير العالي لـ IL22RA2، المعروف أيضًا باسم IL-22 BP، بانخفاض تعبير PVR وبقاء أفضل.18،34 النمط الثالث يتوافق مع التعبير المنخفض تمامًا ويمثل أورامًا باردة مناعيًا.92 على طول هذه الخطوط ، أشار deconvolution CIBERSORTx إلى أن المجموعة 1 التي تتميز بتعبير IL22RA2 العالي تتميز بتوقيع جيني لخلايا NK النشطة ولكن غير المريحة مقارنة بالمجموعات الأخرى. تم توضيح تعبير CD226 لتقسيم المرضى إلى طبقات للحصول على نتائج في العديد من التجارب السريرية لـ NSCLC.93 ومع ذلك، نظرًا للطريقة المزدوجة لتنظيم CD226 قبل وبعد الترجمة، لا ينعكس التعبير دائمًا في بيانات تسلسل mRNA.94 ومن ثم، الدراسات التي تركز على في تنظيم ما بعد الترجمة لـ CD226، قم بتقييم تعبيره في العينات السريرية باستخدام تلطيخ الأجسام المضادة. }}.24، ص=0.06)، في حين لم يظهر TIGIT وCD96 أي ارتباط مع البقاء على قيد الحياة. الأهم من ذلك، أن الخلايا السرطانية المصممة لإفراز IL-22 BP شكلت عددًا أقل من النقائل، مما يسلط الضوء على إمكانات مسار IL-22 للتدخل العلاجي المستهدف. يمكن أن يتصدى هذا للإفراط في التعبير عن الورم CD155، حيث لا يزال الاستهداف المباشر له يمثل تحديًا بسبب شبكة معقدة من المستقبلات المشتركة. تجدر الإشارة أيضًا إلى أن التأثيرات طويلة المدى لتحييد IL-22 على ورم خبيث غير معروفة ولكن يمكن أن يكون لها تأثير مباشر على الاعتبارات العلاجية للخلايا التائية أو توفر الأساس المنطقي لتحييد IL-22 باستخدام الأجسام المضادة ذات ملف تعريف أمان مفيد، مثل Fezakinumab (تجربة NCT01941537) أو IL -22 المصمم هندسيًا بتصميم قائم على البنية. 39،95 باختصار، حددنا IL -22- الإفراط في التعبير CD155 الناجم عن IL على الخلايا السرطانية كآلية يفيد النمو النقيلي. أكد هذا الدور الأساسي في التشخيص على إمكانات IL-22 كهدف علاجي في السرطان. حتى الآن، يُقترح تحييد IL-22 بشكل أساسي كإستراتيجية لعلاج أمراض المناعة الذاتية. إن نقص IL-22 العالمي، يدعم الإمكانات العلاجية لاستهداف محور IL-22-IL-22R1 ويجب استكشافه بشكل أكبر في الدراسات قبل السريرية والسريرية.
مراجع
1. هاناهان، د.، واينبرغ، ر.أ (2011). السمات المميزة للسرطان: الجيل القادم. الخلية 144، 646-674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. ماساجو، ج.، وأوبينوف، إيه سي (2016). الاستعمار النقيلي عن طريق تعميم الخلايا السرطانية. الطبيعة 529، 298-306. https://doi.org/10.1038/ Nature17038.
3. رينر، بي، روفيرا، جيه، كلاين، سي، شليت، إتش جيه، جيسلر، إي كيه، وكرومر، أ. (2014). الخلايا القاتلة الطبيعية KLRG1 (+) تحمي من مرض النقيلي الرئوي عن طريق المراقبة المناعية. علم المناعة الأورام 3، e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. موهمي، م.، ريثدورف، س.، وبانتل، ك. (2017). الخلايا السرطانية المنتشرة والمنتشرة - آليات المراقبة المناعية والهروب. نات. القس كلين. أونكول. 14، 155-167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA, and Kobold, S. (2021). إنترلوكين في السرطان: من علم الأحياء إلى العلاج. نات. القس السرطان 21، 481-499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. كيتامورا، ت.، تشيان، بي زد، وبولارد، جيه دبليو (2015). تعزيز الخلايا المناعية لورم خبيث. نات. القس إيمونول. 15، 73–86. https://doi.org/10.1038/nri3789.
