يتحكم قارئ RNA M6 A YTHDF2 في الخلايا القاتلة الطبيعية المضادة للأورام والمناعة المضادة للفيروسات الجزء 4

من المعروف أن YTHDF2 يعمل كقارئ m6A، الذي يتعرف على الحمض النووي الريبي (RNA) المحتوي على m6A ويربطه وينظم تحلل نسخ m6A.
أجرينا بعد ذلك الترسيب المناعي للحمض النووي الريبي (RIP) –seq باستخدام الجسم المضاد YTHDF2 لرسم خريطة للنصوص المستهدفة المرتبطة بـ YTHDF2 في خلايا NK. تم إثراء مواقع ربط YTHDF2- في منطقة تسلسل ترميز البروتين و39UTR (الشكل S5 وE وF).

العلاقة بين القراء والذاكرة وثيقة للغاية. القراءة هي واحدة من أفضل الطرق لتحسين مهارات الذاكرة لدينا.

عندما نقرأ، تمر أدمغتنا بعملية معقدة. عندما نقوم بمسح الكلمات وتحويلها إلى معنى، تقوم أدمغتنا باستمرار بإنشاء اتصالات عصبية جديدة. تشكل هذه الوصلات العصبية نظام الذاكرة لدينا وتساعدنا على تخزين المعلومات في الذاكرة طويلة المدى.

بالإضافة إلى ذلك، تحفز القراءة خيالنا وإبداعنا، مما يساعد أيضًا على تحسين ذاكرتنا. عندما نقوم ببناء الصور والمشاهد في أذهاننا، فإن أدمغتنا تعمل بنشاط، وبالتالي يتم تشكيل المزيد من الاتصالات العصبية، مما يعزز قدرات الذاكرة لدينا.

وأخيرًا، تعمل القراءة أيضًا على تحسين تركيزنا وتركيزنا. عندما نركز على القراءة، فإن أدمغتنا تمارس التمارين باستمرار مرارًا وتكرارًا، مما يجعل ذاكرتنا أقوى.

بشكل عام، يمكن أن يكون للقراءة تأثير إيجابي للغاية على ذاكرتنا. من خلال تنمية عادة القراءة وتحفيز أدمغتنا من خلال القراءة، يمكننا تحسين مهارات الذاكرة لدينا والاستمتاع بحياة أكثر ثراءً وإثارة للاهتمام. يمكن ملاحظة أننا بحاجة إلى تحسين الذاكرة، ويمكن لـ Cistanche deserticola أن يحسن الذاكرة بشكل كبير لأن Cistanche deserticola هي مادة طبية صينية تقليدية لها العديد من التأثيرات الفريدة، أحدها هو تحسين الذاكرة. تأتي فعالية Cistanche deserticola من المكونات النشطة المتعددة التي يحتوي عليها، بما في ذلك حمض التانيك، والسكريات، وجليكوسيدات الفلافونويد، وما إلى ذلك. ويمكن لهذه المكونات تعزيز صحة الدماغ من خلال مجموعة متنوعة من المسارات.

انقر فوق تعرف على 10 طرق لتحسين الذاكرة

حددنا 3,951 ذروة ربط محتملة لـYTHDF2 من 1,290 نسخة، تم اكتشاف 426 منها (33%) مع إثراء كبير لـ m6A. أظهر تحليل التخصيب GO أنه تم إثراء النصوص المستهدفة YTHDF2 البالغ عددها 1290 في ترجمة البروتين وربط الحمض النووي الريبي (RNA) وربط الحمض النووي الريبي (RNA) (الشكل S5 G).

حددنا بعد ذلك النصوص المستهدفة المحتملة من النصوص المتداخلة من خلال RNA-seq وm6A-seq وRIP-seq ووجدنا أن مجموعة من 29 نسخة مرتبطة بـ YTHDF2 ومميزة بـ m6A (في كل من خلايا Ythdf2WT وYthdf2ΔNK NK) تم التعبير عنها بشكل تفاضلي بين خلايا NK من الفئران Ythdf2WT و Ythdf2ΔNK (الشكل 7 G). من بينها ، تم تنظيم 12 نسخة وتم تنظيم 17 نسخة في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة بتلك الموجودة في خلايا Ythdf2WT NK (الشكل 7 G).