7. جالون، ج.، وبروني، د. (2020). علم مناعة الورم وتطور الورم: تاريخ متشابك. الحصانة 52، 55-81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD ، وآخرون. (2018). التحقق الدولي من الإجماع المناعي لتصنيف سرطان القولون: دراسة تشخيصية ودقيقة. لانسيت 391، 2128-2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W., and Wei, S. (2017). يعزز IL-22 تطور سرطان الثدي عن طريق تنظيم HOXB-AS5. أونكوتارجت 8، 103601-103612. https://doi.org/10.18632/oncotarget.22063.
10. كريتشيك، آي، لين، واي، ناغارشيث، إن، بينغ، دي، تشاو، إل، تشاو، إي، فاتان، إل، سزيليجا، دبليو، دو، واي، أوينز، إس .، وآخرون. (2014). تعمل الخلايا التائية IL-22(+)CD4(+) على تعزيز نشوء سرطان القولون والمستقيم عبر تنشيط عامل النسخ STAT3 وتحريض ميثيل ترانسفيراز DOT1L. الحصانة 40، 772-784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. جيانغ، آر، تان، زي، دينغ، إل، تشن، واي، شيا، واي، غاو، واي، وانغ، إكس، وصن، بي (2011). يعزز Interleukin -22 سرطان الخلايا الكبدية البشرية عن طريق تنشيط STAT3. أمراض الكبد 54, 900-909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ Upper, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I .، هايدجر، س، وآخرون. (2013). يتم التعبير عن الإنترلوكين-22 بشكل متكرر في سرطان الرئة ذو الخلايا الصغيرة والكبيرة ويعزز نمو الخلايا السرطانية المقاومة للعلاج الكيميائي. جيه ثوراك. أونكول. 8، 1032-1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. هيرنانديز، ب.، جرونك، ك.، وديفينباخ، أ. (2018). صيد -22: الإنترلوكين -22 والسرطان. يورو. جي إمونول. 48، 15-31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. خسروي، ن.، كايتانو، إم إس، كومبيان، آم، أونفر، ن.، دي لا جارزا راموس، سي، نوبل، أو، داليري، إس، هيرنانديز، بي جيه، جوتيريز، بي إيه، إيفانز، إس إي، وآخرون. (2018). يعزز IL22 سرطان الرئة المتحول من Kras عن طريق تحفيز الاستجابة المناعية للورم وحماية خصائص الجذع. مناعي للسرطان. الدقة. 6، 788-797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. لي، إتش، مو، كيو، لي، بي، يانغ، زي، وانغ، زي، نيو، جيه، ليو، واي، صن، زي، إل في، إس، تشانغ، بي .، ويين، سي. (2019). MiR -486-5 p يمنع IL -22- الانتقال الظهاري الوسيط لخلايا سرطان الثدي عن طريق قمع Dock1. ج. السرطان 10، 4695-4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC, and Choi, HS (2014). يعزز Interleukin -22 تحول الخلايا الظهارية وتكوين أورام الثدي عبر تنشيط MAP3K8. التسرطن 35، 1352-1361. https://doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. كتارا، جي كي، كولشريستا، أ.، شنايدرمان، إس، ريهل، في، إبراهيم، إس، وبيمان، كويت (2020). يعزز إنترلوكين -22 تطور الآفات الخبيثة في نموذج فأر لسرطان الثدي التلقائي. مول. أونكول. 14، 211-224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. هوبر، إس، جالياني، ن.، زينويتز، لوس أنجلوس، هوبر، إف جيه، بوسورجي، إل.، هو، بي، هيدل، إم، تشانغ، دبليو، أوكونور، دبليو، جونيور، ميرفي، AJ، وآخرون. (2012). يتم تنظيم IL-22 BP بواسطة الجسيم الالتهابي وينظم تكوين الأورام في الأمعاء. الطبيعة 491، 259-263. https://doi.org/10.1038/ Nature11535.
19. بيريز، إل جي، كيمبسكي، جيه، ماكجي، إتش إم، بيلزكار، بي.، أجاليوتي، تي، جيانو، أ.، كونكزالا، إل.، بروكمان، إل.، وهيب، آر.، شو، ه.، وآخرون. (2020). تعمل إشارات TGFbeta في خلايا Th17 على تعزيز إنتاج IL-22 وسرطان القولون المرتبط بالتهاب القولون. نات. مشترك. 11، 2608. https://doi.org/10.1038/ ق41467-020-16363-ث.
20. ماير، أ.، ستارك، م.، كارستينز، جيه إتش، كريستيانسن، هـ، وبرونز، ف. (2012). كثرة المنسجات لخلايا لانجرهانس في قاعدة الجمجمة: هل العلاج الإشعاعي بجرعة منخفضة فعال؟ مندوب الحالة أونكول. ميد. 2012، 789640. https://doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T., وآخرون. (2012). ترتبط زيادة إنتاج الخلايا التائية CD4(+) IL-22- داخل الفم وخلايا Th22 بتطور سرطان المعدة وتتنبأ بضعف بقاء المريض على قيد الحياة. مناعي للسرطان. مناعة أخرى. 61، 1965-1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. تشن، إكس، وانغ، واي، وانغ، جيه، وين، جيه، جيا، إكس، وانغ، إكس، وتشانغ، إتش (2018). تراكم الخلايا التائية المساعدة 22، والإنترلوكين -22 والخلايا الكابتة المشتقة من النخاع الشوكي يعزز تطور سرطان المعدة لدى المرضى المسنين. أونكول. بادئة رسالة. 16، 253-261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.8612.
23. دولابي، ح.، راستن، م.، شاباهنغ، ح.، مداح، ج.، عبد الله، أ.، نصرت آبادي، ر.، إسماعيلي، إس. إيه، ومحمودي، م. (2018). تحليل خلايا Th22 وTh17 وCD4(+) التي تنتج IL-17/IL-22 في مراحل مختلفة من سرطان القولون البشري. بيوميد. فارماكوثر. 103، 1101-1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. زينج، إتش، ليو، زي، وانج، زي، تشو، كيو، تشي، واي، تشين، واي، تشين، إل، تشانغ، بي، وانج، جيه، تشانغ، واي .، وآخرون. (2020). تحدد الخلايا المنتجة لـ IL22- داخل الفم سرطان المثانة الغازي للعضلات من النوع الفرعي المناعي (2017). وظيفة وقائية لـ IL-22 BP في إعادة ضخ الدم بنقص التروية وإصابة الكبد الناجمة عن عقار الاسيتامينوفين. جي إمونول. 199، 4078-4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. جيانغ، آر، وانغ، إتش، دينغ، إل، هو، جيه، شي، آر، ياو، إم، غاو، واي، ياو، إيه، وانغ، إكس، يو، إل .، وصن، ب. (2013). يرتبط IL-22 بتطور سرطان القولون البشري عن طريق تنشيط STAT3. بي إم سي للسرطان 13، 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. فوكوي، إتش، تشانغ، إكس، صن، سي، هارا، كيه، كيكوتشي، إس، ياماساكي، تي، كوندو، تي، توميتا، تي، أوشيما، تي، واتاري، جي .، وآخرون. (2014). يعزز IL-22 الذي تنتجه الخلايا الليفية المرتبطة بالسرطان غزو خلايا سرطان المعدة عبر إشارات STAT3 وERK. ر. ج. السرطان 111، 763-771. https://doi.org/10.1038/bjc.2014.336.
27. ليو، تي، بينج، إل، يو، بي، تشاو، واي، شي، واي، ماو، إكس، تشين، دبليو، تشينج، بي، وانج، تي، تشين، إن .، وآخرون. (2012). ترتبط زيادة خلايا Th22 و Th17 المنتشرة بتطور الورم وبقاء المريض في سرطان المعدة البشري. جيه كلين. إيمونول. 32، 1332-1339. https://doi.org/10.1007/ ق10875-012-9718-8.