استنادًا إلى توصيفنا الوظيفي لـ YTHDF2 وتحليل GO من بيانات RNA-seq، يؤثر نقص Ythdf2 على انقسام الخلايا NK وانتشارها، ربما عن طريق تسهيل تدهور mRNA لنقاط تفتيش دورة الخلية أو المنظمات السلبية أثناء انقسام الخلايا.

من بين النسخ الـ 12 المنتظمة، تم الإبلاغ عن أن ثلاثة منها تنظم بشكل سلبي انقسام الخلايا أو تكاثرها، بما في ذلك Mdm2 (الدقيقة المزدوجة الفأرية 2 [MDM2]؛ Frum et al.، 2009؛ Giono and Manfredi، 2007؛ Giono et al.، 2017)، Tardbp ( بروتين ربط الحمض النووي TAR 43 [TDP43]؛ أيالا وآخرون، 2008؛ سانا وآخرون، 2020)، وكريبزف (عامل النسخ CREB/ATFBZIP؛ هو وآخرون، 2020؛ لوبيز-ماتيو وآخرون، 2012) مما يشير إلى أنها الأهداف المحتملة لخلايا YTHDF2in NK.

تجدر الإشارة إلى أن قمم m6A تتلاءم جيدًا مع مواقع ربط YTHDF2- عند 39UTR لـ Mdm2 وTardbp ومع 59UTR لجينات Crebzf، كما هو موضح بواسطة Integative Genomics Viewer (الشكل 7 H).

أكد RIP باستخدام الجسم المضاد m6A أو YTHDF2 الذي يتبع qPCR أن Mdm2 و Tardbp و Crebzf تم بالفعل ميثيل m6A وإثرائه في الغالب بواسطة YTHDF2 في خلايا NK (الشكل 7 وI وJ)، مما يدعم بيانات m6A-seq وRIP-seq، مما يشير إلى أن هذه ثلاثة جينات هي أهداف محتملة لخلايا YTHDF2 inNK.

لاستكشاف ما إذا كان YTHDF2 ينظم تعبير Mdm2 وTardbp وCrebzf من خلال تعديل قابلية mRNAstability، قمنا بقياس تدهور mRNA للأهداف الثلاثة عن طريق تثبيط النسخ باستخدام الأكتينوميسين D في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK وYthdf2WT.

أظهرت النتائج أن Mdm2 وTardbp، ولكن ليس Crebzf، لهما عمر نصف أطول في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة بتلك الموجودة في الفئران Ythdf2WT (الشكل 7، K –M)، مما يشير إلى أن Mdm2 وTardbp يتم تنظيمهما مباشرة بواسطة YTHDF2 في خلايا NK.

باستخدام التطعيم المناعي، أكدنا أن مستويات البروتين لـ MDM2 وTDP43 تم تنظيمها في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK (الشكل S5 H). وللتأكيد بشكل أكبر على أن هذين الجينين هما هدفان وظيفيان لـ YTHDF2، استخدمنا Mdm2- أو Tardbp -سيرنا المحدد لضربة قاضية التعبير عن الجينين في المختبر (الشكل S5 وI وJ).

قمنا بعد ذلك بمقارنة تكاثر الخلايا وبقاء خلايا Ythdf2ΔNKNK مع عدم تدمير Mdm2 أو Tardbp في وجود IL-15. أظهرت النتائج أن ضربة قاضية Tardbp يمكن أن تنقذ جزئيًا على الأقل الخلل في تكاثر الخلايا وبقاء الخلايا في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK (الشكل 7، N، وO).

ومع ذلك، فإن ضربة قاضية Mdm2 لم يكن لها أي آثار إنقاذ (الشكل S5، K، وL). تشير هذه النتائج إلى أن YTHDF2 ينظم تكاثر الخلايا NK وانقسامها جزئيًا على الأقل عن طريق تثبيط استقرار mRNA في Tardbp.