28. نيكولاي، إي، تادي، أ.، ريتشي، إف، رولا، إس، ديليوس، إم إم، بيناجيانو، إم، بيشي، بي، بينسيني، إل، رينجريسي، إم إن، بيني، أ .، وآخرون. (2016). ترتبط خلايا Th22 المنتجة لـ IFN-gamma داخل الورم بمرحلة TNM وأسوأ النتائج في سرطان البنكرياس. كلين. الخيال العلمي. 130، 247-258. https://doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B., and Wang, H. (2014). ترتبط زيادة مستويات وترددات الإنترلوكين 22 داخل الفم 22-الخلايا التائية المنتجة للقرص المضغوط4+ بتطور سرطان البنكرياس. البنكرياس 43، 470-477. https://doi.org/10.1097/MPA.000000000000 0055.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). تحديد مجمع مستقبلات الإنترلوكين الوظيفي -22 (IL-22): سلسلة IL-10R2 (IL-10Rbeta ) هي سلسلة مشتركة لكل من IL{{7 }} و IL-22 (IL- 10- العامل المحفز المشتق من الخلايا التائية، IL-TIF) مجمعات المستقبلات. جي بيول. الكيمياء. 276، 2725-2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. أويانغ، دبليو، وأوجارا، أ. (2019). IL-10 السيتوكينات العائلية IL-10 و IL- 22: من العلوم الأساسية إلى الترجمة السريرية. الحصانة 50، 871-891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨stemeier, A. ، نوروكي، M.، وآخرون. (2020). يتوسط IL22BP التأثيرات المضادة للأورام للسموم اللمفاوية ضد أورام القولون والمستقيم في الفئران والبشر. أمراض الجهاز الهضمي 159, 1417-1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, and Pestka, S. (2001). تحديد واستنساخ وتوصيف مستقبل جديد قابل للذوبان يربط IL-22 ويحيد نشاطه. جي إمونول. 166، 7096-7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. دوداكوف، جيه إيه، هاناش، آم، وفان دن برينك، إم آر إم (2015). إنترلوكين-22: علم الأحياء المناعي وعلم الأمراض. آنو. القس إيمونول. 33، 747-785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. وولك، ك.، كونز، إس.، ويت، إي.، فريدريش، إم.، أسد الله، ك.، وسابات، ر. (2004). IL-22 يزيد من المناعة الفطرية للأنسجة. الحصانة 21، 241-254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. سابات، ر.، أويانغ، دبليو، وولك، ك. (2014). الفرص العلاجية لنظام IL-22-IL-22R1. نات. القس المخدرات ديسكوف. 13، 21-38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. زينويتز، لوس أنجلوس، يانكوبولوس، جي دي، فالينزويلا، دي إم، ميرفي، إيه جيه، ستيفنز، إس.، وفلافل، آر إيه (2008). يحمي الإنترلوكين الفطري والتكيفي -22 الفئران من مرض التهاب الأمعاء. الحصانة 29، 947-957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. جرونك، ك.، هيرنا إنديز، بي.بي، زيمرمان، جي.، كلوز، سي.إس.إن، كوفويد برانزك، إم.، جويندل، إف.، ويتكوفسكي، إم.، تيزيان، سي.، أمان، إل.، شوماخر، واو، وآخرون. (2019). يحمي الإنترلوكين -22 الخلايا الجذعية المعوية من الإجهاد السمي الجيني. الطبيعة 566، 249-253. https://doi.org/10.1038/س41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM, and Garcia, KC (2021). يمكن فصل وظائف حماية الأنسجة للإنترلوكين -22 عن الإجراءات المؤيدة للالتهابات من خلال التصميم القائم على البنية. الحصانة 54, 660-672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. دوموتييه، ل.، لوواحد، ج.، ورينو، جي سي (2000). استنساخ وتوصيف العامل المحفز المشتق من الخلايا التائية IL-10- (IL-TIF)، وهو سيتوكين جديد مرتبط هيكليًا بـ IL-10 ومحفز بواسطة IL-9. جي إمونول. 164، 1814-1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. ليجون، د.، دوموتييه، إل.، كونستانتينسكو، إس.، كرويجر، دبليو، شورينغا، جيه جيه، ورينو، جي سي (2002). يقوم Interleukin-22 (IL-22) بتنشيط مسارات كيناز JAK/ STAT وERK وJNK وp38 MAP في خط خلايا سرطان الكبد الفئران. المسارات المشتركة مع IL-10 والمتميزة عنها. جي بيول. الكيمياء. 277، 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. ناجالاكشمي، إم إل، راسيل، أ، زوراوسكي، إس، مينون، إس، ودي وال مالفيت، آر (2004). يقوم Interleukin-22 بتنشيط STAT3 ويحفز IL-10 بواسطة الخلايا الظهارية للقولون. كثافة العمليات. إمونوفارماكول. 4، 679-691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. ميترا، أ.، رايشودوري، إس كيه، ورايشودوري، إس بي (2012). يتم تنظيم تكاثر الخلايا المستحث IL-22- بواسطة سلسلة إشارات PI3K/Akt/mTOR. السيتوكين 60، 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. باخمان، م.، أولزيبات، إس.، إتش يورو أردل، إل.، بفيلشيفتر، جيه.، إم يورو يو إتش إل، إتش. (2013). يقوم IFNalpha بتحويل IL-22 إلى السيتوكين بكفاءة لتنشيط STAT1 وأهدافه النهائية. الكيمياء الحيوية. فارماكول. 85، 396-403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., عباس, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ, and Ouyang ، دبليو (2008). يتوسط Interleukin-22 دفاع المضيف المبكر ضد ربط ومحو مسببات الأمراض البكتيرية. نات. ميد. 14، 282-289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi ، أ، وآخرون. (2005). Interleukin-22، وهو عضو في فصيلة IL-10 الفرعية، يستحث استجابات التهابية في الخلايا الليفية العضلية تحت الظهارة القولونية. أمراض الجهاز الهضمي 129, 969-984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, آل، وآخرون. (2016). يرتفع مستوى الإنترلوكين -22 في الغسيل لدى المرضى المصابين بسرطان الرئة وأمراض رئوية أخرى. بي إم سي للسرطان 16، 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., وآخرون. (2017). تحفز الخلايا السرطانية إنتاج الإنترلوكين -22 من خلايا الذاكرة CD4 (+) التائية عبر الإنترلوكين -1 لتعزيز نمو الورم. بروك. ناتل. أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية 114، 12994-12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. ماركوتا، أ.، إندريس، س.، وكوبولد، س. (2018). استهداف الإنترلوكين -22 لعلاج السرطان. همم. مصل. مناعة أخرى. 14، 2012-2015. https://doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. أوينز، أ.، ميهيتش، إي.، وإيركي، إم جي (2005). ورم خبيث بعيد من سرطان الثدي النخاعي E0771 الذي ينمو تحت الجلد. الدقة المضادة للسرطان. 25، 3905-3915.
51. سوجيورا، ك.، وستوك، سي سي (1952). دراسات في طيف الورم. I. مقارنة عمل ميثيل مكرر (2-كلورو إيثيل) أمين و3- مكرر (2- كلورو إيثيل) أمينوميثيل -4- ميثوكسي ميثيل -5- هيدروكسي {{7} } تأثير ميثيلبيريدين على نمو مجموعة متنوعة من أورام الفئران والجرذان. السرطان 5، 382-402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. رينير، إن، وو، زي، وسيمون، دي جي، يانغ، جيه، وأرييل، بي، وتيسيير لافين، إم (2014). iDISCO: طريقة بسيطة وسريعة لوضع العلامات المناعية على عينات الأنسجة الكبيرة لتصوير الحجم. الخلية 159، 896-910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. كلاينشميت، D.، جيانو، AD، ماكجي، HM، Kempski، J.، Steglich، B.، Huber، FJ، Ernst، TM، Shiri، AM، Wegscheid، C.، Tasika، E.، وآخرون.