مناقشة

في هذه الدراسة، قمنا بالإبلاغ عن الأدوار المتعددة الأوجه لمثيلة m6A بوساطة YTHDF2- في مناعة الخلايا القاتلة الطبيعية. لقد وجدنا أن YTHDF2، أحد أهم قراء تعديلات m6A، أمر بالغ الأهمية للحفاظ على توازن الخلايا القاتلة الطبيعية، والنضج، والبقاء على قيد الحياة بوساطة IL-15، ومضاد الأورام والنشاط المضاد للفيروسات.

لقد حددنا أيضًا حلقة ردود فعل إيجابية جديدة بين STAT5 وYTHDF2، أسفل IL-15، والتي تساهم في وظائف المستجيب والبقاء في خلايا NK الفأرية. توضح دراستنا الأدوار البيولوجية لميثيل YTHDF2 أو m6A بشكل عام في المناعة الفطرية للخلايا القاتلة الطبيعية. إنه يسد فجوة المعرفة حول كيفية تنظيم YTHDF2 للاستجابة المناعية الفطرية للتحول الخبيث والعدوى الفيروسية.

توفر نتائجنا اتجاهًا جديدًا لتسخير مناعة الخلايا القاتلة الطبيعية المضادة للأورام وفي نفس الوقت تعزيز فهمنا لتعديلات m6A في تشكيل المناعة الفطرية. ينظم البروتين القارئ m6A YTHDF2 استقرار mRNAs المستهدف (Du et al.، 2016؛ Wang et al.، 2014). لقد دعمت العديد من الدراسات التأثير الواسع لـ YTHDF2 في العمليات البيولوجية المختلفة.

يمنع YTHDF2 توسع الخلايا الجذعية المكونة للدم الطبيعي والتجديد الذاتي ولكنه مطلوب أيضًا لصيانة الخلايا الجذعية المكونة للدم على المدى الطويل (Li et al.، 2018؛ Mapperley et al.، 2021 Paris et al.، 2019؛ Wang et al.، 2018a). في الآونة الأخيرة، يشارك هذا الجين في تقييد الالتهاب أثناء العدوى البكتيرية (وو وآخرون، 2020 أ). تمت دراسة دور وآلية YTHDF2 في تطور الورم جيدًا.

YTHDF2 يعزز نمو الخلايا الجذعية لسرطان الدم وبدء سرطان الدم النخاعي الحاد (باريس وآخرون، 2019). إلى جانب سرطان الدم، ثبت أن YTHDF2 يعزز تطور الأورام الصلبة، بما في ذلك سرطان البروستاتا (ليت آل، 2020)، والورم الأرومي الدبقي (ديكسيت وآخرون، 2021)، وسرطان الخلايا الكبدية (تشن وآخرون، 2018؛ هو وآخرون، 2018). 2019; Zhang et al.,2020)، من خلال استهداف النصوص المتنوعة المعدلة بـ m6A، مثل مثبطات الأورام LHPP وNKX3-1 (Li et al., 2020), IGFBP3(Dixit et al., 2021), OCT4 ( تشانغ وآخرون، 2020)، وSOCS2 (تشينيت آل.، 2018).

على الرغم من أن YTHDF2 يلعب دورًا معززًا في تطور الورم، إلا أن دراستنا تكشف عن دور مفيد لـ YTHDF2 في الاستجابة المناعية للخلايا السرطانية، خاصة في الخلايا القاتلة الطبيعية، والتي تعد مكونًا رئيسيًا للمناعة الفطرية ضد الالتهابات الفيروسية والتحول الخبيث.

لذلك، يجب متابعة التطوير المستقبلي لمثبطات YTHDF2 لاستهداف الخلايا السرطانية لعلاج السرطان بحذر لأن تثبيط YTHDF2 قد يضعف استجابة المضيف المضادة للأورام بواسطة الخلايا القاتلة الطبيعية. من ناحية أخرى، فإن تسخير النشاط المضاد للورم لـ YTHDF2 في الخلايا القاتلة الطبيعية أو الخلايا المناعية الأخرى يجب أن يأخذ في الاعتبار تأثيره المحتمل الذي يعمل على الخلايا السرطانية مباشرة. الاستهداف التفاضلي لـ YTHDF2 في الخلايا السرطانية والخلايا المناعية يجب أن يزيد من نشاط مضاد الأورام.

For more information:1950477648nn@gmail.com