54. أودونيل، جي إس، مادور، جيه، لي، إكس واي، وسميث، إم جي (2020). وظائف المناعة الذاتية والخارجية للورم لـ CD1
55. سيمين. السرطان بيول. 65، 189-196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A., و Paolini, R (2020). CD155: جزيء متعدد الوظائف في تطور الورم. كثافة العمليات. جيه مول. الخيال العلمي. 21، 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. جاو، جيه، تشنغ، كيو، شين، إن، وانغ، دبليو، وتشاو، سي (2017). CD155، جزيء مناعي سرطاني في الأورام البشرية. علوم السرطان. 108، 1934-1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. موريموتو، K.، ساتوه-ياماغوتشي، K.، هاماغوتشي، A.، إينوي، Y.، تاكيوتشي، M.، أوكادا، M.، إيكيدا، W.، تاكاي، Y.، وإماي، T. ( 2008). تفاعل الخلايا السرطانية مع الصفائح الدموية بوساطة مستقبل Necl-5/فيروس شلل الأطفال يعزز انتشار الخلايا السرطانية إلى الرئتين. الجين الورمي 27، 264-273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. تشان، سي جيه، مارتينيت، إل.، جيلفيلان، إس.، سوزا-فونسيكا-غيمارايش، إف.، تشاو، إم تي، تاون، إل.، ريتشي، دي إس، كولونا، إم.، أندروز، دي إم، وسميث، إم جي (2014). تتعارض المستقبلات CD96 وCD226 مع بعضها البعض في تنظيم وظائف الخلايا القاتلة الطبيعية. نات. إيمونول. 15، 431-438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. فوكس، أ.، سيلا، م.، جيوريساتو، إي.، شو، إيه إس، وكولونا، م. (2004). أحدث التقنيات: CD96 (اللمسي) يعزز التصاق الخلايا المستهدفة للخلايا القاتلة الطبيعية من خلال التفاعل مع مستقبل فيروس شلل الأطفال (CD155). جي إمونول. 172، 3994– 3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. جاروش، إس، كوهلين، جيه، فاغنر، إس، ديبوليتو، إي، وبوش، دي إتش (2022). ChipCytometry للكشف المتعدد عن علامات البروتين وmRNA في عينات أنسجة FFPE البشرية. ستار بروتوك. 3، 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., وآخرون. (2020). يؤدي تحفيز IL15 باستخدام حصار TIGIT إلى عكس الخلل الوظيفي لخلايا NK بوساطة القرص المضغوط في سرطان الجلد. كلين. الدقة السرطان. 26، 5520-5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse، M.، Asrir، A.، Pichler، AC، Lemaitre، L.، Braun، M.، Carrie´، N.، Joubert، MV، Le Moine، M.، Do Souto، L.، Gaud، ز، وآخرون. (2020). يؤدي فقدان الاعتماد على Eomespend لمستقبل التنشيط المشترك CD226 إلى تقييد وظائف الخلايا التائية CD8 (+) المضادة للورم ويحد من فعالية العلاج المناعي للسرطان. الحصانة 53، 824-839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., وآخرون. (2020). يؤدي وجود CD155 الموجود على الخلايا السرطانية إلى تحفيز مقاومة العلاج المناعي عن طريق تحفيز تدهور المستقبل المنشط CD226 في الخلايا التائية CD8(+). الحصانة 53، 805-823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, وآخرون. (2020). يرتبط تعبير الورم CD155 بمقاومة العلاج المناعي المضاد لـ PD1 في سرطان الجلد النقيلي. كلين. الدقة السرطان. 26، 3671-3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. نيومان، إيه إم، ستين، سي بي، ليو، سي إل، جينتلز، إيه جيه، تشودري، أأ، شيرر، إف.، خدادوست، إم إس، أصفهاني، إم إس، لوكا، بي إيه، ستاينر، دي، وآخرون. (2019). تحديد وفرة نوع الخلية والتعبير من الأنسجة السائبة باستخدام القياس الخلوي الرقمي. نات. التكنولوجيا الحيوية. 37، 773-782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. سورياني، أ.، زينجوني، أ.، سيربوني، سي، إيانيتو، إم إل، ريكياردي، إم آر، دي جياليوناردو، في، سيبيتيلي، إم، فيوندا، سي، بيتروتشي، إم تي، جواريني، أ.، وآخرون. (2009). يؤدي التنظيم المعتمد على ATM-ATR لروابط DNAM -1 و NKG2D على خلايا المايلوما المتعددة بواسطة عوامل علاجية إلى تعزيز حساسية خلايا NK ويرتبط بالنمط الظاهري للشيخوخة. الدم 113، 3503-3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
